水通道蛋白1作为急性呼吸窘迫综合征肺部炎症水平的新生物标志物探索研究

目的探讨急性呼吸窘迫综合征(ARDS)肺组织水通道蛋白1(AQP1)表达水平的时效规律以及与肺损伤程度、经典炎症指标的相关性,旨在为ARDS寻找新的生物标志物及干预靶点。方法脂多糖(LPS)滴鼻制备ARDS小鼠模型,每日称量小鼠体质量,取6 h、1 d、3 d和7 d四个时间点肺组织和肺泡灌洗液,HE分析肺组织病理变化,ELISA和qPCR检测炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的表达水平,流式细胞术分析中性粒细胞、肺泡巨噬细胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞等天然免疫细胞数量及比例,qPCR和Western blotting检测AQP1 mRNA和蛋白表达水平,Pearson法分析AQP1与炎性细胞相关性。结果LPS刺激6 h后小鼠肺组织有炎性细胞浸润,至第3日出现严重肺损伤,第7日有所恢复;炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA和蛋白水平持续升高至第3日,第7日降低(P<0.05);中性粒细胞比例显著升高,第7日降低,肺泡巨噬细胞和嗜酸性粒细胞、单核细胞比例持续降低至第3日,第7日升高(P<0.05);AQP1 mRNA和蛋白表达水平持续降低(P<0.05);AQP1表达水平与四种炎性细胞显著相关(P<0.01)。结论ARDS肺组织AQP1表达水平与肺损伤程度及炎症指标呈显著负相关,可作为肺损伤的新生物标志物,进一步揭示AQP1可能扮演的保护性角色具有潜在临床价值。

基于TLR-4/NF-κB信号通路及水通道蛋白1表达探讨大陷胸汤干预重症急性胰腺炎早期肺损伤的效应机制

目的:探讨大陷胸汤对重症急性胰腺炎(SAP)早期肺损伤的影响及作用机制。方法:将60只大鼠随机分为实验组、模型组和对照组,每组20只。实验组予大陷胸汤灌胃,对照组及模型组予蒸馏水灌胃,在连续灌胃7 d后,模型组与实验组以胰胆管注射牛磺胆酸钠的方式制备SAP模型,于造模后12、24、48、72 h各时间点分别处死5只大鼠取材,观察大鼠一般情况、胸腹水量、肺湿干重比、胰腺组织及肺组织病理学改变、肺组织白细胞介素(IL)-1及Toll样受体4(TLR-4)水平、肺组织核因子(NF)-κB及水通道蛋白1(AQP1)表达水平。结果:与对照组相比,模型组大鼠一般情况较差,胰腺炎症反应以及肺损伤程度较重,胸腹水量、肺湿干重比、肺组织NF-κB表达水平、IL-1及TLR-4水平升高(P<0.05),肺组织AQP1表达水平下降。与模型组相比,实验组大鼠一般情况较好,肺损伤程度较轻,胸腹水量、肺湿干重比、肺组织NF-κB表达水平、IL-1及TLR-4水平下降(P<0.05),肺组织AQP1表达水平升高,造模后72 h后,胰腺组织坏死程度与同期模型组相比明显好转。结论:大陷胸汤可在一定程度上减轻SAP大鼠早期肺损伤,其机制可能与抑制TLR-4/NF-κB炎症信号通路,增强AQP1表达有关。

孕中期水通道蛋白1、白细胞介素37对高风险孕妇发生子痫前期的预测

目的探讨孕中期水通道蛋白1(AQP1)、白细胞介素37(IL-37)对高风险孕妇发生子痫前期的预测价值。方法选取2020年1月—2020年12月连云港市第一人民医院收治的70例孕早期预测有子痫前期的高风险孕中期孕妇作为研究对象,将其中22例发生子痫前期的孕妇分为子痫前期组,48例未发生子痫前期且血压维持正常的孕妇分为非子痫前期组,另选取同期在连云港市第一人民医院体检的30名健康非高风险孕妇作为对照组。对比三组孕妇孕中期AQP1、IL-37表达水平,应用受试者操作特征(ROC)曲线分析AQP1、IL-37对高风险孕妇发生子痫前期的预测价值。对所有产妇进行随访,记录70例有子痫前期高风险孕妇产后新生儿情况,将20例羊水污染程度为Ⅲ度、胎儿胎心率超过180次/min、新生儿Apgar评分<7分的产妇分为妊娠结局不良组,将其余的50例产妇分为妊娠结局良好组,对比两组产妇一般临床特征和孕中期相关临床指标,应用Logistic回归分析分析AQP1、IL-37对子痫前期不良妊娠结局的预测价值。结果三组孕妇孕中期AQP1、IL-37表达水平对比,子痫前期组明显高于非子痫前期组与对照组,差异有统计学意义(P<0.05);AQP1、IL-37两者联合对子痫前期的预测灵敏度和特异度明显高于AQP1、IL-37单一预测,差异有统计学意义(P<0.05),通过预测最高阈值和最低阈值计算出预测平均阈值,AQP1的预测阈值为14.58μg/L,IL-37为234.62 pg/mL;不良妊娠结局组与良好妊娠结局组孕妇年龄、身体质量指数、妊娠次数、产次、高血压家族史、妊娠前高血压史对比,差异无统计学意义(P>0.05),孕中期DBP、SBP、尿蛋白、AQP1、IL-37水平对比,差异有统计学意义(P<0.05);Logistic回归分析结果表明:尿蛋白、AQP1、IL-37是子痫前期高风险孕妇不良妊娠结局的独立影响因素(P<0.05)。结论孕中期AQP1、IL-37水平对高风险孕妇子痫前期具有重要预测价值,且其预测阀值分别为14.58μg/L、234.62 pg/mL,且两者联合的预测效能更高。同时,孕中期AQP1、IL-37也能够预测子痫前期高风险孕妇不良妊娠结局的发生,因此临床需要针对孕中期AQP1、IL-37水平升高的产妇进行相关干预,预防不良结局发生。

孕中晚期血清水通道蛋白1和白细胞介素37水平在子痫前期孕妇中的临床意义

目的 探讨孕中晚期血清水通道蛋白1(APQ1)和白细胞介素37(IL-37)水平在子痫前期孕妇中的临床意义。方法 前瞻性选取2019年1月至2021年12月亳州市人民医院收治的子痫前期孕妇65例,根据疾病严重程度,将患者分为轻度子痫前期组(n=38)与重度子痫前期者(n=27);根据发病先后将患者分为早发型子痫前期(n=34)与晚发型子痫前期(n=31),选择同期来亳州市人民医院孕检的正常孕妇60例作为对照组。比较轻度子痫前期组、重度子痫前期组患者与对照组的血清APQ1和IL-37水平;比较早发型子痫前期、晚发型子痫前期患者与对照组的血清APQ1和IL-37水平;分析子痫前期与对照组孕妇的临床检测指标水平;分析子痫前期孕妇的血清APQ1和IL-37水平与各临床指标的相关性及对子痫前期的预测价值。结果 3组组间血清APQ1和IL-37水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05),对照组、轻度子痫前期组及重度子痫前期组APQ1水平呈低到高趋势,IL-37水平呈高到低趋势。子痫前期组的血清白蛋白、总蛋白明显低于对照组,尿酸、尿氮素、胱抑素C、肌酐、乳酸脱氢酶、24 h尿蛋白含量均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。血清APQ1与血清白蛋白呈负相关(P<0.05),与胱抑素C、24 h尿蛋白呈正相关(P<0.05);血清IL-37与血清白蛋白呈正相关(P<0.05),与胱抑素C、24 h尿蛋白呈负相关(P<0.05)。ROC曲线结果表明,血清APQ1以26.34 ng/mL作为子痫前期预测的临界值,以36.88 ng/mL作为区分轻度子痫、重度子痫的临界值;IL-37以120.45 ng/mL作为子痫前期预测的临界值,以67.89 ng/mL作为区分轻度子痫、重度子痫的临界值。结论 血清APQ1升高、IL-37降低与子痫前期的发生、发展具有相关性,且两者均可预测子痫前期,对于子痫前期具有重要价值。

高血压肾病患者尿液水通道蛋白1、P53和P21水平分析

目的分析高血压肾病患者尿液中水通道蛋白1(AQP1)、P53、P21水平并观察其在诊断肾脏损伤中的价值。方法收集哈尔滨医科大学附属第一医院健康者(82例)、高血压患者(109例)和高血压肾病患者(126例)的晨尿,用ELISA试剂盒检测尿液中AQP1、P53和P21蛋白表达。结果高血压组AQP1、P53、P21水平较健康组升高(P<0.01),高血压肾病组P53、P21水平较高血压组升高,而AQP1下降(P<0.01)。AQP1在高血压肾病分期(CKD1~5期)中呈递减趋势,但P53、P21表达差异无统计学意义(P>0.05)。Pearson相关分析显示,高血压肾病组AQP1与血液肌酐(Cr)、尿素(Urea)、β2-微球蛋白(β2⁃MG)、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(CysC)以及尿液微量清蛋白(m⁃Alb)、转铁蛋白(Tf)、α1-微球蛋白(α1⁃MG)、24 h尿蛋白定量(24 h U⁃Pro)水平呈负相关(r分别为-0.720、-0.720、-0.706、-0.767、-0.868、-0.879、-0.844、-0.860,P均<0.01),与肾小球滤过率(GFR)呈正相关(r=0.852,P<0.01)。P53、P21与以上指标均无相关性(P>0.05)。此外,AQP1、P53、P21诊断高血压肾病的ROC曲线下面积(AUCROC)分别为0.921、0.996、0.983。结论高血压肾病患者尿液AQP1水平下降及P53、P21表达上升,可作为肾脏损伤指标。

水通道蛋白1在腹膜透析中的研究现状及进展

腹膜透析是终末期肾脏病的替代治疗方案之一,相较于血液透析来说,具有价格低廉、操作方便、血流动力学稳定、对残余肾功能有较好的保护作用等优势。作为腹膜上表达量最大的水通道蛋白家族成员,水通道蛋白1在腹膜透析过程中起着关键的作用。因此本文主要针对水通道蛋白1在腹膜上的分布、对超滤及腹膜纤维化的影响、部分调控机制及遗传学发现作阐述,为腹膜透析患者判断腹膜功能、延缓超滤衰竭、制订个性化透析方案提供新思路。

青天葵对内毒素致急性肺损伤大鼠肺水通道蛋白1和5表达的影响

目的通过观察青天葵预先给药对内毒素致急性肺损伤(acute lung injury,ALI)大鼠肺水通道蛋白1和5(aquaporin 1 and 5,AQP-1、AQP-5)表达的影响,探讨其保护作用机制。方法 SD大鼠24只随机分为正常组(A组)、青天葵预保护组(B组)、内毒素模型组(C组)。B、C组采用舌底静脉注射内毒素(5mg/kg)复制ALI模型,B组预先给予10mL/kg青天葵水煎液及每天灌胃处理,造模8h后检测3组肺湿/干重比(W/D),观察肺脏水通透性的变化,HE染色观察肺组织病理学的改变,免疫组化法及逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法检测AQP-1、AQP-5在肺内的表达。结果与C组比较,B组及A组肺W/D比值明显降低(P<0.05),B组肺水肿病理改变程度明显减轻,AQP-1、AQP-5在肺内的蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论青天葵预先给药可通过促进ALI大鼠肺AQP-1和AQP-5的表达上调,增加清除和转运肺水,改善水液代谢,减轻肺水肿状态,从而有效保护急性肺损伤。

海水淹溺肺损伤大鼠肺组织水通道蛋白1表达变化的研究

目的观测海水淹溺肺损伤大鼠肺组织水通道蛋白1(AQP1)表达变化。方法100只健康雄性Wistar大鼠随机分为两组,即海水淹溺组、对照组。海水淹溺组用气管吸入海水法建立模型,对照组除不吸入海水外,其他处理同海水淹溺组。分别于致伤后0.5、1、2、4、8 h时点,取大鼠颈动脉血做血气分析观察动脉血氧分压(PaO2)的变化;光镜下观察肺组织病理变化情况;采用免疫组织化学法检测肺组织表达与分布;采用RT-PCR方法检测AQP1 mRNA表达。结果成功复制了大鼠海水淹溺肺损伤模型:海水淹溺组在吸入海水后血PaO2明显下降,海水淹溺组各时点血PaO2显著低于相应时点对照组(P<0.01)。光镜下可见海水淹溺组各时点肺组织有毛细血管充血、肺间质、肺泡水肿和灶性出血,对照组未见明显病理变化。免疫组化显示海水淹溺组肺间质的毛细血管内皮AQP1的阳性表达,积分光密度值显著高于对照组的表达(P<0.05);海水淹溺组大鼠肺组织AQP1 mRNA表达也显著高于对照组(P<0.01)。结论海水淹溺肺损伤时肺组织AQP1蛋白及mRNA表达增加,AQP1在ALI/ARDS水的转运中可能起着重要作用。

马兜铃酸I和马兜铃内酰胺I对大鼠肾小管损伤机制及其对肾脏水通道蛋白1表达的影响

目的研究马兜铃酸I(AA-I)和马兜铃内酰胺I(AL-I)在亚急性毒性条件下对大鼠肾小管损伤的毒性机制及其对肾脏水通道蛋白1(AQP1)表达的影响。方法 AA-I及AL-I以高、中、低剂量(9.0,4.5,2.25 mg/kg)连续腹腔注射给药7 d,在给药第5天后,收集24 h尿液,对各组总尿量进行比较,并用ELISA方法检测尿液中β2-微球蛋白(β2-MG)含量。给药7 d后,取全血检测血生化,并用HE法染色观察肾脏病理组织学变化;用ELISA和免疫组织化学方法分析AA-I及AL-I在高、中、低剂量时肾脏组织AQP1的表达变化。结果 AA-I及AL-I在给药第5天即出现β2-MG排泄量增加,血生化中血浆离子浓度出现异常。AA-I及AL-I在9.0、4.5、2.25 mg/kg的剂量下均能明显抑制AQP1的表达,且存在一定的剂量依赖关系。结论 AA-I及AL-I均能导致肾脏毒性,且AL-I的肾毒性作用强于AA-I。AA-I及AL-I在肾小管损伤早期均可抑制AQP1表达,这与其早期导致大鼠尿量增加的利尿作用有关。

透明晶状体和老年性白内障晶状体上皮细胞水通道蛋白1的表达

目的 探讨透明晶状体和老年性白内障患者晶状体上皮细胞水通道蛋白 1(aquaporin 1,AQP1)的表达水平。方法 收集 5例透明晶状体和 4 0例老年性白内障患者的前囊膜。应用免疫组织化学方法和计算机图像分析技术对前囊膜下晶状体上皮细胞AQP1进行检测。结果 AQP1阳性表达在透明晶状体和老年性白内障患者前囊膜下晶状体上皮细胞的细胞膜。图像分析透明晶状体和老年性白内障患者晶状体上皮细胞AQP1平均吸光度值差异有显著性意义 (P <0 0 5 )。老年性白内障患者晶状体上皮细胞AQP1平均吸光度值低于透明晶状体上皮细胞AQP1平均吸光度值。结论 透明晶状体和老年性白内障患者晶状体上皮细胞的细胞膜表达AQP1,AQP1可能在老年性白内障发生发展中起一定作用。

刀鲚水通道蛋白1的分子克隆及高盐作用下的表达分析

采用cDNA末端快速扩增技术(Rapid Amplification of cDNA Ends,RACE)克隆获得了刀鲚(Coilia nasus)水通道蛋白1(AQP1)全长cDNA序列。其碱基序列全长为1299 bp,5′端、3′端非翻译区(untranslated regions,UTR)长度分别为107 bp和458 bp,开放阅读框(open reading frame,ORF)长度为777 bp,共编码258个氨基酸。理论等电点是6.13,蛋白分子量为27.1 kD。结构分析表明,刀鲚AQP1具有水通道蛋白家族典型结构特征,包括6个跨膜结构域,2个天冬酰胺-脯氨酸-丙氨酸(NPA)特征序列,同时还具有AQP1抑制剂含汞化合物的半胱氨酸结合位点。序列同源性及系统进化分析表明,其与同属鲱形目的大西洋鲱的同源性最高(93%),并且与其聚为一支。实时荧光定量分析结果表明,刀鲚AQP1基因在多种组织中有表达,包括脑、鳃、肝、前肠、后肠、中肾、肌肉。高盐度作用后,AQP1在渗透调节作用关键组织鳃、中肾、肠中的表达水平有显著差异(P<0.05),体现了AQP1在刀鲚渗透调节中的重要作用。本研究结果可为今后进一步探讨刀鲚渗透调节相关基因的调控机制提供理论参考。

不同单肺通气时间对大鼠肺组织中水通道蛋白1、4表达的影响

目的研究不同单肺通气(OLV)时间对大鼠肺组织水通道蛋白1、4(AQP1、AQP4)表达的影响,探讨AQP1、AQP4与OLV致急性肺损伤的关系。方法将30只SD大鼠随机均分成五组,实验组(OLV1、OLV2、OLV3、OLV4组)麻醉后使用小动物呼吸机行机械通气,对照组(C组)行双肺通气,实验组采用插管过深法将气管导管插入右肺,分别行右肺OLV 0.5h(OLV1组)、1h(OLV2组)、2h(OLV3组)、4h(OLV4组),确定左肺萎陷。实验结束后取左下肺组织,采用实时定量PCR测定各组大鼠AQP1、AQP4 mRNA表达,免疫组化观察AQP1、AQP4蛋白表达。结果 OLV4组AQP1 mRNA的表达明显低于C组(P<0.01)。肺组织免疫组化观察到随着OLV时间的延长,AQP1蛋白表达逐渐减少,OLV3和OLV4组明显低于C组(P<0.01),五组AQP4 mRNA表达和AQP4蛋白差异无统计学意义。结论长时间的OLV后,AQP1在调节肺内液体平衡中起到明显作用,可能参与了OLV致急性肺损伤的发病过程,而AQP4与其无明显关系。

水通道蛋白1在人胎盘和胎膜中的表达

目的研究正常妊娠晚期人胎盘和胎膜组织中水通道蛋白1(AQP1)的表达及分布模式。方法收集5例正常足月妊娠剖宫分娩的人胎盘和胎膜组织样本,运用RT-PCR法、western印迹和免疫组织化学方法检测AQP1在胎盘和胎膜组织中的表达。结果RT-PCR显示AQP1mRNA在胎盘和胎膜组织均有表达;AQP1Western印迹检测胎盘和胎膜组织在28KD左右有一特异性条带;免疫组织化学结果显示AQP1强表达于胎盘的血管内皮细胞和合体滋养细胞、羊膜上皮细胞、平滑绒毛膜细胞滋养细胞。结论AQP1在人胎盘和胎膜的表达提示其在母胎液体交换及羊水平衡中可能发挥着重要的作用。

水通道蛋白1在宫颈病变中的表达及意义

目的:检测宫颈病变组织中水通道蛋白1的表达,探讨该蛋白在宫颈癌形成和演进进程中的意义。方法:用免疫组织化学SP法检测83例石蜡包埋宫颈组织中水通道蛋白1的表达,结合临床病理分型分析其表达的意义。结果:水通道蛋白1在慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)和宫颈癌组织中的阳性率分别为4.0%,33.3%和74.2%,3组样本中水通道蛋白1阳性率的差异有统计学意义(P<0.05),宫颈癌病理学分级1+2级和3级相比,差异有统计学意义(P<0.01)。水通道蛋白1表达阳性率与CIN的分级,与宫颈癌临床分期、组织学分型和淋巴结转移无关(P>0.05)。结论:水通道蛋白1在宫颈癌前病变和宫颈癌组织中表达升高,可能在宫颈癌的发生发展过程中起重要作用。

外燥对小鼠肺组织水通道蛋白1表达的影响

目的观察外燥对小鼠肺组织水通道蛋白1(AQP1)表达的影响。方法 60只SPF级昆明种小鼠随机分为常温常湿组、常温燥组、温燥组、凉燥组,每组15只。图像分析免疫组化法之各组第6天、第12天,第18天小鼠肺组织AQP1阳性表达率。结果各组AQP1阳性表达部位多在肺泡上皮处;温燥组第12天、第18天AQP1蛋白表达阳性率持续下降,凉燥组也呈同样趋势,尤以第12天为甚(P<0.01),伴肺部炎性病变并随时间延长而加重。结论外燥致肺部炎性病变之时,伴肺泡液细胞内外转运相关的AQP1蛋白表达下降,提示与外燥伤肺、耗津病机相关。

水通道蛋白1与子宫内膜异位症新生血管形成的关系

目的探讨水通道蛋白1(AQP1)与子宫内膜异位症新生血管形成的相关性。方法 (1)抗新生血管形成:将22只裸鼠随机分为模型对照组8只、实验组14只。模型对照组和实验组小鼠腹腔内种植入子宫内膜组织块后,分别在组织块周围注射0.1 mL生理盐水和0.1 mL的AQP1-siRNA-Lipo2000。于种植后第15天,动物成模后处死裸鼠,测量腹腔内异位病灶的最大径线及最小径线,计算抑瘤率,并取腹腔内病灶。(2)新生血管的逆转治疗:12只子宫内膜异位模型裸鼠,随机分为对照组4只、研究组8只,分别在异病灶及其周围注射0.1 mL生理盐水和0.1 mL AQP1-siRNA-Lipo2000。治疗后7 d处死,测量腹腔内异位病灶的最大径线及最小径线,计算抑瘤率,并取瘤体。以上两组研究均采用CD34免疫组化检测异位病灶中微血管密度,Western blot对AQP1进行蛋白定量。结果抗新生血管形成实验组及新生血管逆转治疗研究组裸鼠的异位病灶微血管密度较对照组明显降低,差异均有统计学意义(P=0.012,P=0.000),AQP1的蛋白定量也较对照组降低,差异也有统计学意义(P=0.014,P=0.012),异位病灶瘤体体积较对照组明显减小,差异均有统计学意义(P=0.04,P=0.012)。结论AQP1的表达降低与子宫内膜异位症中微血管密度的减少相一致,通过siRNA靶向干预后异位病灶瘤体体积减小,推测AQP1是参与子宫内膜异位症新生血管形成的因素之一。

湿阻中焦证模型胃肠水通道蛋白1的病理特征性表达分布谱以及平胃散干预的研究

目的:本实验以前期较成熟湿阻中焦证动物模型为研究平台,研究湿阻中焦证动物模型胃肠组织AQP1的分布和含量以及平胃散的干预,揭示湿阻中焦证动物模型水通道蛋白病理特征性表达分布谱。从蛋白水平揭示湿阻中焦证在水液代谢失调病机方面以及平胃散治疗湿阻中焦证的科学内涵;搭建中药复方水通道调节剂的研究平台。方法:模拟外湿过盛,困阻脾胃、饮食不节,湿从内生、情志不遂,气机受阻,水湿不运三大致湿病因,建立湿阻中焦证模型。用免疫组化技术测定胃肠组织AQP1的分布,用酶联免疫法(ELISA)测定胃肠组织AQP1的含量。结果:湿阻中焦证AQP1在胃贲门黏膜下组织和胃体中间黏膜表达减少,AQP1在胃贲门和小肠中段黏膜表达增加。平胃散增强湿阻中焦证胃贲门黏膜下组织、胃体中间黏膜和小肠中段黏膜AQP1的表达,抑制湿阻中焦证胃贲门黏膜AQP1的表达。结论:AQP1在湿阻中焦证胃肠特征性表达分布谱可能是湿阻中焦证湿邪困阻脾胃,阻遏气机,散输水津失调所表现证候的分子基础之一。平胃散对湿阻中焦证胃肠AQP1表达的干预可能是平胃散燥湿运脾、行气导滞、散中焦之湿阻治疗湿阻中焦证的分子机理之一。平胃散增强正常大鼠胃肠AQP1的表达,可能是平胃散苦燥虽可祛湿但也可伤津液的分子机理之一。平胃散治疗湿阻中焦证的疾病临床疗效确切,但也不能乱服多服。

溺死大鼠肺组织水通道蛋白1的表达

目的检测生前溺死与死后抛尸的肺组织水通道蛋白的表达。方法取2种死亡方式条件下大鼠肺组织,用免疫组织化学方法检测肺组织中水通道蛋白1表达的分布特征。结果两种死亡条件下肺泡间质和支气管周围的毛细血管内皮及肺泡上皮均有AQP1的阳性表达,但积分光密度值(intergratedopticaldensity,IOD)值有显著性差别。结论AQP1在大鼠两种溺死条件下表达差别有统计学意义。

地塞米松对急性过敏性哮喘小鼠肺水通道蛋白1的影响

【目的】观察水通道蛋白1(AQP1)在急性过敏性哮喘小鼠肺组织的改变,以及地塞米松对其的影响。【方法】建立小鼠哮喘模型,并随机分为3组,哮喘模型组、生理盐水对照组和治疗组,治疗组在激发阶段给予地塞米松治疗。检测各组中支气管肺泡灌洗液(BALF)的白细胞总数、分类计数以及IL-5和IFN-γ水平,用RT-PCR、Western blot和免疫组化法检测AQP1mRNA、蛋白质水平和在肺组织的分布,观察肺组织形态学改变。【结果】(1)哮喘组BALF中白细胞总数[(52±8)×106/mL]、嗜酸性粒细胞数[(9.8±1.7)×106/mL]和IL-5水平[(71±27)pg/mL]均高于对照组(P均<0.01),IFN-γ水平[(294±26)pg/mL]低于对照组(P<0.05),治疗后白细胞总数、嗜酸性粒细胞数和IL-5水平均明显下降(P<0.05,P<0.01,P<0.01),IFN-γ水平明显上升(P<0.05);(2)哮喘组AQP1mRNA(1.90±0.29)和蛋白质(1.31±0.10)明显高于对照组(P均<0.01),治疗后表达明显下降(P<0.01,P<0.05);(3)哮喘组肺组织可见较弥漫的炎性改变,黏液分泌增多,血管壁水肿明显,血管周围有大量的炎症细胞渗出物,治疗组形态学改变明显减轻;AQP1在气管黏膜上皮、微血管内皮上皮、支气管周围血管床、炎症细胞呈阳性表达,哮喘组表达呈强阳性,治疗后表达明显减弱。【结论】AQP1在急性哮喘小鼠肺组织内过度表达,地塞米松对其有显著的抑制作用,可明显改善小鼠肺部的炎性浸润和肺水渗出的病理生理过程。

急性哮喘小鼠肺组织水通道蛋白1的表达变化及乙酰唑胺对其表达的影响

目的观察水通道蛋白1(AQP-1)在急性过敏性哮喘小鼠肺组织表达的变化,以及乙酰唑胺(AZ)对AQP-1表达的影响。方法 40只C57BL/6小鼠随机分对照组(A组)、AZ大剂量干预组(300mg/kg,B组)、AZ中剂量干预组(200mg/kg,C组)、AZ小剂量干预组(100mg/kg,D组)和哮喘组(E组),每组8只。干预组在激发阶段给予不同剂量的AZ腹腔注射。结果①E组肺组织的湿干重比值比A组明显增高(P<0.05);B、C、D组肺组织的湿干重比值较E组显著减低(P<0.05),与剂量呈负相关性。②E组BALF中细胞总数、嗜酸粒细胞数和IL-5水平均高于A组(P<0.05),IFN-γ水平低于A组(P<0.05),治疗后细胞总数、嗜酸粒细胞数、中性粒细胞及淋巴细胞均明显下降(P<0.05),且与剂量呈正相关性。③E组AQP-1在气管黏膜上皮、微血管内膜上皮、支气管周围血管床及炎症细胞呈强阳性表达,其表达水平明显高于A组(P<0.01),使用AZ干预后表达明显低于E组(P<0.05),下降的幅度与剂量呈正相关性;但AQP-1mRNA检测结果无明显差异(P>0.05)。结论①AQP-1在急性哮喘小鼠肺组织内及炎症细胞上过度表达,E组呈强阳性表达。②AZ对AQP-1有显著的抑制作用,可明显改善小鼠肺部的炎性细胞浸润等病理改变,且呈剂量依赖性。③AQP-1蛋白质在各组中表达差异较大,但AQP-1mRNA无明显差异,提示乙酰唑胺对AQP-1的影响可能是在转录后的水平上。