波长切换HPLC法同时测定水蛭蛴螬化瘀片中10个活性成分的含量

目的:建立多波长切换HPLC法同时测定水蛭蛴螬化瘀片中丹参素钠、丹酚酸B、黄芩素、汉黄芩素、黄芩苷、汉黄芩苷、异鼠李素-3-O-新橙皮苷、甘草酸铵、延胡索乙素、芍药苷10个成分的含量。方法:采用岛津Insertsustain C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以0.2%醋酸水溶液-甲醇-乙腈为流动相梯度洗脱,DAD检测器,检测波长为280 nm(0~20 min,33~36 min,38.8~42 min检测丹参素钠、延胡索乙素、黄芩苷),230 nm(20~29 min,检测芍药苷),254 nm(29~33 min,检测异鼠李素-3-O-新橙皮苷),252 nm(62~70 min检测甘草酸铵),286 nm(36~38.8 min检测丹酚酸B),274 nm(42~48 min,70~80 min检测汉黄芩苷、汉黄芩素),276 nm(48~62 min,检测黄芩素),流速1.0 mL·min^(-1),柱温为25℃。结果:通过1次进样,同时测定了上述10个成分的含量,丹参素钠、丹酚酸B、黄芩素、汉黄芩素、黄芩苷、汉黄芩苷、异鼠李素-3-O-新橙皮苷、甘草酸铵、延胡索乙素、芍药苷的进样质量浓度分别在6.32~158μg·mL^(-1)(r=0.999 8)、53.4~1 336μg·mL^(-1)(r=0.999 9)、1.51~37.8μg·mL^(-1)(r=0.999 9)、0.888~22.2μg·mL^(-1)(r=0.999 9)、18.6~465μg·mL^(-1)(r=0.999 9)、7.92~198μg·mL^(-1)(r=0.999 9)、2.14~53.6μg·mL^(-1)(r=0.999 8)、3.30~82.6μg·mL^(-1)(r=1.000 0)、1.12~28.0μg·mL^(-1)(r=0.999 9)、38.5~962μg·mL^(-1)(r=0.999 9)与峰面积呈良好线性关系;平均加样回收率(n=6)分别为97.0%(RSD=1.6%)、99.1%(RSD=1.4%)、99.0%(RSD=1.4%)、98.1%(RSD=1.6%)、99.2%(RSD=0.98%)、100.2%(RSD=1.8%)、98.7%(RSD=2.6%)、100.4%(RSD=1.7%)、100.2%(RSD=3.0%)、100.5%(RSD=2.2%);3批中试样品中上述10个成分含量测定结果依次为2.112~2.119 mg·g^(-1)、15.642~15.648 mg·g^(-1)、1.558~1.568 mg·g^(-1)、0.553~0.568 mg·g^(-1)、16.515~16.527 mg·g^(-1)、4.412~4.423 mg·g^(-1)、0.554~0.569 mg·g^(-1)、3.353~3.368 mg·g^(-1)、0.192~0.201 mg·g^(-1)、8.749~8.761 mg·g^(-1)。结论:该方法可用于水蛭蛴螬化瘀片的质量控制,为其质量标准的建立奠定了基础。