HPLC-MS/MS法考察水黄皮素在SD大鼠体内的药代动力学特征

目的:建立大鼠血浆中水黄皮素的定量分析方法,并对其药代动力学进行研究。方法:通过灌胃给予SD大鼠水黄皮素(10 mg·kg^(-1)),血浆样品经蛋白沉淀法处理后进行HPLC-MS/MS定量分析,以五味子醇甲为内标,采用Agilent Poroshell 120 EC-C_(18)(50 mm×3.0 mm,2.7μm)色谱柱,乙腈(A)-0.1%甲酸溶液(B)为流动相,流速0.3 mL·min^(-1),梯度洗脱;采用电喷雾离子源(ESI),正离子多反应监测模式(MRM)扫描,水黄皮素[M+H]^(+)m/z 293.1→277.0,五味子醇甲[M+H]^(+)m/z433.2→384.2;使用DAS软件计算相关药代动力学参数。结果:在1.5625~1600 ng·mL^(-1)浓度范围内,水黄皮素线性关系良好(r=0.9997),定量下限为1.5625 ng·mL^(-1),精密度RSD和准确度RE均小于20%;低、中、高质控样品精密度RSD和准确度RE均小于15%,提取回收率在91.70%~100.28%,基质效应在88.35%~97.55%,稳定性RSD均小于15%。水黄皮素在雌性SD大鼠体内T_(max)、t_(1/2)、C_(max)和AUC_(0→t)分别为3 h、1.95 h、1214.85 ng·mL^(-1)和11920.43 ng·mL^(-1)·h;在雄性SD大鼠体内T_(max)、t_(1/2)、C_(max)和AUC_(0→t)分别为3 h、1.19 h、1221.57 ng·mL^(-1)和9983.40 ng·mL^(-1)·h。结论:所建方法符合生物样品定量分析的基本要求,可用于水黄皮素在大鼠血浆中的含量测定及其药代动力学评价;水黄皮素在雌性SD大鼠体内的生物利用度更高。

水黄皮素候选化学对照品制备及分析研究

目的:研究水黄皮素候选化学对照品的制备方法及其质量标准,为干花豆药材及其相关产品的质量控制奠定物质基础。方法:采用有机溶剂提取,快速硅胶柱色谱、重结晶和反相制备型高效液相色谱对水黄皮素进行分离纯化,通过波谱等确证化学结构,采用高效液相色谱法测定样品色谱纯度,炽灼残渣法测定灰分,以质量平衡法计算水黄皮素的含量。结果:水黄皮素候选化学对照品高效液相色谱纯度测定均值为98.33%,炽灼残渣测定均值为0.01%;以质量平衡法计算其含量为98.32%。结论:制备得到的高纯度水黄皮素对照品符合中药化学对照品技术要求,可作为中药材或中药复方制剂质量控制的标准品;建立的分析方法准确、可靠,为对照品质量控制提供科学依据。

HPLC法测定玉郎伞中水黄皮素的含量

目的建立高效液相色谱法(HPLC)测定玉郎伞中水黄皮素含量的方法。方法以CLC-ODS(6.0mm×150mm,5μm)为色谱柱,[0.05mol/L庚烷磺酸钠-0.05mol/L磷酸二氢钾(3∶5)]-乙腈(1∶1)用磷酸调pH至3.0为流动相,流速1.0ml/min,检测波长261nm,柱温30℃。结果水黄皮素的线性范围为0.099～0.998μg,平均回收率为100.3%(RSD=1.2%)。结论所建立的HPLC法可用于玉郎伞中水黄皮素含量测定及其质量控制。

薄层色谱-荧光分析法测定水罗伞药材中水黄皮素含量的研究

目的建立薄层色谱-荧光分光光度法测定水罗伞中水黄皮素含量的方法。方法采用无水乙醇为溶剂,硅胶G为薄层板,苯-乙酸乙酯(8.5∶1.5)为展开剂,激发波长与荧光波长分别为355nm和428nm。结果水黄皮素线性范围为0.138～0.69μg,r=0.9991,平均回收率为99.14%,RSD为1.94%(n=5)。结论该法便捷、灵敏、准确、重现性好,可以控制该药材的质量。

HPLC法测定玉郎伞中水黄皮素的含量

[目的]建立高效液相色谱法测定玉郎伞中水黄皮素含量的方法。[方法]以CLC-ODS(6.0 mm×150 mm,5μm)为色谱柱,[0.05 mol/L庚烷磺酸钠–0.05 mol/L磷酸二氢钾(3∶5)]–乙腈(1∶1)用磷酸调pH 3.0为流动相,流速1.0 ml/min,检测波长261 nm,柱温30℃。[结果]水黄皮素的线性范围为0.099～0.998μg,平均回收率为100.3%(RSD=1.2%)。[结论]所建立的HPLC法可用于玉郎伞中水黄皮素含量测定及质量控制。

水黄皮中水黄皮素的提取及其对桔小实蝇的杀虫活性

桔小实蝇是一种毁灭性害虫,可为害200多种水果,目前其防治方法或毒性大,对环境不友好,或成本高昂。本研究拟采用廉价易得的水黄皮荚果为原料,采用超声波辅助提取法,单因素试验比较乙醇浓度,乙酸乙酯、石油醚、正己烷和乙醇的料液比对水黄皮荚果中水黄皮素提取率的影响,得出最优溶剂及其料液比;再分别采用浸渍法和叶碟法测定其提取物对桔小实蝇的卵孵化抑制活性和对1龄幼虫的胃毒活性。结果表明,乙醇最佳提取浓度为60%,乙酸乙酯、石油醚、正己烷与60%乙醇的最佳料液比分别为1∶30、1∶20、1∶30和1∶25,提取率分别为0.48%、0.31%、0.37%和0.44%,即1∶30乙酸乙酯的提取效果最好。杀虫活性研究表明,2%水黄皮提取物对桔小实蝇的卵孵化抑制作用最强,校正孵化抑制率为58.53%,6%提取物对卵孵化抑制作用次之,校正孵化抑制率为46.46%;4%提取物对桔小实蝇1龄幼虫胃毒活性最好,24 h校正死亡率为54.05%,48 h校正死亡率为95.94%。以乙酸乙酯为溶剂,料液比1∶30时,水黄皮中水黄皮素的提取效果最好,其提取率是0.48%。水黄皮提取物对桔小实蝇的卵孵化有抑制作用,对1龄幼虫有胃毒活性,因此有望开发为针对桔小实蝇的植物源杀虫剂。

广西不同产地玉郎伞根茎叶中水黄皮素的含量测定

目的对广西不同产地壮药玉郎伞根、茎、叶中水黄皮素进行测定,探讨玉郎伞习用药用部位为根的科学性及为其种植基地的选择提供检测数据。方法采用高效液相色谱法测定广西不同产地壮药玉郎伞药材根、茎、叶中水黄皮素的含量。色谱条件:Symmetry C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm);以乙腈-含0.005 mol·L^(-1)庚烷磺酸钠0.05 mol·L^(-1)磷酸二氢钾(40∶60)为流动相;柱温:30℃;流速1.0 m L·min^(-1);检测波长为217 nm;进样量10μL。结果水黄皮素进样量在12.23~122.3μg·m L^(-1)间有良好的线性关系。根、茎、叶中水黄皮素的回收率分别为98.86%,98.36%,101.04%;RSD分别为0.36%,0.74%,0.54%。水黄皮素在玉郎伞的根部含量最高,茎次之,在叶中几乎不含有,广西不同产地壮药玉郎伞根、茎中水黄皮素含量也有一定差异。结论该实验证实玉郎伞习用药用部位为根部的科学性,其检测数据也可用于壮药玉郎伞种植基地的选择。

HPLC法测定肿痛宁酊中水黄皮素的含量

目的:建立HPLC法测定肿痛宁酊中水黄皮素的含量。方法:以CLC-ODS(6.0 mm×150 mm,5μm)为色谱柱,甲醇-0.05 mol·L^(-1)磷酸二氢钾溶液(65:35,用磷酸调pH 4.5)为流动相,流速1.0 mL·min^(-1),检测波长261 nm,柱温30℃,按外标法计算结果。结果:水黄皮素进样量在86.64～866.4μg范围内有良好的线性关系(r=0.9997),平均加样回收率(n=6)为97.8%。结论:本研究建立了HPLC法测定肿痛宁酊中水黄皮素的含量,为该制剂的质量控制提供依据。

RP-HPLC法测定水黄皮药材中水黄皮素的含量

目的：建立RP-HPLC测定水黄皮药材中水黄皮素含量的方法。方法：以Hypersil-C18ODS2（4.6mm×150mm,5μm）为色谱柱,0.1%甲酸溶液（三乙胺调pH=3.0）-乙腈（60∶40）为流动相,流速0.8mL·min-1,检测波长258nm,柱温35℃。结果：水黄皮素进样量在0.116~0.696μg范围内线性良好（r=0.9999,n=6）,平均回收率（n=9）为99.3%。结论：本方法准确、简便,重复性好,可用于水黄皮药材中水黄皮素的含量测定。

水黄皮素在大鼠肝微粒体中的代谢研究

目的研究水黄皮素在大鼠肝微粒体中的代谢稳定性,确定水黄皮素的代谢酶表型。方法将水黄皮素与大鼠肝微粒体于37℃孵育,应用UPLC-MS/MS法检测孵育液中水黄皮素的含量,考察水黄皮素的代谢稳定性。将水黄皮素与各细胞色素P450(CYP)酶中的各同工酶CYP2E1、2C19、1A2、2D6、2C9和3A4的特异性抑制剂共孵育,确定其代谢酶表型。结果在大鼠肝微粒体中,水黄皮素的t1/2=1.97 h、Cl=0.70 m L·h-1·mg-1,CYP1A2是其主要代谢酶。结论水黄皮素在大鼠肝微粒体中是由多个CYP同工酶介导代谢的,其中,CYP1A2酶的介导作用最强。

水罗伞药材的鉴别及水黄皮素的含量测定

目的研究制订壮药材水罗伞Fordia cauliflora的质量标准。方法采用性状、显微、TLC等法鉴别水罗伞药材真伪;采用HPLC法测定水罗伞药材中水黄皮素的含量,药材检查等项参照《中国药典》方法测定。结果广西不同产地10批水罗伞药材均具有相同的性状、显微及TLC色谱特征,水黄皮素0.173%～0.502%,浸出物5.1%～10.8%,水分7.7%～10.8%,总灰分5.2%～7.8%,酸不溶性灰分0.1%～0.5%。结论建立的壮药材水罗伞质量标准,可有效控制水罗伞药材的质量。

玉郎伞的化学成分分析

对广西壮、瑶医常用药材玉郎伞Millettia Pulchra Kurz var. laxior(Dunn)Z.Wei的主要化学成分进行了初步研究,从中分离出2个结晶成分,经理化及光谱分析,鉴定为蔗糖(Ⅰ)和水黄皮素(karanjin,Ⅱ)。

基于网络药理学和分子对接的薏苡附子散对类风湿性关节炎及慢性心力衰竭“异病同治”作用机制探讨

目的基于网络药理学和分子对接方法探讨薏苡附子散治疗类风湿性关节炎(RA)及慢性心力衰竭(CHF)“异病同治”的作用机制。方法通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)数据库筛选薏苡附子散的活性成分,并利用Pubchem数据库获得Smile号,进而通过Swiss Target Prediction数据库获取活性成分对应的靶点。在GeneCards和OMIM数据库平台预测RA及CHF疾病作用靶点。对活性成分靶点与疾病交集靶点进行蛋白质相互作用(PPI)网络构建及核心靶点筛选,并进行基因本体(GO)功能及京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。筛选核心成分和核心靶点,利用AutoDock软件进行分子对接验证。结果从薏苡附子散中共筛选得到符合条件的活性成分10个,活性成分潜在作用靶点403个,RA疾病靶点1112个,CHF疾病靶点2983个,取交集,获得药物、疾病交集靶点69个。GO富集分析结果显示主要与炎症反应的调节、MAPK级联调控、对氧化应激的反应、骨化的调节、平滑肌细胞增殖等相关;KEGG通路富集分析得到236条通路,与RA及CHF相关且排序较靠前的通路有PI3K-Akt信号通路、NF-κB信号通路、MAPK信号通路等。分子对接结果表明,薏苡附子散中的核心成分多根乌头碱、水黄皮素、豆甾醇具有与核心靶点TNF、SRC、ESR1和PTGS2良好的结合潜力。结论薏苡附子散治疗RA和CHF具有多靶点效应,涉及多条生物过程和信号通路,可能通过调控炎症反应、氧化应激反应、血管生成和发育、心脏收缩调节及MAPK级联调控等发挥“异病同治”作用。

壮药干花豆枝叶化学成分研究

目的研究干花豆Fordia cauliflora枝叶中的化学成分。方法采用硅胶、C18、Sephadex LH-20等色谱手段对干花豆枝叶的95%乙醇提取物中醋酸乙酯萃取部分进行化学成分分离,通过波谱学技术和理化性质确定化合物的结构。结果从干花豆中分离得到11个成分,分别鉴定为羽扇豆醇(1)、羽扇豆醇乙酸酯(2)、水黄皮素(3)、呋喃-[4″,5″,8,7]-黄酮(4)、7-甲氧基-8-异戊烯基黄烷酮(5)、7-甲氧基-8-(3″-羟基-3″-甲基-1″-丁烯基)-黄酮(6)、豆甾醇(7)、豆甾醇-3-O-β-葡萄糖苷(8)、胡萝卜苷(9)、齐墩果酸(10)、β-谷甾醇(11)。结论化合物2、4、6～9为首次从该植物中分离得到。