明日叶叶水溶性总黄酮提纯工艺

比较水浴加热、直接加热煮沸、微波辅助浸提3种水浸提取方法,确定明日叶叶总黄酮提取率最高的水浸提工艺条件,得到粗提液,并进一步考察大孔树脂类型、粗提液上样量、乙醇洗脱液pH值、乙醇体积分数、洗脱液用量等条件对水溶性总黄酮提纯结果的影响。结果表明:水浴加热浸提的提取率最高,其最佳浸提条件为水浴温度95℃,加热时间10min。HP-20大孔树脂对明日叶叶中总黄酮具有较好吸附与解吸性能,最佳提纯工艺条件为质量浓度为2.445mg/mL的粗提液上样量为40mL,洗脱液乙醇体积分数70%、pH2、洗脱用量为8BV。提纯产物总黄酮含量比明日叶叶干粉的含量提高了约6.8倍。

分蘖葱头水溶性总黄酮含量测定方法的研究

目的采用比色法测定东北特产分蘖葱头中水溶性总黄酮的含量。方法以槲皮素为对照品，以三氯化铝为显色剂，检测波长为431nm。结果线性范围为1．068～12．816μg·ml^-1（r=0．9998），平均回收率为99．8％，相对标准偏差为0．8％（n=9）。结论该法测定分蘖葱头中水溶性总黄酮的含量简便可行，准确度高。

狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮对H2O2致LO2细胞损伤的保护作用

目的:探讨狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮(WSTF)对氧化应激损伤LO_2细胞的保护作用。方法:通过细胞毒性实验确定给药范围,建立过氧化氢(H2O_2)致LO_2细胞损伤模型,用含不同浓度WSTF的培养液与急性损伤肝细胞共孵育不同时间,采用MTT比色法测定细胞活力,检测谷氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙二醛(MDA)的水平,评价WSTF对肝细胞损伤的保护作用。检测细胞线粒体膜电位和细胞内活性氧簇(ROS)水平,分析WSTF抑制H2O_2诱导LO_2细胞凋亡情况。结果:0.3 mmol·L^(-1)H2O_2处理LO_2细胞4 h构建H2O_2损伤LO_2细胞模型,确定0.031 2~0.125 mg·ml^(-1)WSTF为保护LO_2细胞损伤的给药浓度范围。WSTF可抑制H2O_2对肝细胞的损伤,并明显降低H2O_2致急性损伤肝细胞的ALT、AST释放量和MDA水平,逆转H2O_2诱导LO_2肝细胞线粒体膜电位去极化和细胞内ROS升高。结论:WSTF体外给药对肝细胞损伤有保护作用。

新疆昆仑雪菊水溶性总黄酮的含量测定

目的建立检测新疆昆仑雪菊中水溶性总黄酮含量的方法。方法以芦丁为对照品,用分光光度计进行全波长扫描并在510nm波长处测定吸光度,计算总黄酮含量。结果昆仑雪菊总黄酮在0.008-0.080mg.mL-1浓度范围内具有良好的线性关系,方法操作简便,重现性好,r=0.9999,平均加样回收率92.80%,RSD为1.91%(n=9),总黄酮平均含量为18.62%。结论昆仑雪菊总黄酮含量较高;该实验方法可适用于昆仑雪菊及其制剂的质量控制。

昆仑雪菊中水溶性总黄酮的提取工艺研究

目的:研究雪菊中水溶性总黄酮的提取工艺。方法:采用水提取法,并正交实验法确定最佳提取工艺。结果:雪菊中水溶性总黄酮最佳提取工艺为:提取温度80℃、提取3次、提取时间每次45min、料液比为:1∶10。结论:所确定提取工艺简便有效,为实际生产提供了科学依据.

响应面法优化大蝎子草水溶性总黄酮提取工艺及其水提液抗氧化活性分析

目的:优化大蝎子草水溶性总黄酮提取工艺,并对其水提液抗氧化活性进行分析。方法:以浸泡时间、料液比和提取时间为影响因素,大蝎子草水溶性总黄酮含量为评定指标,设计响应面实验。通过DPPH和ABTS自由基清除实验,对大蝎子草水提液的抗氧化活性进行分析。结果:大蝎子草水溶性总黄酮的最佳提取工艺为浸泡时间65 min、料液比1∶19、提取时间70 min,水溶性总黄酮含量为6.42±0.026 mg/g。大蝎子草水提液和VC溶液对DPPH自由基的最大清除率分别为73.38%和97.34%,IC_(50)值分别为59.616μg/mL和0.018μg/mL,大蝎子草水提液和VC溶液对ABTS自由基的最大清除率分别为99.38%和99.47%,IC_(50)值分别为12.086μg/mL和13μg/mL。结论:该方法简便、稳定、可行,可用于大蝎子草水溶性总黄酮的提取,且其水提液具有一定的抗氧化作用。

狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮对人肝癌裸鼠移植瘤抑制作用及机制研究

目的:观察狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮对人肝癌裸鼠移植瘤的抑制作用,探讨其机制。方法:建立荷瘤裸鼠动物模型,给药后观察并测量裸鼠瘤体,计算体积大小,并绘制生长曲线。分离瘤体后,计算抑制率,病理组织学检查,TUNEL染色检测移植瘤细胞凋亡。透射电镜观察瘤组织细胞的自噬小体和细胞超微结构,Western blot法检测Beclin1、Atg5、CyclinD1、Caspase-3、Bax、Bcl-2、nm23-Hl和MMP-9蛋白表达。结果:与模型对照组比较,狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮50、100、200 mg/kg具有显著抑制移植瘤生长的作用(P<0.01)。与5-氟尿嘧啶20 mg/kg相比,狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮100 mg/kg+5-氟尿嘧啶20 mg/kg联合应用能显著地降低肿瘤/体重比(P<0.01)。病理组织检查发现,与模型对照组比较,狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮50、100、200 mg/kg能促使癌细胞核分裂相对减少,肿瘤细胞发生凋亡,可见比较明显的重度坏死。TUNEL染色实验发现,与模型对照组比较,5-氟尿嘧啶20 mg/kg、华蟾素624 mg/kg、联合组、狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮100、200 mg/kg能诱导细胞凋亡,移植瘤细胞凋亡率均有显著提高(P<0.01)。电镜观察移植瘤细胞超微结构发现,与模型对照组比较,联合用药组、狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮各剂量组可抑制细胞自噬体的形成。与模型对照组比较,狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮100、200 mg/kg能促使细胞核固缩,碎裂、溶解,出现凋亡小体。Western blot法分析表明,与模型对照组比较,狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮三个剂量组、联合组及两个阳性药组能显著上调Bax和Caspase-3蛋白和下调Bcl-2和Survivin蛋白的表达水平,诱导移植瘤HepG2细胞发生凋亡(P<0.01),能抑制Beclin1、Atg5、CyclinD1、MMP-9等蛋白的表达,能促进nm23-Hl蛋白的表达(P<0.01),抑制HepG2细胞转移,进而抑制人肝癌裸鼠移植瘤的生长。结论:狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮可以抑制人肝癌裸鼠移植瘤的生长。

紫苏叶抗急性肝损伤活性组分筛选及机制研究

目的筛选紫苏叶发挥保肝活性的关键组分并探究其作用机制。方法小鼠随机分为8组,正常组和模型组灌胃PBS,给药组分别灌胃30 mg/kg奥贝胆酸阳性药和120 mg/kg紫苏叶水煎液、醇沉上清液、醇沉固体、总黄酮以及多糖,每天1次,连续7 d。末次给药后2 h,各组小鼠(除正常组外)腹腔注射0.5%CCl_(4)花生油(10 mL/kg)进行造模。造模结束后,收集血清和肝脏组织,全自动生化分析仪检测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性及总胆红素(TBIL)水平,HE染色观察肝组织病理形态变化,试剂盒检测肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平,ELISA法检测肝组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)及白细胞介素-1β(IL-1β)水平,RT-qPCR法检测肝组织NLRP 3、半胱肽氨酸蛋白酶-1(caspase-1)和IL-1βmRNA表达。结果与模型组比较,紫苏叶固体组和总黄酮组小鼠血清ALT、AST活性和TBIL水平均降低(P<0.05,P<0.01),肝组织SOD活性和TGF-β1水平升高(P<0.05,P<0.01),MDA、TNF-α、IL-6、IL-1β水平和NLRP3、caspase-1、IL-1βmRNA表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论水溶性总黄酮是紫苏叶发挥保肝作用的关键活性组分,抑制NLRP3/caspase-1炎性小体信号通路可能是其抗CCl_(4)致急性肝损伤的作用机制之一。