水稻谷蛋白GluA-2基因5′上游序列控制下的UidA基因在转基因水稻胚乳中的表达模式(英文)

为了研究谷蛋白胚乳特异性表达启动子在我国栽培稻品种中的表达模式 ,将UidA基因分别置于水稻谷蛋白GluA 2基因 750bp和 2 3kb上游序列下游 ,利用农杆菌转化法导入栽培稻品种中花 8号并获得转基因植株。Southernblot检测表明 ,UidA基因已经整合到水稻基因组当中并以单拷贝存在。Northernblot检测表明 ,开花后 13～15d和 11～ 13d ,UidA基因和水稻内源的GluA 2基因的表达量分别达到最高 ,随后逐渐降低。对转基因植株种子的GUS染色表明 ,UidA基因仅在胚乳中表达 ,在糊粉层中GUS表达量最高。测定了 2 3kb和 750bp转基因植株种子的GUS活性 ,结果表明前者的GUS活性是后者的 2～ 3倍。序列分析表明 ,位于GluA 2基因转录启始位点上游 2170bp的G

鼻息肉组织嗜酸粒细胞中水通道蛋白-1和抗凋亡基因Bcl-2 mRNA的表达及意义

目的 明确水通道蛋白-1(aquaporin-1,AQP-1)mRNA、抗凋亡基因Bcl-2 mRNA在鼻息肉组织中的表达、分布及其相关性,探讨AQP-1 mRNA在鼻息肉组织嗜酸粒细胞中表达的意义。方法 16例鼻息肉组织标本来源于鼻息肉切除的患者(女11例,男5例,年龄20-65岁);10例下鼻甲黏膜组织来源于有变应性鼻炎病史的鼻整形患者(女7例,男3例,平均年龄16-58岁)。上述标本取组织相邻切片,应用原位杂交方法检测AQP-1 mRNA和Bcl-2 mRNA的表达;以麦格-姬姆萨(May-Griunwald-Giemsa,MGG)染色法鉴别嗜酸粒细胞。结果 16例鼻息肉组织嗜酸粒细胞中均有AQP-1 mRNA和Bcl-2 mRNA表达,其阳性细胞表达率分别为(93.16±13.25)％;(84.74±12.10)％;而10例下鼻甲组织嗜酸粒细胞中均有Bcl-2 mRNA表达,但仅有4例表达AQP-1 mRNA;AQP-1mRNA和Bcl-2 mRNA在下鼻甲组织嗜酸粒细胞中阳性细胞表达率分别为(19.54±4.98)％和(16.45±3.12)％。AQP-1 mRNA与Bcl-2 mRNA在鼻息肉组织嗜酸粒细胞的表达呈明显正相关(r=0.875,P<0.01)。结论 AQP-1能够平衡鼻息肉组织嗜酸粒细胞内外液体渗透压,维持其存活,在嗜酸粒细胞抗凋亡中具有重要的意义。

猪苓对大鼠肾脏水通道蛋白-2基因表达的影响

目的 观察猪苓的利尿作用和对大鼠肾脏水通道蛋白-2（aquaporin-2，AQP2）基因表达的影响。探讨猪苓利尿作用机制。方法 代谢笼法观察不同时间、不同剂量的猪苓对大鼠尿量的影响；RT-PCR方法检测猪苓对大鼠肾脏水通道蛋白-2基因表达的影响。结果 猪苓1g／kg组可引起大鼠尿量明显增加，与对照组比较差异有显著性（P〈0．01）。0．5/kg组较对照组尿量有所增加，但差异无显著性（P〉0．05）。猪苓的利尿作用于药后1h起效，2～4h作用最显著，维持时间〉6h。大鼠肾脏AQP2 mRNA表达猪苓高剂量组明显低于对照组（P〈0．05）。结论 猪苓利尿作用强，起效快，维持时间较长；大鼠肾脏AQP2mRNA表达减少可能与猪苓的利尿作用机制有关。

高温和HgCl2复合处理对水稻花期生理特性和水通道蛋白基因表达的影响

以转OsPIN1a的基因水稻‘中花11’为材料,设置3个处理:适温处理(CK),昼夜温度为30℃/28℃;高温处理(TR1),昼夜温度为38℃/33℃;复合处理(TR2),昼夜温度为38℃/33℃,配以0.1 mmol/L HgCl2处理,研究高温胁迫和水通道蛋白抑制剂(HgCl2)对水稻花期生理特性、水通道蛋白基因表达、稻穗和剑叶相对含水量及淀粉粒发育的影响。结果表明:与适温处理相比,高温与HgCl2胁迫均能降低稻穗和剑叶相对含水量,降低结实率和千粒质量,降低柱头上花粉粒数量及柱头和花粉粒的线粒体活性,抑制OsTIPs和OsPIPs家族多个基因的表达,使稻穗水分供给减少,导致胚乳淀粉粒发育不良,形成不规则圆球形,以高温与HgCl2复合处理时影响最大。水通道蛋白基因家族表达受抑制后,加重了高温胁迫对水稻植株花期生长发育的伤害,致使花粉粒和柱头活性下降,导致结实率降低和籽粒充实不良。

托伐普坦在心力衰竭临床应用及关于水通道蛋白-2基因多态性的研究

心力衰竭是心内科许多疾病的终末期临床表现,传统的利尿治疗在终末期患者的应用往往效果欠佳。课题组对心力衰竭的发病机制做过许多研究,包括交感神经兴奋性的增强、体液因子的改变、肾素-血管紧张素-醛固酮系统及下丘脑-垂体系统的激活等。近年来随着水通道蛋白的发现,精氨酸血管加压素-精氨酸血管加压素V2型受体-水通道蛋白-2系统在心力衰竭水钠潴留中的作用日渐受到相关学者重视。而托伐普坦作为精氨酸加压素2型拮抗剂的代表,其在慢性心力衰竭患者的应用尤其是在终末期心力衰竭患者的应用越来越多;但是在观察了一些心力衰竭患者使用托伐普坦的治疗效果后,发现不同患者对于该药物的剂量反应的差异性较大。故推测人群中因水通道蛋白-2的基因多态性造成水通道蛋白-2表达的差异可能是造成这一现象的主要因素之一。因此查询了关于托伐普坦在慢性心力衰竭患者的临床应用及水通道蛋白-2基因多态性研究的相关文献,并予以综述。

肾脏Aquaporin 2 水通道蛋白的检测及其在充血性心力衰竭的应用

肾脏Ａｑｕａｐｏｒｉｎ２水通道蛋白的检测及其在充血性心力衰竭的应用＊许顶立任昊邓英姿张远慧刘伊丽关键词ＡＰＱ２基因水通道蛋白充血性心衰Ａｑｕａａｐｏｒｉｎ２基因（ＡＱＰ２）是在１９９３年被克隆确认的，主要存在于肾脏集合管主细胞的胞浆内和管腔侧细胞膜上...

水通道蛋白2在人胎膜中的表达及意义

目的:通过检测水通道蛋白2(aquaporin 2,AQP2)是否在人胎盘和胎膜组织中表达,探讨AQP2在羊水平衡中的意义。方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学技术对5例足月正常分娩的胎盘和胎膜组织样本进行AQP2的检测。结果:RT-PCR显示AQP2mRNA水平在胎膜组织中有表达;免疫组化显示AQP2阳性着色主要分布于羊膜上皮细胞的胞膜和平滑绒毛膜滋养细胞。结论:AQP2在人胎膜组织中表达,提示其可能在羊水平衡的调节中发挥作用。

肺癌患者胸水中sST2、Fascin含量以及癌细胞恶性增殖、侵袭基因表达水平的检测分析

目的探讨胸水中可溶性生长刺激表达基因2蛋白(sST2)、肌动蛋白交联蛋白(Fascin)含量和癌细胞恶性增殖、侵袭基因表达水平以及它们之间相关性,为判定胸水性质、明确诊断、指导治疗提供参考。方法回顾分析2017年1月至2019年2月在我院治疗的肺癌合并恶性胸水患者50例(研究组)和低蛋白血症合并胸水患者或心力衰竭合并胸水患者30例(对照组)的临床资料,比较两组患者胸水中的sST2、Fascin含量以及癌细胞恶性增殖、侵袭基因的表达水平;对肺癌患者胸水sST2、Fascin含量与其癌细胞恶性增殖、侵袭基因的表达水平进行Pearson相关性分析。结果研究组患者的sST2、Fascin含量显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组患者胸水癌细胞的恶性增殖基因BCL2、KI-67的表达水平显著高于对照组,LKB1、MTS1的表达水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组患者胸水癌细胞恶性侵袭基因MMP9、N-cadherin的表达水平显著高于对照组,E-cadherin、TMSG-1及Bin-1的表达水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,研究组患者胸水中的sST2、Fascin含量与其癌细胞中恶性增殖基因LKB1、MTS1及恶性侵袭基因E-cadherin、TMSG-1及Bin-1的表达水平呈负相关,与恶性增殖基因BCL2、KI-67及恶性侵袭基因MMP9、N-cadherin的表达水平呈正相关。结论患者胸水中的sST2、Fascin含量、恶性增殖基因BCL2、KI-67及恶性侵袭基因MMP9、N-cadherin的表达水平与患者胸水的性质密切相关,这对明确胸水性质并对患者进行正确诊断和治疗具有重要的参考价值。

Smad7基因对胞外信号调节激酶磷酸化水平的调控

研究在BEP2D细胞中,作为Smads蛋白家族的抑制分子,Smad7对胞外信号调节的蛋白激酶(ERK1/2或p44/42)磷酸化水平的调控。将Smad7真核表达载体或人工合成的Smad7-siRNA转染BEP2D细胞,TGF-β刺激,通过Western印迹检测Smad7对p44/42蛋白磷酸化的影响。结果在永生化BEP2D细胞中,TGF-β1刺激后5min开始,可以检测到磷酸化的p44/42;到60min达到高峰,之后逐渐降低。细胞转染Smad7,TGF-β作用60min后,p44/42磷酸化水平明显增高;而转染Smad7-SiRNA,TGF-β作用60min后,p44/42磷酸化水平显著降低。p44/42蛋白水平基本上不受TGF-β1刺激及Smad7表达水平的影响。以上结果说明,在BEP2D细胞中,Smad7可参与TGF-β对ERK/MAPK通路的活化作用。

AQP2基因突变所致先天性肾性尿崩症1例并文献复习

目的对1例先天性肾性尿崩症患者进行临床及基因分析。方法对1例自婴儿期出现多饮、多尿症状的患者进行临床和实验室检查,并采集患者及其父母、哥哥的外周血,提取基因组DNA,用PCR扩增血管加压素2受体(AVPR2)及水通道蛋白-2(AQP2)基因的全部编码区,并进行直接测序。结果患者自婴儿期开始出现脱水症状,9岁确诊为肾性尿崩症时伴发了肾功能不全、身材矮小、智力低下症状。基因检测发现患者AQP2基因存在c.211G>A(p.V71M)纯合子突变。结论先天性肾性尿崩症早期诊断困难,基因检测有助于早期明确诊断。

1例AQP2基因突变所致肾性尿崩症患儿临床特点及基因突变情况的分析

肾性尿崩症是一种罕见的肾小管功能异常性疾病,也是一种遗传性疾病。水通道蛋白2(AQP2)基因突变是引起性尿崩症的原因之一。本文主要是对1例水通道蛋白2(AQP2)基因突变所致肾性尿崩症患儿的临床特点及基因突变情况进行分析。

载脂蛋白E4水平与阿尔采默病关系的分析

载脂蛋白E（Apolipoprotein E，ApoE）为一种多形态载脂蛋白．表现三种主要异构型：ApoE2，E3，E4。它们在单一基因位点上分别有三种等位基因82，83及84编码。这三种异构型的不同组合构成六种不同表型（3种纯合子-E狐2，E3／E3，E4／E4和三种杂合子-E2／E3，E3／E4，E2／E4）。

三叶肽对胃黏膜适应性细胞保护的调节作用

目的探讨三叶肽(ITF)对胃黏膜适应性细胞保护的调节作用。方法采用重复水浸束缚应激(WRS)法制作模型,动态监测模型动物的胃黏膜血流量(GMBF),观察黏膜损伤指数(UI)及病理组织学变化;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质免疫印迹法(Westernblot)检测乳癌相关肽(PS2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、ITF、转化生长因子-α(TGF-α)及环氧合酶-2(COX-2)的表达。结果单次WRS后造成胃黏膜广泛损伤;重复应激后胃黏膜产生适应性,GMBF上升,损伤逐渐减轻;经4次应激后,UI降低到单次应激的22.0%,并且胃腺区细胞增殖。单次应激后,PS2基因表达减弱,而iNOS、ITF、TGF-α及COX-2基因表达均增强;重复应激后,PS2、ITF、TGF-α表达逐渐增强,而iNOS及COX-2基因表达逐渐减弱;正常时iNOS、ITF及COX-2几乎无表达,PS2、ITF、TGF-α主要在胃腺颈部表达;应激后PS2、ITF、TGF-α不但在胃腺颈部黏膜增殖带表达增强,在胃腺基底部亦有表达,iNOS及COX-2在溃疡及其边缘存在。结论胃黏膜适应性细胞保护伴有细胞增殖,PS2、ITF、TGF-α表达逐渐增强,iNOS及COX-2表达逐渐减弱,表明三叶肽在这一现象中具有重要的调节作用。

局部亚低温对再灌注治疗时间窗的影响

目的:脑缺血再灌注期间进行局部亚低温干预,观察其对再灌注治疗时间窗的影响并研究其机制。方法:将72只Wistar大鼠随机分为假手术组6只;大脑中动脉闭塞(MCAO)24小时组6只;常温再灌注组30只;亚低温再灌注组30只。动物均在再灌注24小时后处死,但MCAO24小时组大脑中动脉闭塞24小时后直接处死。采用TTC染色观察梗死体积,用干-湿质量法测定脑含水量,用原位末端标记(TUNEL)观察神经细胞凋亡的变化,采用免疫组化法检测大鼠模型的Bcl-2、Bax及水通道蛋白4(aquapor-in4,AQP4)的表达。结果:与脑梗死的近期结局MCAO24小时组的梗死体积、脑含水量、TUNEL阳性细胞数、及Bcl-2、Bax、AQP4的表达相比较:常温组MCAO2～3小时再灌注24小时有统计学差异(P<0.01),MCAO4～6小时再灌注24小时没有统计学差异(P>0.05);亚低温组MCAO2～4小时再灌注24小时各组有统计学差异(P<0.01);MCAO5～6小时再灌注24小时没有统计学差异(P>0.05)。亚低温再灌注组各时相点的梗死体积、脑含水量、TUNEL阳性细胞数、Bax、AQP4的表达均显著低于相应常温组,Bcl-2的表达显著高于常温组(P<0.01,P<0.05)。结论:再灌注期间实施局部亚低温可延长再灌注治疗时间窗,其机制可能与抑制Bax的表达提高Bcl-2的表达从而抑制凋亡,抑制AQP4的表达从而保护脑微循环有关。

骨髓间充质干细胞移植联合依达拉奉抑制脑梗死后的神经元凋亡

背景:国内外多项研究证实骨髓间充质干细胞移植对脑梗死组织具有一定的神经保护作用。依达拉奉是一种新型强效小分子羟自由基清除剂,可通过清除脑梗死产生的自由基,抑制神经细胞损伤,从而起到脑保护作用。目的:观察骨髓间充质干细胞移植联合依达拉奉对大鼠脑梗死组织水通道蛋白4、Bcl-2、脑源性神经营养因子表达的影响。方法:选取Wistar大鼠80只,建立右侧大脑中动脉闭塞模型,随机分为对照组、骨髓间充质干细胞组、依达拉奉组和联合治疗组。建模6 h后通过尾静脉分别注入移植液,对照组注射培养液,骨髓间充质干细胞组注射骨髓间充质干细胞,依达拉奉组给予依达拉奉注射液,联合组同时注入骨髓间充质干细胞和依达拉奉注射液。分别在伤后72 h将大鼠麻醉后断头取脑,应用RT-PCR、Western Blot法检测脑组织中水通道蛋白4、Bcl-2、脑源性神经营养因子基因表达和蛋白合成变化。伤后12,24,36 h取大鼠脑组织以TUNEL法测定细胞凋亡情况。结果与结论:RT-PCR、Western Blot结果显示,在骨髓间充质干细胞与依达拉奉联合治疗组中,Bcl-2、脑源性神经营养因子的表达明显高于骨髓间充质干细胞组、依达拉奉组及对照组(P<0.05);而水通道蛋白4的表达低于其余各组(P<0.05)。TUNEL测定结果显示,联合治疗组中免疫组化呈棕色的凋亡细胞明显少于单独治疗组及对照组。提示骨髓间充质干细胞移植与依达拉奉联合应用治疗大鼠脑梗死,可进一步促进损伤局部脑源性神经营养因子及Bcl-2的表达,对神经细胞凋亡具有明显的抑制作用,同时可下调水通道蛋白4水平,减轻脑水肿程度,二者联合运用的效果明显优于单独治疗组。