稻瘟病菌毒素对水稻愈伤组织防御酶系的诱导

稻瘟病菌毒素对水稻愈伤组织的防御酶系 (PAL、SOD、PO)具有一定的诱导作用。毒素处理后 ,不同抗性品种的PAL酶活性增加 ,均在4h达到最大值 ;抗病品种SOD酶活性8h达高峰 ,而感病品种SOD酶活性4h达高峰 ,之后均下降低于对照水平 ;抗病品种PO酶活性上升 ,8h达高峰 。

水稻愈伤组织分化培养过程中保护酶活性及其同工酶的变化

以湘早籼33号、01早5202和V20B为供试品种,研究了水稻愈伤组织分化培养过程中保护酶活性及其同工酶酶谱的变化。结果表明:在水稻愈伤组织分化过程中,可溶性蛋白质分别在第6天和第12天出现峰值,而这正是胚性细胞形成和绿苗分化的时期。过氧化物酶活性则在接种后12d出现峰值,分化前期,SOD活性变化趋势与POD活性变化趋势相反,推测这两种酶活性的差异与细胞分化决定有关。此外,POD、SOD同工酶酶谱的变化与水稻愈伤组织分化进程紧密相关。

铜、银元素对水稻愈伤组织绿苗分化率的作用

铜、银元素对水稻愈伤组织绿苗分化率作用的研究结果表明 ,铜、银元素能明显提高水稻愈伤组织绿苗分化率 ,使用的浓度范围较广 ( 2～ 2 0 μmol/L) ,其中以铜元素 2 0 μmol/L、银元素 5 μmol/L效果最好 ;同工酶分析表明 ,经过 2～ 3d铜、银处理的水稻愈伤组织过氧化物酶 (POX)的活性增强 ,说明铜、银短时间处理能增强水稻愈伤组织过氧化物酶活性 。

用高速微弹法将外源基因导入水稻愈伤组织

高速微弹法是在1987年发展起来的引人注目的外源基因导入技术。它是用粒子枪把被覆盖目的基因DNA分子的微钨弹加速到高速,直接穿过植物的细胞壁、细胞膜,将DNA带进细胞内部。与其他转化技术相比,既不受植物种类的限制,也不存在原生质体培养成株方面的困难。用高速微弹法,T.M.Klein(1987年)把TMV

农杆菌介导的水稻双载体共转化法中部分影响因素的研究

以T-DNA区分别只含有潮霉素选择标记基因(HPT)和GUS报告基因的双元载体pCAMBIA1300和pCAMBIA0301用于农杆菌介导的水稻共转化试验。根据经农杆菌浸染并共培养3d后水稻愈伤组织中的GUS瞬间表达情况及其稳定共转化率,测定了不同农杆菌菌株搭配及其不同浓度配比对共转化效率的影响。结果表明,在两种农杆菌菌液浓度比为1:1的情况下,农杆菌EHA105/pCAMBIA1300与EHA105/pCAMBIA0301组合共转化水稻的效率要高于其他菌株的组合;在以农杆菌EHA105/pCAMBIA1300与EHA105/pCAMBIA0301进行共转化时,两种菌液浓度比为1:2时共转化效率最高。

水稻(Oryza sativa L.)愈伤组织发育过程中Auxin-miR167-ARF8信号通路的研究

采用荧光定量PCR(Real-time PCR),进行miR167及其靶基因ARF8表达水平的相对定量分析,初步得出水稻愈伤组织发育过程中Auxin-miR167-ARF8信号通路的调控情况.发现经过12h～24h的积累,2mg/L的2,4-D能够明显地上调miR167的表达水平,从而导致miR167的靶基因ARF8的表达量下降,这种变化在第7天的时候趋于平缓,直到形成愈伤组织,miR167和ARF8的表达量维持在一个相对稳定的水平.本实验为Auxin-miR167-ARF8信号通路的研究提供了切入点.

农杆菌介导寒地水稻遗传转化的研究

通过农杆菌介导法,将拟南芥转录激活因子ICE1基因导入寒地品种垦鉴稻10号成熟胚愈伤组织中,将经潮霉素筛选得到的抗性愈伤进行分化,获得了一些再生抗性植株,部分植株经PCR检测为阳性,证明外源目的基因已整合到水稻的染色体上,从而建立了高效水稻遗传转化体系。实验表明:YEB和MS按适当比例混合作为悬浮培养基转化率较高;干燥除菌效果和转化率均优于羧苄青霉素、头孢霉素液体除菌;潮霉素采用低压-高压-低压方式筛选最好;AS和葡萄糖均能提高转化率。