OCT及OCTA评估水通道蛋白-4抗体阳性NMOSD视网膜结构和血管密度及其与临床特征的关系

目的应用光学相干断层扫描(optical coherence tomography,OCT)及血管成像(optical coherence tomography angiography,OCTA)评价视神经脊髓炎谱系疾病(neuromyelitis optica spectrum disorders,NMOSD)视网膜结构和血管密度改变及其与临床疾病特征的相关性。方法共纳入水通道蛋白-4抗体阳性的NMOSD患者42例(84只眼),健康对照(对照组)45名(90只眼)。根据视神经炎(optic neuritis,ON)病史,NMOSD组进一步分为两组:有ON病史的NMOSD+ON组和无ON病史的NMOSD-ON组。通过OCT和OCTA测量神经节细胞复合体(ganglion cell complex,GCC)厚度、视网膜神经纤维层(retinal nerve fiber layer,RNFL)厚度、黄斑区浅层毛细血管丛(superficial capillary plexus,SCP)、深层毛细血管丛(deep capillary plexus,DCP)和视盘区血管的血管密度。记录患者NMOSD病程和发作次数、最佳矫正视力(best corrected visual acuity,BCVA)和扩展残疾状态量表(expanded disability status scale,EDSS)评分,分析上述指标与OCT和OCTA观察指标之间的相关性。结果黄斑和视盘的结构改变:与对照组比较,NMOSD+ON组总体及颞区(TEM)、上区(SUP)、鼻区(NAS)、下区(INF)各区的RNFL厚度均明显降低(P<0.05);NMOSD-ON组总体和SUP区的RNFL厚度明显降低(P<0.05)。与NMOSD-ON组比较,NMOSD+ON组总体及TEM、SUP、NAS、INF各区的RNFL厚度均明显降低(P<0.05)。与对照组比较,NMOSD+ON组总体、SUP及INF区的GCC厚度明显降低(P<0.05);NMOSD-ON组总体及SUP区的GCC厚度明显降低(P<0.05)。与NMOSD-ON组比较,NMOSD+ON组总体GCC厚度及SUP、INF区的GCC厚度明显降低(P<0.05)。黄斑区血管密度:与对照组比较,NMOSD+ON组SCP总体、中心凹、中心凹旁及中心凹周围TEM、SUP、NAS、INF各区血管密度均明显降低(P<0.05)。与对照组比较,NMOSD-ON组DCP总体血管密度、中心凹旁及中心凹周围TEM、SUP、NAS、INF各区血管密度均明显降低(P<0.05)。与NMOSD-ON组比较,NMOSD+ON组SCP总体血管密度以及中心凹旁TEM区、SUP区、INF区和中心凹周围TEM、SUP、NAS、INF各区血管密度均明显降低(P<0.05),DCP中心凹、中心凹旁NAS区、中心凹周围TEM区血管密度明显升高(P<0.05)。与对照组比较,NMOSD+ON组视盘区总体血管密度,视盘内血管密度以及和视盘旁鼻上区(NS)、鼻下区(NI)、下鼻区(IN)、下颞区(IT)、颞下区(TI)、颞上区(TS)、上颞区(ST)、上鼻区(SN)各区血管密度均明显降低(P<0.05)。与NMOSD-ON组比较,NMOSD+ON组除视盘内血管密度差异无统计意义(P=0.268)外,视盘区总体血管密度和视盘旁各区血管密度均明显降低(P<0.05)。NMOSD组病程与GCC厚度、RNFL厚度、SCP血管密度、放射状周围毛细血管(RPC)血管密度均呈负相关(分别r=-0.436,P<0.001;r=-0.337,P=0.002;r=-0.325,P=0.003;r=-0.239,P=0.028),发病次数与RNFL厚度、RPC血管密度呈负相关(分别r=-0.360,P=0.001;r=-0.315,P=0.004),BCVA与GCC厚度呈负相关(r=-0.303,P=0.005)。结论NMOSD患者发生和不发生ON的眼,均存在视网膜结构和视网膜血管的损伤,且NMOSD病程越长、发病次数越多,损伤越明显。与没有ON的眼相比,ON患眼SCP血管密度减低。

铁离子、水通道蛋白-4在脑室出血后脑积水形成中的交互作用及预测预后的价值

目的分析铁离子(Fe)、水通道蛋白-4(AQP-4)在脑室出血(IVH)后脑积水形成中的交互作用及预测预后的价值。方法选取2021年1月至2023年1月洛阳市中心医院收治的52例IVH后发生脑积水的患者作为研究组,另选取同期52例IVH后未发生脑积水的患者作为对照组。比较两组患者以及研究组不同病情、不同预后患者的血清Fe、AQP-4水平,采用Pearson法分析Fe、AQP-4与格拉斯哥昏迷量表(GCS)评分、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分的相关性,通过交互作用分析Fe、AQP-4对脑积水形成的影响,并采用受试者工作特性曲线(ROC)分析Fe、AQP-4对预后的预测价值。结果研究组患者的血清Fe水平为(10.36±2.74)μmol/L,明显低于对照组的(14.12±3.58)μmol/L,AQP-4水平为(179.62±24.48)μg/L,明显高于对照组的(141.59±18.62)μg/L,差异均有统计学意义(P<0.05);研究组不同程度意识障碍患者血清Fe水平比较,重度<中度<轻度,AQP-4水平比较,重度>中度>轻度,差异均有统计学意义(P<0.05);研究组不同程度神经功能缺损患者血清Fe水平比较,重度<中度<轻度,AQP-4水平比较,重度>中度>轻度,差异均有统计学意义(P<0.05);Pearson法分析结果显示,研究组患者的血清Fe水平与GCS评分、NIHSS评分呈负相关(r=-0.623、-0.661,P<0.05),AQP-4水平与之呈正相关(r=0.658、0.674,P<0.05);交互作用分析结果显示,低Fe水平与高AQP-4水平在IVH后脑积水形成中呈次相乘模型的正向交互作用(P<0.05);预后不良患者的术前血清Fe水平为(8.14±1.84)μmol/L,明显低于预后良好患者的(11.75±2.39)μmol/L,AQP-4水平为(197.65±23.24)μg/L,明显高于预后良好患者的(168.35±19.17)μg/L,差异均有统计学意义(P<0.05);血清Fe、AQP-4单独及联合预测IVH后脑积水患者预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.805、0.814、0.928。结论低Fe水平、高AQP-4水平在IVH后脑积水形成中呈正向交互作用,两指标水平与脑积水病情严重程度具有一定相关性,联合检测对预后具有一定预测价值,可为临床工作提供可靠参考。

血清及尿β_(2)微球蛋白、视黄醇结合蛋白、水通道蛋白-2与肾盂输尿管连接部梗阻致小儿肾积水严重程度的关系研究

目的探讨血清及尿β_(2)微球蛋白(β_(2)-MG)、视黄醇结合蛋白(RBP)、水通道蛋白-2(AQP2)与肾盂输尿管连接部梗阻(UPJO)致小儿肾积水严重程度的关系。方法选取南宁市第六人民医院泌尿外科接受肾盂输尿管梗阻手术治疗的60例肾积水患儿为肾积水组,根据肾积水严重程度分为轻度组(n=13)、中度组(n=22)和重度组(n=25),另外选取同期该院接受体检的60例健康儿童为对照组。比较对照组和肾积水组不同严重程度患儿血清及尿β_(2)-MG、RBP、AQP2水平;分析β_(2)-MG、RBP、AQP2水平与超声参数[肾盂前后径(APD)、肾实质厚度(PT)]的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清及尿β_(2)-MG、RBP、AQP2对中重度肾积水的诊断效能。结果肾积水组血清及尿β_(2)-MG、RBP水平均高于对照组,血清及尿AQP2水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。肾积水患儿血清β_(2)-MG、尿β_(2)-MG、尿RBP水平和APD水平由低到高为轻度组、中度组、重度组,尿AQP2水平和PT由高到低为轻度组、中度组、重度组,差异均有统计学意义(P<0.05)。轻度组血清RBP水平低于中度组和重度组,差异有统计学意义(P<0.05)。肾积水患儿血清β_(2)-MG、尿β_(2)-MG、尿RBP水平与APD均呈正相关,与PT均呈负相关(P<0.05);尿AQP2水平与APD呈负相关,与PT呈正相关(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清β_(2)-MG、尿β_(2)-MG、尿RBP、尿AQP2检测对中重度肾积水均具有一定诊断价值,曲线下面积(AUC)分别为0.652、0.688、0.859、0.680,尿RBP诊断中重度肾积水的AUC显著大于其余指标(P<0.05)。结论血清β_(2)-MG、尿β_(2)-MG、尿RBP、尿AQP2与UPJO致小儿肾积水严重程度相关,尿RBP对中重度肾积水的诊断效能优于其他指标。

改良VPS治疗脑室出血后脑积水的效果及对神经功能、铁离子和水通道蛋白-4的影响

目的 探讨改良脑室-腹腔分流术(VPS)在脑室出血(IVH)后脑积水患者治疗中的应用价值。方法 选取2021年1月至2023年1月洛阳市中心医院收治的102例IVH后脑积水患者,采用简单随机化法分为两组,各51例。对照组接受传统VPS治疗,研究组接受改良VPS治疗。比较两组手术相关指标、神经功能评分[美国国立卫生院卒中量表(NIHSS)]及相关因子[白蛋白商(QAlb)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)]、血清铁离子(Fe)、水通道蛋白-4(AQP-4)水平、认知功能[蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分]、生活能力[日常生活能力量表(ADL)评分]、步态障碍评分(Tinetti评分)、并发症及术后6个月情况良好率。结果 研究组通气时间、住院时间、住院费用均较对照组低(P<0.05);术后第7天,研究组NIHSS评分、脑脊液NSE和QAlb、血清Fe和AQP-4水平均较对照组低(P<0.05);研究组术后第6个月MoCA评分、ADL评分、Tinetti评分均较对照组高(P<0.05);研究组并发症发生率较对照组低,术后6个月预后良好率较对照组高(P<0.05)。结论 改良VPS治疗IVH后脑积水患者,可减轻神经功能损伤,恢复认知功能和步态,增强日常生存能力,改善患者预后,且能减少并发症及住院时间,减轻患者负担。

水通道蛋白-4的激活可促进胶质淋巴系统功能及脑出血后血肿清除

有效清除血肿对于改善脑出血(ICH)患者的临床结局至关重要。由水通道蛋白-4(AQP4)促进的胶质淋巴系统在脑脊液(CSF)流入和代谢废物清除方面发挥关键作用。本研究探讨胶质淋巴系统在脑出血病理中的作用,重点关注AQP4。本研究建立了胶原酶诱导的脑出血模型,并通过米非司酮作为激动剂、TGN-020作为抑制剂以及Aqp4基因敲除来调控AQP4表达。采用荧光示踪和多模态磁共振成像(MRI)观察胶质淋巴系统功能、血肿和水肿体积。使用改良Garcia量表(modified GarciaScale)进行神经功能缺损评分。采用RT-qPCR和Westernblotting量化AQP4表达,并利用免疫荧光探索其细胞定位。检查脑组织切片中的神经元形态、退行性改变和铁沉积。脑出血后第3天,AQP4激动剂组表现出AQP4蛋白表达增加和血管周围极化增强、血红蛋白水平降低以及铁沉积减少。抑制组则呈现相反的趋势。AQP4的激活改善了胶质淋巴系统功能,导致分布范围更广、神经功能改善和血肿减少。AQP4的药理学抑制和基因敲除具有相反的效果。由AQP4促进的胶质淋巴系统在脑出血后的血肿清除中发挥关键作用。上调AQP4可改善胶质淋巴系统功能,促进血肿清除,并促进脑组织恢复。

水通道蛋白-2、4在小鼠肾发育过程中的表达

目的观察水通道蛋白-2(AQP-2)和水通道蛋白-4(AQP-4)在小鼠肾脏发育过程中的表达位置,探讨其与肾脏发生发育的关系及作用。方法免疫组织化学SABC法染色和体视学半定量检测AQP-2、AQP-4的表达。结果AQP-2在胚龄17d的胎鼠可以明确检测到,其表达部位为集合管主细胞的管腔膜和胞浆内。体视学测量发现,从胚龄17d开始表达到生后1d的小鼠其管腔膜的面密度值逐渐增加,此后面密度值基本上没有变化。AQP-4在胚龄14d的胎鼠可见到微弱的表达,随着胚龄的增长其表达逐渐增加,到生后1d达到最大水平,以后随着日龄的增加表达量无明显变化,并且在每一个时期的表达量都远远小于AQP-2的表达量。AQP-4的表达部位为集合管的侧基底细胞膜。结论推测AQP-2对小鼠出生后肾脏水平衡的调节作用比较重要,而AQP-4对出生前水平衡的调节作用比较重要。

黄芪对急性肺损伤模型大鼠肺组织水通道蛋白-1和水通道蛋白-5表达的影响

目的探讨补气中药黄芪对急性肺损伤模型大鼠肺组织水通道蛋白-1(AQP-1)和水通道蛋白-5(AQP-5)表达的影响。方法将30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、中药组各10只,予以每ml相当于0.25g黄芪生药的煎剂干预后,使用凝胶电泳测条带积分光密度值来检测确定肺组织AQP-1和AQP-5的表达情况。结果中药组大鼠肺组织AQP-1的积分光密度值为(0.572±0.084),模型组大鼠肺组织AQP-1的积分光密度值为(0.278±0.068),中药组高于模型组(P<0.01)。中药组大鼠肺组织AQP-5的积分光密度值为(0.812±0.084),模型组大鼠肺组织AQP-5的积分光密度值为(0.525±0.045),中药组高于模型组(P<0.05)。中药组与正常对照组无明显差异(P>0.05)。结论黄芪可能是通过促进肺组织AQP-1、AQP-5的表达,从而起到对模型大鼠急性肺损伤的防治作用。

水通道蛋白-1,5在干燥综合征小鼠下颌下腺中的表达

目的:探讨水通道蛋白-1和-5(AQP1、AQP5)在干燥综合征(Sjgrensyndrome,SS)小鼠下颌下腺中的表达及其意义。方法:选用BALB/c小鼠10只,用完全弗氏佐剂+同种鼠下颌下腺抗原诱导,使之产生在临床表现、病理损害和免疫特征上都类似于人SS的动物模型,对照组10只均注射等体积的生理盐水。用免疫组化和Western印迹方法研究SS小鼠下颌下腺AQP1、AQP5表达的变化特点。结果:SS小鼠下颌下腺组织中AQP1和AQP5的表达量均显著减少(P<0.01),主要分布在导管部位;AQP5在腺泡顶膜表达减少,而基侧膜的表达增强。结论:AQP1和AQP5表达量减少以及分布部位的异常改变,可能是SS患者口干的重要原因之一。

糖尿病大鼠下颌下腺内水通道蛋白-1和5表达变化及意义

目的：观察水通道蛋白-1（AQPl）和水通道蛋白-5（AQP5）在糖尿病大鼠下颌下腺内表达变化，探讨糖尿病患者口渴症状的发生机制。方法：SD大鼠随机分为对照组、糖尿病组、治疗组。取大鼠下颌下腺，分别进行H-E染色、免疫组织化学显色（SP法）和计算机图像分析。结果：对照组和治疗组的血糖分别与糖尿病组血糖比较，均有差异；与对照组比较，糖尿病组腺泡轻度萎缩，细胞排列紊乱，导管数目减少，直径变小；糖尿病组AQPl和AQP5表达下降；治疗组AQPl和AQP5表达较糖尿病组增加；对照组与糖尿病组大鼠下颌下腺AQPl、AQP5的MOD值比较，均有差异；糖尿病组与治疗组AQPl、AQP5的MOD值比较，均有差异性。结论：糖尿病大鼠下颌下腺内AQPl和AOP5的表达减少，为进一步探讨糖尿病下颌下腺分泌功能降低的发病机制提供形态学依据。

小鼠肾集合管发育中主细胞的形态学变化及水通道蛋白-2和-3的表达

目的观察小鼠肾集合管发育过程中主细胞的形态学变化及水通道蛋白(AQP)-2、-3的表达,探讨AQP-2、-3与小鼠肾集合管主细胞发育的关系及作用。方法应用透射电镜、免疫组织化学、免疫印迹技术并结合体视学方法,观察并检测胚龄16、18 d胎鼠及生后1、3、7、14、21 d仔鼠肾集合管发育过程中主细胞的形态学变化及AQP-2、-3的表达。结果小鼠胚龄18 d可见发育早期的主细胞。生后7～21d,主细胞形态结构发育基本完善。AQP-2于胚龄18 d表达于集合管主细胞游离面细胞膜和胞质内,生后1d其阳性表达逐渐增加,于生后21d达到高峰。AQP-3于胚龄16 d表达在主细胞的侧基底膜,生后1d达到较高水平。结论 AQP-2与AQP-3在肾发生发育中对水通透性的调节可能发挥了重要的作用,AQP-2的作用发生在出生后,AQP-3的作用主要发生在胚胎时期。

皮质类固醇激素性高眼压大鼠眼内水通道蛋白-1和水通道蛋白-4的表达

目的:探讨水通道蛋白-1(AQP-1)和AQP-4与皮质类固醇激素性高眼压(激素性高眼压)发病机制的关系。方法:健康Wistar大鼠30只随机分为A组(10只)、B组(20只),A组不做处理,B组右眼球结膜下隔日注射地塞米松磷酸钠制备大鼠激素性高眼压模型,左眼注射等量无菌生理盐水作为空白对照,用药4周后摘除眼球,分别采用免疫组化和RT-PCR检测2组大鼠房角组织AQP-1和AQP-4的表达情况。结果:小梁网、Schlemm管内皮细胞、细胞外基质、虹膜基质和睫状体无色素上皮细胞中有AQP-1蛋白的阳性表达,AQP-4阳性表达于虹膜基质和睫状体无色素上皮细胞,而房角组织中未见AQP-4的阳性表达;地塞米松作用4周后,虹膜基质和睫状体无色素上皮细胞中AQP-4蛋白的表达部位和表达量无明显变化,而AQP-1蛋白在房角组织中的表达明显减弱。A组AQP-1mRNA的相对表达量为1.195±0.159,与B组左眼(1.208±0.157)比较,差异无统计学意义(P>0.05);与B组右眼(0.745±0.114)比较,差异有统计学意义(t=5.592,P<0.05)。结论:一定浓度的地塞米松磷酸钠可使大鼠小梁网内皮细胞、Schlemm管内皮细胞及细胞外基质中AQP-1蛋白和mRNA的表达水平降低,其可能是诱发房水外流阻力增加、导致眼压升高的原因之一。

活血、利水中药对脑出血大鼠脑组织肿瘤坏死因子-α、核转录因子-κB及水通道蛋白-4表达的影响

目的探讨活血、利水中药对脑出血急性期大鼠脑组织肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-al-pha,TNF-α)、核转录因子-κB(nuclear factor-kappaB,NF-κB)及水通道蛋白-4(aquaporin-4,AQP-4)表达的影响及其治疗脑水肿的可能机制。方法自体股动脉血注入脑尾状核建立大鼠脑出血模型,SD雄性大鼠随机分为假手术组(42只)、模型组(42只)、活血组(42只)和利水组(42只),其中活血组予活血中药复方(每毫升含生药量分别为:大黄0.2g、水蛭0.02g、三七0.3g)10mL/kg灌胃,1次/日;利水组予利水中药复方(每毫升含生药量分别为:茯苓0.2g、泽泻0.2g、石菖蒲0.2g)10mL/kg灌胃,1次/日。模型组和假手术组予生理盐水4.0mL/kg灌胃,1次/日。1、3、5d取材,免疫组织化学染色法和实时荧光定量PCR法检测大鼠脑组织TNF-α、NF-κB p65和AQP-4mRNA和蛋白的表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠各时间点脑组织TNF-α、NF-κBp65和AQP-4蛋白及mRNA表达明显增加(P<0.01,P<0.05);与模型组比较,活血组和利水组各时间点AQP-4和TNF-α表达显著降低(P<0.05);活血组NF-κB p65表达亦明显低于模型组(P<0.05),利水组NF-κB p65表达差异无统计学意义(P>0.05);与模型组比较,活血组和利水组各时间点脑组织含水量均有不同程度的降低,活血组与利水组间比较,差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论活血、利水中药均可抑制炎性因子TNF-α的释放,下调AQP-4的表达,减轻大鼠血肿周围脑水肿,但作用强度和作用环节有差异。

大黄改善急性脑出血大鼠血脑屏障损伤的水通道蛋白-4机理研究

目的探讨大黄改善急性脑出血血脑屏障损伤的水通道蛋白4(aquaporin4,AQP4)机理。方法采用立体定向注射自体无肝素动脉血制作大鼠脑出血模型,对神经功能缺损、脑含水量进行观察,伊文思蓝染色观察血脑屏障紧密连接(bloodbrainbarriertightjunction,BBBTJ)的损害,电镜观察不同时间点BBB和神经星形胶质细胞足突改变,用RTPCR和Westernblot检测AQP4mRNA和蛋白表达。结果脑出血后,与模型组比较,大黄可明显减轻脑水肿;伊文思蓝染色结果显示血脑屏障从12h开始明显损害;电镜结果提示出血后12h血脑屏障紧密连接被破坏,而且神经星形胶质细胞足突肿胀;大黄可有效使血脑屏障紧密连接的破坏减少、神经星形胶质细胞足突肿胀减轻。脑出血模型组大鼠AQP4表达出现增高(P<0.05);脑出血后1天AQP4mRNA和AQP4蛋白表达增强,第3天达峰值,其后逐渐有所下降。大黄可抑制AQP4基因转录和翻译。结论大黄可通过改善血脑屏障损伤减轻脑水肿;大黄改善血脑屏障破坏的作用可能是通过抑制AQP4基因转录和翻译实现的。

电针督脉对实验性脊髓损伤大鼠水通道蛋白-4的影响

目的电针督脉对大鼠脊髓损伤后水通道蛋白4(AQP4)表达和后肢功能恢复的影响。方法取SD大鼠150只,分为正常组(50只)、模型组(50只)、电针组(50只),模型组和电针组用改良的Allen法制成脊髓损伤模型,于模型成功后,电针组针刺督脉上大椎和命门穴3min,每天1次,连续7天。于实验第1、3、7、14、21天分别对大鼠后肢功能进行BBB评分,应用免疫组织化学技术检测脊髓组织AQP4的表达,用图像分析仪进行定量分析。结果脊髓损伤后第1天,模型组和电针组受损脊髓灰质、白质中AQP4的表达明显增加;第3天时均达到高峰,但电针组低于模型组(P<0.05)。第7、14、21天,与模型组比较,电针组AQP4表达也较低(P<0.01)。结论电针督脉使脊髓损伤后AQP4表达减少,这可能有利于抑制脊髓水肿、消除脊髓继发性损伤,保存了残存正常脊髓组织并促进神经组织重建。

电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠水通道蛋白-4的调节作用

目的:探讨电针、脑水肿和水通道蛋白-4(AQP4)之间的变化关系。方法:选用健康SD雄性大鼠,阻塞大鼠大脑中动脉(MCAO),制作缺血性脑水肿模型。动物分为正常对照组、模型组和电针处理组,每组大鼠36只。电针处理组电针“水沟”“百会”穴,0.8-1.0mA,疏密波,电针30min。用CV染色法测定脑水肿肿胀率,用IgG免疫组化法测定脑组织中的IgG来反映血脑屏障(BBB)的通透性,采用免疫组化和逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术分别观察AQP4蛋白和mRNA在脑组织中表达的变化。结果:MCAO12h后,模型组脑水肿所引起的缺血侧脑半球开始肿胀,IgG开始外渗,AQP4蛋白和mRNA的表达开始上升,随着梗塞时间的延长,肿胀和外渗逐渐加重,AQP4的表达进一步增多,在72h均达到高峰。而电针能够明显减轻脑水肿所引起的缺血侧脑半球的肿胀,减少IgG外渗,降低AQP4蛋白和mRNA的表达。结论:电针可减轻脑缺血后脑水肿肿胀率,同时改善BBB的损伤程度。电针的这种保护作用可能与AQP4表达下调有一定的关系。

糖尿病大鼠肾脏水通道蛋白-2mRNA的表达及黄芪的调节作用

目的观察黄芪注射液(astragalus membranaceus,AM)对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠肾脏髓质水通道蛋白-2(aquaporin-2,AQP-2)基因表达的影响,以探讨黄芪治疗糖尿病的分子生物学机制。方法实验大鼠分为4组:正常组、糖尿病模型组、AM小剂量组和AM大剂量组,后两组应用AM5、10g·kg-1·d-1腹腔注射6周,测定各组大鼠血糖、血清胰岛素及C肽水平,用代谢笼法测定各组大鼠24h尿量,RT-PCR方法测定各组大鼠肾AQP-2 mRNA的表达。结果糖尿病大鼠血糖水平明显增高,血清胰岛素及C肽水平明显下降,单用黄芪注射液治疗对血糖、血清胰岛素和C肽水平无明显影响,但黄芪治疗可使糖尿病大鼠尿量明显增加。RT-PCR检测发现糖尿病大鼠肾髓质AQP-2 mRNA的表达明显上调,黄芪治疗可使其表达下降。结论黄芪治疗糖尿病利水消肿、改善水平衡代谢紊乱的作用可能与其降低肾髓质AQP-2 mRNA的表达有关。

不同介入时间高压氧治疗对实验性脑出血大鼠出血灶周围水肿及水通道蛋白-4表达的影响

目的:观察不同介入时间的高压氧(HBO)治疗对实验性脑出血大鼠出血(ICH)灶周围水肿及水通道蛋白-4(AQP4)表达的影响。方法:应用胶原酶诱导法建立大鼠脑出血模型,将185只雄性Wistar大鼠随机分为正常组(5只)、假手术组(60只)、脑出血对照组(60只)和高压氧治疗组(60只),高压氧治疗组按高压氧介入时间不同分为6h介入组、1d介入组、2d介入组和3d介入组4个亚组,每组15只,再按不同的治疗次数分为高压氧治疗后1d、3d、5d组,每个时间点各5只鼠,高压氧治疗压力2.0ATA,稳压吸氧60min,1次/d,与末次高压氧治疗结束后24h处死。所有大鼠饲养在相同环境中,正常组饲养3d后处死,脑出血对照组与假手术组大鼠不进行任何治疗,参照高压氧治疗组进行分组,并于相应时间点断头取脑,采用干湿比重法测定脑组织的水含量,免疫组化法测定AQP4的表达。结果:高压氧治疗组及脑出血对照组大鼠脑组织的水含量均高于正常组及假手术组(P<0.05);高压氧治疗组较脑出血对照组大鼠脑水含量减少(P<0.05);高压氧治疗组间比较6h介入组较其他治疗组明显减少(P<0.05);高压氧治疗组及脑出血对照组大鼠出血灶周围AQP4的表达均高于正常组及假手术组(P<0.05);高压氧治疗组较脑出血对照组大鼠出血灶周围AQP4表达减少(P<0.05),高压氧治疗组间比较6h介入组较其他组减少明显(P<0.05)。结论:HBO治疗可减少出血灶周围脑组织水含量及AQP4表达,介入治疗时间以6h为最优。

β-七叶皂甙钠对脑缺血小鼠脑组织白介素-1β、水通道蛋白-4表达及脑梗死体积和脑水肿的影响

目的观察β-七叶皂甙钠对脑缺血小鼠脑组织白介素-1β(IL-1β)、水通道蛋白4(AQP4)表达及脑梗死体积和脑水肿的影响。方法 228只小鼠随机分为假手术组(n=48)、脑缺血组(n=60)、β-七叶皂苷钠组(n=60)和生理盐水(NS)对照组(n=60);每组又分为缺血后12 h、24 h、48 h、72 h、168 h亚组。用线栓法建立大脑中动脉闭塞脑缺血模型。在脑缺血后2 h,β-七叶皂苷钠组和NS对照组分别经腹腔注射β-七叶皂苷钠和同体积NS,每隔24 h重复1次。在相应时间点对小鼠分别进行脑含水率(干/湿法)、脑梗死体积(TTC染色)、脑组织IL-1β及AQP4表达检测(酶联免疫吸附法)。结果与假手术组比较,脑缺血组与NS对照组小鼠脑含水率显著增高,脑组织IL-1β和AQP4表达显著上调(P<0.05～0.01);β-七叶皂苷钠组各时间点亚组脑含水率、脑梗死体积和脑组织IL-1β、AQP4表达明显低于脑缺血组和NS对照组(P<0.05～0.01)。结论β-七叶皂甙钠能抑制缺血性脑损伤后脑组织IL-1β和AQP4表达上调;减轻缺血性脑损害和脑水肿。

右美托咪定对脓毒症大鼠心肌组织水通道蛋白-1及炎症细胞因子水平的干预作用

目的：研究脓毒症大鼠心肌组织水通道蛋白-1（AQP-1）水平的变化规律，并比较AQP-1与心肌细胞炎症因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）及心肌组织含水量的相关性，探讨右美托咪定对脓毒症大鼠心肌的保护作用及可能机制。方法将90只雄性SD 大鼠按随机数字表法分为假手术组、脓毒症模型组和右美托咪定组，每组30只。采用盲肠结扎穿孔术（CLP）复制大鼠脓毒症模型；假手术组仅开腹、关腹，不行CLP。右美托咪定组于术前0.5 h静脉注射右美托咪定1μg/kg，浓度为2μg/mL，模型组和假手术组大鼠术后皮下注射生理盐水5 mL/kg。于术后2、12、24、48、72 h处死6只大鼠取出心脏，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定各时间点心肌组织匀浆中AQP-1含量及炎症细胞因子TNF-α、IL-6水平，利用干湿重法检测心肌组织含水量，并比较AQP-1与TNF-α、IL-6及心肌组织含水量的相关性。结果模型组术后2 h起心肌组织AQP-1、TNF-α及IL-6水平均较假手术组明显升高；随时间延长，AQP-1水平及心肌组织含水量有所降低，但TNF-α及IL-6水平却持续增高。右美托咪定组除术后72 h心肌组织含水量外，从术后2 h起上述各指标即均较模型组明显降低〔AQP-1（ng/g）：9.29±0.15比9.73±0.26，TNF-α（pg/g）：109.47±8.41比128.13±7.36，IL-6（pg/g）：232.95±20.56比279.71±22.24，心肌组织含水量：（74.82±6.37）%比（75.62±6.39）%，均P＜0.05〕，但仍高于假手术组。相关性分析显示，脓毒症大鼠AQP-1与早期心肌组织含水量（r＝0.418，P＝0.001）和晚期心肌组织含水量（r＝0.235，P＝0.022）的变化呈正相关，与早期（术后2 h）细胞因子TNF-α（r＝0.235，P＝0.021）及IL-6（r＝0.345，P＝0.003）浓度变化呈正相关，与晚期（术后72 h）细胞因子TNF-α（r＝-0.408，P＝0.037）及IL-6（r＝-0.276，P＝0.002）浓度变化呈负相关。结论脓毒症大鼠早期即出现明显心肌损伤，导致AQP-1的过度表达，从而引起心肌细胞水肿；右美托咪定可通过减少心肌组织AQP-1的表达及心肌炎症细胞因子水平进而减轻心肌细胞水肿，而发挥心肌保护作用。

地塞米松对人眼小梁细胞水通道蛋白-1表达的影响

目的 :观察地塞米松对人眼小梁细胞水通道蛋白 -1(AQP -1)表达的影响。方法 :通过RT -PCR方法 ,半定量检测原代培养的人眼小梁细胞AQP -1的mRNA水平及不同浓度地塞米松的作用。结果 :正常人眼小梁细胞AQP -1的mRNA(灰度比 )为1 643±0 354,10-8mol、5×10-8mol、10-7mol、5×10-7mol地塞米松作用3d为1 577±0 405、1 117±0 443、0 458±0 301、0 267±0 243。地塞米松浓度≥5×10 -8mol出现抑制作用 (P<0 05)。结论 :地塞米松使培养的正常人眼小梁细胞AQP -1的mRNA减少 ,可能是皮质类固醇性青光眼房水流出阻力增加的原因之一。