视网膜静脉阻塞病人血清胶质纤维酸性蛋白和水通道蛋白4水平变化及其与预后的关系

目的检测视网膜静脉阻塞(RVO)病人血清中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、水通道蛋白4(AQP4)水平,探究二者表达水平与RVO病人预后的关系。方法回顾性选取2019年8月至2021年8月西安医学院第二附属医院收治的94例RVO病人为研究组,另取同期体检健康者85例为对照组。收集病人一般临床资料,对研究组和对照组的血清GFAP、AQP4水平进行检测;根据研究组病人预后情况将其分为预后良好组(39例)和预后不良组(55例);多因素logistic回归分析RVO病人预后的影响因素;绘制血清GFAP、AQP4对RVO病人预后评估的受试者操作特征曲线(ROC曲线)。结果研究组血清GFAP水平(3.56±0.74)μg/L显著高于对照组(1.85±0.41)μg/L,研究组血清AQP4水平(15.97±2.82)μg/L显著高于对照组(10.56±2.54)μg/L(P<0.05)。预后不良组血清GFAP水平(3.91±0.84)μg/L显著高于预后良好组(3.06±0.62)μg/L;预后不良组血清AQP4水平(17.25±3.29)μg/L显著高于预后良好组(14.18±2.18)μg/L(P<0.05)。预后良好组与预后不良组病人高血压史、空腹血糖、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)差异有统计学意义(P<0.05)。logistic回归分析显示,血清GFAP、AQP4、高血压史、空腹血糖、TC、TG、LDL-C和HDL-C均是RVO病人预后不良的影响因素(P<0.05)。血清中GFAP、AQP4、二者联合预测RVO病人预后的AUC分别是0.73、0.79、0.92,灵敏度分别为47.27%、78.85%、77.08%,特异度分别为89.74%、72.97%、97.14%,约登指数分别为0.370、0.518、0.742;二者联合优于GFAP、AQP4各自单独预测(均P<0.05)。结论RVO病人血清GFAP、AQP4水平显著升高,对病人的预后状况具有较高的预测效能,可为临床的合理干预和改善病人预后提供依据。

抗水通道蛋白4抗体阳性视神经脊髓炎谱系疾病诊断与治疗进展

视神经脊髓炎谱系疾病(NMOSDs)以抗水通道蛋白4(AQP4)抗体阳性NMOSDs最为多见,主要表现为反复发作的视神经炎和脊髓炎等,严重降低患者生活质量。近年来,对该病的诊断技术、诊断标志物和免疫治疗药物不断有新的认识,本文综述抗AQP4抗体阳性NMOSDs的诊断技术和诊断标志物新进展以及新的治疗药物,以促进对该病的诊断与治疗新技术的理解和应用,探索更多可能的临床诊断与治疗方法。

顽固性低钾低钠血症的水通道蛋白4阳性NMOSD 1例

视神经脊髓炎谱系疾病(NMOSD)是一种主要累及视神经和脊髓的中枢神经系统脱髓鞘疾病,极后区综合征患者临床表现为频繁恶心、呕吐和顽固性呃逆,尤其是在不伴其他神经系统症状而单独出现时,早期易被误诊为消化道疾病和其他疾病,延误诊治。该文报道1例以频繁恶心、呕吐起病伴顽固性低钾低钠血症的水通道蛋白4阳性NMOSD,以提高对该病的认识,做到早诊断、早治疗,减少误、漏诊,从而改善患者预后。

铁离子、水通道蛋白-4在脑室出血后脑积水形成中的交互作用及预测预后的价值

目的分析铁离子(Fe)、水通道蛋白-4(AQP-4)在脑室出血(IVH)后脑积水形成中的交互作用及预测预后的价值。方法选取2021年1月至2023年1月洛阳市中心医院收治的52例IVH后发生脑积水的患者作为研究组,另选取同期52例IVH后未发生脑积水的患者作为对照组。比较两组患者以及研究组不同病情、不同预后患者的血清Fe、AQP-4水平,采用Pearson法分析Fe、AQP-4与格拉斯哥昏迷量表(GCS)评分、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分的相关性,通过交互作用分析Fe、AQP-4对脑积水形成的影响,并采用受试者工作特性曲线(ROC)分析Fe、AQP-4对预后的预测价值。结果研究组患者的血清Fe水平为(10.36±2.74)μmol/L,明显低于对照组的(14.12±3.58)μmol/L,AQP-4水平为(179.62±24.48)μg/L,明显高于对照组的(141.59±18.62)μg/L,差异均有统计学意义(P<0.05);研究组不同程度意识障碍患者血清Fe水平比较,重度<中度<轻度,AQP-4水平比较,重度>中度>轻度,差异均有统计学意义(P<0.05);研究组不同程度神经功能缺损患者血清Fe水平比较,重度<中度<轻度,AQP-4水平比较,重度>中度>轻度,差异均有统计学意义(P<0.05);Pearson法分析结果显示,研究组患者的血清Fe水平与GCS评分、NIHSS评分呈负相关(r=-0.623、-0.661,P<0.05),AQP-4水平与之呈正相关(r=0.658、0.674,P<0.05);交互作用分析结果显示,低Fe水平与高AQP-4水平在IVH后脑积水形成中呈次相乘模型的正向交互作用(P<0.05);预后不良患者的术前血清Fe水平为(8.14±1.84)μmol/L,明显低于预后良好患者的(11.75±2.39)μmol/L,AQP-4水平为(197.65±23.24)μg/L,明显高于预后良好患者的(168.35±19.17)μg/L,差异均有统计学意义(P<0.05);血清Fe、AQP-4单独及联合预测IVH后脑积水患者预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.805、0.814、0.928。结论低Fe水平、高AQP-4水平在IVH后脑积水形成中呈正向交互作用,两指标水平与脑积水病情严重程度具有一定相关性,联合检测对预后具有一定预测价值,可为临床工作提供可靠参考。

抑制水通道蛋白4表达对脑缺血再灌注模型小鼠自噬和凋亡的影响

目的:探讨抑制水通道蛋白4(AQP4)表达对脑缺血再灌注模型小鼠自噬和凋亡的影响及其机制。方法:采用暂时性大脑中动脉闭塞(tMCAO)建立小鼠脑缺血再灌注损伤模型。将60只小鼠按随机数字表法分成假手术(sham)组、I/R组、AQP4抑制组和自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)组,每组15只,sham组和I/R组腹腔注射生理盐水,AQP4抑制组和3-MA组分别腹腔注射AER-271(2 mg·kg^(-1)·d^(-1))和AER-271+3-MA(2 mg·kg_(-1)·d^(-1)),给药3 d,每天1次。观察各组小鼠神经功能Longa评分,记录体重变化;采用苏木精-伊红(HE)染色法观察脑梗死体积及组织病理变化;采用Western blot检测AQP4、LC3-Ⅱ、P62和cleaved caspase 3含量变化,采用免疫荧光法检测LC3-Ⅱ、P62、cleaved caspase-3与NeuN(神经元标志物)的共定位及表达情况。结果:I/R组与AQP4抑制组检测到大面积的脑梗塞和脑水肿,以及较高的Longa评分;与I/R组比较,AQP4抑制组的脑梗塞体积、脑水肿体积和Longa评分均显著降低(P<0.05);与sham组比较,I/R组的AQP4、LC3-Ⅱ和cleaved caspase-3的表达显著增加(P<0.01),而小鼠体重和P62表达则显著降低(P<0.05,P<0.01)。与I/R组比较,AQP4抑制组和3-MA组的AQP4、LC3-Ⅱ和cleaved caspase-3表达显著降低(P<0.05,P<0.01),而小鼠体重和P62表达则显著增加(P<0.05,P<0.01)。然而,与AQP4抑制组比较,3-MA组小鼠Longa评分、脑梗死体积、小鼠体重和AQP4、LC3-Ⅱ、cleaved caspase-3及P62的表达无显著差异。结论:抑制AQP4的表达能够显著减小tMCAO模型小鼠的脑梗死面积和减轻神经损伤程度。同时,抑制AQP4的表达对脑梗死后自噬和凋亡具有减缓作用,而加用自噬抑制剂后对AQP4抑制剂的保护作用无显著影响。

改良VPS治疗脑室出血后脑积水的效果及对神经功能、铁离子和水通道蛋白-4的影响

目的 探讨改良脑室-腹腔分流术(VPS)在脑室出血(IVH)后脑积水患者治疗中的应用价值。方法 选取2021年1月至2023年1月洛阳市中心医院收治的102例IVH后脑积水患者,采用简单随机化法分为两组,各51例。对照组接受传统VPS治疗,研究组接受改良VPS治疗。比较两组手术相关指标、神经功能评分[美国国立卫生院卒中量表(NIHSS)]及相关因子[白蛋白商(QAlb)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)]、血清铁离子(Fe)、水通道蛋白-4(AQP-4)水平、认知功能[蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分]、生活能力[日常生活能力量表(ADL)评分]、步态障碍评分(Tinetti评分)、并发症及术后6个月情况良好率。结果 研究组通气时间、住院时间、住院费用均较对照组低(P<0.05);术后第7天,研究组NIHSS评分、脑脊液NSE和QAlb、血清Fe和AQP-4水平均较对照组低(P<0.05);研究组术后第6个月MoCA评分、ADL评分、Tinetti评分均较对照组高(P<0.05);研究组并发症发生率较对照组低,术后6个月预后良好率较对照组高(P<0.05)。结论 改良VPS治疗IVH后脑积水患者,可减轻神经功能损伤,恢复认知功能和步态,增强日常生存能力,改善患者预后,且能减少并发症及住院时间,减轻患者负担。

血清水通道蛋白4抗体与视神经脊髓炎谱系疾病严重程度的关系研究

目的 探讨血清水通道蛋白4抗体(AQP4-IgG)与视神经脊髓炎谱系疾病严重程度的关系,为临床诊治提供参考。方法 选取2015年2月至2022年7月安徽医科大学第一附属医院收治的86例视神经脊髓炎谱系疾病患者作为观察组,另选取同期于安徽医科大学第一附属医院体检的50例健康者作为对照组进行回顾性分析。根据扩展功能障碍状态量表(EDSS)评分将观察组患者分为轻中度组(55例,EDSS≤3分)和重度组(31例,EDSS>3分)。比较观察组与对照组研究对象血清AQP4-IgG水平,比较不同严重程度患者血清AQP4-IgG水平及脊髓病变节段数,分析血清AQP4-IgG水平与病情严重程度和脊髓病变节段数的相关性。结果 观察组研究对象血清AQP4-IgG水平高于对照组(P<0.05)。重度组患者血清AQP4-IgG水平高于轻中度组(P<0.05)。两组患者脊髓病变节段数比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Pearson相关性分析显示,血清AQP4-IgG水平与病情严重程度呈正相关(P<0.05);血清AQP4-IgG水平与脊髓病变节段数无明显相关性(P>0.05)。结论 视神经脊髓炎谱系疾病患者AQP4-IgG水平与病情严重程度呈正相关,可反映神经功能损害情况。

水通道蛋白4抗体阳性的视神经脊髓炎谱系疾病的防复发治疗

视神经脊髓炎谱系疾病(neuromyelitis optica spectrum disorders,NMOSD)是一种自身免疫介导的主要以视神经炎和横贯性脊髓炎为特征的中枢神经系统疾病。NMOSD的发病主要由水通道蛋白4(aquaporin-4,AQP4)抗体引起,具有高复发、高致残的特点,每次复发都可能导致神经损伤和残疾逐步累积,因此应尽早使用有效的预防复发的药物,从而减少复发率、改善患者的长期预后。目前,随着对NMOSD致病机制的研究不断深入,新兴治疗靶点单克隆抗体药物不断涌现。本文主要就AQP4抗体阳性的NMOSD的慢性期防复发治疗展开综述。

抑制磷酸二酯酶4可降低脑缺血/再灌注损伤后的水通道蛋白4表达、减轻星形胶质细胞肿胀

我们的既往研究已显示磷酸二酯酶4(PDE4)抑制剂对大鼠中脑动脉闭塞/再灌注(MCAO/R)后的神经元损伤具有保护作用。然而,PDE4对脑水肿和星形胶质细胞肿胀的影响尚不清楚。在本研究中,我们发现通过Roflumilast(Roflu)抑制PDE4可以减轻大鼠缺血再灌注后的脑水肿、降低脑组织含水量。Roflu减少了水通道蛋白4(AQP4)的表达,而磷酸化蛋白激酶B(Akt)和叉头框蛋白O3a(FoxO3a)的水平增加。此外,Roflu减少原代星形胶质细胞在糖氧剥夺/再灌注(OGD/R)后的细胞体积和AQP4的表达。同样,PDE4B敲低显示出与PDE4抑制相似的作用;而PDE4B过表达可以减少PDE4B敲低对AQP4表达的抑制作用。本研究还发现,Roflu对AQP4表达和细胞体积的影响可以被Akt抑制剂MK2206阻断。神经炎症和星形胶质细胞激活是在卒中病理生理的机制之一,所以本研究用白细胞介素-1β(IL-1β)处理原代星形胶质细胞。结果显示,经IL-1β处理的星形胶质细胞表现出AQP4和磷酸化Akt及FoxO3a减少。Roflu显著降低了AQP4表达,这伴随着Akt和FoxO3a磷酸化的增加。此外,FoxO3a的过表达部分逆转了Roflu对AQP4表达的影响。本研究结果显示,PDE4抑制通过Akt/FoxO3a/AQP4通路限制了缺血诱导的脑水肿和星形胶质细胞肿胀。PDE4是脑缺血后脑水肿的一个有潜力的干预目标。

电针对甲基苯丙胺戒断后抑郁小鼠海马水通道蛋白4及BDNF/TrkB/CREB信号通路的影响

目的观察电针对甲基苯丙胺(MTHE)戒断后抑郁小鼠海马水通道蛋白4(AQP4)及脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸蛋白激酶B(TrkB)/环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)信号通路的影响,探讨电针改善MTHE戒断后抑郁潜在的作用机制。方法健康雄性C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组和电针组,每组10只。模型组、电针组采用条件性位置偏爱实验(CPP)复制小鼠MTHE成瘾模式,自然戒断后制备戒断后小鼠抑郁模型。空白组、模型组、电针组不给予任何干预,电针组取“百会”、“大椎”穴给予电针干预,选用连续波,频率2 Hz,1次/d,15 min/次,连续治疗28 d。分别于戒断后和干预后对各组小鼠进行强迫游泳试验和开放旷场试验,Western blot法检测小鼠海马AQP4、BDNF、TrkB、CREB和p-CREB等蛋白表达情况,免疫荧光染色法检测小鼠海马AQP4表达情况,实时荧光定量PCR法检测小鼠海马AQP4 mRNA表达。结果造模后,与空白组比较,模型组、电针组CPP值均升高(均P<0.01),模型组、电针组CPP值差异无统计学意义(P>0.05)。戒断后,与空白组比较,模型组、电针组水中自主不动状态持续时间均增加(均P<0.01)、中央区活动持续时间均减少(均P<0.01),模型组与电针组差异无统计学意义(P>0.05);干预后,与空白组比较,模型组、电针组水中自主不动状态持续时间增加(P<0.01)、中央区活动持续时间减少(P<0.01),与模型组比较,电针组水中自主不动状态持续时间减少(P<0.01),中央区活动持续时间增加(P<0.01);干预后,与空白组比较,模型组、电针组AQP4、BDNF、TrkB、CREB、p-CREB蛋白表达均减少(均P<0.01),与模型组比较,电针组AQP4、BDNF、TrkB、CREB、p-CREB蛋白表达均增加(均P<0.01)。干预后,与空白组比较,模型组、电针组AQP4阳性减少(P<0.01),与模型组比较,电针组AQP4阳性表达增加(P<0.01)。干预后,与空白组比较,模型组、电针组AQP4 mRNA表达减少(P<0.01)。干预后,与模型组比较,电针组AQP4 mRNA表达增加(P<0.01)。结论电针可改善METH戒断后小鼠抑郁样行为,其作用机制可能与调控AQP4表达,以及BDNF/TrkB/CREB信号通路活性相关。

血清AQP4、NFL、BAFF水平与癫痫患儿认知功能的相关性及其对认知功能损害的评估价值

目的探讨癫痫患儿血清水通道蛋白4(AQP4)、神经丝轻链蛋白(NFL)、B细胞活化因子(BAFF)水平与认知功能的相关性及其对认知功能损害的评估价值。方法选取2020年5月至2023年5月周口市中心医院收治的126例癫痫患儿作为研究对象,依据蒙特利尔认知评估量表(MoCA)分为认知损害组58例和认知正常组68例,同时选取同期体检正常儿童42例作为对照组。比较三组受检者的血清AQP4、NFL、BAFF水平;采用Pearson法分析血清AQP4、NFL、BAFF水平与国立医院癫痫发作严重程度量表(NHS3)、MoCA评分的相关性;采用多因素Logistic回归分析认知功能损害的影响因素,绘制受试者工作特征曲线(ROC)及曲线下面积(AUC)分析血清AQP4、NFL、BAFF水平对认知功能损害的评估价值。结果认知损害组患者的血清AQP4水平明显低于认知正常组和对照组,且认知正常组明显低于对照组,认知损害组患者的血清NFL、BAFF水平则明显高于认知正常组和对照组,且认知正常组明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);认知损害组患者的NHS3评分为(14.25±3.75)分,明显高于认知正常组的(10.08±3.16)分,差异有统计学意义(P<0.05);经Pearson法分析结果显示,AQP4与MoCA评分呈正相关(r=0.528,P<0.05),与NHS3评分呈负相关(r=-0.429,P<0.05),而NFL、BAFF与MoCA评分呈负相关(r=-0.438、-0.501,P<0.05),NFL、BAFF与NHS3评分呈正相关(r=0.442、0.538,P<0.05);经多因素Logistic回归分析结果显示,全面性发作、发作频率升高、AQP4水平降低及NFL、BAFF水平升高均为认知功能损害的危险因素(P<0.05);经ROC分析结果显示,血清AQP4、NFL、BAFF、AQP4+NFL、AQP4+BAFF、BAFF+NFL、AQP4+NFL+BAFF评估认知功能损害的AUC分别为0.716、0.705、0.786、0.834、0.818、0.828、0.940,且AQP4+NFL+BAFF评估认知功能损害的AUC明显大于任意两项指标联合评估、单独指标评估(P<0.05)。结论癫痫患儿认知功能损害者血清AQP4水平降低,血清NFL、BAFF水平升高,其与癫痫发作严重程度密切相关,且为认知功能损害的影响因素,联合检测其水平对认知功能损害的评估具有临床意义。

血清AQP4、DCN、Apelin水平对早产儿视网膜病变诊断及病理分期的评估价值

目的探讨血清水通道蛋白4(AQP4)、核心蛋白聚糖(DCN)、爱帕琳肽(Apelin)水平对早产儿视网膜病变(ROP)诊断及病理分期的评估价值。方法选择2021年10月至2022年10月在该院接受治疗的64例ROP患儿(共128眼)作为ROP组,同时选择相同出生胎龄段无ROP的64例早产儿(共128眼)作为正常组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清AQP4、DCN、Apelin水平;采用多因素Logistic回归分析影响ROP发生的因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清AQP4、DCN、Apelin对ROP发生及病理分期的诊断价值。结果与正常组相比,ROP组的出生体质量显著降低(P>0.05)。ROP组血清AQP4、DCN、Apelin水平均高于正常组(P<0.05)。不同病理分期ROP患儿血清AQP4、DCN、Apelin水平差异有统计学意义(P<0.05)。根据多因素Logistic回归分析得知,AQP4、DCN、Apelin是影响ROP发生的危险因素(P<0.05),出生体质量是影响ROP发生的保护因素(P<0.05)。血清AQP4、DCN、Apelin三者联合诊断ROP发生的曲线下面积(AUC)最大,优于血清AQP4、DCN、Apelin各自单独诊断(Z_(三者联合-AQP4)=3.018、P=0.003,Z_(三者联合-DCN)=2.306、P=0.021,Z_(三者联合-Apelin)=3.301、P=0.001)。血清AQP4、DCN、Apelin三者联合诊断ROP病理分期的AUC最大,优于血清AQP4、DCN、Apelin各自单独诊断(Z_(三者联合-AQP4)=2.735、P=0.006,Z_(三者联合-DCN)=2.228、P=0.026,Z_(三者联合-Apelin)=2.594、P=0.001)。结论ROP患儿血清AQP4、DCN、Apelin水平显著升高,三者联合可更好地诊断ROP发生及评估其病理分期。

基于TLR-4/NF-κB信号通路及水通道蛋白1表达探讨大陷胸汤干预重症急性胰腺炎早期肺损伤的效应机制

目的:探讨大陷胸汤对重症急性胰腺炎(SAP)早期肺损伤的影响及作用机制。方法:将60只大鼠随机分为实验组、模型组和对照组,每组20只。实验组予大陷胸汤灌胃,对照组及模型组予蒸馏水灌胃,在连续灌胃7 d后,模型组与实验组以胰胆管注射牛磺胆酸钠的方式制备SAP模型,于造模后12、24、48、72 h各时间点分别处死5只大鼠取材,观察大鼠一般情况、胸腹水量、肺湿干重比、胰腺组织及肺组织病理学改变、肺组织白细胞介素(IL)-1及Toll样受体4(TLR-4)水平、肺组织核因子(NF)-κB及水通道蛋白1(AQP1)表达水平。结果:与对照组相比,模型组大鼠一般情况较差,胰腺炎症反应以及肺损伤程度较重,胸腹水量、肺湿干重比、肺组织NF-κB表达水平、IL-1及TLR-4水平升高(P<0.05),肺组织AQP1表达水平下降。与模型组相比,实验组大鼠一般情况较好,肺损伤程度较轻,胸腹水量、肺湿干重比、肺组织NF-κB表达水平、IL-1及TLR-4水平下降(P<0.05),肺组织AQP1表达水平升高,造模后72 h后,胰腺组织坏死程度与同期模型组相比明显好转。结论:大陷胸汤可在一定程度上减轻SAP大鼠早期肺损伤,其机制可能与抑制TLR-4/NF-κB炎症信号通路,增强AQP1表达有关。

miR-29a调控水通道蛋白4抑制过氧化氢诱导的星形胶质细胞凋亡

背景:一些研究已经证实了miR-29a、水通道蛋白4在星形胶质细胞损伤过程中的作用,但其是否存在相互作用以及分子机制尚未见报道。目的:研究miR-29a调控水通道蛋白4表达对过氧化氢诱导星形胶质细胞损伤的影响。方法:①以小鼠原代培养的星形胶质细胞为研究对象,用不同浓度的过氧化氢诱导小鼠星形胶质细胞损伤反应,细胞分为对照组、过氧化氢组、过氧化氢+空载体组、过氧化氢+miR-29a过表达组。采用MTT法检测小鼠星形胶质细胞存活率;Western blot法检测小鼠星形胶质细胞凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax、cleaved-Caspase-3)、水通道蛋白4和胶质纤维酸性蛋白的蛋白表达水平;实时定量PCR检测小鼠星形胶质细胞中miR-29a的表达水平;流式细胞仪检测小鼠星形胶质细胞凋亡水平。②将12只雌性BALB/c小鼠随机分为空载体组、过表达miR-29a组,每组6只。制备小鼠T10脊髓撞击损伤动物模型,建模后分别注射以下重组慢病毒(空载体、miR-29a过表达载体)。术后第7天,采用免疫组织荧光染色检测小鼠脊髓损伤部位水通道蛋白4和胶质纤维酸性蛋白表达水平。结果与结论:①过氧化氢诱导后星形胶质细胞活性下降,促凋亡相关蛋白Bax、cleaved-caspase-3水平升高,抑凋亡相关蛋白Bcl-2水平降低,且具有浓度依赖效应。在过氧化氢诱导损伤的小鼠星形胶质细胞中,miR-29a表达降低而水通道蛋白4和胶质纤维酸性蛋白的蛋白表达显著增加;过表达miR-29a能抑制水通道蛋白4的蛋白表达,抑制细胞凋亡。信息学软件预测水通道蛋白4可能是miR-29a的下游靶基因。②在小鼠脊髓撞击损伤模型中,与注射空载体病毒组比较,损伤部位过表达miR-29a能抑制水通道蛋白4和胶质纤维酸性蛋白的蛋白表达。③以上研究结果表明,miR-29a调控水通道蛋白4能够抑制过氧化氢诱导的星形胶质细胞凋亡。

远隔缺血后适应通过水通道蛋白-4对局灶性脑缺血再灌注大鼠的血脑屏障保护机制

目的:研究远隔缺血后适应对大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑组织内水通道蛋白-4(AQP4)的表达及对血脑屏障通透性的影响。方法:采用线栓法建立大脑中动脉栓塞再灌注(MCAO/R)模型。将75只雄性SD大鼠随机平均分为3组:假手术组(Sham组)、再灌注组(I/R组)、后适应组(RIPC组)。再灌注24h后对每组大鼠进行:神经功能评分,脑组织含水量,海马区神经元形态及病理损伤变化,脑梗死体积,评估血脑屏障的通透性,水通道蛋白-4的表达。结果:与Sham组相比,I/R组的大鼠表现出明显神经功能障碍,脑组织水肿明显,苏木素-伊红(HE)染色缺血侧海马CA1区呈现出明显的病理性改变,脑组织缺血侧呈白色,梗死范围较大,伊文氏蓝含量显著升高,AQP4的表达明显升高。RIPC组的大鼠比I/R组有明显改善,但差于Sham组。结论:远隔缺血后适应对大鼠脑缺血再灌注血脑屏障损伤有保护作用,可能通过下调AQP4的表达,降低血脑屏障的通透性有关。下肢作为远隔缺血后适应的器官是安全可行的,值得临床上进一步探讨。

水通道蛋白-4与缺氧缺血性脑病患儿严重程度的相关性及对预后的评估价值

目的探讨水通道蛋白-4(AQP4)与缺氧缺血性脑病(HIE)患儿严重程度的相关性及对预后的评估价值。方法选取2019年6月—2021年5月武汉市第一医院收治的137例HIE患儿为研究对象。依据影像学检查结果,将HIE患儿分为轻度组、中度组和重度组,分别有75例、37例和25例。比较不同严重程度HIE患儿脑脊液AQP4水平。统计HIE患儿28 d生存情况,依据患儿是否存活分为死亡组和生存组,分别有34例和103例。比较死亡组和存活组HIE患儿的临床资料。多因素Logistic回归分析影响HIE患儿预后的危险因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析脑脊液AQP4水平对HIE患儿预后的评估价值。结果重度组脑脊液AQP4水平较中度组、轻度组高,中度组较轻度组高(P<0.05)。死亡组与存活组患儿性别、分娩孕周、日龄、分娩方式、出生时体重、胆固醇、白蛋白、血尿素、脐带异常、母体贫血比较,差异无统计学意义(P>0.05),死亡组Apgar评分低于存活组,开始治疗日龄长于存活组,重度病情程度占比、C反应蛋白、白细胞介素-8、肿瘤坏死因子-α及AQP4水平高于存活组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示:开始治疗日龄[OR=2.907(95%CI:1.049,3.758)]、病情程度为重度[OR=3.843(95%CI:1.853,8.027)]、AQP4[OR=4.175(95%CI:2.146,10.482)]是导致HIE患儿死亡的影响因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,脑脊液AQP4水平对HIE患儿预后评估的最佳截断值为21.07 g/L,敏感性、特异性及AUC分别为76.47%(95%CI:58.43,88.62)、58.44%(95%CI:76.80,91.35)、0.821(95%CI:0.747,0.881)。结论脑脊液AQP4水平与HIE患儿的病情严重程度及预后有关,且脑脊液AQP4水平对HIE患儿预后的评估效能良好。

脊髓钝挫伤后慢病毒干扰水通道蛋白4对大鼠运动功能及Rho表达的影响

目的 探讨脊髓钝挫伤(SCC)后,慢病毒干扰水通道蛋白4(AQP4)对大鼠运动功能的影响,并观察凋亡相关因子Rho表达的变化。方法 将SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、生理盐水组(SCC组)、空载组(Vector组)和慢病毒组(AQP4RNAi组,制备慢病毒AQP4干扰模型),每组32只。SCC组、AQP4RNAi组及Vector组均采用改良Allen’s法制备SCC模型,术后12 h及术后1、3 d,采用大鼠脊髓损伤(BBB)评分评估4组后肢运动功能;采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测4组脊髓组织中rho的表达;采用免疫组织化学方法检测Rho在4组脊髓组织中的表达;生物信息学分析预测AQP4与Rho之间的相关性。结果 运动功能评分结果显示,术后12 h SCC组、Vector组和AQP4 RNAi组BBB评分均为0分,术后3 d AQP4 RNAi组BBB评分较Vector组高(P<0.05)。GeneMANIA结果显示,AQP4与Rho存在间接共表达关系。RT-PCR和免疫组织化学结果显示,术后12 h及术后1、3 d AQP4RNAi组脊髓组织中rho表达均低于Vector组(P<0.05);SCC组脊髓组织中rho表达均高于Sham组(P<0.05)。结论 大鼠SCC后脊髓组织中Rho表达上调,而干扰AQP4能使其Rho表达下调,减少神经细胞凋亡,有利于大鼠运动功能恢复。

甘草泻心汤对溃疡性结肠炎大鼠水通道蛋白3、4的影响

目的探讨甘草泻心汤对溃疡性结肠炎(UC)大鼠水通道蛋白3、4的影响。方法清洁级SD大鼠32只,抽取8只作为空白组,余下24只采用4%葡聚糖硫酸钠复制UC模型,模型成功后随机分为模型组,西药组(美沙拉嗪缓释颗粒),中药组(甘草泻心汤),每组8只,持续灌胃2周,每天1次。检测并记录体质量、疾病活动指数、结肠长度、结肠黏膜损伤指数、组织病理学改变和结肠组织学损伤指数,血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)、IL-6,结肠水通道蛋白3(AQP3)、水通道蛋白4(AQP4)蛋白和mRNA。结果与空白组相比,模型组和给药组血清TNF-α、IL-1β、IL-6浓度升高(P<0.05);模型组和给药组结肠AQP3、AQP4蛋白表达降低(P<0.05);模型组、给药组结肠AQP3 mRNA表达和模型组、西药组结肠AQP4 mRNA表达降低(P<0.05)。中药组结肠AQP4 mRNA表达与空白组相比无统计学差异(P>0.05)。与模型组相比,给药组血清TNF-α、IL-1β、IL-6浓度降低(P<0.05);中药组血清TNF-α、IL-1β、IL-6浓度比西药组更低(P<0.05);给药组结肠AQP3、AQP4蛋白和mRNA表达升高(P<0.05);中药组结肠AQP4蛋白表达比西药组更高(P<0.05);中药组结肠AQP3、AQP4 mRNA表达比西药组更高(P<0.05)。结论甘草泻心汤能有效改善UC大鼠体质量、疾病活动指数、结肠黏膜损伤指数、组织学损伤指数等情况,其可能通过改善结肠AQP3、AQP4蛋白和mRNA表达,调节血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平,推测这些可能是甘草泻心汤治疗UC的效应机制。

动脉瘤蛛网膜下腔出血后迟发性脑缺血患者血清水通道蛋白4、神经元特异性核蛋白水平及意义

目的探讨动脉瘤蛛网膜下腔出血(aSAH)后迟发性脑缺血患者血清水通道蛋白4(AQP4)和神经元特异性核蛋白(NeuN)水平变化及临床意义。方法选取100例aSAH患者为研究对象,根据aSAH后迟发性脑缺血发生情况将患者分为无迟发性脑缺血组(n=68)和迟发性脑缺血组(n=32)。血清中AQP4和NeuN水平采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测,采用Pearson法分析血清AQP4与NeuN的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清AQP4和NeuN水平对aSAH后迟发性脑缺血的预测价值。结果与无迟发性脑缺血组相比,迟发性脑缺血组WFNS分级为Ⅲ~Ⅳ级患者占比、Hunt-Hess分级为Ⅲ~Ⅳ级占比以及血清AQP4水平较高,血清NeuN水平较低,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson法分析显示,血清AQP4和NeuN呈负相关(P<0.05)。Logistic回归分析显示,Hunt-Hess分级、AQP4是aSAH后迟发性脑缺血的危险因素,NeuN是aSAH后迟发性脑缺血的保护因素(P<0.05)。ROC曲线显示,AQP4预测aSAH后迟发性脑缺血的曲线下面积(AUC)为0.862(95%CI:0.781~0.942),敏感度为76.50%,特异度为83.82%,截断值为1.19 ng/L;NeuN预测aSAH后迟发性脑缺血的AUC为0.771(95%CI:0.672~0.870),敏感度为78.10%,特异度为76.50%,截断值为0.47μg/mL;AQP4联合NeuN预测aSAH后迟发性脑缺血的AUC为0.879(95%CI:0.811~0.948),敏感度为90.60%,特异度为75.00%;联合诊断的AUC值高于NeuN单独诊断(Z=2.476,P=0.013)。结论aSAH后迟发性脑缺血患者血清NeuN水平下调,AQP4水平上调,AQP4联合NeuN可作为预测aSAH后迟发性脑缺血的评估指标。

水通道蛋白AQP4基因缺失加重NMDA诱导的小鼠脑损伤

目的:评价水通道蛋白AQP4在兴奋性氨基酸NMDA诱导脑损伤中起的作用。方法:在AQP4基因敲除小鼠,皮层注射NMDA 150 nmol诱导损伤。甲苯胺蓝染色评价损伤面积,Fluro-Jade B染色评价变性神经元,免疫组化法评价血脑屏障通透性增高。结果:与野生型小鼠比较,AQP4基因缺失加重NMDA诱导的皮层损伤,增加损伤区变性神经元密度,加重血脑屏障通透性的增高。结论:AQP4在NMDA诱导的脑损伤中可能起保护作用。