水貂细小病毒性肠炎实验室诊断方法研究进展

水貂细小病毒性肠炎是威胁水貂养殖的最大疾病之一。该病在我国广泛存在,一旦暴发将给水貂养殖业造成巨大的经济损失。为了防制该病,需要迅速、准确地作出诊断。经过几十年的努力,水貂细小病毒性肠炎诊断技术从最早的病毒分离鉴定到血清学试验,再到分子生物学技术,已逐渐向更敏感、更特异、更方便、更经济的方向发展。本文就水貂细小病毒性肠炎的实验室诊断方法研究进展进行综述。

水貂犬瘟热活疫苗与水貂细小病毒性肠炎灭活疫苗制备及其联合免疫效果研究

制备了水貂犬瘟热活疫苗(以下简称犬瘟活疫苗)与水貂细小病毒性肠炎灭活疫苗(以下简称肠炎灭活苗)各3批,通过半成品及成品检验结果显示,生产的2种疫苗合格且生产工艺稳定。通过采用肠炎灭活苗稀释犬瘟活疫苗,实现2种疫苗联合(简称联合疫苗)后,体外接种Vero细胞,采用专用稀释液稀释的犬瘟活疫苗作对照,在25℃存放条件下,5 h内两者的犬瘟热病毒含量无明显差异,表明该方法对犬瘟热病毒的存活无明显影响。将联合疫苗免疫水貂10只,犬瘟活疫苗、肠炎灭活苗分别免疫10只水貂作为单苗对照组,免疫后21 d采血,测定3组的抗体水平,联合疫苗组的犬瘟热病毒中和抗体和细小病毒HI抗体分别与对应单苗的抗体水平无明显差异,表明联合疫苗具有与单苗相当的免疫效力。该研究为进一步研发水貂犬瘟活疫苗与肠炎灭活苗联苗奠定了基础。

水貂细小病毒性肠炎灭活疫苗保存期试验

对2—8℃条件下保存90，120，150，180，210，240，300，360d的水貂细小病毒性肠炎灭活疫苗接种水貂进行免疫试验，结果表明：保存300d的疫苗接种水貂30d后血清中水貂肠炎细小病毒（MEV）HI抗体均在1：32以上，免疫水貂强毒攻击均获得100％保护，确定水貂细小病毒细胞灭活疫苗保存期为300d。该结果为水貂细小病毒细胞灭活疫苗运输和保存提供了理论依据。

水貂犬瘟热、细小病毒性肠炎二联灭活疫苗制备及其质量评价

本研究制备了水貂犬瘟热、细小病毒性肠炎二联灭活疫苗3批,通过病毒液检验、半成品检验及成品检验,显示所生产的灭活疫苗工艺稳定,批间差异小,成品接种水貂安全无副反应;采用血清抗体测定和免疫攻毒方法对3批灭活二联苗进行免疫效果研究,结果显示,免疫接种21 d,水貂犬瘟热中和抗体可达1:51~1:91,水貂细小病毒HI抗体可达1:64~1:256,经免疫攻毒,可抵抗100 ID_(50)的犬瘟热强毒和水貂细小病毒强毒的攻击,具有较好的免疫效果。