胚胎期造血干细胞来源及其调控

胚胎干细胞是体内各种组织包括造血组织干细胞的来源 ,在胚胎干细胞向造血干细胞的分化及造血干细胞自身的发育过程中有着复杂的基因调控。原始造血产生于卵黄囊已被普遍认可 ,但永久造血产生于何处仍有争论。目前认为 ,至少有两个独立的部位与永久造血有关 ,即卵黄囊和胚内的PAS/AGM区。对胚胎期造血及其调控的研究不仅有助于探明某些血液病的发病机制 。

造血细胞的发生和发育

胚胎期造血细胞发生分为原始造血和永久造血两部分 ,原始造血起源于卵黄囊已被普遍认可 ,但永久造血起源于何处仍存在争议 ,目前认为至少有两个部位与永久造血有关 ,即卵黄囊和胚内的PAS/AGM区。胚胎干细胞是来源于胚胎发育早期的全能干细胞 ,在诱导分化为造血细胞的过程中 ,一系列过程类似于在体胚胎发育 。

人胚AGM区造血干／祖细胞的分离及其在含AGM区基质细胞体系中的培养

本研究分离人胚主动脉-性腺-中肾(AGM)区造血干/祖细胞(HSPC)并在含人AGM区基质细胞的培养体系中进行培养,以了解人AGM区基质细胞对HSPC的作用。以免疫组织化学方法检测人胎龄28-45天胚胎AGM区细胞CD34、Flk-1、VEGF的表达;分离AGM来源的HSPC,通过直接接种和经Transwell非直接接触两种方法接种于含人AGM区基质细胞系(hAGMS3和hAGMS4)饲养层的培养体系,观察HSPC生长情况和卵石区形成细胞(cobblestone area-forming cells,CAFC)并计数卵石区(cobblastone area,CA);用间接免疫荧光方法检测培养体系中悬浮细胞和CAFC的CD34、Flk-1表达;收获细胞进行半固体造血集落培养以检测两种培养方法对AGM-HSPC的集落形成能力影响。结果表明:人AGM区造血细胞表达CD34和Flk-1。两种接种方法均显示有CFC形成,直接接触培养能形成CD34和Flk-1双阳性的CAFC,集落总数明显高于非接触培养(hAGMS3体系:1647±194vs389±31,p<0.05;hAGMS4体系:1586±75vs432±35,p<0.05)。结论:①人胚AGM区含有CD34+Flk-1+的HSC。②首次建立含人胚AGM基质细胞的AGM-HSPC培养体系,直接接触培养和非直接接触培养均能促进AGM-HSC的生长,AGM基质细胞与HSC直接接触发挥重要作用。

造血干细胞的发生、发育和分化调控研究

在人体整个造血系统中,造血干细胞起着至关重要的作用。对造血干细胞的研究其实质就是对造血过程的发生、发育和调控的研究。本文从造血发生、发育和调控研究的最新进展入手,揭示了造血干细胞的发生发展过程及其在医药领域的重要作用。