凤头姜醇溶和水溶黄酮的抗氧化作用

比较凤头姜水溶和醇溶黄酮对超氧阴离子自由基、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、2’-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS)自由基的清除能力和总抗氧化能力(铁离子还原能力法),同时用VC和2,6-二叔丁基对甲酚(butylated hydroxytoluene,BHT)作对照。结果表明:在DPPH自由基清除能力测定中,水溶黄酮的抗氧化效果强于醇溶黄酮和BHT,但弱于VC,水溶和醇溶黄酮的半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))分别为585.75μg/m L和1 013.45μg/m L;在ABTS+·、超氧阴离子自由基清除能力和总抗氧化能力测定中,醇溶黄酮的抗氧化效果均强于水溶黄酮、VC和BHT,醇溶和水溶黄酮对ABTS+·的IC_(50)分别为21.90μg/m L和87.54μg/m L;在超氧阴离子自由基清除能力测定中,水溶和醇溶黄酮的IC_(50)分别为26.56μg/m L和22.29μg/m L;在铁离子还原能力测定中,水溶黄酮和醇溶黄酮的TEAC1 000分别为45.78μg/m L和36.42μg/m L。综合研究发现,凤头姜水溶黄酮和醇溶黄酮在不同抗氧化体系中的抗氧化效果存在差异。

响应面分析昆仑雪菊水溶性黄酮类化合物的提取工艺

以新疆昆仑山产雪菊为原料,采用水作为萃取剂提取黄酮类化合物,研究提取温度料液比、提取时间和粒度大小4因素对生物黄酮含量的影响,进行响应面试验设计分析。以黄酮类化合物含量为指标,通过响应面法对提取工艺条件进行优化,最终确定水溶液萃取法提取黄酮的最优条件为提取温度90℃、料液比1:90(g/mL)、提取时间60min、粒度40目,在此条件下昆仑雪菊的水溶性黄酮含量为24.85%。

明日叶叶水溶性总黄酮提纯工艺

比较水浴加热、直接加热煮沸、微波辅助浸提3种水浸提取方法,确定明日叶叶总黄酮提取率最高的水浸提工艺条件,得到粗提液,并进一步考察大孔树脂类型、粗提液上样量、乙醇洗脱液pH值、乙醇体积分数、洗脱液用量等条件对水溶性总黄酮提纯结果的影响。结果表明:水浴加热浸提的提取率最高,其最佳浸提条件为水浴温度95℃,加热时间10min。HP-20大孔树脂对明日叶叶中总黄酮具有较好吸附与解吸性能,最佳提纯工艺条件为质量浓度为2.445mg/mL的粗提液上样量为40mL,洗脱液乙醇体积分数70%、pH2、洗脱用量为8BV。提纯产物总黄酮含量比明日叶叶干粉的含量提高了约6.8倍。

分蘖葱头水溶性总黄酮含量测定方法的研究

目的采用比色法测定东北特产分蘖葱头中水溶性总黄酮的含量。方法以槲皮素为对照品，以三氯化铝为显色剂，检测波长为431nm。结果线性范围为1．068～12．816μg·ml^-1（r=0．9998），平均回收率为99．8％，相对标准偏差为0．8％（n=9）。结论该法测定分蘖葱头中水溶性总黄酮的含量简便可行，准确度高。

木菠萝叶中水溶性黄酮苷的分离、鉴定和测定

目的分离、鉴定木菠萝Artocarpus heterophyllus Lam.叶中的水溶性黄酮苷,并采用HPLC法测定其含有量。方法木菠萝叶极性部位浸膏通过大孔树脂、凝胶和制备液相色谱等方法进行分离纯化,波谱数据鉴定所得化合物的结构。分析采用Thermo Syncronis C（18）色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;检测波长338 nm;流动相乙腈-0.1%磷酸（19∶81）;体积流量1 m L/min;柱温30℃。结果从该植物中首次分离鉴定出一种水溶性黄酮苷—牡荆素木糖苷,在0.537 7～10.754 0μg范围内线性关系良好（r=0.999 4）,平均回收率为96.24%（RSD=0.91%）。在4月份,其含有量最低（0.605 5 mg/g）,12月份最高（3.591 2 mg/g）,在成熟叶、嫩叶、黄色落叶中的含有量分别为1.743 1、0.324 5、4.034 5 mg/g。结论牡荆素木糖苷主要存在于木菠萝黄色落叶中。

狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮对H2O2致LO2细胞损伤的保护作用

目的:探讨狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮(WSTF)对氧化应激损伤LO_2细胞的保护作用。方法:通过细胞毒性实验确定给药范围,建立过氧化氢(H2O_2)致LO_2细胞损伤模型,用含不同浓度WSTF的培养液与急性损伤肝细胞共孵育不同时间,采用MTT比色法测定细胞活力,检测谷氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙二醛(MDA)的水平,评价WSTF对肝细胞损伤的保护作用。检测细胞线粒体膜电位和细胞内活性氧簇(ROS)水平,分析WSTF抑制H2O_2诱导LO_2细胞凋亡情况。结果:0.3 mmol·L^(-1)H2O_2处理LO_2细胞4 h构建H2O_2损伤LO_2细胞模型,确定0.031 2~0.125 mg·ml^(-1)WSTF为保护LO_2细胞损伤的给药浓度范围。WSTF可抑制H2O_2对肝细胞的损伤,并明显降低H2O_2致急性损伤肝细胞的ALT、AST释放量和MDA水平,逆转H2O_2诱导LO_2肝细胞线粒体膜电位去极化和细胞内ROS升高。结论:WSTF体外给药对肝细胞损伤有保护作用。

水溶性大豆异黄酮对破骨细胞分化和功能的影响

目的:研究水溶性大豆异黄酮(WSSI)对1,25-二羟基维生素D3诱导兔骨髓细胞分化形成破骨细胞样细胞以及兔成熟破骨细胞骨吸收功能的影响。方法:通过TRAP染色对骨髓细胞诱导分化形成的TRAP阳性多核巨细胞计数;用显微摄影结合计算机图像分析测定骨吸收造成的陷窝数目及表面积,以评价破骨细胞活性;用扫描电镜观察骨吸收陷窝的形态。结果:浓度为20.0、4.0、2.0和0.4μg/ml的水溶性大豆异黄酮既能抑制破骨细胞样细胞的形成(P<0.001),还能抑制成熟破骨细胞的骨吸收功能(P<0.001),具体表现在随着浓度的升高骨吸收陷窝数目及表面积减少。结论:WSSI可以明显抑制破骨细胞样细胞的形成和成熟破骨细胞的骨吸收功能。

昆仑胎菊水溶性黄酮提取工艺优化及其对衰老小鼠肝组织SIRT1、p53表达的影响

采用水溶剂法提取昆仑胎菊水溶性黄酮(water-solubleflavonoids from Coreopsis tinctoria buds,CBF)。在单因素试验的基础上,以提取液中总黄酮提取量为指标,响应面法优化得到CBF提取最优工艺:水提时间15 min、水提温度96℃、液料比71∶1(mL/g),在此条件下水溶性总黄酮提取量可达到145.45 mg/g。探讨CBF对D-半乳糖致衰老小鼠的抗衰老作用及其对衰老小鼠肝组织中沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)、p53蛋白表达的影响。以长期皮下注射D-半乳糖(300 mg/(kg·d))建立衰老小鼠模型,连续造模45 d,建模的同时分别灌胃VE(50 mg/(kg·d))、CBF(180、700 mg/(kg·d)),观察各组小鼠体质量变化及行为学状态,HE染色法观测肝组织病理形态学变化,并采用免疫印迹法评价衰老小鼠肝组织中SIRT1、p53蛋白的表达。结果表明,CBF对小鼠生长发育无不良影响且可改善衰老小鼠的行为状况;显著减轻D-半乳糖引起的肝组织病理学损伤;显著提升衰老小鼠肝组织中SIRT1蛋白表达(P<0.05),有效抑制D-半乳糖引起的p53蛋白过量表达(P<0.05)。结论:响应面法建立的回归数据模型优化得到的CBF水提取工艺条件实际有效,同时发现CBF具有良好的抗衰老作用,其作用机理可能与激活SIRT1/p53信号通路有关。

昆仑雪菊水溶性黄酮提取物对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆障碍的改善作用

为探讨昆仑雪菊水溶性黄酮提取物(water soluble flavonoids from Coreopsis tinctoria flowers,CTWF)对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆障碍的影响,以SPF级昆明种小鼠为实验对象,随机分为正常组、衰老模型组、VE组(50 mg/(kg·d))和CTWF低、高剂量组(150、600 mg/(kg·d))。除正常组皮下注射生理盐水外,其余各组均注射D-半乳糖(300 mg/(kg·d)),连续42 d造模,注射1 h后,药物组分别灌胃VE和不同剂量CTWF,正常组和模型组灌胃等量生理盐水。采用Morris水迷宫测试各组小鼠学习记忆能力,并测定小鼠脑组织乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)含量,乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AchE)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathioneperoxidase,GSH-Px)活力和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。结果表明:CTWF能够显著提升衰老模型小鼠的学习记忆能力(P<0.05),并显著提高脑组织SOD、GSH-Px活力和Ach含量(P<0.05),降低AchE活力和MDA含量(P<0.05)。因此,CTWF具有明显改善衰老模型小鼠学习记忆障碍的作用,其机制可能与提高脑组织胆碱能系统功能和减少自由基损伤有关。

响应面法优化金花葵花水溶性黄酮和总多糖提取工艺

本实验以水溶性黄酮和多糖提取量为指标,考察提取方式、提取时间、提取温度和料液比对金花葵花中水溶性黄酮和多糖提取量的影响。在单因素实验的基础上,采用响应曲面法优化工艺条件,并利用高效液相色谱对金花葵花中黄酮和多糖类成分进行定性分析。结果表明,相比于其他方法,浸泡法操作简单,成本低,避免了长时间受热破坏生物活性成分。浸泡法提取金花葵花中水溶性黄酮和多糖的最佳工艺为:提取时间240 min,提取温度90℃,料液比为1∶270,在此条件下,水溶性黄酮和多糖的提取量分别达到为(43.23±0.56)、(134.60±1.45) mg/g,实测值与响应曲面回归模型预测值之间的相对误差分别为0.44%和0.69%。金花葵花中黄酮类化合物主要有芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、棉皮素-8-O-葡萄糖醛酸苷和杨梅素,其中棉皮素-8-O-葡萄糖醛酸苷含量最高,多糖主要由鼠李糖、葡萄糖和半乳糖组成,同时含有少量的岩藻糖、阿拉伯糖和甘露糖。

新疆昆仑雪菊水溶性总黄酮的含量测定

目的建立检测新疆昆仑雪菊中水溶性总黄酮含量的方法。方法以芦丁为对照品,用分光光度计进行全波长扫描并在510nm波长处测定吸光度,计算总黄酮含量。结果昆仑雪菊总黄酮在0.008-0.080mg.mL-1浓度范围内具有良好的线性关系,方法操作简便,重现性好,r=0.9999,平均加样回收率92.80%,RSD为1.91%(n=9),总黄酮平均含量为18.62%。结论昆仑雪菊总黄酮含量较高;该实验方法可适用于昆仑雪菊及其制剂的质量控制。

Box-Behnken响应面法优化苗药课币有水溶性黄酮提取工艺

【目的】为苗药课币有的质量控制和药理作用研究提供参考。【方法】以黄酮提取量为指标,对苗药课币有水溶性黄酮提取溶剂(蒸馏水及浓度10%、20%、30%、40%、50%的乙醇)、固液比(g︰mL)(1︰8、1︰12、1︰16、1︰20、1︰24)、提取温度(10℃、30℃、50℃、70℃、90℃)、提取时间(10 min、30 min、50 min、70 min、90 min)进行考察,在此基础上结合Box-Behnken响应面法优化苗药课币有水溶性黄酮提取工艺。【结果】苗药课币有水溶性黄酮提取最佳工艺:以蒸馏水为提取溶剂,固液比(g︰mL)1︰20,提取时间90 min,提取2次,提取温度45℃。【结论】在最佳提取工艺下,课币有黄酮提取量平均为1.33 mg/g,与预测值(1.34 mg/g)接近。优化后的提取方法工艺稳定、可行,可为黄酮类成分进一步研究提供基础。

昆仑雪菊中水溶性总黄酮的提取工艺研究

目的:研究雪菊中水溶性总黄酮的提取工艺。方法:采用水提取法,并正交实验法确定最佳提取工艺。结果:雪菊中水溶性总黄酮最佳提取工艺为:提取温度80℃、提取3次、提取时间每次45min、料液比为:1∶10。结论:所确定提取工艺简便有效,为实际生产提供了科学依据.

响应面法优化大蝎子草水溶性总黄酮提取工艺及其水提液抗氧化活性分析

目的:优化大蝎子草水溶性总黄酮提取工艺,并对其水提液抗氧化活性进行分析。方法:以浸泡时间、料液比和提取时间为影响因素,大蝎子草水溶性总黄酮含量为评定指标,设计响应面实验。通过DPPH和ABTS自由基清除实验,对大蝎子草水提液的抗氧化活性进行分析。结果:大蝎子草水溶性总黄酮的最佳提取工艺为浸泡时间65 min、料液比1∶19、提取时间70 min,水溶性总黄酮含量为6.42±0.026 mg/g。大蝎子草水提液和VC溶液对DPPH自由基的最大清除率分别为73.38%和97.34%,IC_(50)值分别为59.616μg/mL和0.018μg/mL,大蝎子草水提液和VC溶液对ABTS自由基的最大清除率分别为99.38%和99.47%,IC_(50)值分别为12.086μg/mL和13μg/mL。结论:该方法简便、稳定、可行,可用于大蝎子草水溶性总黄酮的提取,且其水提液具有一定的抗氧化作用。

苗药课币有水溶性黄酮的纯化

目的:优选聚酰胺树脂纯化课币有(kod bit vud)中水溶性黄酮的工艺条件。方法:采用紫外分光光度法,以芹菜素含量为考察指标,研究聚酰胺树脂在动态条件下,树脂吸附和洗脱水溶性黄酮的行为,并筛选出纯化课币有(kod bit vud)水溶性黄酮的最优工艺参数。结果:采用二次上样的方法,上样原液共9个柱体积,以60%乙醇溶液洗脱5个柱体积,课币有(kod bit vud)水溶性黄酮,纯度从0.54%提高到18.86%,纯度提高了34倍。结论:经过聚酰胺树脂纯化,课币有(kod bit vud)水溶性黄酮得到了明显提高,这为进一步开展其药理活性研究积累了一定基础。

狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮中6种碳苷黄酮的含量测定和抗肿瘤活性研究

该文建立了HPLC同时测定狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮中6种碳苷黄酮含量的方法,并对狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮进行抗肿瘤活性评价。采用Kromasil 100-5 C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;流动相为甲醇-乙腈-0.5%甲酸梯度洗脱;体积流量0.8 mL·min^(-1),检测波长334 nm;柱温为室温(25℃)。以HepG2细胞为供试细胞株,采用MTT法评价水溶性总黄酮的抗肿瘤活性。新西兰牡荆苷2、新西兰牡荆苷3、异夏佛塔苷、夏佛塔苷、牡荆苷和芹菜素-6,8-二-C-α-L-吡喃阿拉伯糖苷线性范围分别为0.25~2.53,0.12~1.20,0.37~3.69,0.16~1.63,0.19~1.92,0.14~1.42μg;平均回收率(n=6)分别为99.6%,100.2%,99.6%,97.9%,98.8%,98.6%,RSD分别为0.87%,2.0%,1.8%,1.5%,1.2%,1.2%。以IC_(50)值作为评价指标,测得狭基线纹香共菜水溶性总黄酮在给药24,48,72 h后抑制HepG2细胞增殖的IC_(50)值分别为1.89,1.71,1.51g·L^(-1)。本法快速、简便、准确,重复性好,可用于狭基线纹香共菜水溶性总黄酮的质量控制。狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮对HepG2细胞增殖有一定的抑制作用。

狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮对人肝癌裸鼠移植瘤抑制作用及机制研究

目的:观察狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮对人肝癌裸鼠移植瘤的抑制作用,探讨其机制。方法:建立荷瘤裸鼠动物模型,给药后观察并测量裸鼠瘤体,计算体积大小,并绘制生长曲线。分离瘤体后,计算抑制率,病理组织学检查,TUNEL染色检测移植瘤细胞凋亡。透射电镜观察瘤组织细胞的自噬小体和细胞超微结构,Western blot法检测Beclin1、Atg5、CyclinD1、Caspase-3、Bax、Bcl-2、nm23-Hl和MMP-9蛋白表达。结果:与模型对照组比较,狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮50、100、200 mg/kg具有显著抑制移植瘤生长的作用(P<0.01)。与5-氟尿嘧啶20 mg/kg相比,狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮100 mg/kg+5-氟尿嘧啶20 mg/kg联合应用能显著地降低肿瘤/体重比(P<0.01)。病理组织检查发现,与模型对照组比较,狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮50、100、200 mg/kg能促使癌细胞核分裂相对减少,肿瘤细胞发生凋亡,可见比较明显的重度坏死。TUNEL染色实验发现,与模型对照组比较,5-氟尿嘧啶20 mg/kg、华蟾素624 mg/kg、联合组、狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮100、200 mg/kg能诱导细胞凋亡,移植瘤细胞凋亡率均有显著提高(P<0.01)。电镜观察移植瘤细胞超微结构发现,与模型对照组比较,联合用药组、狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮各剂量组可抑制细胞自噬体的形成。与模型对照组比较,狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮100、200 mg/kg能促使细胞核固缩,碎裂、溶解,出现凋亡小体。Western blot法分析表明,与模型对照组比较,狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮三个剂量组、联合组及两个阳性药组能显著上调Bax和Caspase-3蛋白和下调Bcl-2和Survivin蛋白的表达水平,诱导移植瘤HepG2细胞发生凋亡(P<0.01),能抑制Beclin1、Atg5、CyclinD1、MMP-9等蛋白的表达,能促进nm23-Hl蛋白的表达(P<0.01),抑制HepG2细胞转移,进而抑制人肝癌裸鼠移植瘤的生长。结论:狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮可以抑制人肝癌裸鼠移植瘤的生长。

黄芪水溶性黄酮对荷瘤小鼠免疫功能影响的实验研究

目的研究黄芪水溶性黄酮(AF)对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法采用"拒染法"体外抑瘤实验,计拒染活细胞数;"MTF 法"测定脾淋巴细胞的增殖能力;"溶血分光光度法(QHS)"检测抗体形成细胞;"微量溶血酶标仪测定法"测定血清溶血素含量。结果 AF 能够抑制瘤重;促进 ConA诱导的荷瘤小鼠脾淋巴细胞的增殖能力;增强荷瘤小鼠的抗体生成细胞功能,提高血清溶血素含量。结论 AF 具有促进和调节荷瘤小鼠免疫功能的作用。

苦荞黄酮对α-葡萄糖苷酶的抑制作用研究

为了比较研究各种提取方法下的3种苦荞黄酮对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,分别对苦荞总黄酮溶液、苦荞水溶性黄酮溶液、苦荞醇溶性黄酮溶液用α-葡萄糖苷酶进行体外活性抑制作用实验,并绘制抑制曲线,所得的结果与阿卡波糖进行比较。结果表明:阿卡波糖、苦荞总黄酮溶液、苦荞水溶性黄酮溶液、苦荞醇溶性黄酮溶液对α-葡萄糖苷酶均有抑制作用,且抑制作用均优于阿卡波糖,其半抑制浓度(IC50)分别为0.85、0.026、0.037、0.057 mg/mL。为3种提取产物在防治糖尿病及其并发症等方面的应用提供参考,具有较大的理论意义和应用价值。

苦荞黄酮对α-淀粉酶的抑制作用研究

为了比较研究各种不同提取方法下的苦荞黄酮对α-淀粉酶的抑制作用,分别对苦荞总黄酮溶液、苦荞水溶性黄酮溶液、苦荞醇溶性黄酮溶液用α-淀粉酶进行体外活性抑制作用试验,并绘制抑制曲线,所得的结果与阿卡波糖进行比较。结果表明:阿卡波糖、苦荞总黄酮、苦荞水溶性黄酮、苦荞醇溶性黄酮对α-淀粉酶均有抑制作用,其半抑制浓度(IC50)值分别为0.095、0.086、0.10、0.202 mg/mL。本研究为三种提取产物在防治糖尿病及其并发症等方面的应用提供参考,具有较大的理论意义和应用价值。