选择性磷酸二酯酶4抑制剂对气道黏液高分泌模型大鼠肺组织水通道蛋白质5表达的影响

目的探讨选择性磷酸二酯酶4（PDFA）抑制剂对气道黏液高分泌模型大鼠肺组织中水通道蛋白质5（AQP5）表达的影响。方法40只清洁级健康雄性sD大鼠完全随机化法随机分为4组，每组10只：正常对照组（给予生理盐水雾化吸人12d）、药物对照组（给予YM976灌胃12d）、模型组（给予丙烯醛雾化吸人12d）、药物干预组（给予丙烯醛雾化吸人同时给予YM976灌胃12d），大鼠右肺中叶固定包埋，行HE染色观察肺组织小气道组织学变化，阿辛蓝染色观察杯状细胞黏蛋白分泌情况，AQP5免疫组化染色观察选择性PDFA抑制剂对AQP5表达的影响。大鼠右肺下叶提取肺组织总RNA和蛋白，以反转录-PCR检测AQP5的mRNA表达水平的变化，以Western印迹法检测AQP5蛋白质水平的变化。结果与模型组相比，药物干预组中的气道黏液腺增生和黏液过度分泌明显减轻，阿辛蓝相对阳染面积明显减少（10．23％±0．94％比14．74％±1．06％，P〈0．05）。同时，药物干预组的肺组织AQP5的mRNA和蛋白相对表达量分别为1．26±0．19和0．56±0．13，均明显高于模型组的0．96±0.17和0．43±0．15（均P〈0．05）。结论PDFA抑制剂可减轻气道黏液高分泌大鼠肺组织的病理损伤，增强AQP5的表达。

水通道蛋白5在过敏性鼻炎黏膜过度表达及其对腺体分泌的影响

目的探讨水通道蛋白1(aquaporins 1,AQP1)和水通道蛋白5(AQP5)在过敏性鼻炎鼻黏膜的表达。方法采集15例鼻内镜手术患者的鼻黏膜组织,其中9例过敏性鼻炎和6例正常对照。小鼠的鼻黏膜组织来源于过敏性鼻炎模型小鼠(10例)和正常对照小鼠(10例),所有鼻黏膜组织一部分经石蜡固定后用于HE、PAS染色及免疫组化分析,一部分患者鼻黏膜组织提取RNA后用于RT-PCR半定量分析。结果免疫组化染色显示AQP1主要表达在鼻黏膜的血管内皮细胞和结缔组织;AQP5主要表达在鼻黏膜的上皮细胞、基底细胞和腺细胞;且AQP5在过敏性鼻炎(患者42.7±13.2,小鼠14.1±5.3)鼻黏膜的浆液腺表达显著高于对照组(9.3±3.6,3.6±2.5,P<0.01)。RT-PCR结果显示,与正常对照组(0.098±0.03)相比,AQP5的mRNA水平在过敏性鼻炎患者(0.236±0.08)的鼻黏膜表达增加,差异具有统计学意义(t=3.203,P<0.01);而AQP1的mRNA水平在过敏性鼻炎组(0.048±0.032)和正常对照组(0.051±0.024)未见显著差异(t=1.584,P>0.05)。结论 AQP1和AQP 5表达在鼻黏膜不同位置;AQP5在过敏性鼻炎表达增加,与过敏性鼻炎鼻黏膜的浆液腺分泌密切相关。

稳定沉默水通道蛋白5基因对异位子宫内膜腺上皮细胞增殖及迁移的影响

目的：探讨水通道蛋白（AQP）5基因对异位子宫内膜腺上皮细胞增殖及迁移的影响。方法：构建可靶向沉默AQP5基因的质粒，在293 T细胞中包装形成病毒颗粒后，感染原代培养的异位子宫内膜腺上皮细胞，分别通过逆转录PCR及蛋白质印迹法鉴定异位子宫内膜腺上皮细胞中AQP5 mRNA和蛋白表达。 MTT法测定细胞增殖；Transwell技术检测细胞的体外迁移能力；蛋白质印迹法检测丝氨酸／苏氨酸蛋白酶（ AKT ）活化情况。构建裸鼠腹腔内子宫内膜异位症体内模型，考察阴性对照组和AQP5沉默组子宫内膜腺上皮细胞在裸鼠腹腔内瘤体生长情况及腹膜转移情况。结果：体外实验结果显示，AQP5沉默后异位子宫内膜腺上皮细胞的增殖能力在第7天时明显抑制（ P＜0．05）；AQP5沉默组异位子宫内膜腺上皮细胞磷酸化（ p－AKT）表达减少，而AKT表达无改变，p－AKT／AKT减少（ P＜0．05）；AQP5沉默组比阴性对照组迁移细胞数减少（ P＜0．05）。体内实验结果显示，与阴性对照组比较，AQP5沉默组瘤体结节数相对较少，体积较小，其中腹膜瘤体结节数少于阴性对照组（ P＜0．05）。结论：AQP5基因沉默可抑制异位子宫内膜腺上皮细胞的增殖及迁移能力，其机制可能与AKT活化有关。

水通道蛋白-5与多药耐药因子在结肠癌组织中的表达及其关系

目的检测不同分化程度结肠癌组织中水通道蛋白(AQP)-5与耐药因子的表达及相互关系。方法对45例结肠癌组织、36例癌旁组织采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)、蛋白免疫印迹法(Western blot)、免疫组织化学染色检测AQP-5及耐药因子P-糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽转移酶(GST-π)、拓扑异构酶(TopoⅡ)、胸苷酸的限速酶(TS)的表达情况。结果免疫组织化学染色结果表明,AQP-5主要分布于细胞膜和细胞质;RT-PCR和Western blot检测结果显示,结肠癌组织中AQP-5的表达显著高于癌旁对照组(P<0.05),且表达量随分化程度降低而升高(P<0.05)。免疫组织化学染色发现,P-gp主要分布于细胞膜和细胞质,GST-π主要分布于细胞核和细胞质,TopoⅡ主要分布于细胞核,TS主要分布于细胞质。RT-PCR和Western blot检测结果显示,结肠癌组织中耐药因子表达量显著高于癌旁组织(P<0.05),其中P-gp、GST-π、TopoⅡ随着分化程度降低表达增加,TS在不同分化程度结肠癌组织中表达变化不明显(P>0.05)。AQP-5与P-gp、GST-π、TopoⅡ的表达呈正相关(P<0.05),与TS表达无相关性(P>0.05)。结论 AQP-5与耐药因子P-gp、GST-π、TopoⅡ、TS蛋白在结肠癌组织中高度表达,可能促进了结肠癌的转移和进展。

水通道蛋白5过表达与宫颈癌发生及临床病理特征的相关性

目的:研究水通道蛋白5(aquaporin 5,AQP5)在宫颈癌中的表达及临床病理意义,探讨AQP5在宫颈组织恶性转化过程中的可能作用。方法:采用蛋白质免疫印迹和免疫组织化学技术检测30例正常宫颈、28例宫颈上皮内瘤样变(CIN)和56例宫颈鳞状细胞癌组织中AQP5的表达,并对其表达的临床病理参数进行统计学分析。结果:AQP5在正常宫颈、CIN和宫颈癌组织中相对蛋白表达量逐渐升高,3组间差异有统计学意义(F=38.516,P=0.000);其表达的平均阳性细胞百分比分别为15.12%、23.18%和36.08%,3组间差异有统计学意义(χ2=22.404,P=0.000);AQP5过表达与宫颈癌淋巴结转移相关(r=0.351,P=0.008),与患者年龄、肿瘤大小、组织学分级和国际妇产科联盟(FIGO)分期无关。结论:增强的AQP5表达与正常宫颈组织恶性转化和宫颈癌发生有关,有望为宫颈癌提供一种新的治疗靶点和预后标记。

溺死大鼠肺组织水通道蛋白5mRNA的表达

目的观察溺死大鼠肺组织中水通道蛋白5 mRNA(AQP-5 mRNA)的变化。方法建立大鼠溺死模型,提取实验组及对照组肺组织的总RNA,反转录合成cDNA第一条链,以cDNA作为模板,通过特异性上下游引物实时荧光定量聚合酶链反应(Real Time PCR)检测cDNA的拷贝数,选取管家基因核糖体蛋白L32为参比基因,对扩增结果进行相对定量分析。结果溺死大鼠肺组织中AQP-5 mRNA表达量较对照组显著下降且差异具有统计学意义。结论AQP-5基因在大鼠淡水溺死时表达下调有阳性意义,实时荧光定量检测溺死肺组织中AQP-5 mRNA敏感而准确,可望用于法医学鉴定生前溺死和死后抛尸入水。

18β-甘草次酸对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜中水通道蛋白5及黏蛋白5AC的影响

目的观察18β-甘草次酸(18β-glycyrrhetinic acid,18β-GA)对变应性鼻炎(AR)鼻黏膜中水通道蛋白5(aquaporin 5,AQP5)与黏蛋白5AC(mucin 5AC,MUC5AC)表达的影响并探讨其意义。方法将30只大鼠随机分为正常对照组、AR模型组、18β-GA组,每组10只,采用OVA致敏法建立大鼠AR模型,18β-GA组大鼠灌胃给予18β-GA(23.4 mg/kg),模型组灌胃给予同体积的生理盐水;给药期间每周末次给药后,对大鼠进行行为学评分测定;随后麻醉大鼠取鼻黏膜组织光镜下观察病理形态学变化;免疫组织化学法观察AQP5及MUC5AC的蛋白表达情况;同时测定小鼠血清中白细胞介素-4(IL-4)、特异性IgE(sIgE)、干扰素-γ(IFN-γ)的含量及鼻黏膜组织中AQP5及MUC5AC的表达情况。结果大鼠AR模型建立成功,与AR模型组比较,18β-GA组大鼠的行为学评分明显降低(4.63±1.02 vs 8.74±1.88,t=7.567,P<0.01);已损伤的黏膜上皮出现好转,腺体和扩张的腺管趋于正常,肥大的杯状细胞明显减少,黏膜固有层浸润的炎性细胞减少。与AR模型组比较,18β-GA组大鼠的血清IL-4、sIgE的含量显著降低[(5.63±1.08)ng/ml vs(6.98±1.24)ng/ml,(0.772±0.185)ng/ml vs(1.886±0.394)ng/ml,t=2.608、8.096,P<0.01],IFN-γ含量显著升高[(65.42±8.02)pg/ml vs(35.14±4.83)pg/ml,t=10.237,P<0.01];AQP5蛋白表达量升高(0.84±0.13 vs 0.57±0.03,t=9.234,P<0.01),而MUC5AC蛋白表达量显著降低(1.46±0.34 vs 1.82±0.31,t=6.318,P<0.01)。结论18β-GA可能通过改变AR小鼠体内的炎症因子的含量,同时升高鼻黏膜组织中AQP5的表达及降低MUC5AC表达的方式来达到治疗AR的效果。

机械通气相关性肺损伤大鼠肺组织水通道蛋白5表达的变化

目的评价机械通气相关性肺损伤大鼠肺组织水通道蛋白5（AQP5）表达的变化。方法健康雄性SPF级SD大鼠70只，周龄7周，体重200—250g，随机分为7组（n=10），对照组（A组）仅切开气管保留自主呼吸；不同通气时间小潮气量组（B1组和B2组）Vτ 7ml／kg，分别通气2h或4h；不同通气时间中潮气量组（C1组和C2组）VT20ml／kg，分别通气2h或4h；不同通气时间大潮气量组（D1组和D2组）Vτ 40ml／kg，分别通气2h或4h。A组在气管切开即刻，其余各组在机械通气结束时处死大鼠，开胸取肺组织行病理损伤评分，测定AQP5蛋白及其mRNA表达，计算肺组织湿／干重比值（W／D比值），收集肺泡灌洗液，计数中性粒细胞（PMN）。结果与A组比较，C1组、C2组、D1组、D2组AQP5蛋白及其mRNA表达下调，W／D比值、PMN计数和病理损伤评分升高（P〈0．05）。与B1组比较，C1组和D1组AQP5蛋白及其mRNA表达下调，W／D比值、PMN计数和病理损伤评分升高（P〈0．05）。与B2组比较，C2组和D2组AQP5蛋白及其mRNA表达下调，W／D比值、PMN计数和病理损伤评分升高（P〈0．05）。与C1组比较，D1组AQP5蛋白及其mRNA表达下调，W／D比值、PMN计数和病理损伤评分升高（P〈0．05）。与C2组比较，D2组AQP5蛋白及其mRNA表达下调，W／D比值、PMN计数和病理损伤评分升高（P〈0．05）。结论AQP5表达下调参与了机械通气诱发大鼠肺水肿的发生。

不同通气方式对新生儿血清水通道蛋白5和肺表面活性蛋白A水平的影响

目的探讨压力调节容量控制通气(PRVC)和同步间歇指令通气(SIMV)治疗呼吸窘迫综合征患儿不同时间点吸气峰压(PIP)、血清肺表面活性蛋白A(SP-A)及水通道蛋白5(AQP-5)水平的变化。方法选择2013年6月至2014年5月本院收治的需机械通气治疗的新生儿呼吸窘迫综合征患儿,随机分为PRVC组(应用PRVC通气)和SIMV组(应用SIMV通气),比较两组患儿机械通气1、12、24、48、72 h时的PIP值;观察两组在通气前、通气24、72 h时血清SP-A、AQP-5水平的变化。结果 PRVC组(32例)和SIMV组(32例)性别、胎龄、出生体重、应用肺表面活性物质(PS)例数、胸部X线Ⅲ级及以上例数、动脉氧分压/吸入氧浓度(PaO_2/FiO_2,P/F)比值、Downes评分、发生气胸、颅内出血(IVH)、支气管肺发育不良(BPD)和呼吸机相关性肺炎(VAP)的比例、机械通气时间、氧疗时间、住院时间等,差异均无统计学意义(P>0.05)。PRVC组PIP值在机械通气1、12、24、48、72 h时(16.1±1.6,15.5±1.2,15.8±1.4,13.9±0.8,11.6±0.8)cmH_20均低于SIMV组(21.1±1.7,20.5±1.2,19.9±1.7,17.8±1.5,13.4±0.6)cmH_2O,差异有统计学意义(P<0.05);两组所有时间点PIP值整体比较,差异有统计学意义(F=173.065,P<0.05)。通气前和通气后24 h时,PRVC组新生儿血清SP-A和AQP-5水平与SIMV组比较,差异均无统计学意义(P>0.05);通气后72 h,PRVC组新生儿血清SP-A和AQP-5水平[(614.7±49.6)ng/L,(14.4±5.8)μg/L]均低于SIMV组[(875.6±74.2)ng/L,(18.6±6.3)μg/L],差异有统计学意义(P<0.05);两组内各时间点血清SP-A和AQP-5水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05),其中机械通气前最低,通气后72 h最高。结论与SIMV相比,新生儿PRVC模式下PIP值有所下降,血清SP-A和AQP-5水平较低,临床意义有待进一步研究。

不同输液方案对兔肺组织水通道蛋白5表达的影响

目的观察不同输液方案对兔肺组织水通道蛋白5(AQP5)表达的影响。方法清洁级成年雄性SD家兔54只,随机分为3组(n=18):限制性输液组(A组,输液速度5 ml/h),常规输液组(B组,输液速度10 ml/h),急性高容量血液稀释组(C组,输液速度20 ml/h)。各组动物分别于输液前(T0)、输液后30 min(T1)、输液后60 min(T2)、输液后120 min(T3)记录心率(HR)、平均动脉压(MAP)、中心静脉压(CVP)等血流动力学指标。将A组在T1、T2、T3时刻再分为3组(n=6):A0.5组(T1)、A1.0组(T2)、A2.0组(T3),B、C组再分组时刻同A组。然后,分别于T1、T2、T3时刻处死动物,取相同部位右肺组织制作HE切片,光镜观察肺组织结构变化;同时取肺组织标本于透射电镜下观察肺组织超微结构变化。免疫组化染色检测AQP5的表达,图像分析测定AQP5染色的平均灰度和阳性单位。结果光镜下各组实验动物肺组织无病理学改变;透射电镜观察各组实验动物肺组织超微结构无变化。免疫组化和图像分析结果显示,肺泡Ⅰ型上皮细胞有大量AQP5阳性染色;不同输液方式对AQP5平均灰度和阳性单位的影响差异无统计学意义(P﹥0.05)。结论不同输液方式对肺组织AQP5的表达无显著影响。

人AQP5真核表达质粒的构建及其在胃癌细胞中的表达

目的构建人pcDNA3.1-AQP5/myc-His真核表达质粒,观察水通道蛋白5(AQP5)基因在胃癌AGS细胞中的稳定表达。方法采用基因重组技术将人AQP5cDNA插入真核表达载体pcDNA3.1/myc-His,构建人pcDNA3.1-AQP5/myc-His真核表达质粒。脂质体介导空载体pcDNA3.1/myc-His和表达质粒pcDNA3.1-AQP5/myc-His分别转染人胃癌AGS细胞株,G418筛选,挑取阳性克隆,扩大培养,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western Blot)分别检测AQP5mRNA和蛋白表达。结果双酶切和基因测序结果均证实人pcDNA3.1-AQP5/myc-His真核表达质粒构建成功。AQP5转染组与空白对照组、空载体组比较,AQP5mRNA表达显著增加(P<0.05),AQP5蛋白表达显著上调(P<0.05)。结论成功构建人AQP5真核表达质粒并获得稳定表达AQP5基因的胃癌AGS细胞系,为进一步研究AQP5蛋白对胃癌恶性表型的影响奠定实验基础。

右美托咪定对大鼠肺缺血再灌注时水通道蛋白1和水通道蛋白5表达的影响：离体实验

目的 评价右美托咪定对大鼠肺缺血再灌注时水通道蛋白1（AQPl）和水通道蛋白5（AQP5）表达的影响.方法 SPF级健康雄性SD大鼠,3-4月龄,体重250- 320 g,制备离体肺灌注模型45个,采用随机数字表法分为3组（n=15）：假手术组（S组）、肺缺血再灌注组（I/R组）和右美托咪定组（D组）.S组持续灌流150 min;I/R组灌流15 min后,停止通气和灌流60 min,然后继续通气和灌流75 min,制备大鼠肺缺血再灌注损伤模型;D组用含10 nmol/L右美托咪定的K-H液灌流15min后,停止通气和灌流60 min,然后继续通气和灌流含10 nmol/L右美托咪定的K-H液75 min.分别于灌流10 min、恢复灌流15、45和75 min时,记录肺顺应性、气道阻力、灌注流量和肺动脉氧分压（PaO2）.于恢复灌流75 min时取肺组织,测定湿重/干重（W/D）比值,观察肺组织病理学和超微结构的改变.分别采用Western blot法和RT-PCR法测定肺组织AQP1和AQP5及其mRNA的表达水平.结果 与S组比较,I/R组和D组恢复灌流期间气道阻力升高,肺顺应性、灌注流量和PaO2均降低,肺组织W/D比值升高,I/R组肺组织AQP1和AQP5及其mRNA的表达下调,D组肺组织AQP1和AQP5及其mRNA的表达上调（P〈0.05）;与I/R组比较,D组恢复灌流期间气道阻力降低,肺顺应性、灌注流量和PaO2均升高,肺组织W/D比值降低,AQP1和AQP5及其mRNA的表达上调（P〈0.05）,肺组织病理学损伤减轻.结论 右美托咪定减轻大鼠肺缺血再灌注损伤的机制可能与上调AQP1和AQP5的表达有关.

Wnt 5a在支气管肺发育不良模型中的作用机制探讨

目的探究Wnt 5a在支气管肺发育不良(BPD)模型中的作用机制。方法(1)细胞水平:将A549细胞分为对照组(CO_(2)体积分数5%)和BPD组(O_(2)体积分数85%)。在高氧48 h后采用Western blot方法检测肺表面活性物质相关蛋白质C(SPC)、水通道蛋白5(AQP5)和Wnt 5a蛋白水平,细胞增殖检测试剂盒检测细胞增殖能力变化。(2)动物水平:将新生大鼠随机分为对照组(O_(2)体积分数21%)和BPD组(O_(2)体积分数85%)。高氧7 d后取肺组织,采用HE染色评估BPD动物模型病理变化;采用Western blot检测肺组织中Wnt 5a、SPC及AQP5变化。(3)细胞水平:进一步在BPD细胞模型中添加Wnt 5a抑制剂,验证Wnt 5a对SPC、AQP5蛋白及细胞增殖能力的影响。结果与对照组比较,BPD细胞模型中SPC和AQP5表达量降低,Wnt 5a表达量升高,细胞增殖能力降低。添加Wnt 5a抑制剂后SPC、AQP5蛋白表达升高,A549细胞增殖能力恢复。BPD动物模型中出现明显的肺组织肺泡数量减少、肺泡面积增大等病理表现;SPC、AQP5、Wnt 5a蛋白表达变化同BPD细胞模型趋势一致。结论Wnt 5a在BPD的发生发展中被异常激活,深入探索Wnt 5a在BPD中的作用机制可能会为BPD的防治提供新思路。

慢性肾衰竭肺组织水通道1、5表达降低诱导肺损伤形成

目的 探讨水通道蛋白1、5在慢性肾功能衰竭小鼠肺组织中表达水平的变化及影响.方法 选用6～8周龄,雄性BALB/c小鼠,将小鼠分为正常组（N）、假手术组（S）和慢性肾功能衰竭模型组（CRF）.CRF模型小鼠通过对其右肾2/3肾皮质透热毁损,并在1周后将左肾完全切除的方法建立.假手术组小鼠只进行麻醉和手术切口,肾脏不做处理.正常组的小鼠不做任何处理.模型建立后10、40和70d三个时间点每组各处死5只小鼠,并留取小鼠的肾脏、血清和肺脏标本.检测三组小鼠的肾组织病理、血清肌酐和尿素氮、肺组织干湿比及肺组织病理;用Western Blotting及RT-PCR方法测定在造模后10、40和70d三组小鼠的肺组织内水通道蛋白1（AQP1）、水通道蛋白5（AQP5）及其mRNA的表达.结果 CRF模型组在造模后10d肾组织病理结果显示部分肾小囊扩张,球囊粘连,肾小管上皮细胞颗粒样变性.造模后40、70d表现为部分肾小球纤维化和增生硬化,部分肾小管萎缩.在三个时间点CRF模型组血肌酐和尿素氮与正常组和假手术组相比均显著升高（P＜0.05）,肺组织干湿比明显下降（P＜0.05）,提示肺水含量增加,肺组织病理学检查提示肺泡及肺间质水肿.Western Blotting检测肺组织AQP1、AQP5的表达,CRF模型组与正常组相比,在造模后10d肺组织中AQP1的表达下降了48％,40d AQP1表达下降了15％,70d AQP1表达下降了37％（P＜0.05）.AQP5在造模后10d肺组织中表达下降了26％,40d表达下降了67％（P＜0.05）,造模后70d表达下降了25％（P＜0.05）.在造模后10、40和70d RT-PCR检测小鼠的肺组织AQP1、5 mRNA的表达水平结果显示,慢性肾功能衰竭模型组与正常组和假手术组相比,AQP-1、5 mRNA表达明显下降（P＜0.05）.在造模后40、70d,AQP-1、5 mRNA表达水平在假手术组的表达量与正常组比较均无显著性差异.结论 CRF模型小鼠肺组织水含量明显增加,而其AQP1和AQP5及其mRNA的表达较正常组和假手术组明显下降,水通道蛋白1、5的表达变化可能诱导了慢性肾功能衰竭小鼠以肺水肿为特点的肺损伤。

右美托咪定对机械通气相关性肺损伤大鼠肺组织AQP5表达的影响

目的评价右美托咪定对机械通气相关性肺损伤大鼠肺组织水通道蛋白5（AQP5）表达的影响。方法清洁级雄性sD大鼠100只，体重270-320g，采用随机数字表法分为5组（n=20）：对照组（C组）、机械通气组（V组）和不同剂量右美托咪定组（DEX1-3组）。机械通气参数设置：潮气量40ml／kg，通气频率50次／min，吸呼比为1：1，FiO2 21％。DEX1-3组机械通气前20min分别静脉输注右美托咪定0．5、1．0、2．0μg／kg，机械通气期间分别以0．5、1．0、2．0μg·kg-1·h-1的速率静脉输注4h。于气管插管前即刻、机械通气1、2和4h时采集股动脉血样，进行动脉血气分析，记录PaO2。机械通气4h时处死大鼠，取肺组织，确定肺通透指数（LPI）和肺湿重，干重（W／D）比值，光镜下观察肺组织病理学结果；采用Western blot法检测p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）、磷酸化p38MAPK（p-p38MAPK）和AQP5的表达水平，计算p—p38MAPK/p38MAPK比值；采用RT-PCR法测定AQP5mRNA的表达水平。结果与C组比较，V组和DEX1组PaO2降低，肺组织W／D比值和LPI升高，p-p38MAPK表达上调，p—p38MAPK／p38MAPK比值升高，AQP5和AQP5tuRNA表达下调（P〈0．05），DEX2,3组上述指标差异无统计学意义（P〉0．05）；与V组比较，DEX2,3组PaO2升高，肺组织W／D比值和LPI降低，肺组织p-p38MAPK表达下调，p-p38MAPK／p38MAPK比值降低，AQP5和AQP5mRNA表达上调（P〈0．05），DEX1组上述指标差异无统计学意义（P〉0．05）。DEX2,3组肺组织病理学损伤较V组减轻。结论右美托咪定减轻大鼠械通气相关性肺损伤的机制可能与抑制肺组织p38MAPK磷酸化，上调AQP5表达有关。

乌司他丁预先给药对体外循环大鼠急性肺损伤时AQP1和AQP5表达的影响

目的评价乌司他丁预先给药对体外循环(CPB)大鼠急性肺损伤时水通道蛋白1(AQP1)和AQP5表达的影响。方法清洁级健康成年雄性SD大鼠48只,体重200~250g,采用随机数字表法分为3组(n=16):假手术组(Sham组)、体外循环组(CPB组)和UTI组(UTI组),每组16只。UTI组大鼠于CPB前10min静脉注射乌司他丁溶液20万U/kg;CPB组和UTI组建立CPB模型,Sham组和CPB组大鼠分别于动脉和静脉穿刺前10min或CPB前10min静脉注射等容量生理盐水。CPB结束1h时处死大鼠取肺,称重,计算湿重/干重(W/D)比值,光镜下观察肺组织形态结构并计算肺泡损伤率(IAR),电镜下观察肺组织超微结构。采用免疫组化法检测AQP1和AQP5的表达水平。采用Westernblot法和RT-PCR法分别测定AQP1和AQP5及其mRNA的表达水平。结果与Sham组比较,CPB组和UTI组肺组织W/D比值和IAR升高,AQP1和AQP5阳性细胞率降低,AQP1和AQP5及其mRNA表达下调(P<0.05);与CPB组比较,UTI组肺组织W/D比值和IAR降低,AQP1和AQP5阳性细胞率升高,AQP1和AQP5及其mRNA表达上调(P<0.05)。UTI组形态学和超微结构损伤较CPB组减轻。结论乌司他丁预先给药减轻CPB大鼠急性肺损伤的机制与其上调AQP1和AQP5的表达有关。