芳香化浊调气法对功能性腹泻大鼠AQP3、5-HT水平及血管活性肠肽表达的影响

目的 探究芳香化浊调气法对功能性腹泻大鼠水通道蛋白(AQP)3、5-羟色胺(HT)及血管活性肠肽的影响。方法 将大鼠随机分为正常组、模型组、药物1组、药物2组、药物3组和对照组,每组10只。检测各组一般状态;检测粪便性状指标(BSS评分、稀便率、腹泻指数);检测血清及组织中血管活性肠肽(VIP)含量;检测肠道组织中5-HT含量;免疫荧光检测结肠组织中AQP3表达。结果 造模后大鼠出现活动减少,精神萎靡,呈缩肩拱背样,体质量下降,毛色无泽,粪便湿软或不成形;药物干预后各组一般状态得到明显改善。与正常组相比,模型组BSS评分、稀便率和腹泻指数均显著增加(P<0.05);与模型组相比,药物1组、药物2组和药物3组均不同程度降低,且药物3组降低最为显著(P<0.05)。模型组血清及胃窦、十二指肠、结肠、下丘脑组织中VIP含量较正常组显著降低(P<0.05);和模型组相比,药物1组、药物2组和药物3组均显著升高,且药物3组变化最显著(P<0.05)。与正常组相比,模型组回肠和结肠组织中5-HT含量均显著升高,结肠组织中AQP3水平明显降低(P<0.05);与模型组相比,药物1组、药物2组和药物3组回肠和结肠组织中5-HT含量均显著降低,结肠组织中AQP3水平明显升高,且呈浓度依赖(P<0.05)。结论 芳香化浊调气法可增加功能性腹泻大鼠AQP3水平和血管活性肠肽水平,减少5-HT水平,对肠道水液吸收功能和运动功能进行改善,进而改善腹泻。

连接蛋白43半通道介导NLRP3炎症小体激活在脑缺血中的作用

缝隙连接蛋白在脑缺血后的神经炎症扩散中发挥重要作用。连接蛋白43(connexin 43,Cx43)作为中枢神经系统中主要的连接蛋白,通常以寡聚形式形成六聚体的半通道,与相邻细胞上的半通道对接,形成缝隙连接通道。在正常生理条件下,细胞表面的半通道开放维持在正常生理水平;然而,在脑缺血的过程中,Cx43半通道的过度开放导致了大量的离子(Na^(+)、Cl^(−)、Ca^(2+)、K^(+))、谷氨酸、天冬氨酸和三磷酸腺苷(ATP)等物质的释放,引起相邻细胞功能紊乱,从而加重神经细胞的损伤。此外,Cx43半通道的开放还诱导炎症因子的释放,这与脑缺血后NLRP3炎症小体的激活密切相关。因此,通过调控Cx43半通道能够缓解脑缺血后神经炎症,进而减轻脑缺血损伤。本文重点综述了Cx43半通道蛋白与NLRP3炎症小体激活的关系,以及其在脑缺血中的作用,旨在为脑缺血的治疗提供新的思路和方法。

ICU急性呼吸衰竭患者外周血HCAR、DcR3、AQP-5水平与机械通气撤机结局的关系及价值分析

目的 探究重症监护室(ICU)急性呼吸衰竭患者外周血超敏C反应蛋白与白蛋白比值(HCAR)、诱骗受体3(DcR3)、水通道蛋白-5(AQP-5)水平与机械通气撤机结局的关系及临床价值。方法 选取连云港市第二人民医院2018年8月—2021年8月ICU急性呼吸衰竭患者120例,均行机械通气治疗,在符合自主呼吸试验(SBT)指征且通过30 min SBT后撤机,根据撤机后48 h内是否再插管分为撤机成功组(87例)和撤机失败组(33例),撤机前采集外周血检测HCAR、DcR3、AQP-5水平,分析外周血HCAR、DcR3、AQP-5水平与撤机结局的关系及预测价值。结果 两组呼吸衰竭类型、合并器官功能障碍综合征(MODS)、肺部超声评分(LUS)、急性生理与慢性健康评价系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分差异有统计学意义(P<0.05);撤机失败组外周血HCAR、DcR3高于撤机成功组,AQP-5低于撤机成功组(P<0.05);Pearson相关性分析显示外周血HCAR、DcR3与LUS、APACHEⅡ评分呈正相关,AQP-5与LUS、APACHEⅡ评分呈负相关(P<0.05);单因素、多因素分析均显示,外周血HCAR、DcR3、AQP-5影响撤机结局(P<0.05);外周血HCAR、DcR3、AQP-5预测撤机失败的截断值分别为4.10 mg/g、14.55μg/L、7.91μg/L,联合预测撤机失败的曲线下面积(AUC)为0.915(95%CI:0.850~0.958),大于各指标单独预测;以截断值为界分为低水平与高水平,外周血HCAR、DcR3高水平患者30 d生存率低于低水平患者,外周血AQP-5高水平患者30 d生存率高于低水平患者(P<0.05)。结论 ICU急性呼吸衰竭患者外周血HCAR、DcR3、AQP-5水平与撤机结局密切相关,联合检测可作为预测撤机失败的重要辅助手段,还能帮助临床判断死亡风险,为临床提供可靠的数据支持。

甘草泻心汤对溃疡性结肠炎大鼠水通道蛋白3、4的影响

目的探讨甘草泻心汤对溃疡性结肠炎(UC)大鼠水通道蛋白3、4的影响。方法清洁级SD大鼠32只,抽取8只作为空白组,余下24只采用4%葡聚糖硫酸钠复制UC模型,模型成功后随机分为模型组,西药组(美沙拉嗪缓释颗粒),中药组(甘草泻心汤),每组8只,持续灌胃2周,每天1次。检测并记录体质量、疾病活动指数、结肠长度、结肠黏膜损伤指数、组织病理学改变和结肠组织学损伤指数,血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)、IL-6,结肠水通道蛋白3(AQP3)、水通道蛋白4(AQP4)蛋白和mRNA。结果与空白组相比,模型组和给药组血清TNF-α、IL-1β、IL-6浓度升高(P<0.05);模型组和给药组结肠AQP3、AQP4蛋白表达降低(P<0.05);模型组、给药组结肠AQP3 mRNA表达和模型组、西药组结肠AQP4 mRNA表达降低(P<0.05)。中药组结肠AQP4 mRNA表达与空白组相比无统计学差异(P>0.05)。与模型组相比,给药组血清TNF-α、IL-1β、IL-6浓度降低(P<0.05);中药组血清TNF-α、IL-1β、IL-6浓度比西药组更低(P<0.05);给药组结肠AQP3、AQP4蛋白和mRNA表达升高(P<0.05);中药组结肠AQP4蛋白表达比西药组更高(P<0.05);中药组结肠AQP3、AQP4 mRNA表达比西药组更高(P<0.05)。结论甘草泻心汤能有效改善UC大鼠体质量、疾病活动指数、结肠黏膜损伤指数、组织学损伤指数等情况,其可能通过改善结肠AQP3、AQP4蛋白和mRNA表达,调节血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平,推测这些可能是甘草泻心汤治疗UC的效应机制。

升降润肠方对功能性便秘模型大鼠胃肠动力及结肠黏膜水通道蛋白3、水通道蛋白9的影响

目的探讨升降润肠方治疗儿童功能性便秘(functional constipation,FC)的可能作用机制。方法将48只SD大鼠随机分为空白组、模型组、乳果糖组、升降润肠方组,每组12只,除空白组外,其余36只采用盐酸小檗碱灌胃建立SD大鼠FC模型;造模成功后,空白组、模型组均予生理盐水1 mL/次,2次/天,灌胃;乳果糖组予乳果糖口服溶液1 mL/次,第2次予生理盐水1 mL/次,灌胃;升降润肠方组予中药液1 mL/次,2次/天,灌胃;四组均灌胃14天。疗程结束后,各组大鼠雌、雄各随机抓取3只,脱颈处死,通过计算胃排空率、碳墨推进率、记录结肠内存留粪粒数来评价大鼠胃肠动力;其余大鼠麻醉后剖腹取近端结肠组织,采用免疫组化检测水通道蛋白3(aquaporin-3,AQP3)、水通道蛋白9(aquaporin-9,AQP9)在结肠组织分布及表达情况,实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)进一步检测其mRNA水平,蛋白印迹(western blot,WB)检测其蛋白表达情况。结果与空白组相比,模型组的胃排空率、碳墨推进率降低,存留粪粒数增多,结肠黏膜AQP3 mRNA及蛋白表达上升,AQP9 mRNA及蛋白表达下降(P<0.05)。与模型组相比,乳果糖组的胃排空率差异无统计学意义(P>0.05),但碳墨推进率增加,存留粪粒数减少,结肠黏膜AQP3 mRNA及蛋白表达下降(P<0.05),AQP9 mRNA及蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);与模型组相比,升降润肠方组的胃排空率、碳墨推进率增加,存留粪粒数减少,结肠黏膜AQP3 mRNA及蛋白表达下降,AQP9 mRNA及蛋白表达上升(P<0.05)。与乳果糖组相比,升降润肠方组的胃排空率增加(P<0.05),碳墨推进率、存留粪粒数、结肠黏膜AQP3 mRNA及蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05),AQP9 mRNA及蛋白表达上升(P<0.05)。结论升降润肠方治疗儿童FC的作用机制与其能促进胃肠动力,下调近端结肠黏膜AQP3及上调近端结肠黏膜AQP9的表达相关。

湿阻中焦证模型大鼠胃肠水通道蛋白3(AQP3)的病理特征性表达分布谱以及平胃散干预的研究

目的:研究湿阻中焦证动物模型胃肠组织AQP3的分布和含量以及平胃散的干预,揭示湿阻中焦证动物模型水通道蛋白病理特征性表达分布谱。方法:SD大鼠60只,雌雄各半,随机分空白组、空白给药组、模型组、平胃散组和自然恢复组,每组12只。用免疫组化技术测定胃肠组织AQP3的分布,用酶联免疫法(ELISA)测定胃肠组织AQP3的含量。结果:模型组AQP3分布在胃贲门和小肠中段的黏膜增加,在小肠中段的外膜增加。经平胃散干预后,AQP3分布在胃贲门的黏膜减少,与自然恢复组比较,在小肠中段的黏膜有所增加。结论:AQP3在湿阻中焦证胃肠特征性表达分布谱可能是湿阻中焦证的分子基础之一。平胃散对湿阻中焦证胃肠AQP3表达的增强可能是平胃散治疗湿阻中焦证的分子机理之一。

牦牛水通道蛋白AQP1和AQP3基因克隆及在不同组织中表达和定位

水通道蛋白(Aquaporin,AQP)广泛存在于生物体的各组织部位,影响着生物体水代谢的过程。为进一步研究水通道蛋白1(AQP1)和水通道蛋白3(AQP3)生物学功能,本文对牦牛(Bos grunniens)不同组织中AQP1和AQP3基因的表达与定位进行了研究。采用PCR方法扩增牦牛AQP1和AQP3基因,对其序列进行生物信息学分析,采用qPCR方法检测2个基因在牦牛不同种组织中的表达量,采用免疫组织化学的方法分析AQP1和AQP3蛋白在组织中的定位和表达。结果表明,牦牛AQP1和AQP3基因CDS区分别为816 bp和840 bp,与野牦牛的同源性最高为99%。AQP1和AQP3基因的表达量在肾脏中最高,显著高于心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肌肉、小肠和瘤胃,AQP1基因在各组织中的表达均高于AQP3基因的表达。AQP1和AQP3蛋白定位发现其主要分布于肾脏近曲小管、小肠固有层细胞和瘤胃颗粒层细胞中,均在肾脏中的表达量最高。AQP1蛋白在脾脏、小肠和肌肉组织中的表达极显著高于AQP3蛋白表达。该研究结果对高寒低氧环境中动物的研究具有借鉴意义,有助于牦牛AQP1和AQP3功能研究。

稳定表达人水通道蛋白4的胚肾细胞系HEK293/AQP4的建立及应用

【目的】建立一种可临床应用的并能稳定表达水通道蛋白4的胚肾细胞系HEK293/AQP4,用于检测视神经脊髓炎患者血清中的AQP4抗体。【方法】构建有AQP4基因的表达载体,利用脂质体将载体转入HEK293细胞,G418筛选,RT-PCR、间接免疫荧光检测稳定细胞系中水通道蛋白4的表达及分布。细胞间接免疫荧光检测20例NMO患者、20例MS患者、30例健康对照血清中的AQP4抗体,并同鼠脑间接免疫荧光检测法比较。【结果】限制性酶切消化、PCR、测序结果证明载体构建成功。间接免疫荧光证实稳定细胞系中有AQP4表达,且主要分布在细胞膜上。20例NMO患者血清中11例NMO-IgG阳性,18例AQP4抗体阳性,滴度在1∶60-1∶15360之间,而MS患者仅检测到1例阳性,健康对照未检测到阳性。【结论】成功构建稳定表达水通道蛋白4的胚肾细胞系HEK293/AQP4,并检测出国人NMO患者血清中存在AQP4抗体,且敏感性高于鼠脑法,可以有效的鉴别视神经脊髓炎和多发性硬化。

四氢嘧啶对HaCaT细胞活力及AQP3、Claudin-1、ZO-1表达的影响

目的研究四氢嘧啶(Ectoine)对人角质形成细胞(HaCaT)的细胞活力、细胞凋亡率和细胞活性氧(ROS)的影响,并分析水通道蛋白3(AQP3)、紧密连接蛋白-1(Claudin-1)、闭锁连接蛋白(ZO-1)的表达水平。方法设置Ectoine浓度实验组和空白对照组,培养HaCaT细胞(24 h),采用CCK8法检测HaCaT细胞的细胞活力,甄选最佳的Ectoine作用浓度。用Western Blot法检测HaCaT细胞的AQP3、Claudin-1、ZO-1表达水平;用流式细胞仪检测HaCaT细胞的凋亡率及胞内ROS水平。结果CCK8法检测结果显示,0.10%Ectoine组、0.20%Ectoine组、0.30%Ectoine组的HaCaT细胞活力均高于120%,其中0.20%Ectoine组最高(146.92%±7.67%)。Ectoine浓度实验组相对于空白对照组,HaCaT细胞的AQP3、Claudin-1、ZO-1表达水平明显升高(P<0.05),且细胞凋亡率和胞内ROS水平均明显降低(P<0.05)。结论Ectoine可提高HaCaT细胞的细胞活力,降低凋亡率和胞内ROS水平,上调AQP3、Claudin-1、ZO-1表达水平。Ectoine可能与相关保湿蛋白的表达相关,对HaCaT细胞具有一定的保护作用。

中医药调节水通道蛋白3通路治疗慢性传输型便秘的研究进展

水通道蛋白3(AQP3)为动植物及微生物细胞上普遍存在的一种膜孔道蛋白,其结构中的丙氨酸-脯氨酸-天冬氨酸部分直接参与了水分子的转运过程。AQP3广泛存在于结肠上皮细胞基底部,发挥着调节肠道水分及粪便含水量的作用,与慢性传输型便秘(STC)的发生存在密切关联。中医药治疗便秘历史悠久,现已有大量研究表明中医药可通过内治及外治方法调控AQP3及相关靶点改善STC的症状。深入研究中医药调节AQP3治疗STC的机制,可为进一步深入研究提供方向。

激活的人外周T淋巴细胞表达水通道蛋白AQP3

目的:探讨水通道蛋白(Aquaporin,AQP)在人外周T淋巴细胞的表达和生理学意义。方法:利用逆转录PCR和免疫印迹技术检测AQP0～9mRNA和蛋白在静止的和经活化的T淋巴细胞的表达。结果:静止的淋巴细胞无AQP0-9表达,而活化的T淋巴细胞表达AQP3mRNA和蛋白。结论:T淋巴细胞激活过程可能需要AQP3转运水和甘油的功能。

SWE检查联合氯离子通道蛋白-3在诊断宫颈癌中的应用

本文探究实时剪切波弹性成像(SWE)联合氯离子通道蛋白-3(ClC-3)诊断宫颈癌的价值。选取疑似宫颈病变的105例患者作为研究对象,包括50例良性病变患者(良性病变组)和55例宫颈癌患者(宫颈癌组),选取同期50例体检健康者作为对照组。通过SWE检查所有受试者的弹性模量最大值、弹性模量平均值。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法测定血清ClC-3 mRNA水平。以临床病理诊断为金标准,通过ROC曲线评价弹性模量最大值、弹性模量平均值、血清ClC-3 mRNA诊断宫颈癌的价值。与对照组和良性病变组相比,宫颈癌组患者弹性模量最大值、弹性模量平均值、血清ClC-3 mRNA水平升高(P<0.05)。弹性模量最大值和弹性模量平均值均与ClC-3 mRNA显著正相关(r=0.447,P<0.001),与单一检查相比,弹性模量最大值、弹性模量平均值、ClC-3 mRNA联合诊断宫颈癌的AUC和敏感度升高(P<0.05)。SWE成像参数与血清ClC-3 mRNA变化与宫颈癌发生具有一定相关性,SWE联合血清ClC-3 mRNA检查具有较高的宫颈癌诊断价值。

基于AQP3/Claudin-1研究痛泻要方治疗腹泻型肠胃激综合征模型大鼠的机制

目的通过构建腹泻型肠易激综合征(irritable bowel with diarrhea,IBS-D)大鼠模型,观察经痛泻要方治疗后肥大细胞(mast cell,MC)计数、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的浓度变化,水通道蛋白3(aquaporin 3,AQP3)和Claudin-1 mRNA及蛋白的表达水平,并探讨痛泻要方治疗IBS-D的作用机制。方法采用改良慢性应激结合束缚的方法建立IBS-D模型大鼠。甲苯胺蓝染色法进行MC染色计数,ELISA法检测TNF-α含量,RT-PCR及SABC免疫组化法检测结肠组织AQP3和Claudin-1mRNA及蛋白的表达水平。结果(1)与正常组比较,模型组MC计数增加,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,匹维溴铵组、痛泻要方中、高剂量组MC计数明显减少,差异有统计学意义(P<0.05);(2)与正常组比较,模型组TNF-α含量明显上升,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,匹维溴铵组、痛泻要方中、高剂量组TNF-α含量均下降,差异有统计学意义(P<0.05);(3)与正常组比较,模型组AQP3和Claudin-1mRNA及蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,痛泻要方中、高剂量组及匹维溴铵组能上调大鼠结肠AQP3及Claudin-1mRNA及蛋白的表达水平,差异有统计学意义(P<0.05)。结论痛泻要方可能通过降低MC计数,降低TNF-α含量,上调AQP3和Claudin-1的表达水平,促进结肠对肠腔内水分的重吸收,修复肠道黏膜屏障,对IBS-D发挥作用。

小麦TaCLC-e-3AL基因功能分析及互作蛋白鉴定

【目的】分析小麦氯离子通道TaCLC-e-3AL基因功能并鉴定其互作蛋白,以解析TaCLC-e-3AL参与小麦响应低氮胁迫的作用机制。【方法】以拟南芥AtCLC-e氨基酸序列为参考序列,通过BlastP对小麦基因组数据库进行比对,获得TaCLC-e-3AL(TraesCS3A02G253600)、TaCLC-e-3B(TraesCS3B02G285500)和TaCLC-e-3DL(TraesCS3D02G254500)3个基因,分析其基因结构和系统进化关系。将TaCLC-e-3AL-p1300-GFP融合蛋白表达载体转化至小麦原生质体中,分析TaCLC-e-3AL的亚细胞定位特征;采用转基因拟南芥进行异源功能验证,利用酵母双杂交筛选与TaCLC-e-3AL相互作用的蛋白。【结果】生物信息学分析表明,TaCLC-e-3AL编码的蛋白含有11个跨膜结构域,与乌拉尔图小麦TuCLC-e同源性最高。组织表达量预测分析表明,TaCLC-e-3AL基因在小麦的叶片和茎部表达量较高。顺式作用元件分析表明,其可能响应光、激素以及逆境胁迫等信号。亚细胞定位显示,TaCLC-e-3AL蛋白经内质网分选后定位于叶绿体内。过表达TaCLC-e-3AL转基因拟南芥植株在低氮胁迫条件下可以储存更多的NO_(3)^(-),并能够维持植株体内NO_(3)^(-)/Cl^(-)的稳态,不引起植株根长和鲜重的显著变化。酵母双杂交文库筛选显示TaCLC-e-3AL与水通道、叶绿体a/b结合蛋白和电压依赖性阴离子通道3个蛋白互作,表明TaCLC-e-3AL可能与它们协同参与干旱胁迫响应、光合作用、信号传导等生物过程。【结论】小麦氯离子通道蛋白TaCLC-e-3AL位于叶绿体内。TaCLC-e-3AL基因转化至拟南芥中过表达,在低氮胁迫条件下较野生型可以在植株体内储存更多的NO_(3)^(-),并维持NO_(3)^(-)/Cl^(-)的值,表明TaCLC-e-3AL可能调控Cl^(-)和NO_(3)^(-)的协同运输。TaCLC-e-3AL通过与水通道蛋白、叶绿体a/b结合蛋白、电压依赖性阴离子通道蛋白互作,参与小麦的干旱胁迫、光合作用和离子胁迫应答。

抑制磷酸二酯酶4可降低脑缺血/再灌注损伤后的水通道蛋白4表达、减轻星形胶质细胞肿胀

我们的既往研究已显示磷酸二酯酶4(PDE4)抑制剂对大鼠中脑动脉闭塞/再灌注(MCAO/R)后的神经元损伤具有保护作用。然而,PDE4对脑水肿和星形胶质细胞肿胀的影响尚不清楚。在本研究中,我们发现通过Roflumilast(Roflu)抑制PDE4可以减轻大鼠缺血再灌注后的脑水肿、降低脑组织含水量。Roflu减少了水通道蛋白4(AQP4)的表达,而磷酸化蛋白激酶B(Akt)和叉头框蛋白O3a(FoxO3a)的水平增加。此外,Roflu减少原代星形胶质细胞在糖氧剥夺/再灌注(OGD/R)后的细胞体积和AQP4的表达。同样,PDE4B敲低显示出与PDE4抑制相似的作用;而PDE4B过表达可以减少PDE4B敲低对AQP4表达的抑制作用。本研究还发现,Roflu对AQP4表达和细胞体积的影响可以被Akt抑制剂MK2206阻断。神经炎症和星形胶质细胞激活是在卒中病理生理的机制之一,所以本研究用白细胞介素-1β(IL-1β)处理原代星形胶质细胞。结果显示,经IL-1β处理的星形胶质细胞表现出AQP4和磷酸化Akt及FoxO3a减少。Roflu显著降低了AQP4表达,这伴随着Akt和FoxO3a磷酸化的增加。此外,FoxO3a的过表达部分逆转了Roflu对AQP4表达的影响。本研究结果显示,PDE4抑制通过Akt/FoxO3a/AQP4通路限制了缺血诱导的脑水肿和星形胶质细胞肿胀。PDE4是脑缺血后脑水肿的一个有潜力的干预目标。

益气养阴通络方通过抑制PI3K/AKT通路和水通道蛋白2(AQP2)表达减轻糖尿病肾病大鼠肾损伤

目的探讨益气养阴通络方(YYTR)对糖尿病肾组织磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)、水通道蛋白2(AQP2)表达的影响及机制。方法将60只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、缬沙坦(20 mg/kg)组、YYTR(4 mg/kg、1 mg/kg)组、4 mg/kg YYTR联合0.5μmol/kg 740Y-P组,每组各10只。除空白组外,其余各组大鼠利用高糖高脂饲料联合注射链脲佐菌素(STZ)制备糖尿病肾病(DN)大鼠模型。造模成功次日,灌胃给药,共8周。实验结束后检测肾功能指标,根据肾脏组织HE染色和Masson染色结果评价肾小球硬化指数、肾间质损伤指数。Western blot法检测AQP2、PI3K、AKT、磷酸化PI3K(p-PI3K)和磷酸化AKT(p-AKT)蛋白水平,免疫组织化学染色检测肾组织AQP2表达和分布。结果与正常组比较,模型组大鼠24 h尿蛋白总量(24 h UTP)、血肌酐、尿素氮、β2微球蛋白(β2-MG)含量、肾脏指数、肾小球硬化指数、肾间质损伤指数、AQP2蛋白和PI3K、AKT、p-PI3K和pAKT蛋白表达量升高;与模型组相比,4 mg/kg YYTR组大鼠以上指标均明显降低,与4 mg/kg YYTR组相比,YYTR联合740Y-P组大鼠以上指标则升高。结论YYTR下调糖尿病肾病大鼠肾脏组织AQP2蛋白表达并抑制PI3K/AKT通路活化发挥肾保护作用。

中药对脾胃湿热证患者胃黏膜水通道蛋白3、4基因表达的影响

目的探讨脾胃湿热证与胃黏膜水通道蛋白 (AQP) 3、4基因表达的关系及中药清热化湿方对其影响。方法选择慢性浅表性胃炎患者 6 8例 ,属脾胃湿热证者 5 3例 (其中湿重于热 19例 ,热重于湿 14例 ,湿热并重 2 0例 ) ,脾虚证者 15例。脾胃湿热证患者予中药清热化湿方治疗。采用荧光定量PCR方法检测胃黏膜AQP 3、4的基因表达。结果脾胃湿热证组患者AQP 3基因表达的水平高于健康人组 (10名 )和脾虚证组 ,但 3者比较 ,差异无显著性 ;AQP 4基因表达的水平则显著高于健康人组和脾虚证组 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ;脾虚证组与健康人组比较差异无显著性 ;脾胃湿热证各亚型之间比较呈湿重于热 >湿热并重 >热重于湿的趋势 ;治疗后脾胃湿热证患者及湿重于热亚型AQP 3、4的基因表达水平显著下降 (P <0 0 1) ,接近健康人组及脾虚证组水平。结论AQP 3、4的异常表达可能是脾胃湿热证的发生机制之一 ,中药可能通过影响AQP 3。

石榴花水提物调节AHR/BNIP3改善糖尿病小鼠肝脏胰岛素信号

目的:探讨石榴花水提物(pomegranate flower water extract,PFW)对2型糖尿病小鼠肝脏胰岛素信号传导的影响及机制。方法:将C57BL/6J随机分为正常组、模型组、二甲双胍组(Met)、石榴花水提物低剂量组(PFWL)和石榴花水提物高剂量组(PFWH)。连续给药11周后,称小鼠体质量,检测空腹血糖(FBG)、胰岛素(INS)、甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)的含量,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理变化;Western blot法检测肝组织中胰岛素受体底物1(IRS1)、p-IRS1(Ser307)、蛋白激酶B(AKT)、p-AKT(Ser473)、糖原合成酶激酶-3β(Gsk3β)、p-Gsk3β(S9)、芳香烃受体(AhR)、磷脂酰乙醇胺N-甲基转移酶(PEMT)、Bcl-2/腺病毒E1B-19kDa相互作用蛋白3(BNIP3)蛋白表达。结果:与模型组比较,PFWH组FBG、INS、HOMA-IR、TG和TC含量极显著降低(P<0.01);PFWH组小鼠肝细胞内脂肪滴明显减少;PFWH组极显著升高肝脏中IRS1、p-AKT(Ser473)/AKT、p-Gsk3β(S9)/Gsk3β、BNIP3蛋白表达(P<0.01),极显著降低p-IRS1(Ser307)/IRS1、AHR、PEMT蛋白表达(P<0.01)。结论:PFW可能通过调节AHR/BNIP3抑制肝脏脂质沉积,改善p-IRS1(Ser307)/p-AKT(Ser473)/p-GSK3β(S9)胰岛素信号通路转导。

决明子对便秘小鼠结肠肌电和水通道蛋白3表达的影响

目的探讨决明子对慢传输型便秘小鼠结肠肌电活动和水通道蛋白3(AQP3)在结肠黏膜表达的影响。方法 40只雄性小鼠随机分为四组,对照组、便秘组、决明子组和酚酞组(阳性对照组)。建立小鼠慢传输便秘模型,用决明子,酚酞灌胃治疗决明子组和酚酞组。检测4组小鼠首便时间,6 h排便数量,结肠肌电信号,结肠黏膜AQP3的表达。结果决明子组与便秘组相比,首便时间缩短,6 h粪便数量增加(P<0.05),结肠肌电慢波频率振幅均有极显著差异(P<0.01),频率变异系数有显著差异(P<0.05),结肠黏膜AQP3平均光密度有极显著差异(P<0.01)。结论决明子能够有效地改善小鼠结肠运动功能,减少结肠黏膜AQP3的表达,对慢传输型便秘治疗具有显著疗效。

轻度肾积水儿童肾脏水通道蛋白2、3和4的表达

目的探讨水通道蛋白2、3、4（AQP2～4）在儿童轻度积水肾脏（HnK）的表达。方法收集6例来自肾母细胞瘤周围的正常肾脏组织标本为对照组（男2例,女4例;平均60.33个月）,12例轻度肾积水患儿（男5例,女7例;平均14.58个月）的HnK标本为积水组（B超示集合系统分离均〈3.5cm,肾实质轻度变薄）。采用免疫组织化学法检测AQP2～4在正常肾脏和HnK中的定位及其表达情况。结果正常肾脏AQP2阳性着色主要分布于肾脏集合管上皮细胞胞膜和胞质,AQP3阳性着色主要分布于肾脏集合管主细胞的基底侧,AQP4阳性着色主要分布于肾内髓集合管上皮细胞基底侧。HnK中AQP2～4的表达阳性率均明显低于对照组（Pa〈0.05）。结论AQP2～4在儿童HnK组织中表达明显降低,提示AQP2～4的表达降低可能是引起HnK形态功能改变的早期因素之一。