水通道蛋白0／1在年龄相关性白内障晶状体中的表达及其意义

背景年龄相关性白内障是常见的致盲眼病，其病因及发病机制尚未完全明确，了解其病因及发病机制对白内障的预防具有重要意义。近年来的研究证实，晶状体中的2个小分子蛋白AQP0和AQP1与白内障的发病关系密切。目的研究水通道蛋白AQP0和AQP1在正常晶状体和年龄相关性白内障晶状体的表达和分布差异，探讨其在年龄相关性白内障发病机制中的作用。方法采用前瞻性研究设计，纳入2011年3—9月在福建医科大学附属第一医院眼科就诊的拟行白内障小切口非超声乳化囊外摘出术年龄相关性白内障患者，术中收集的晶状体前囊膜和晶状体核组织17例，同时6例透明晶状体标本取自同期行角膜移植术的供体眼球，制备晶状体前囊膜和晶状体核组织切片。采用免疫组织化学染色法检测年龄相关性白内障标本中和正常晶状体标本中AQP0和AQP1的表达和分布；采用Westernblot法测定和分析晶状体中AQP0、AQP1蛋白的相对表达量，对2种标本中的检测结果进行比较。结果免疫组织化学检测结果显示，AQP1主要表达于LECs中，AQP0主要表达于晶状体皮质区及核区的纤维细胞中，年龄相关性白内障组AQP1和AQP0的表达量（平均吸光度，A值）分别为0．223±0．008和0．118±0．015，较正常组的0．246±0．007和0．149±0．007均明显减少，差异均有统计学意义（t=-4．508、-3．291，均P〈0．01）。Westernblot法检测显示，年龄相关性白内障组标本中AQP1和AQP0蛋白表达条带均较正常组减弱，年龄相关性白内障组标本中AQP1和AQP0蛋白的相对表达量（A值）分别为0．663±0．012和0．599±0．016，明显低于正常组的0．844±O．041和0．955±O．064，差异均有统计学意义（t=-7．492，P〈0．05；t=-9．570，P〈0．01）。结论AQP1及AQP0在正常晶状体的分布部位不同。年龄相关性白内障晶状体中AQP1及AQP0表达均下调，提示在年龄相关性白内障的发生和发展过程中，AQP0及AQP1的作用有所不同。

依达拉奉与甘露醇联合应用对大鼠脑梗死后脑组织内水通道蛋白-4表达的影响

【目的】探讨依达拉奉与甘露醇联合应用对大鼠脑梗死后脑组织内水通道蛋白-4（AQP-4）表达的影响。【方法】成年雄性Wistar大鼠150只，随机分为正常组、假手术组、手术未治疗组、甘露醇组、依达拉奉组、甘露醇与依达拉奉合用组（联合组）。采用Longa改良法制作大鼠脑梗死模型，各组分别于术后6h、d1、d2、d3、d7取损伤区脑组织，观察缺血脑组织形态变化及检测AQP-4 mRNA的表达并比较。【结果】正常组与假手术组脑组织无明显水肿，未治疗组大鼠缺血区的脑组织细胞及血管周围间隙扩大，部分细胞坏死，脑水肿于d3最明显，d7基本消退，甘露醇组未见脑水肿缓解、残留少许神经细胞；依达拉奉组和联合组脑组织水肿减轻、有较多的神经细胞保留。假手术组、依达拉奉组、联合组d1、d7组织中AQP-4 mRNA表达水平与对照组比较无显著性差异（P〉0．05），而假手术组6h、d2、d3均显著高于对照组（P〈0．05），依达拉奉组、联合组6h高于对照组（P〈0．05），d2、d3显著低于对照组（P〈0．05），依达拉奉组、联合组各时间点AQP-4mRNA表达水平比较均无显著性差异（P〉0．05）；未治疗组、甘露醇组随时间AQP-4 mRNA表达逐渐增多，d3达到高峰，之后下降，但在d7时还均高于对照组（P〈0．05）。【结论】AQP-4／TIRNA与脑水肿的过程密切相关，脑梗死后AQP-4mRNA的表达增加，依达拉奉联合甘露醇治疗能够下调AQP-4 mRNA的表达，缓解脑梗死后的脑水肿。

单侧输尿管梗阻对肾脏水通道蛋白表达的影响及临床意义

目的 探讨单侧输尿管梗阻解除前后肾脏水通道蛋白（AQP）变化与尿液浓缩功能障碍之间的联系.方法 56只体重180～200 g成年雄性SD大鼠随机分为实验组（n=48只）和对照组（n=8只）.实验组大鼠通过手术建立单侧输尿管梗阻模型并于相应时间点解除梗阻,对照组接受假手术.于相应时间点检测尿液渗透压改变,处死动物取出肾脏后通过Western blot检测梗阻前后AQP1、AQP2蛋白表达的变化,免疫组化观察蛋白表达部位.结果 梗阻后1、2 d及解除梗阻后1d,患侧AQP1、AQP2的表达随时间延长进行性下降,解除梗阻后7d其表达有所回升,AQP2于梗阻解除后14 d内恢复正常水平,而AQP1则在梗阻解除后21 d内达到正常水平.同时AQPs的变化趋势与患侧尿液渗透压改变趋势相同.梗阻解除前AQP2分布于集合管主细胞的胞浆及管周膜,解除梗阻后其表达更多的集中于管周膜.结论 AQP表达下降是造成梗阻性肾积水中尿液浓缩功能障碍的重要原因,同时梗阻解除后AQP2接受ADH的调节.

健骨冲剂对大鼠膝骨性关节炎模型关节软骨中AQP3表达的影响及意义

目的探讨健骨冲剂对大鼠膝骨性关节炎(OA)关节软骨中水通道蛋白3(AQP3)表达的影响及意义。方法 SD大鼠随机分为假手术组、模型组、健骨冲剂治疗组,其中治疗组分为健骨冲剂高剂量、中剂量和低剂量3亚组,每组12只。利用膝关节注射4%木瓜蛋白酶与0.03 mol/L L-半胱氨酸混合液的方法制作骨关节炎模型。假手术组和模型组每日正常喂养,治疗组(高、中、低剂量组)造模完成后第2天开始,分别给予不同剂量健骨冲剂灌胃给药,2次/d,连续4周。治疗完统一处死实验大鼠,取膝关节软骨,采用大体光镜和组织学病理切片观察关节软骨破坏情况;RealtimePCR法和Western blot法检测各组大鼠右膝关节软骨内AQP3的表达变化。结果健骨冲剂治疗组的关节软骨破坏程度明显轻于模型组(P<0.05);模型组AQP3的mRNA和蛋白表达水平明显高于假手术组(P<0.05);OA大鼠用健骨冲剂治疗4周后,关节软骨中AQP3的mRNA和蛋白表达水平显著下降,健骨冲剂各亚组与模型组比较差异均有统计学意义(P<0.05),其中高剂量组下降最为明显。结论健骨冲剂能降低大鼠膝OA关节软骨中AQP3的表达,从而缓解关节肿胀,可能具有关节软骨保护作用。