水通道蛋白11在羊水量过少产妇胎盘和胎膜中的表达变化及意义

目的探讨水通道蛋白(AQP)11在特发性羊水过少产妇胎盘和胎膜中定性及相对定量表达情况及其在羊水平衡过程中的作用。方法选择在兰州大学第一医院经剖宫产分娩的55例产妇,其中25例特发性羊水过少者作为实验组,30例羊水量正常的足月产妇为对照组。采用SABC免疫组化法和实时荧光定量PCR技术,检测两组产妇羊膜、绒毛膜、胎盘中AQP11的表达及分布。结果 AQP11在足月妊娠产妇羊膜、绒毛膜及胎盘中均有表达,且在羊膜的表达与羊水量呈正相关,在胎盘的表达与羊水量呈负相关;在不同羊水量的绒毛膜的表达均呈增加趋势。结论AQP11在妊娠晚期羊水量调节中可能发挥着重要作用。

芳香化浊调气法对功能性腹泻大鼠AQP3、5-HT水平及血管活性肠肽表达的影响

目的 探究芳香化浊调气法对功能性腹泻大鼠水通道蛋白(AQP)3、5-羟色胺(HT)及血管活性肠肽的影响。方法 将大鼠随机分为正常组、模型组、药物1组、药物2组、药物3组和对照组,每组10只。检测各组一般状态;检测粪便性状指标(BSS评分、稀便率、腹泻指数);检测血清及组织中血管活性肠肽(VIP)含量;检测肠道组织中5-HT含量;免疫荧光检测结肠组织中AQP3表达。结果 造模后大鼠出现活动减少,精神萎靡,呈缩肩拱背样,体质量下降,毛色无泽,粪便湿软或不成形;药物干预后各组一般状态得到明显改善。与正常组相比,模型组BSS评分、稀便率和腹泻指数均显著增加(P<0.05);与模型组相比,药物1组、药物2组和药物3组均不同程度降低,且药物3组降低最为显著(P<0.05)。模型组血清及胃窦、十二指肠、结肠、下丘脑组织中VIP含量较正常组显著降低(P<0.05);和模型组相比,药物1组、药物2组和药物3组均显著升高,且药物3组变化最显著(P<0.05)。与正常组相比,模型组回肠和结肠组织中5-HT含量均显著升高,结肠组织中AQP3水平明显降低(P<0.05);与模型组相比,药物1组、药物2组和药物3组回肠和结肠组织中5-HT含量均显著降低,结肠组织中AQP3水平明显升高,且呈浓度依赖(P<0.05)。结论 芳香化浊调气法可增加功能性腹泻大鼠AQP3水平和血管活性肠肽水平,减少5-HT水平,对肠道水液吸收功能和运动功能进行改善,进而改善腹泻。

水通道蛋白AQP4基因缺失加重NMDA诱导的小鼠脑损伤

目的:评价水通道蛋白AQP4在兴奋性氨基酸NMDA诱导脑损伤中起的作用。方法:在AQP4基因敲除小鼠,皮层注射NMDA 150 nmol诱导损伤。甲苯胺蓝染色评价损伤面积,Fluro-Jade B染色评价变性神经元,免疫组化法评价血脑屏障通透性增高。结果:与野生型小鼠比较,AQP4基因缺失加重NMDA诱导的皮层损伤,增加损伤区变性神经元密度,加重血脑屏障通透性的增高。结论:AQP4在NMDA诱导的脑损伤中可能起保护作用。

水通道蛋白亚型AQP1的研究进展

水是生命最基本的组成成分，机体的水平衡对动物的生命维持非常重要。长期以来．人们一直认为水跨生物膜的移动仅靠单纯扩散。但近10余年来大量研究证实机体内广泛存在着特异性的水通道家族（aquapofins，AQPs）。由于它们在生命活动中的重要性，对它们的结构、功能研究一直是近年来生物学界的热点。其中对水通道蛋白1（AQP1）的研究最深入．本文在此对其研究进展作一概述。

不同发育阶段大鼠睾丸水通道蛋白AQP9的表达研究

目的研究不同发育阶段大鼠睾丸水通道蛋白AQP9的表达情况.方法半定量RT-PCR.结果 4,8,12周大鼠睾丸AQP9mRNA表达逐渐增强.结论大鼠睾丸AQP9 mRNA表达与大鼠的不同发育阶段有关.

湿阻中焦证模型胃肠水通道蛋白9(AQP9)的病理特征性表达分布谱以及平胃散干预的研究

目的以前期较成熟湿阻中焦证动物模型为研究平台,研究湿阻中焦证动物模型胃肠组织AQP9的分布和含量以及平胃散的干预,揭示湿阻中焦证动物模型水通道蛋白病理特征性表达分布谱。从蛋白水平揭示湿阻中焦证在水液代谢失调病机方面以及平胃散治疗湿阻中焦证的科学内涵;搭建中药复方水通道调节剂的研究平台。方法模拟外湿过盛、困阻脾胃,饮食不节、湿从内生,情志不遂、气机受阻、水湿不运三大致湿病因,建立湿阻中焦证模型。用免疫组化技术测定胃肠组织AQP9的分布,用酶联免疫法(ELISA)测定胃肠组织AQP9的含量。结果湿阻中焦证AQP9在胃贲门粘膜、胃体中间组织、小肠中段粘膜下组织表达减少,AQP9在胃贲门粘膜下组织表达增加。平胃散增强湿阻中焦证胃体中间组织AQP9的表达。结论 AQP9在湿阻中焦证胃肠特征性表达分布谱可能是湿阻中焦证湿邪困阻脾胃,阻遏气机,散输水津失调所表现证候的分子基础之一。平胃散对湿阻中焦证胃肠AQP9表达的增强可能是平胃散燥湿运脾、行气导滞、散中焦之湿阻治疗湿阻中焦证湿邪困阻脾胃,阻遏气机,散输水津失调所表现证候的分子机理之一。平胃散增强正常大鼠胃肠AQP9的表达,可能是平胃散苦燥虽可祛湿但也可伤津液的分子机理之一。平胃散治疗湿阻中焦证的疾病临床疗效确切,但也不能乱服多服。

稳定表达人水通道蛋白4的胚肾细胞系HEK293/AQP4的建立及应用

【目的】建立一种可临床应用的并能稳定表达水通道蛋白4的胚肾细胞系HEK293/AQP4,用于检测视神经脊髓炎患者血清中的AQP4抗体。【方法】构建有AQP4基因的表达载体,利用脂质体将载体转入HEK293细胞,G418筛选,RT-PCR、间接免疫荧光检测稳定细胞系中水通道蛋白4的表达及分布。细胞间接免疫荧光检测20例NMO患者、20例MS患者、30例健康对照血清中的AQP4抗体,并同鼠脑间接免疫荧光检测法比较。【结果】限制性酶切消化、PCR、测序结果证明载体构建成功。间接免疫荧光证实稳定细胞系中有AQP4表达,且主要分布在细胞膜上。20例NMO患者血清中11例NMO-IgG阳性,18例AQP4抗体阳性,滴度在1∶60-1∶15360之间,而MS患者仅检测到1例阳性,健康对照未检测到阳性。【结论】成功构建稳定表达水通道蛋白4的胚肾细胞系HEK293/AQP4,并检测出国人NMO患者血清中存在AQP4抗体,且敏感性高于鼠脑法,可以有效的鉴别视神经脊髓炎和多发性硬化。

大豆11S球蛋白在空气-水界面上的吸附动力学

采用轴对称滴形分析法研究了大豆11S球蛋白在空气-水界面上的吸附动力学,主要检测了不同浓度和pH值条件下表面压力随吸附时间的变化。实验表明,大豆11S球蛋白在空气-水界面上的吸附随初始体相蛋白质质量分数的增加而加快,受pH值的影响尤其明显。当pH=3.0时,11S球蛋白快速吸附到空气-水界面上;而当pH=5.0时,吸附明显下降。在吸附的初始阶段,扩散控制吸附动力学;而当表面压力较高时,蛋白质分子在界面上的展开和重排控制吸附动力学。

激活的人外周T淋巴细胞表达水通道蛋白AQP3

目的:探讨水通道蛋白(Aquaporin,AQP)在人外周T淋巴细胞的表达和生理学意义。方法:利用逆转录PCR和免疫印迹技术检测AQP0～9mRNA和蛋白在静止的和经活化的T淋巴细胞的表达。结果:静止的淋巴细胞无AQP0-9表达,而活化的T淋巴细胞表达AQP3mRNA和蛋白。结论:T淋巴细胞激活过程可能需要AQP3转运水和甘油的功能。

湿热证大鼠肾内髓及尿液中水通道蛋白AQP2含量的变化

目的 :探讨湿热证大鼠肾内髓AQP2和尿液AQP2与湿热证中“湿”的形成的关系。方法 :复制湿热证大鼠模型 ,检测各组肾内髓及尿液AQP2的含量。结果 :湿热证模型组AQP2水平较正常组明显降低 ,尿液AQP2蛋白的排出量与肾脏AQP2蛋白的表达量有着良好的相关性。结论 :模型组大鼠肾脏AQP2的减少与湿热因素造模有着密切联系 ,尿液AQP2含量可以反映肾内髓AQP2蛋白的水平。

空气/水界面上大豆11S球蛋白吸附膜的膨胀特性

采用轴对称滴形分析法检测了不同体相蛋白含量和pH值条件下,空气/水界面上大豆11S球蛋白吸附膜的表面膨胀特征参数随吸附时间的变化.结果表明:随着吸附时间的延长,吸附膜的表面膨胀模量增大,相角减小;膨胀弹性明显高于膨胀粘性,因此,从流变学的角度分析,空气/水界面上大豆11S球蛋白吸附膜的粘弹性实际上是弹性的;表面膨胀模量随体相蛋白浓度的增加而增大,受pH值的影响更为明显.

胸段硬膜外阻滞对心力衰竭兔血液动力学、神经内分泌和肺水通道蛋白AQP_4影响

目的:探讨胸段硬膜外阻滞(TEB)对心力衰竭兔血液动力学、神经内分泌及肺组织水通道蛋白-4(AQP4)基因表达的影响。方法:将60只胸段硬膜外穿刺置管成功的兔随机分为3组(n=20);假手术组(S组),左冠状动脉前降支(LAD)仅置缝线,但不结扎,从硬膜外腔注入生理盐水0.5ml/kg,每天2次,连续4周;心力衰竭组(HF组),结扎LAD后第2天开始,从硬膜外腔注入生理盐水0.5ml/kg,每天2次,连续4周;TEB治疗组(TEB组),结扎LAD后第2天开始,从硬膜外腔注入0.1%罗哌卡因0.5ml/kg,每天2次,连续4周。术后4周经股动脉和颈总动脉直接插管测定血液动力学参数;用放免法测定血浆心钠素及内皮素浓度;逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)法半定量检测肺组织AQP4mRNA的表达。结果:心力衰竭组MAP、LVSP、±dp/dtmax明显下降,LVEDP、HR明显升高;血中内皮素和心钠素的浓度升高,肺AQP4mRNA的表达下降。经TEB治疗MAP、LVSP、±dp/dtmax有升高,LVEDP、HR显著降低;血中内皮素和心钠素的浓度降低,肺AQP4mRNA的表达增加。结论:胸段硬膜外阻滞可以改善心力衰竭兔血液动力学参数,降低血中ANP、ET-1的水平,并能部分纠正肺组织AQP4mRNA的异常表达。

平胃散对湿阻中焦证模型大鼠水通道蛋白1(AQP1)的影响

目的:以前期较成熟的湿阻中焦证大鼠模型为研究平台,研究湿阻中焦证对肺脾肾三脏AQP1含量的影响和不同剂量平胃散对湿阻中焦证大鼠模型肺肝肾水通道蛋白AQP1含量的影响,从AQP1含量变化的角度揭示肺肝肾三脏与水液代谢的关系。方法:选取SPF大鼠雌雄各半,按体重随机分为空白组,模型组,自然恢复组,平胃散高、中、低剂量组。采用综合造模法建立湿阻中焦证大鼠模型,采用酶联免疫法(ELISA)检测各组大鼠肺肝肾AQP1含量,采用免疫组化法检测各组大鼠AQP1平均光密度值。结果:肾脏中AQP1的含量明显高于其他两脏,差异具有统计学意义(P<0.01),平均光密度值显著低于其他两脏,差异具有统计学意义(P<0.05);模型组大鼠AQP1含量有下降趋势,平均光密度值呈上升趋势。服用平胃散后AQP1含量明显上升,平均光密度值明显下降。结论:水液代谢与人体肺肝肾三脏有关,与肾脏关系尤为密切。湿阻中焦证可能影响机体水液的代谢,平胃散能明显改善湿阻中焦证导致机体的水液代谢失常状况。

水通道蛋白家族成员——AQP_1研究进展

水通道蛋白是九十年代初发现的存在于哺乳动物和植物细胞膜上转运水的特异孔道。目前已鉴定出至少５种水通道，ＡＱＰ１是该家族最早成员，含有特征性重复串联序列ＮＰＡ，该蛋白在膜上为四聚体结构。ＡＱＰ１存在于包括肾在内的多种组织和细胞内，特别是那些与液体吸收和分泌有关的上皮细胞及可能协同水跨细胞转运的内皮细胞中，参与水的跨膜转运及水平衡调节。水通道的研究有助于人们了解某些疾病如肾衰、脑水肿等发生的病理生理学机制并为其治疗提供有益的探索。

水通道蛋白AQP5在小鼠骨髓间充质干细胞中的免疫定位

水通道蛋白家族是由能够转运水和小的溶质分子透过细胞膜的膜蛋白分子构成。AQP5属于水选择性通道,其在机体组织内的表达非常广泛。间充质干细胞主要来源于骨髓和脂肪组织,能够诱导分化成间充质组织中的各类细胞。采用PCR、免疫印迹和免疫荧光技术分析了水通道蛋白AQP5在小鼠骨髓间充质干细胞中的表达情况。结果表明:AQP5在RNA和蛋白质水平上都有表达,并且与CD90,CD44在小鼠骨髓间充质干细胞膜上共表达。

大豆油/水界面上大豆11S球蛋白吸附膜的膨胀流变特性

本文采用轴对称滴形分析法(ADSA)检测了pH2.0和5.0条件下,大豆油/水界面上不同浓度(0.1-0.001%,w/w)的大豆11S球蛋白吸附膜的膨胀流变特征参数(膨胀模量、膨胀弹性、膨胀粘性及相角)随吸附时间的变化。实验表明,在温度(23℃)和体相溶液离子强度(0.05)恒定的条件下,随着吸附时间的延长,表面膨胀模量增大,相角减小。膨胀弹性明显大于膨胀粘性,因此,从表面流变学的角度分析,油/水界面上粘弹性的大豆11S球蛋白吸附膜实际上是弹性的。膨胀模量随液滴体相蛋白浓度的增加而增大,受体相pH值的影响很大。pH2.0时,吸附膜的膨胀模量明显大于pH5.0时吸附膜的膨胀模量。

哺乳动物水通道蛋白家族成员-AQP8

AQP8是1997年以来被鉴定的哺乳动物水通道蛋白家族成员之一,主要分布于肝细胞、胰腺腺泡细胞、消化道上皮细胞、唾液腺腺泡细胞、睾丸精子细胞、胎盘、支气管上皮细胞和支气管腺的肌上皮细胞以及肾近曲小管、集合管上皮细胞的细胞内囊泡和顶质膜.能够特异性通透水分子,受cAMP等因素调节,可在细胞内囊泡与细胞顶质膜之间穿梭.可能参与胰液、胆汁及唾液的分泌、排泄物的脱水、精子成熟和受精以及肾脏水的重吸收等生理过程.

电针影响大鼠脑缺血再灌注后水通道蛋白4(AQP4)的表达及其在血管周边的分布

目的研究电针干预大鼠脑缺血再灌注损伤时脑内水通道蛋白4(aquaporin 4,AQP4)的表达与分布改变。方法选用SD雄性大鼠406只,分为正常对照组(n=40),脑缺血组(n=138),脑缺血+电针组(电针处理组,n=138)和脑缺血+假电针组(n=90)。利用线栓法制作大鼠大脑中动脉阻塞(middle cerebral arteryocclusion,MCAO)模型,缺血1h后实施脑血流再灌注。电针处理组在脑缺血开始后立即给予电针刺激,穴位选择"水沟"(GV 26)与"百会"(GV 20)。利用Western blot检测AQP4的蛋白表达水平,胶体金免疫电镜观察AQP4免疫阳性颗粒在血管周边的分布,常规焦油紫染色计算脑缺血后的脑梗死体积以及脑肿胀程度。神经行为学评估通过Garcia量表进行评分。结果 (1)再灌注24h内,电针可下调因脑缺血而诱导的AQP4表达升高,再灌注后6h和12h分别是缺血组的0.63倍和0.72倍(P<0.05);(2)与正常对照组相比,血管周边AQP4的免疫阳性颗粒在再灌注后6h增多,在再灌注后24h减少,电针干预组中血管周边AQP4的免疫阳性颗粒密度发生改变,其变化与缺血组相反,差异有统计学意义(P<0.05);(3)电针减轻脑缺血后的脑梗死及脑肿胀,促进神经行为功能的恢复。结论电针下调因缺血而导致的AQP4蛋白的表达升高,并动态改变其在血管周边的分布。电针对AQP4的调控作用可能与电针的神经保护作用机制相关。

水通道蛋白AQP4调节星形胶质细胞功能和在脑缺血损伤中的研究进展

缺血性脑损伤大约占卒中死亡的85%,急性或慢性的脑血管阻塞使脑血流量减少,造成神经细胞、胶质细胞及联系纤维发生变性、坏死或功能丧失。缺血性脑损伤的病理生理有复杂的生物分子反应和血流动力学改变过程,特征包括水肿和炎性反应。水通道蛋白家族（aquaporins,AQP）是特殊的水通道蛋白,在细胞膜广泛表达,负责水和其他小分子的运输。