水通道蛋白5在高氧肺损伤中的表达及调节机制

目的探讨水通道蛋白5(AQP5)在高氧肺损伤中的表达及其地塞米松对AQP5的调节作用。方法2周左右Wistar大鼠64只,按随机数字表法分为空气对照组、高氧暴露3、7、14d组和相应的地塞米松干预组。高氧暴露组置于常压氧仓中(O2体积分数≥95%);空气对照组置于同室常压空气中(O2体积分数为21%);各地塞米松干预组在暴露于空气或高氧的同时,经腹腔注射地塞米松5mg·kg-1·d-1,连续3d。采用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)和免疫组化方法观察AQP5的mRNA表达和分布变化,并与地塞米松干预后进行比较分析。结果AQP5主要表达在肺泡型上皮细胞及气道分泌上皮顶质膜;与空气对照组相比,高氧暴露不同时间后,AQP5特异性表达部位保持不变,但随暴露时间延长,AQP5表达呈逐渐减弱趋势,高氧暴露3、7和14d,AQP5mRNA较空气对照组均降低(P均<0.05)。与同期高氧暴露组比较,地塞米松干预后不同时间点AQP5mRNA表达均无明显变化(P均>0.05)。结论高氧肺损伤时AQP5表达降低,可能是高氧肺损伤肺水肿形成的原因之一;而未见地塞米松对高氧肺损伤AQP5的表达有调节作用。

金水六君煎对慢性阻塞性肺疾病气道黏液高分泌大鼠肺组织黏蛋白5AC及水通道蛋白5表达的影响

目的观察金水六君煎对慢性阻塞性肺疾病(COPD)气道黏液高分泌大鼠肺组织黏蛋白5AC(MUC5AC)、水通道蛋白5(AQP5)表达的影响,探讨其治疗气道黏液高分泌的可能机制。方法24只SD大鼠随机分成正常组、模型组、金水六君煎组和阿奇霉素组,每组6只。采用烟熏加气管内脂多糖滴入制作大鼠COPD气道黏液高分泌模型,成模后给予相应药物干预,连续2周。观察大鼠一般情况,小动物肺功能仪检测肺功能,HE染色观察肺组织病理,PAS染色检测气道杯状细胞数及黏液量,RT-PCR和Western blot分别检测肺组织MUC5AC、AQP5基因与蛋白的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠肺组织HE染色符合COPD病理改变,肺功能及AQP5基因与蛋白表达明显降低(P<0.05),气道杯状细胞数、黏液量增加及MUC5AC基因与蛋白表达显著升高(P<0.05);与模型组比较,金水六君煎组大鼠肺功能明显改善(P<0.05,P<0.01),气道杯状细胞数、黏液量减少及肺组织MUC5AC基因与蛋白表达明显降低(P<0.05),肺组织AQP5基因与蛋白表达显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论金水六君煎可促进肺组织AQP5表达,抑制MUC5AC表达,纠正黏蛋白/水盐比例失衡可能是其治疗COPD气道黏液高分泌的机制之一。

哮喘小鼠肺组织水通道蛋白5的表达及地塞米松对其的调节

目的:探讨支气管哮喘(哮喘)小鼠肺组织中水通道蛋白5(aquaporin 5,AQP5)和黏蛋白5AC(MUC5AC)的变化及地塞米松对其的调节作用。方法:雌性C57BL/6小鼠48只,随机分为对照组、哮喘组和地塞米松干预组,每组16只。测定各组小鼠肺组织病理变化及湿/干质量比值,应用实时定量PCR法测定其肺组织中AQP5和MUC5AC mRNA的表达,应用免疫组化法测定各组AQP5蛋白在肺组织中的分布,免疫印迹法测定AQP5蛋白在肺组织中的表达。ELISA法测定各组支气管肺泡灌洗液中MUC5AC的含量。结果:哮喘组小鼠肺组织中AQP5表达较对照组明显降低[mRNA减少(42.5±3.6)%,蛋白质减少(64.3±8.2)%]。而MUC5AC表达显著升高[mRNA升高(93.3±8.1)%;蛋白质水平升高(98.3±7.2)%]。地塞米松分别负调节其表达(与模型组比较P<0.05)。结论:哮喘小鼠肺组织中AQP5表达明显降低可能与气道MUC5AC表达的升高有关,地塞米松对其显著负调节从而改善气道黏液高分泌、炎性浸润和肺水渗出的病理生理过程。

青天葵对内毒素致急性肺损伤大鼠肺水通道蛋白1和5表达的影响

目的通过观察青天葵预先给药对内毒素致急性肺损伤(acute lung injury,ALI)大鼠肺水通道蛋白1和5(aquaporin 1 and 5,AQP-1、AQP-5)表达的影响,探讨其保护作用机制。方法 SD大鼠24只随机分为正常组(A组)、青天葵预保护组(B组)、内毒素模型组(C组)。B、C组采用舌底静脉注射内毒素(5mg/kg)复制ALI模型,B组预先给予10mL/kg青天葵水煎液及每天灌胃处理,造模8h后检测3组肺湿/干重比(W/D),观察肺脏水通透性的变化,HE染色观察肺组织病理学的改变,免疫组化法及逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法检测AQP-1、AQP-5在肺内的表达。结果与C组比较,B组及A组肺W/D比值明显降低(P<0.05),B组肺水肿病理改变程度明显减轻,AQP-1、AQP-5在肺内的蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论青天葵预先给药可通过促进ALI大鼠肺AQP-1和AQP-5的表达上调,增加清除和转运肺水,改善水液代谢,减轻肺水肿状态,从而有效保护急性肺损伤。

甲基丁香酚对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜水通道蛋白5的影响

目的:观察甲基丁香酚对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜水通道蛋白(aquaporin,AQP)5表达的影响,并探讨其意义。方法:Wistar大鼠126只随机分为正常对照组,变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)模型对照组,布地奈德阳性对照组,甲基丁香酚80 mg/kg组、40 mg/kg组、20 mg/kg组及10 mg/kg组,每组18只,除正常对照组外,其余组大鼠经卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏建立变应性鼻炎模型,造模成功后分别给予蓖麻油、布地奈德及对应剂量甲基丁香酚干预,于给药1、2、4周后应用免疫组织化学方法观察鼻黏膜AQP5的分布,Western blotting比较各组鼻黏膜中AQP5的表达,Real-time PCR比较AQP5 mRNA的表达。结果:AQP5主要位于鼻黏膜腺上皮及导管上皮细胞的胞膜和胞质。AR模型对照组大鼠鼻黏膜的AQP5及AQP5 mRNA均较正常对照组表达减少(P<0.05)。各给药组大鼠鼻黏膜AQP5及AQP5 mRNA均较AR模型对照组有不同程度增高。药物干预1、2、4周,布地奈德阳性对照组AQP5的表达与正常对照组比较,差异均无统计学意义(P均>0.05),与AR模型对照组比较,差异均有统计学意义(P均<0.05);布地奈德阳性对照组的AQP5 mRNA分别与正常对照组及AR模型对照组比较,差异均有统计学意义(P均<0.05)。干预2周后,甲基丁香酚各剂量组AQP5的表达即与布地奈德阳性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。干预1周,20 mg/kg组的AQP5 mRNA与正常对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);与模型对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:甲基丁香酚可能通过上调AQP5的表达减轻鼻黏膜腺体水肿程度、减少腺体分泌,从而缓解变应性鼻炎鼻痒、喷嚏及流涕等症状。

苓甘五味姜辛汤对哮喘大鼠环腺苷酸、环腺苷酸依赖性蛋白激酶A及水通道蛋白5的影响

目的观察苓甘五味姜辛汤对寒饮伏肺型哮喘大鼠环腺苷酸(c AMP)、环腺苷酸依赖性蛋白激酶A(PKA)及水通道蛋白5(AQP5)含量的影响,探讨其对寒饮伏肺型哮喘的作用机制。方法采用卵清蛋白腹腔注射和雾化激发+寒冷刺激建立哮喘模型。将90只大鼠随机分为空白组、模型组、地塞米松组及苓甘五味姜辛汤低、中、高剂量组,各治疗组给予相应药物干预,ELISA检测大鼠c AMP、PKA、AQP5含量。结果与空白组比较,模型组大鼠c AMP、PKA、AQP5含量降低(P<0.05);与模型组比较,各治疗组大鼠c AMP、PKA、AQP5含量升高(P<0.05),其中苓甘五味姜辛汤高剂量组作用显著(P<0.05)。结论苓甘五味姜辛汤可调节寒饮伏肺型哮喘大鼠c AMP、PKA、AQP5正常分泌,增加气道液体分泌,降低黏蛋白浓度,从而起到治疗哮喘的作用。

当归对阴虚哮喘BALB/c小鼠肺水通道蛋白1、5表达的影响

目的探讨当归对阴虚哮喘小鼠的平喘作用及对水通道蛋白(AQP)1、AQP5表达的影响。方法将小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、地塞米松组、3个当归剂量组、当归与地塞米松组,通过注射卵清白蛋白(OVA)致敏、吸入OVA激发复制哮喘模型,实验后期给予甲状腺素复制成阴虚哮喘BALB/c小鼠模型,观测当归对哮喘发作鼠数、肺液清除功能、肺组织AQP1、AQP5及其基因表达的影响。结果 2、4、8 g/kg当归可明显减少哮喘发作鼠数,促进肺水代谢平衡,促进肺组织AQP1、AQP5及其基因的表达(P<0.05,0.01)。同时,当归与地塞米松配伍后对AQP1、AQP5及其基因表达有一定的协同作用(P<0.05)。结论当归治疗哮喘的机制之一是调节AQP1、AQP5及其基因表达而促进肺水代谢平衡。

变应性鼻炎小鼠鼻黏膜水通道蛋白5的表达

目的探讨水通道蛋白5(aquaporin 5,AQP5)在变应性鼻炎小鼠鼻黏膜组织中的表达。方法应用qPCR和Western blot分别检测20只正常小鼠和20只变应性鼻炎小鼠鼻黏膜组织中AQP5 mRNA和蛋白的表达。结果变应性鼻炎小鼠鼻黏膜组织中AQP5mRNA和蛋白显著高于正常小鼠(P<0.05)。结论 AQP5在变应性鼻炎小鼠鼻黏膜组织中高表达,对AQP5的研究开发可能会成为变应性鼻炎新的基因治疗靶点。

黄芪对急性肺损伤模型大鼠肺组织水通道蛋白-1和水通道蛋白-5表达的影响

目的探讨补气中药黄芪对急性肺损伤模型大鼠肺组织水通道蛋白-1(AQP-1)和水通道蛋白-5(AQP-5)表达的影响。方法将30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、中药组各10只,予以每ml相当于0.25g黄芪生药的煎剂干预后,使用凝胶电泳测条带积分光密度值来检测确定肺组织AQP-1和AQP-5的表达情况。结果中药组大鼠肺组织AQP-1的积分光密度值为(0.572±0.084),模型组大鼠肺组织AQP-1的积分光密度值为(0.278±0.068),中药组高于模型组(P<0.01)。中药组大鼠肺组织AQP-5的积分光密度值为(0.812±0.084),模型组大鼠肺组织AQP-5的积分光密度值为(0.525±0.045),中药组高于模型组(P<0.05)。中药组与正常对照组无明显差异(P>0.05)。结论黄芪可能是通过促进肺组织AQP-1、AQP-5的表达,从而起到对模型大鼠急性肺损伤的防治作用。

清气化痰汤对急性肺损伤小鼠水通道蛋白5表达的影响

目的:研究探讨清气化痰汤治疗ALI的机制,为临床治疗ALI开辟新的治疗措施提供理论和实践方向。方法:24只昆明小鼠随机分成3组(每组8),即空白对照组(NS组)、造模组(ALI组)、清气化痰汤组,观察6h后测定肺湿干重比值(W/D),并采用HE染色观察炎症变化,RTPCR检测AQP5 mRNA、TNF-αmRNA、IL-1βmRNA的表达变化。结果:ALI组小鼠的肺部炎症反应显著,以中性粒细胞浸润为主,伴明显的肺泡充血、水肿。清气化痰汤组肺组织炎症、充血明显改善,ALI组的W/D的比值与其它3组比较,差异有统计学意义(P<0.05);与NS组相比,ALI组AQP5 mRNA的表达显著降低(P<0.05),而清气化痰汤组的AQP5 mRNA的表达显著高于ALI组(P<0.05)。与NS组相比,ALI组TNF-αmRNA的表达显著升高(P<0.05),而清气化痰汤组的TNF-αmRNA的表达显著低于ALI组(P<0.05)。IL-1βmRNA表达的变化与TNF-αmRNA的变化相似,肺损伤炎症减轻。结论:清气化痰汤可通过上调AQP5的表达减轻肺损伤时肺水肿。可能是通过抑制炎症因子TNF-α、IL-1β的表达实现的。

PM2.5对MLE-12细胞的损伤及水通道蛋白5mRNA表达的影响

目的：研究大气细颗粒物（PM 2.5）对体外培养的肺泡Ⅱ型上皮细胞系MLE-12细胞活性、炎性因子分泌及其水通道蛋白5mRNA表达的影响,探讨PM 2.5对呼吸系统的损伤及其机制。方法：采集大气中的PM2.5,并制成悬浮液,MLE-12细胞暴露于不同浓度的PM2.5处,用MTT比色法测定细胞存活力,放射免疫法测定炎性因子TNF-α、IL-6和IL-8的含量,荧光实时定量PCR法检测AQP5 mRNA的表达。结果：MTT实验中不同浓度的PM2.5作用于MLE-12细胞24 h、48 h后,细胞存活率显著下降,并呈浓度效应关系。炎性因子测定中,随着PM2.5浓度的增加,PM2.5诱导MLE-12细胞产生炎性因子TNF-α、IL-6和IL-8的浓度逐渐升高（P〈0.05）。在0.025-0.20 mg/m L的质量浓度范围内,随着PM2.5染毒液浓度的增加,MLE-12中AQP5mRNA表达水平逐渐降低,且与对照组相比,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：PM2.5通过诱导MLE-12细胞的炎症反应及AQP5蛋白表达降低引起MLE-12细胞的活性降低,促进细胞凋亡。

祛风胜湿方对变应性鼻炎小鼠免疫球蛋白E及水通道蛋白5的影响

目的观察祛风胜湿方对变应性鼻炎小鼠血清免疫球蛋白E(IgE)及水通道蛋白5(AQP5)的影响。方法以卵清蛋白(OVA)+氢氧化铝基础致敏、局部以OVA激发复制变应性鼻炎小鼠模型,将其分为正常对照组、模型组、祛风胜湿方组、氯雷他定组。灌胃给药14天,观察各组对变应性鼻炎小鼠血清IgE、AQP5及鼻黏膜组织病理形态学的影响。结果与正常对照组比较,模型组小鼠血清IgE及AQP5均显著增高(P<0.05);与模型组比较,各药物干预组的上述指标均显著降低(P<0.05)。结论祛风胜湿方作用机制可能与其抑制IgE及AQP5表达有关。本实验为揭示中医"风能胜湿"与"祛风止痒"理论提供了实验数据支持。

半夏提取物对小鼠肺水通道蛋白5表达的影响

目的了解急性肺损伤(ALI)小鼠肺组织中水通道蛋白5(AQP5)的表达变化,探讨半夏提取物(EP)治疗ALI的药理机制,为半夏的临床应用提供理论基础。方法 36只昆明种小鼠随机分成3组,即空白对照组(NS组)、肺损伤造模组(ALI组)和半夏提取物治疗组(EP组),6 h后观察测定肺组织湿干重比值(W/D),HE染色光镜下观察肺炎症变化,ELISA法检测小鼠血清TNF-α浓度,RT-PCR检测肺组织匀浆AQP5 mRNA表达情况。结果 ALI组小鼠肺部炎症反应显著,中性粒细胞浸润为主,同时肺泡明显充血水肿。EP组肺组织炎症减轻、充血消退。与NS组和EP组比较,ALI组的W/D值差异有统计学意义(P<0.05);ALI组肺组织AQP5 mRNA的表达,较NS组显著降低,较EP组的表达显著升高(P<0.05)。ALI组血清TNF-α的表达,较NS组显著升高,较EP组的表达显著降低(P<0.05)。结论半夏提取物可通过上调肺AQP5的表达减轻肺水肿,作用机制可能是通过抑制炎症因子TNF-α的表达实现的。

脱氢穿心莲内酯琥珀酸半酯上调水通道蛋白5减轻LPS诱导的急性肺损伤肺水肿的实验研究

目的探讨脱氢穿心莲内酯琥珀酸半酯(DAS)对于急性肺损伤状态下水通道蛋白5(AQP-5)的调节作用及对肺水肿清除的影响。方法 30只雄性BALB/C小鼠平均分为对照组(Control组)、治疗组(LPS+DAS组)和内毒素组(LPS模型组),每组10只。通过HE染色观察肺组织病理学改变;使用湿/干比(W/D)分析肺水肿程度;使用RTPCR和western blotting对AQP-5的表达进行测量。结果小鼠气道内注射内毒素(LPS)72小时后肺损伤评分和W/D比值明显增加,AQP-5表达量水平明显下降,差异有显著统计学意义(均P<0.05)。同时发现,LPS+DAS组小鼠肺损伤评分及W/D比值较LPS组较低,而AQP-5表达量较之升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论脱氢穿心莲内酯琥珀酸半酯可以有效减轻LPS诱导的小鼠ALI导致的肺水肿,其机制可能与上调了AQP-5的表达相关。该结果为脱氢穿心莲内酯琥珀酸半酯治疗ALI/ARDS相关的肺水肿奠定了实验基础。

水通道蛋白-5对结直肠癌淋巴结转移的作用及机制

目的检测水通道蛋白-5(AQP-5)在结直肠癌中的表达情况,分析TAZ与肿瘤淋巴结转移情况及患者预后的关系;同时检测肿瘤侵袭转移蛋白金属基质蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9、金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)、TIMP-2蛋白的表达,并对其意义进行分析。方法收集98例区域淋巴结转移阳性的结直肠癌及40例癌旁正常组织石蜡组织标本,免疫组化(SP)染色检测AQP-5、MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2表达情况。记录患者的临床资料并进行随访,分析AQP-5对结直肠癌淋巴结转移及预后的意义,并对AQP-5与肿瘤侵袭转移蛋白的关系进行分析。结果AQP-5、MMP-2、MMP-9在肿瘤组织中表达高于癌旁组织,TIMP-1、TIMP-2表达则低于癌旁组织(P<0.05)。AQP-5、MMP-2蛋白表达水平均与淋巴结转移数目呈正相关(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示,AQP-5阳性者生存期较短(P<0.05)。在结直肠癌组织中AQP-5与MMP-2、MMP-9、TIMP-1之间均有相关性(P<0.05)。结论AQP-5蛋白可促进结直肠癌的淋巴结转移,AQP-5阳性是患者预后较差的标志。AQP-5的这种作用可能是通过调节侵袭转移蛋白实现的。

兴奋或抑制汗液分泌对小鼠汗腺水通道蛋白5免疫定位的影响

目的探讨兴奋或抑制汗液分泌过程中水通道蛋白-5(AQP5)在汗腺组织的分布及表达变化。方法应用硅橡胶印模及免疫荧光技术测定小鼠在毛果芸香碱或阿托品处理后不同时间点的泌汗功能状态及AQP5在汗腺组织的分布和表达。结果静息状态下,汗腺分泌细胞及导管细胞中的AQP5几乎只分布于管腔侧胞膜;在毛果芸香碱刺激后小鼠汗液分泌的高峰期(15min)、衰退期(1h)及刺激后静息期(6h),AQP5在汗腺组织的亚细胞分布及表达量均未有明显变化;阿托品处理后10或20min,小鼠汗腺的分泌反应完全被抑制,但AQP5在汗腺组织的表达分布未受明显影响。结论在光镜水平,兴奋或抑制汗液分泌并不改变AQP5在活体小鼠汗腺的分布及表达。

甲泼尼龙对机械通气相关性肺损伤大鼠肺组织水通道蛋白5表达的影响

目的探讨甲泼尼龙(Mp)对机械通气相关性肺损伤大鼠肺组织水通道蛋白5(AQP5)表达影响及其作用机制。方法将100只SD大鼠随机分为5组:正常对照组(C组)、机械通气组(V组)和不同剂量甲泼尼龙组(Mp1,Mp_2,Mp_3组)。C组不行机械通气,自然呼吸空气; V组:大潮气量机械通气4 h,吸入氧浓度为21%; Mp1,Mp_2,Mp_3组:机械通气前10 min分别静脉注射Mp 2,10,30 mg·kg^(-1)。于插管即刻,机械通气1,2和4 h(t1-4)时采集股动脉血样,进行动脉血气分析,计算氧合指数(OI)。机械通气4 h后放血处死大鼠,检测肺通透指数(LPI)与肺湿干重(W/D)比;Western blotting法检测p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)和水通道蛋白5(AQP5)的表达水平,计算p-p38MAPK/p38MAPK比值;采用RT-PCR法测定AQP5 mRNA表达;光镜下观察各组肺组织病理变化,计算肺泡损伤率(IAR)。结果与C组比较,V组和Mp1组OI降低,肺组织W/D比、LPI和IAR升高(P<0.05),p-p38MAPK表达水平和p-p38MAPK/p38MAPK比值升高(P<0.05),AQP5和AQP5 mRNA表达水平下降(均P<0.05),Mp_2和Mp_3组上述指标差异无统计学意义(P>0.05);与V组比较,Mp_2和Mp_3组OI升高,肺组织W/D比、LPI和IAR降低(P<0.05),肺组织p-p38MAPK表达水平和p-p38MAPK/p38MAPK比值下降(P<0.05),AQP5和AQP5 mRNA表达水平升高(P<0.05),Mp_2和Mp_3组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。Mp_2和Mp_3组肺组织病理学损伤较V组减轻。结论 Mp可减轻大鼠机械通气相关性肺损伤,其机制与抑制p38MAPK磷酸化、上调AQP5表达有关,中等剂量甲泼尼龙为较合适的肺保护剂量。

拓扑替康对卵巢癌SKOV3细胞水通道蛋白5及NF-κB表达的影响

背景与目的:水通道蛋白5(aquaporin 5,AQP5)的表达异常与卵巢癌细胞的浸润转移和血管形成有关。核转录因子NF-κB参与细胞的增殖、分化、凋亡,且能影响肿瘤细胞对化疗的敏感性。本研究探讨拓扑替康(topotecan,TPT)对卵巢癌SKOV3细胞中AQP5、核转录因子(nuclear factor kappaB,NF-κB)及其抑制因子(inhibitor kappa B,IκBα)表达的影响。方法:用不同浓度TPT作用SKOV3细胞不同时间后,应用MTT法检测并计算卵巢癌细胞增殖抑制率,蛋白质印迹法检测AQP5、NF-κB及IκBα蛋白表达,并分析各蛋白表达水平的相关性。结果:0.4μg/mLTPT与SKOV3细胞温育24h,AQP5、胞浆和胞核NF-κBp65以及胞浆IκBα表达随着作用时间延长均明显下降,并维持至72h后(P<0.05)。不同浓度(0.2μg/mL、0.4μg/mL、0.6μg/mL、0.8μg/mL)TPT作用于SKOV3细胞24h,随着TPT浓度增加,SKOV3细胞AQP5表达量逐渐减少(P<0.05),0.8μg/mLTPTAQP5表达抑制率为57.9%;同时,细胞核NF-κBp65、IκBα表达量也逐渐减少。TPT对细胞的增殖抑制率与AQP5表达呈负相关(r=-0.965;P<0.05),AQP5表达与NF-κBp65和IκBα呈正相关(r=0.903,0.896;P<0.05)。结论:TPT抑制肿瘤细胞增殖时下调AQP5及核转录因子NF-κB表达。

丝裂原活化蛋白激酶信号对高氧性肺损伤水通道蛋白5的调控机制

目的:探讨丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinases,MAPKs)信号通路三亚族ERK、p38、JNK对高氧性肺损伤异常表达水通道蛋白5(aquaporin 5,AQP5)的分子调控机制。方法:制备高氧肺损伤动物模型,通过不同信号途径抑制剂干预。随机将Wistar实验大鼠分为8组(n=6):空气对照组(A)、高氧组(H)、高氧+ERK抑制剂PD98059组(H+PD)、高氧+p38抑制剂SB203580组(H+SB)、高氧+JNK抑制剂SP600125组(H+SP)及空气+抑制剂对照组(A+PD、A+SB、A+SP),采用蛋白质免疫印迹法检测AQP5蛋白表达,real-time PCR检测AQP5 mRNA。结果:Western blot结果显示:A组AQP5蛋白呈较高表达,H组AQP5表达减弱(P=0.000),而H+SB、H+SP组较H组AQP5蛋白表达明显升高(P=0.000),二者中尤以H+SB组其蛋白上调更明显,H+PD组与H组比较无统计学性差异(P=0.737);real-time PCR结果显示:H组AQP5 mRNA表达较空气对照组降低(P=0.000),H+SB、H+SP与H组比较AQP5 mRNA表达升高(P=0.000),二者中尤以H+SB组其mRNA上调更明显,但二者与A组比较,差异仍有统计学意义(P=0.000),而H+PD干预组与H组比较,未见肺组织AQP5 mRNA表达的明显变化(P=0.796)。A组与A+抑制剂对照组(A+PD、A+SB、A+SP)在AQP5蛋白及mRNA表达上均无明显差异。结论:抑制剂SB203580及SP600125在高氧暴露后能增加AQP5蛋白和mRNA表达,因而推测MAPKs通路中p38、JNK可能参与了调控高氧肺损伤AQP5基因表达的下调过程。

水通道蛋白5与肿瘤发展和转移的研究进展

水通道蛋白(aquaporin,AQP)5是水通道蛋白家族的成员之一,为膜转运蛋白。随着研究的日渐深入,发现AQP5除影响跨上皮、跨细胞水分子的转运外,与肿瘤发生和发展也有一定的关系。AQP5以其独特的结构,在非小细胞肺癌、卵巢癌、结肠癌以及慢性粒细胞性白血病等恶性肿瘤的发展与恶化中发挥了重要作用。目前的研究显示,AQP5能够影响肿瘤细胞的形态、增殖及迁移,进而影响肿瘤的发生发展过程。有关的调节机制也已经有了进一步的研究,现在已证实AQP5与Ras、NF-κB、c-Src和Rb等信号通路有一定的关系。目前针对AQP5的抗肿瘤药物也有了初步的研究,并引起了广泛的关注。本文就AQP5的结构和功能的变化与肿瘤发生发展的关系及其调节机制进行了阐述。