药用水蛭的化学成分及药理作用研究进展

水蛭,俗名蚂蟥,生长繁殖于内陆淡水水域,是我国传统的特种药用水生动物。部分水蛭的干燥全体泡制后入药,具有治疗中风、高血压、瘀血、闭经、跌打损伤等功效,药用价值高,因此被称为药用水蛭。近年来,随着药用水蛭资源的开发利用,其在临床医学领域的应用日益广泛,但有关合理高效利用药用水蛭鲜见相关报道,文章综述了药用水蛭的化学成分及相关的药理作用,为科学合理应用药用水蛭提供理论指导。

炙黄芪-水蛭联合阿加曲班注射液治疗气虚血瘀型急性脑梗死的疗效观察

[目的]探究炙黄芪-水蛭联合阿加曲班注射液治疗气虚血瘀型急性脑梗死的疗效观察。[方法]选取2021年2月—2023年2月于本院进行急性脑梗死治疗的患者110例,按照随机数字表法将其分为阿加曲班注射液组(西药组)34例、炙黄芪-水蛭组(中药组)36例,以及联合组40例。西药组给予阿加曲班注射液;中药组给予炙黄芪-水蛭;联合组给予炙黄芪-水蛭联合阿加曲班注射液治疗。评估患者治疗前后中医证候积分水平;采用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)、改良Rankin(mRS)评分量表评估患者自身的神经功能缺损情况以及神经功能恢复情况;检测脑血流阻力指数(RI)、舒张期血流速度(Vd)、收缩期峰值流速(Vs)、平均血流速度(Vm)、血管内皮生长因子(VEGF)、一氧化氮(NO)水平。[结果]治疗后,联合组中医证候积分、NIHSS、mRS评分、RI、VEGF水平均低于西药组、中药组(P<0.05);Vd、Vs、Vm、NO水平高于西药组、中药组(P<0.05);联合组总有效率较高(P<0.01)。[结论]经炙黄芪-水蛭、阿加曲班注射液联合治疗,其气虚血瘀型急性脑梗死患者中医证候积分水平降低,相关神经功能、血流情况及血管内皮损伤情况均得到显著改善,临床治疗效果显著。

水蛭治疗缺血性脑卒中的研究进展

目前水蛭及相关制剂在缺血性脑卒中的临床治疗中运用广泛,除单用水蛭外,临床常与益气活血类中药配伍使用,其复方制剂发展和运用也愈加广泛。本文就近年来活血化瘀类中药水蛭及常用药对和复方制剂对缺血性脑卒中治疗的研究进展进行综述,总结归纳了相关临床疗效评价和作用机制研究,梳理了水蛭及常用药对和相关制剂在缺血性脑卒中的防治及在抗凝抗血栓、抗炎抗氧化、抗凋亡等各方面效用,以期为今后水蛭及相关制剂防治缺血性脑卒中的临床运用和科学研究提供参考。

基于本草考证的水蛭功能主治及用法用量探究

基于本草考证,水蛭功能主要为破血逐瘀和活血通络;用药形式以水煎剂和研末为主;现代水煎剂用量2~20 g,研末用量1~10 g,古今均超出药典规定剂量,剂量选择与临床用药目的、用药形式相关,破血逐瘀之功用量常高于活血通络之功用量,水煎剂用量高于粉剂。水蛭的临床剂量具有一定的研究价值,《中华人民共和国药典》规定剂量有一定的局限性,临床应用应因人、因证、因时制宜给予最佳剂量。

水蛭治疗脑小血管病所致神经功能障碍的疗效及其对相关生物标志物的影响

目的探讨水蛭治疗脑小血管病(Cerebral Small Vessel Disease,CSVD)所致神经功能障碍患者的临床疗效。方法选取2020年10月—2023年6月广西壮族自治区民族医院神经内科收治的120例CSVD导致认知功能障碍患者为研究对象,以随机数表法分为对照组(n=60,常规西药内科基础治疗)和观察组(n=60,在对照组基础上增加中药水蛭治疗)。分别于治疗前、治疗2周及治疗3个月后观察两组患者的神经功能障碍评分和血清胱抑素C、同型半胱氨酸、高敏C反应蛋白指标水平。结果与治疗前相比,两组治疗2周、治疗3个月后的神经功能障碍评分以及血清胱抑素C、同型半胱氨酸、高敏C反应蛋白指标水平均明显下降,且观察组治疗3个月后下降幅度更大,差异有统计学意义(P均<0.05)。观察组治疗的总有效率(86.67%)高于对照组(71.67%),差异有统计学意义(χ^(2)=4.093,P<0.05)。结论水蛭能有效改善CSVD所致的神经功能缺损,同时能降低患者血清胱抑素C、同型半胱氨酸、高敏C反应蛋白指标水平。

水蛭治疗脑小血管病所致认知功能障碍的疗效分析

目的探究水蛭饮片治疗脑小血管病(Cerebral Small Vessel Disease,CSVD)所致认知障碍患者的临床疗效。方法方便选取2020年10月—2023年6月广西壮族自治区民族医院神经内科收治的120例CSVD所致认知障碍患者为研究对象,以随机数表法分为对照组和观察组,各60例。对照组实施内科常规西药基础治疗,观察组在对照组治疗基础上增加中药水蛭口服治疗。观察并对比两组的治疗结果。结果治疗后与对照组相比,观察组最小量认知评估量表(Mini Mental State Examination,MMSE)评分、蒙特利尔认知评估量表(Montreal Cognitive Assessment,MoCA)评分更高,差异有统计学意义(P均<0.05)。观察组临床治疗有效率(86.67%)显著高于对照组(71.67%),差异有统计学意义(χ^(2)=4.093,P<0.05)。治疗后与对照组相比,观察组的白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)和超敏-C反应蛋白(High Sensitive C-reactive Protein,hs-CRP)水平更低,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论水蛭能有效减轻CSVD所致认知障碍患者的临床症状,改善患者的认知功能障碍。

戈焰教授运用水蛭治疗慢性萎缩性胃炎经验总结

水蛭,为水蛭科动物蚂蟥Whitmania pigra Whitman、水蛭Hirudo nipponica Whitman或柳叶蚂蟥Whitmania acranulata Whitman的干燥全体^([1]),全国各地均有出产。其首见于《神农本草经》,记载水蛭“主逐恶血、瘀血、月闭,破血瘕积聚,无子,利水道”。后世认为其性咸、苦、平,有小毒,归肝经,功效为破血通经、逐瘀消癥。现代药理研究^([2])表明,水蛭具有抗凝、抗血栓、抗肿瘤、抗炎、抗纤维化等广泛的药理作用,目前主要应用于心脑血管疾病。

基于破血逐瘀理论探讨中药水蛭及其复方治疗肿瘤的研究进展

肿瘤是临床中比较难治疗的疾病,化疗药物的耐药性以及治疗过程中的不良反应增加了治疗的难度。中药作为天然药物,具有不良反应少、遗传毒性低等优点,可以在治疗肿瘤疾病的同时对机体功能从根本上进行调理,通过查阅文献发现破血逐瘀药物,如三棱、莪术、水蛭、斑蝥等用于治疗肿瘤疗效确切,基于此,从破血逐瘀理论出发,分析肿瘤的中医病因病机及破血逐瘀治则,总结水蛭临床治疗肿瘤的部分作用机制,旨在为临床诊疗该疾病提供参考及研究方向。

水蛭素的HPLC色谱分析条件优化研究

为研究水蛭素的HPLC最佳色谱分析条件,通过对比重组水蛭素的HPLC分析方法的洗脱条件、检测波长、色谱柱的分离效果,拟合水蛭素浓度与峰面积的线性方程,优选最佳水蛭素色谱分析条件。结果显示,ODSC18柱分析最佳条件为:采用梯度洗脱,流动相A和B洗脱程序:0~60 min,B:0%~100%,进样量20μL,柱温35℃,流速为1 mL/min,波长205 nm;TSKgelG2000SW柱最佳分析条件为:流动相磷酸缓冲液(0.02 mol/L,pH 7.0),流速0.5 mL/min,检测波长205 nm,进样量20μL。研究表明,水蛭素浓度与峰面积具有良好的直线线性相关关系,采用TSKgelG2000SW色谱柱的分析效果优于ODSC18柱,可为动物活性多肽的分析提供依据。

水蛭药理作用及其在脑病中的应用

水蛭,最早见于《神农本草经》,其历史悠久,为破血消癥、活血祛瘀要药,是脑系疾病治疗的常用药物。根据目前研究总结发现,水蛭药理作用包括抗凝血、抗血栓、抗肿瘤、抗炎、抗纤维化、抗细胞凋亡、抑制血脂等方面。随着对水蛭临床疗效的逐步认识,运用中医药治疗脑病也愈加常见。水蛭在治疗脑病中的优势逐渐显现,运用水蛭治疗卒中、头痛、眩晕、痴呆、颤证等脑系疾病常取得较好疗效。

水蛭抗凝血类成分及提取物治疗缺血性中风的研究进展

水蛭是我国传统的动物类活血化瘀药,现代药理学研究表明,水蛭提取物中含有大量的抗凝类成分,具有多种药理作用,水蛭提取物对心脑血管疾病具有很好的临床治疗效果。笔者通过对水蛭中抗凝血类化学成分及其药理作用相关研究文献进行综述,发现水蛭中含有蛋白质等多肽类、类脂类、蝶啶类等化合物,其中水蛭中抗凝类化合物为水蛭中的主要有效成分,具有抗血栓、抗凝血、抗动脉粥样硬化、抗肿瘤、抗炎等多种药理作用,治疗缺血性中风的作用机制与改善凝血、改善血液流变和微循环并能修复受损血脑屏障作用有关。

重构本草——水蛭

通过古籍文献调研、中医药现代研究成果的梳理,结合中医临床及中药学等学科领域内知名专家学者的认识及应用经验,归纳出水蛭:功效主要为破血通经,逐瘀消癥。症靶为闭经或月经量少或月经血块多,心腹疼痛,肢体感觉异常,跌扑损伤之肿胀、疼痛、出血。标靶为腹内结块、肿瘤,恢复期脑卒中,肾纤维化,肝纤维化改变。现代药理研究发现,水蛭及其有效成分具有抗凝、抗血栓、抗肿瘤、抗炎、抗纤维化、降血脂、保护血管内皮细胞、抗神经损伤等作用。水蛭煎剂可引发胃肠道反应及过敏反应,孕妇及月经过多者禁用。高温破坏水蛭素,临床使用应注意冲服法或用量。临床使用水蛭煎服剂量多为1~9 g,打粉吞服剂量为0.3~10 g,内服时当根据不同疾病,或同一疾病的不同阶段进行辨证使用,并积极探索水蛭用量与症靶、标靶的量效关系构建。

水蛭和黄连随证施量策略在糖尿病肾病治疗中的运用

糖尿病肾病是主要的糖尿病微血管并发症之一,该疾病早中期,患者常没有明显的临床症状,但会有蛋白尿,ACR升高等异常指标,因此在准确辨证基础上,应用针对降蛋白尿和降糖的中药水蛭和黄连,往往能获得较好的疗效。对于此类药物的剂量,要结合随证施量策略,选定调整剂量的指征,找准变量的时机,控制好药物用量的范围,才能在确保用药安全的基础上取得最佳疗效。

基于转录组学探讨水蛭素对HK-2细胞的影响机制

目的采用转录组学技术探讨水蛭素对人肾皮质近曲小管上皮细胞(HK-2细胞)的影响及机制。方法利用CCK-8法检测水蛭素处理之后的HK-2细胞活力,通过转录组学的技术对溶媒对照组和水蛭素组进行转录组测序;通过RSEM的方法计算不同样品中的基因表达水平,差异基因的筛选采用DEseq2方法,筛选标准为|log2FC值|≥1,P<0.05。随后根据差异表达的基因进行富集分析。结果水蛭素5 mg/mL下提高HK-2细胞活力效果最佳,转录组学研究结果表明,与正常HK-2细胞相比,水蛭素处理后的HK-2细胞有1723个基因发生差异表达。GO和KEGG分析结果表明,炎症通路的调控是水蛭素治疗高尿酸血症的主要作用机制。结论水蛭素作用于多条炎症信号通路,进而促进尿酸排泄,促进集体代谢和尿酸排出体外,起到降尿酸的作用,表明水蛭素在治疗高尿酸血症方面效果显著。

水蛭素对糖尿病肾病模型小鼠的作用机制研究

目的本研究旨在探讨水蛭素对糖尿病肾病模型小鼠的治疗作用及机制。方法采用高脂饮食和腹腔注射链脲佐菌素制备糖尿病肾病小鼠模型,将模型小鼠随机分为模型组和水蛭素治疗组。治疗组小鼠给予水蛭素灌胃,连续8周。观察小鼠肾功能指数、尿液指标、炎症因子及炎性蛋白表达水平的变化。结果小鼠造模后,血糖水平显著提高,出现明显肾损伤,说明造模成功。水蛭素治疗后,血尿素氮(BUN)、血清肌酐(CREA)和尿白蛋白与肌酐比值(UACR)水平均显著降低,尿液β2-微球蛋白(β2-MG)和尿肌酐(UCr)水平均显著改善,肾皮质中炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和MCP-1的浓度均明显降低。进一步的蛋白印迹实验表明,水蛭素可以显著抑制NLRP3和TLR4蛋白的表达水平。结论水蛭素对糖尿病肾病小鼠有治疗作用,其机制可能与抗炎作用有关。

基于GEO数据库和生物信息学方法分析水蛭治疗心肌梗死的差异靶基因和信号通路

目的:探讨水蛭治疗心肌梗死(myocardial infarction,MI)的差异靶基因和信号通路。方法:从基因表达综合数据库(gene expression omnibus,GEO)中检索与MI有关的数据芯片,利用GEO2R工具对数据芯片进行在线分析,筛选出MI差异表达的靶基因;利用中医药综合数据库(traditional Chinese medicine integrated database,TCMID)、比较毒理基因组学数据库(comparative toxicogenomics database,CTD)、BATMAN、SwissTargetPrediction数据库筛选与水蛭相关的靶点;利用STRING数据库和核心靶基因导入基因功能注释数据库(the database for annotation visualization and integrated discovery,DAVID),对水蛭治疗MI的差异靶基因进行基因本体论(gene ontology,GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)富集分析。结果:利用GEO2R工具筛选出794个与MI有关的差异靶基因,包括386个下调基因,408个上调基因;利用TCMID数据库得到518个与水蛭相关的靶点;最终筛选出28个水蛭治疗MI的差异靶基因,10个关键基因;经GO和KEGG富集分析得到P<0.05的生物过程(biological process,BP)25个、细胞组分(cell component,CC)5个、分子功能(molecular function,MF)27个,信号通路22条。结论:水蛭治疗MI的差异靶基因包括VEGFA、AREG、EGFR等基因,其作用机制可能与水蛭调控Rap1、PI3K-Akt、Ras、MAPK、HIF-1等信号通路有关。

高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法测定水蛭药材中11种重金属元素

采用微波消解法联合ICP-MS法,以钪、锗、铟、铋为内标元素,采用KED模式对样品中重金属元素的含量进行测定,建立电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)同时测定水蛭药材中11种重金属元素的含量。数据显示11种重金属元素具有良好的线性关系,线性系数(r)均大于0.999 0,重复性测试RSD小于2.8%,精密度测试RSD为0.86%~4.0%,回收率为85.2%~110.0%。结果表明本法简单高效、精密度佳、准确性好,可为水蛭药材中11种重金属元素的测定提供技术参考。

水蛭素对脓毒症早期大鼠纤溶功能的影响

目的:观察水蛭素对脓毒症早期大鼠纤溶功能的影响。方法:将45只大鼠随机分为假手术组、盲肠结扎组和水蛭素组,每组15只。同时各组均随机抽取10只大鼠用于观察24 h生存情况。术后6 h和12 h时间点取血标本及病理组织,检测抗凝血酶Ⅲ(AntithrombinⅢ,ATⅢ)、纤维蛋白原(Fibrinogen,FIB)、纤溶酶原(Plasminogen,PLG)、纤溶酶抑制剂(Plasmin Inhibitor,PI)、D-二聚体和纤维蛋白原降解产物(Fibrin Degradation Products,FDP)水平。结果:术后24 h,假手术组、模型组和水蛭素组大鼠的存活率分别为100%、40%和80%。与假手术组相比较,盲肠结扎组和水蛭素组大鼠的FIB水平在盲肠结扎穿孔术后12 h明显升高,且水蛭素组大鼠的FIB水平较盲肠结扎组更高(P<0.05)。盲肠结扎组和水蛭素组术后6 h和12 h的ATⅢ较假手术组均明显下降(P<0.05),且盲肠结扎组12 h时的ATⅢ较水蛭素组更低(P<0.05)。盲肠结扎组和水蛭素组大鼠术后12 h的PLG较假手术组明显降低(P<0.05)。与盲肠结扎组相比较,水蛭素组和假手术组大鼠12 h时的PI明显更低(P<0.05)。与盲肠结扎组相比较,假手术组和水蛭素组大鼠的FDP水平均明显更低(P<0.05)。盲肠结扎组大鼠的肠上皮细胞坏死及水肿情况较水蛭素组更重,且炎症细胞浸润更明显。结论:水蛭素可以调节促纤溶及抗纤溶的力量并增强脓毒症早期的抗凝及抗炎作用,从而改善脓毒症早期纤溶功能。

水蛭对非酒精性脂肪肝病小鼠的保护作用及其机制

目的探讨水蛭对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)小鼠的保护作用及潜在机制。方法将雄性载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠随机分为模型组和水蛭低、高剂量组(0.45、0.9 g/kg),每组10只;另取同周龄野生型雄性C57BL/6J小鼠10只,作为对照组。对照组小鼠以基础维持饲料喂养,其余各组小鼠以高脂饲料喂养12周以建立NAFLD模型。第13周,各药物组小鼠灌胃相应药液,每天1次,连续8周。末次给药后,测定各组小鼠的体重、肝脏质量,并计算肝脏指数;检测其血清核因子κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平;观察其肝组织病理形态学变化,并检测肝组织中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、沉默信息调节因子1(SIRT1)蛋白的表达情况。结果与对照组比较,模型组小鼠肝组织可见较多的脂肪空泡和炎症细胞浸润,并有明显的脂质堆积;其体重、肝脏质量及肝脏指数和血清NF-κB、TNF-α、IL-1β、IL-6、TC、TG、LDL-C水平均显著升高,血清HDL-C水平和肝组织中PPARγ、SIRT1蛋白的表达水平均显著降低(P<0.01)。与模型组比较,水蛭低、高剂量组小鼠肝组织病理改变均有所缓解;其体重、肝脏质量及肝脏指数和血清NF-κB、TNF-α、IL-1β、IL-6、TC、TG、LDL-C水平均显著降低,血清HDL-C水平和肝组织中PPARγ、SIRT1蛋白的表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论水蛭可能通过激活PPARγ、SIRT1蛋白的表达来调节肝脏脂质代谢、抑制炎症反应,从而发挥对NAFLD的改善作用。

重组水蛭素抗ApoE^(-/-) 小鼠动脉粥样硬化的研究

目的探讨重组水蛭素对ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化血脂水平和粥样斑块的影响。方法高脂饲料喂养雄性ApoE^(-/-)小鼠随机分为模型组和重组水蛭素低、中、高剂量给药组,正常饮食的C57BL/6J小鼠作为正常对照组。连续给药8周后,检测血脂水平;HE染色以及Masson染色观察主动脉血管病理学改变;CD68、α-SMA免疫组织化学染色分别观察重组水蛭素对粥样斑块中巨噬细胞浸润和平滑肌肌动蛋白的影响。结果与模型组比较,重组水蛭素各剂量给药组的血清总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇水平均有不同程度的降低(P<0.05);各给药组与模型组的高密度脂蛋白胆固醇的差异无统计学意义(P>0.05);Masson染色显示模型组主动脉血管胶原异常增生,而各给药组胶原含量均有不同程度减少;CD68、α-SMA免疫组织化学染色显示,模型组主动脉粥样斑块处有大量CD68表达和少量α-SMA表达,而重组水蛭素各给药组粥样斑块处CD68表达减少(表示巨噬细胞浸润减少)、α-SMA表达增加(P<0.05)。结论重组水蛭素能降低ApoE^(-/-)小鼠血清血脂水平,延缓平滑肌细胞凋亡,抑制血管胶原增生,从而抑制动脉粥样硬化的发展。