水通道蛋白8对脓毒症大鼠肝细胞线粒体形态的影响

目的研究脓毒症状态下大鼠肝细胞线粒体形态学的变化及线粒体水通道蛋白8（AQP8）的表达。方法将24只sD大鼠分成对照组和脓毒症组（每组12只）。采用盲肠结扎穿孔术（CLP）建立脓毒症实验动物模型，用Western印迹法检测大鼠肝细胞线粒体AQP8蛋白的表达，应用RT—PCR技术检测线粒体AQP8mRNA相对表达量；电镜下观察两组大鼠肝细胞线粒体的超微结构。结果脓毒症组大鼠肝细胞线粒体出现明显损伤；将对照组肝细胞线粒体AQP8蛋白相对表达水平设为1，则脓毒组AQP8蛋白表达水平为0．61±0．08，较对照组平均减少约39％，差异有统计学意义（P〈0．01）；将对照组肝细胞线粒体AQP8mRNA相对表达量设为1，脓毒组大鼠肝细胞线粒体AQP8mRNA相对表达量为1．59±0．24，较对照组平均增加约59％，差异也有统计学意义（P〈0．01）。结论脓毒症状态下，肝细胞线粒体出现肿胀、变性，线粒体AQP8蛋白表达下调可能是重要因素之一；由于机体的代偿作用，线粒体AQP8mRNA的表达是增加的。

参苓白术散加减方对结肠黏膜组织水通道蛋白4、水通道蛋白8表达的影响

目的观察参苓白术散加减方对脾虚泄泻模型大鼠结肠黏膜组织水通道蛋白(aquaporin,AQP)4、AQP8的表达的影响。方法健康雄性Wistar大鼠42只随机分为正常组、模型组、高中低剂量组及西药组6组,采用水环境小平台站立法复合高乳糖饲料喂养的方法复制腹泻模型,模型成功后,灌胃给药7天,取结肠组织,通过免疫组化的方法观察结肠黏膜组织AQP4、AQP8的变化。结果与正常组比较,模型组大鼠结肠黏膜组织AQP4、AQP8的表达明显降低;与模型组比较,高中低剂量组及西药组均可以提高结肠黏膜组织中AQP4的表达,高低剂量组和西药组可提高AQP8的表达,中剂量组改善不明显。结论参苓白术散加减方可提高脾虚泄泻模型大鼠结肠黏膜组织中的AQP4、AQP8的表达水平,促进水分的吸收,从而达到止泻的目的。

地塞米松对羊水过少胎盘和胎膜水通道蛋白8的干预效应

目的:研究水通道蛋白8(AQP8)在正常妊娠和羊水过少孕妇胎膜和胎盘中的表达,和地塞米松对羊水过少胎盘、胎膜中AQP8的干预效应。方法:选择2009年10月至2010年10月在遵义医学院附属医院产科住院的足月孕妇30例,其中羊水过少组15例,正常对照组15例。采用RT-PCR技术和免疫组织化学法检测两组在羊膜上皮细胞、胎盘合体滋养细胞和绒毛膜滋养细胞中AQP8 mRNA和蛋白的表达,及分别加入不同剂量的地塞米松(0μg/ml、1μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、50μg/ml)孵育24小时后,检测两组产妇胎膜和胎盘组织中AQP8 mRNA的表达水平。结果:两组绒毛膜滋养细胞中AQP8 mRNA和蛋白的表达比较,差异均无统计学意义(P>0.05),而羊水过少组中AQP8 mRNA和蛋白在羊膜上皮细胞和胎盘合体滋养细胞的表达低于正常对照组(P<0.05)。两组羊膜上皮细胞和胎盘合体滋养细胞AQP8 mRNA的表达随着地塞米松浓度的增加有增加趋势。两组羊膜上皮细胞和胎盘合体滋养细胞在地塞米松(50μg/ml)作用24小时后,AQP8 mRNA的表达明显增加,与地塞米松0μg/ml浓度比较,差异有统计学意义(P<0.05),而绒毛膜滋养细胞在不同浓度中的表达比较无差异(P>0.05)。结论:羊膜上皮细胞、胎盘合体滋养细胞与羊水量有一定的关系;地塞米松对AQP8 mRNA表达水平有促进作用,地塞米松可能通过上调羊膜上皮细胞、胎盘合体滋养细胞中AQP8的表达而对羊水量的稳态产生一定的影响。

水牛水通道蛋白8基因克隆及表达分析

本研究对水牛水通道蛋白8(aquaporin 8,AQP8)基因进行了克隆,并构建了真核表达载体,同时对AQP8基因在水牛卵巢组织中的表达进行了分析。结果发现,水牛AQP8基因编码区长度为732bp,与黄牛及小鼠AQP8基因的氨基酸序列同源性为100%。AQP8蛋白在不同发育阶段水牛卵泡中均有表达,在次级卵泡中的表达显著高于原始卵泡和初级卵泡(P<0.05),且集中表达于卵泡颗粒细胞。构建的pEGFP-N1-AQP8真核蛋白融合表达载体经脂质体法转染HEK293T细胞后,可观察到清晰的EGFP绿色荧光蛋白表达。该试验结果为深入研究AQP8基因在水牛卵泡发育及颗粒细胞凋亡中的功能奠定了基础。

子痫前期产妇胎盘胎膜中水通道蛋白8和水通道蛋白9的表达和意义

目的研究水通道蛋白8(aquaporin 8,AQP8)和水通道蛋白9(AQP9)在妊娠期高血压及子痫前期产妇胎盘胎膜上的表达,探讨其在子痫前期发病中的作用。方法选取2007年1月～2009年1月笔者医院产科足月产妇90例,其中正常妊娠30例,妊娠期高血压30例,子痫前期30例。采用免疫组化SP法,检测各组胎盘胎膜中AQP8和AQP9的表达,分析其与高血压程度、血乳酸脱氢酶水平和24h尿蛋白定量等的相关性。结果在子痫前期组,AQP8在羊膜上皮细胞的表达显著高于绒毛膜滋养细胞和胎盘滋养层细胞,而AQP9在胎盘滋养层细胞的表达显著高于绒毛膜滋养细胞和羊膜上皮细胞。子痫前期组,AQP8在羊膜上表达显著高于正常组,而在胎盘上的表达显著下降;AQP9在胎盘上表达显著高于正常组,在羊膜上表达轻度升高。子痫前期产妇胎盘上AQP8,AQP9的表达与血乳酸脱氢酶水平相关,而与24h尿蛋白水平无关。结论 AQP8、AQP9在子痫前期产妇胎盘胎膜上表达异常,可能参与子痫前期的发生和发展。

腹泻大鼠结肠水通道蛋白8表达的研究

水通道蛋白（aquapofins，AQPs）是广泛存在于动植物细胞膜上转运水的特异性孔道。属膜蛋白大家族。到目前为止在哺乳动物中已发现了该家族的13个成员（AQP0～AQPl2）。AQP8是该家族的成员之一，已有研究表明其在结肠有大量的表达．但是腹泻时结肠AQP8表达情况的研究目前少见文献报道。本实验通过免疫组织化学对腹泻时结肠AQP8的表达进行定量定位研究，以明确AQP8在结肠水代谢中的作用，并进一步为腹泻相关性疾病的发病机制提供实验依据。

水通道蛋白8在人羊膜上皮细胞WISH株的表达和定位

目的:研究水通道蛋白8(AQP8)在人羊膜上皮细胞WISH株的表达和定位,羊水膜内吸收的分子机制。方法:培养人羊膜上皮细胞WISH株,采用Western blot技术检测WISH细胞AQP8蛋白表达,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测WISH细胞AQP8 mRNA的表达,免疫荧光组织化学方法检测WISH细胞上AQP8的分布。结果:WISH细胞能表达较低水平的AQP-8 mRNA,WISH细胞AQP8蛋白在34ku处有一明显的糖基化条带。在细胞内微粒体膜和细胞膜上均检测到标记AQP8的荧光。结论:人羊膜上皮细胞WISH有AQP8的蛋白和mRNA表达,AQP8可能介导了羊水膜内吸收。

水通道蛋白8在人胎盘胎膜中的表达(英文)

背景:胎盘和胎膜在母胎液体平衡过程中起着重要作用,而水穿过胎盘和胎膜运输的分子和细胞机制目前尚不十分清楚,推测母胎液体交换可能通过胎盘和胎膜上的水通道进行。目的:观察人正常妊娠晚期胎盘与胎膜组织中水通道蛋白8蛋白质水平的表达及其分布。设计、时间及地点:对比观察,于2005-07/12在广州医学院实验中心完成。材料:收集正常足月妊娠剖宫分娩的胎盘与胎膜组织样本各5例,产妇年龄(27±5)岁,实验方法获医院伦理委员会批准。方法:胎盘胎膜组织在分娩30min内取样,用无菌生理盐水漂洗干净去除血液,立即放入液氮中,转运至-80℃冰箱保存备用。主要观察指标:运用反转录-聚合酶链反应法、免疫组织化学法及Western印迹法检测水通道蛋白8在胎盘与胎膜组织中的表达与分布。结果:反转录-聚合酶链反应显示,水通道蛋白8mRNA在胎盘和胎膜组织中均有表达。水通道蛋白8 Western印迹检测胎盘和胎膜组织显示,一特异性条带在Mr45000左右。免疫组织化学结果显示,水通道蛋白8表达于胎盘合体滋养细胞、羊膜上皮细胞及平滑绒毛膜细胞滋养细胞。结论:在蛋白质水平显示,水通道蛋白8表达于胎盘的合体滋养细胞、羊膜上皮细胞及平滑绒毛膜细胞滋养细胞。

水通道蛋白8基因3’-非翻译区荧光素酶报告载体的构建及其活性鉴定

目的:构建水通道蛋白8(AQP8)基因3’-UTR荧光素酶报告载体,与microRNA(miRNA)共转染HT29细胞,分析miRNA对其调控作用。方法:以HT29细胞基因组DNA为模板PCR扩增AQP8基因3’-UTR序列,并将其克隆到荧光素酶报告载体pGL3M上;根据生物信息学软件Targetscan和miRanda预测可能与AQP8基因3’-UTR作用的miRNA,将pGL3-AQP8 3’-UTR和预测miRNA共转染,利用双荧光素酶报告系统检测荧光素酶活性。结果:成功构建AQP8基因3’-UTR序列荧光素酶报告载体;生物信息学软件预测miRNA靶点显示AQP8基因3’-UTR可能是miR-214、miR-15a、miR-330、miR-137、miR-32、miR-612、miR-200a/141、miR-16的作用靶点;与对照组相比,miR-15a、miR-330、miR-32、miR-612、miR-200a、miR-16可使荧光素酶活性降低10%～45%。结论:成功地构建AQP8基因3’UTR荧光素酶报告载体,miR-15a、miR-330、miR-32、miR-612、miR-200a和miR-16可抑制其荧光素酶活性。

水通道蛋白8在人胎盘和胎膜中的表达

目的:探讨水通道蛋白8(aquaporin 8,AQP8)在正常人胎膜及胎盘中的表达情况。方法:采集6例正常足月剖宫产的胎膜和胎盘组织,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测AQP8mRNA在胎膜、胎盘中的表达,用免疫组织化学的方法检测AQP8蛋白在胎膜、胎盘中的定位表达。结果:AQP8mRNA在羊膜、绒毛膜和胎盘均有表达,AQP8蛋白主要表达于羊膜上皮细胞、绒毛膜滋养细胞和胎盘合体滋养细胞的胞浆和胞膜中。结论:AQP8在羊水平衡的调节和母儿液体交换过程中可能起重要作用。

三黄柴术方对急性肝内胆汁淤积性肝损伤大鼠肝脏水通道蛋白8/9表达的影响

目的:观察三黄柴术方对急性肝内胆汁淤积性肝损伤的防治作用及对肝组织水通道蛋白8/9表达的影响。方法:SD雄性大鼠随机分成正常组、模型组、复方高剂量组、复方低剂量组,每组8只。复方高、低剂量组大鼠从实验第1天起分别灌服20 g/(kg·d)、10 g/(kg·d)的三黄柴术方水提液,每天1次,连续4天;正常组和模型组大鼠每天灌服等容量的生理盐水。实验第3天上午正常组大鼠灌服1 ml/kg麻油,其他3组均1次性灌服1 ml/kg 4%萘异硫氰酸酯(ANIT)麻油溶液。实验第5天上午采集标本,采用全自动生化仪检测实验大鼠血清肝功能指标,HE染色观察实验大鼠肝组织病理学变化,qRT-PCR和Western Blot技术检测实验大鼠肝组织AQP8 mRNA、AQP9 mRNA及其蛋白表达水平。结果:模型组大鼠血清ALT、AST、ALP、TBil、TBA水平较正常组明显升高(P<0.01);复方高、低剂量组大鼠血清ALT、AST水平较模型组明显降低(P<0.01)。模型组大鼠肝组织出现肝细胞脂肪变,汇管区、小叶周边出现小的胆管增生和少量胶原沉积,有少量炎性细胞浸润;复方高、低剂量组大鼠肝组织病理变化程度明显减轻。模型组大鼠肝组织AQP8、AQP9 mRNA和蛋白表达均较正常组明显下调(P<0.01),复方高剂量组大鼠肝组织AQP8、AQP9 mRNA和蛋白表达均较模型组显著升高(P<0.01或P<0.05),复方低剂量组大鼠肝脏AQP8 mRNA、AQP9 mRNA和AQP 9蛋白表达较模型组显著增高(P<0.05)。结论:ANIT诱导的急性肝内胆汁淤积大鼠肝组织AQP8、AQP9基因及蛋白质表达水平均下降,三黄柴术方能够上调实验大鼠肝组织AQP8/9表达,这可能是其改善大鼠肝内胆汁淤积性肝细胞损伤的作用机制之一。

血管活性肠肽对HT-29细胞水通道蛋白8表达的影响

结肠的主要功能是吸收食物残渣中的水分和盐类,使粪便成形,结肠内水分的吸收属于被动转运,但近年研究发现消化道水通道蛋白（aquaporins,AQPs）大量表达,提示经细胞途径的水分吸收机制除了简单扩散外还存在特殊跨膜转运蛋白的快速水转运机制。研究认为AQPs在肠道的异常表达导致结肠对水分的吸收和分泌紊乱,参与了腹泻和便秘的发生。

水通道蛋白8与肠易激综合征

水通道蛋白8是近年来发现的一种新型的特异性跨膜转运水的蛋白质,在消化道有广泛的表达并且与某些消化系统疾病密切相关,最近发现水通道蛋白8表达与IBS的便秘和腹泻症状有关,为进一步了解IBS的发病机制,此文就水通道蛋白8与IBS的关系作一综述。

水通道蛋白8对结肠癌细胞侵袭转移的影响

目的探讨水通道蛋白8(aquaporin 8,AQP8)与结肠癌细胞侵袭转移的关系。方法应用免疫组组织化学链霉卵白素-过氧化物酶连结(SP)法检查18例发生转移的结肠癌、15例未发生转移的结肠癌原发肿瘤组织中AQP8的表达水平差异;结肠癌细胞系Caco-2细胞中过表达AQP8后聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测上皮细胞间充质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)相关蛋白(钙黏蛋白和波形蛋白);Transwell侵袭实验检测过表达AQP8后细胞的侵袭能力,定量分析穿膜细胞数量。结果 AQP8在发生转移的结肠癌组织中高表达;AQP8能促进EMT的发生,细胞表型由上皮细胞向间质细胞转化;Transwell实验显示,过表达AQP8后肿瘤细胞穿膜数为88.0±7.2,显著高于对照组(51.6±4.0;P<0.01)。结论 AQP8通过促进EMT的发生,促进结肠癌细胞侵袭转移。

泽泻汤加味方对高脂血症模型大鼠肝组织中水通道蛋白8的影响

目的:观察泽泻汤加味方对高脂血症模型大鼠肝组织中水通道蛋白8(AQP8)表达的影响,探讨该方防治高脂血症的机制。方法:将60只大鼠随机分为空白对照组(蒸馏水)、模型组、阳性对照组(辛伐他汀1.89 mg/kg)和泽泻汤加味方高、中、低剂量组(29.56、14.78、7.39 g/kg,以生药量计),每组10只。除空白对照组大鼠给予正常饮食外,其余各组大鼠均给予高脂饲料以复制高脂血症模型,并于造模同时每天灌胃给药1次,连续给药5周。给药结束后,检测大鼠血清中三酰甘油(TG)、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)含量,观察大鼠肝组织病理形态学变化,并检测大鼠肝组织中AQP8 m RNA和蛋白表达水平。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠血清中TG、TC、LDL-C含量显著升高(P<0.05或P<0.01),血清中HDL-C含量显著降低(P<0.01),肝组织出现细胞排列不整齐、肝血窦充血水肿等病理学变化,肝组织中AQP8 m RNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,各给药组大鼠上述指标均显著改善(P<0.05或P<0.01),肝组织的结构趋于正常、脂肪变性明显减轻。结论:泽泻汤加味方可能通过下调肝组织中AQP8 m RNA及蛋白的表达,发挥其对高脂血症的防治作用。

水通道蛋白8及其与肠易激综合征关系的研究进展

肠易激综合征是消化内科常见疾病,病因尚不明确。研究已发现肠易激综合征患者肠道黏膜存在多种异常分子,其中水通道蛋白8可能对肠易激综合征中的腹泻和便秘的发病起作用。本文对其与肠易激综合征关系的研究进展做一综述。

水通道蛋白8与消化系统疾病

水通道蛋白8是近年来发现的一种新型的膜蛋白和细胞内蛋白,在消化系统有广泛的表达并且与某些消化系统疾病密切相关,如短肠综合征、结肠直肠肿瘤、结肠炎、胆汁淤积等疾病。通过对水通道蛋白8的研究能为消化系统疾病的治疗提供新途径。

水通道蛋白8及水通道蛋白1表达在病变宫颈上皮组织中的临床意义

目的分析水通道蛋白8及水通道蛋白1在病变宫颈上皮组织中的临床意义。方法选择2013年至2014年医院收治的50例宫颈炎患者与50例宫颈癌患者，使用免疫组化方法检测并分析两组患者的水通道蛋白8及水通道蛋白1的表达。结果两组患者的水通道蛋白8阳性表达率差异显著（P〈0．05），水通道蛋白1微血管密度差异显著（P〈0．05），且两因子与宫颈癌的临床特征密切相关。结论不同宫颈上皮组织病变程度的水通道蛋白8、水通道蛋白l表达差异显著，故在宫颈癌病情的发生以及病情的发展过程中，检测水通道蛋白8、水通道蛋白1具有显著的临床病理价值。

硫酸镁对妊娠晚期羊水过少孕妇胎盘和胎膜水通道蛋白8及妊娠结局的影响

目的探讨硫酸镁对妊娠晚期羊水过少孕妇胎盘和胎膜水通道蛋白8(Aquaporin 8,AQP8)及妊娠结局的影响。方法选择2018年2~11月我院住院分娩妊娠晚期羊水过少孕妇72例,根据住院时间分为试验组(2018年7~11月)38例和对照组(2018年2~6月)34例。对照组给予葡萄糖、维生素C、丹参注射液静脉滴注,试验组给予葡萄糖、维生素、丹参注射液、硫酸镁注射液静脉滴注。治疗5 d后,比较两组孕妇临床症状、AQP8 mRNA表达及妊娠结局。结果试验组妊娠晚期羊水过少孕妇羊水指数(amniotic fluid dindex,AFI)明显高于对照组,胎儿脐动脉收缩期峰值流速与舒张期流速比值(S/D)明显低于对照组(P<0.05);羊膜上皮细胞、胎盘合体滋养细胞APQ8 mRNA明显高于对照组(P<0.05);胎儿窘迫等新生儿并发症发生率明显低于对照组(P<0.05)。结论硫酸镁有助于改善妊娠晚期羊水过少孕妇临床症状,降低新生儿并发症的发生,可能与促进羊膜上皮细胞、胎盘合体滋养细胞APQ8 mRNA表达有关。

水通道蛋白8与胎膜水平衡调控相关性研究进展

水通道蛋白（AQP）是一类对水具有高度选择性的跨膜糖蛋白，可介导自由水快速被动跨生物膜转运，是水分子跨膜转运的主要分子基础，对保持细胞内外环境的稳态起重要作用，同时参与机体一些重要的生理功能。自1988年Agre分离出第一个AQP以来，目前已确定了13种AQP家族成员，即AQP0、AQP1～12，称为AQP家族（AQPS）。迄今为止，AQP的基因结构和表达调控、染色体定位、蛋白结构、组织分布和生理功能均得到了一定的研究。近年来有关胎膜与AQPS的研究只涉及AQP1、3、4、8、9。水通道蛋白8作为一种重要的调控哺乳动物胎膜两侧水平衡的跨膜通道蛋白目前广受关注。