NEK6在卵巢癌中的表达及临床意义

目的:探讨永离有丝分裂基因A相关激酶6(never in mitosis gene A-related expressed kinase 6,NEK6)在卵巢癌组织中的表达水平,分析其表达与临床病理因素及预后之间的关系。方法:收集临床上卵巢癌患者的肿瘤及正常卵巢组织,用实时定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)和蛋白质印迹(Western Blot)检测卵巢癌组织和正常卵巢组织中NEK6的表达情况,并用免疫组织化学的方法检测110例卵巢癌患者中NEK6的表达水平,分析其表达水平与年龄、病理类型、肿瘤分期、组织分级、转移之间的关系,用Kaplan-Meier生存分析法分析NEK6在卵巢癌中的表达水平与患者生存期之间的关系。结果:RT-qPCR、Western Blot及免疫组织化学结果均显示卵巢癌组织中的NEK6表达水平显著高于正常卵巢组织(均P<0.01);NEK6在卵巢癌患者肿瘤组织中的表达水平与卵巢癌的组织分级(P=0.008)、转移(P=0.006)呈正相关;Kaplan-Meier分析显示NEK6高表达水平的患者总生存期显著低于NEK6低表达患者(P<0.01)。结论:NEK6在卵巢癌患者的肿瘤组织中高表达,并影响卵巢癌的转移,提示NEK6可能参与卵巢的发生发展,可以作为潜在的卵巢癌预后指标。

基于蛋白激酶NEK9/MTA2信号通路泛素化修饰探讨胃癌的转移机制

目的:基于永离有丝分裂基因A相关激酶9(NEK9)/转移相关肿瘤基因家族2(MTA2)信号通路泛素化修饰探讨胃癌(GC)的转移机制。方法:使用癌症基因组图谱(TCGA)和Kaplan-Meier Plotter数据库分析NEK9表达与GC分期、预后之间的关联。体外实验中,将GC细胞分为:对照组、shNC组、shNEK9组、shNC+NC-OE组、shNEK9+NC-OE组和shNEK9+MTA2-OE组。分别采用MTT和Transwell法测定细胞的增殖、迁移和侵袭,并通过Western blot检测NEK9、MTA2、上皮间充质转化(EMT)标记和PI3K/AKT信号通路蛋白表达。结果:TCGA数据库分析显示,NEK9 mRNA在肿瘤组织中的表达明显上调,并且与TNM分期较晚和NEK9高表达者的预后较差密切相关。此外,NEK9在7个GC细胞系中的表达明显高于正常胃上皮GES-1细胞(P<0.05)。与对照组相比,shNEK9组细胞活力、相对集落形成、EdU阳性细胞数、侵袭和迁移细胞数均显著降低(P<0.05)。此外,在shNEK9组细胞中,E-钙粘蛋白水平上调(P<0.05),波形蛋白水平下调(P<0.05)。通过免疫共沉淀试验证明NEK9与MTA2有相互作用。NEK9敲低加速了HGC-27细胞中MTA2的降解,并且MTA2泛素化在NEK9沉默的细胞中增加。与shNEK9+NC-OE组组相比,shNEK9+MTA2-OE组相对集落形成、EdU阳性细胞数和迁移和侵袭数均显著增加(P<0.05)。结论:NEK9在GC中明显上调,其敲低在体外抑制GC细胞的生长和转移。NEK9可能通过去泛素化途径稳定MTA2进而激活PI3K-AKT信号通路来对GC细胞产生促癌影响。

腹腔镜胃癌根治术后复发与病灶组织TRAF4、RSK4、nm23表达的相关性研究

目的 测定肿瘤坏死因子受体相关因子4 (TRAF4)、肿瘤转移抑制基因nm23(nm23)、核糖体S6蛋白激酶4(RSK4)在胃癌患者病灶组织中的蛋白表达,探究分析腹腔镜胃癌根治术后复发与病灶组织TRAF4、RSK4、nm23表达的相关性。方法 选取来自本三甲医院于2023年1月至2024年1月收治的胃癌患者的电子病历系统临床资料,共160例。比较胃癌组织与癌旁组织TRAF4、RSK4、nm23蛋白表达。随访术后患者36个月,根据术后是否复发胃癌分为复发组和未复发组,比较两组患者一般资料,运用Cox回归模型进行多因素回归分析。结果 相较于癌旁组织,胃癌组织nm23、RSK4蛋白阳性表达率更低,TRAF4蛋白阳性表达率更高(P<0.05)。腹腔镜胃癌根治术后复发率为31.25%。两组组织分化、肿瘤直径、浸润程度、术后化疗、TNM分期、淋巴结转移、TRAF4、RSK4、nm23蛋白表达对比差异均有统计学意义(P<0.05)。TRAF4蛋白表达、淋巴结转移、RSK4蛋白表达、nm23蛋白表达、组织分化程度均是其影响因素(P<0.05)。结论 腹腔镜胃癌根治术后复发与病灶组织TRAF4蛋白高表达、RSK4蛋白低表达、nm23蛋白低表达有关,可成为早期评估腹腔镜胃癌根治术后复发的潜在标志物。

基于TCGA数据分析NEK2基因在恶性胸膜间皮瘤中的表达及预后意义

目的 分析永不有丝分裂基因A相关激酶2(NEK2)基因在恶性胸膜间皮瘤(MPM)中的表达及预后意义。方法 下载癌症基因组图谱(TCGA)数据库MPM基因表达数据、临床病理数据和生存状态数据;使用perl软件和R语言的limma、timeROC等程序包作NEK2基因在MPM中的差异分析、临床病理相关性分析、COX单因素和多因素分析以及基因富集分析,并绘制ROC曲线;利用TIMER2.0数据库分析MPM中NEK2表达与常见的免疫细胞浸润的相关性。选取12例MPM组织和6例非MPM胸膜组织,通过RT-qPCR的方法验证NEK2基因在MPM与非瘤组织中的表达情况。结果 与正常肺组织相比,NEK2在MPM组织中高表达(P<0.001)。NEK2基因mRNA表达量与MPM淋巴结分期具有显著相关性(P<0.05);NEK2高表达与MPM患者预后不良相关(P<0.001);NEK2基因表达与MPM中B淋巴细胞、巨噬细胞、树突状细胞浸润水平呈正相关(P<0.05),并在细胞周期、DNA复制、剪接体、mRNA监测等通路显著富集。在收集到的病例样本中,与非MPM胸膜组织相比,NEK2基因在MPM组织中的表达量显著增高(P<0.01)。结论 NEK2在MPM组织中高表达,且NEK2在MPM中高表达提示预后不良,可能成为治疗MPM的潜在靶点。

非小细胞肺癌中RASSF6与MST1的表达及病理意义

目的检测RAS相关结构域家族成员6基因(RASSF6)及MST1在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达情况,并探讨二者对NSCLC患者的病理意义。方法利用GEPIA2数据库测定肺腺癌(LUAD)和肺鳞癌(LUSC)中RASSF6和MST1基因表达水平;通过qRT-PCR实验测定NSCLC新鲜组织中RASSF6、MST1 mRNA表达水平;免疫组化法检测石蜡标本中RASSF6、MST1蛋白表达。Spearman探讨二者的相互关系。结果与癌旁正常肺组织比较,NSCLC的RASSF6 mRNA和蛋白表达水平均明显增加(P<0.05),但MST1 mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.05)。RASSF6及MST1蛋白表达均与临床分期、淋巴结转移相关(P<0.05),而与NSCLC患者的年龄、性别、组织分型及分化程度无关(P>0.05);且RASSF6与MST1呈负相关(r_(s)=-0.227,P<0.05)。结论RASSF6和MST1可能与NSCLC的进展有关,有望成为NSCLC患者新的潜在治疗靶点。

2型糖尿病相关基因的研究进展

随着分子生物新技术新方法的不断发展,近年来,人们发现了一些与2型糖尿病发病有关的基因,如:组织蛋白酶L基因(CathepsinL基因),胰岛素能上调该基因的表达,从而降低血糖,所以该基因可能是参与血糖调节的中间环节。CAPN10基因,该基因存在很多多态性位点,如:该基因SNP43、SNP19、SNP64等,都与糖尿病发病有一定关联。青少年起病的成人型糖尿病(MODY)是2型糖尿病的一种,其特点是早期发病(通常25岁以下),伴有胰岛素分泌功能障碍。肝细胞核因子4α(HNF4α)、葡萄糖激酶(GCK)、肝细胞因子1α(HNF1α)、胰岛素启动因子(IPF1)、肝细胞因子1β(HNF1β)和神经元分化因子/β细胞E框反式激活物2(NeuroD1/BETA2)是分别引起6种MODY的因素。这些基因的突变可导致代谢功能障碍,从而引发对β细胞的毒性作用,还可以引起胰腺发育不良。还有一些细胞因子基因,如:IL6基因,该基因的启动子的多态性也与2型糖尿病发病有很大关联。

CALCA、DAPK、PAX1基因启动子甲基化和人乳头状瘤病毒E6/E7 mRNA检测与宫颈病变的相关性研究

目的检测降钙素基因相关肽α(calcitionin-related polypeptide alpha,CALCA)、死亡相关蛋白激酶(death associated protein kinase,DAPK)、配对盒家族基因1(paired boxed gene 1,PAX1)基因启动子甲基化和人乳头状瘤病毒(human papilloma virus,HPV)E6/E7 mRNA情况,并探究与宫颈病变的相关性。方法选择2021年6月至2023年12月濮阳油田总医院收治宫颈病变患者192例,患者均接受阴道镜组织活检及CALCA、DAPK、PAX1基因启动子甲基化和HPV E6/E7 mRNA检测,比较不同级别宫颈病变CALCA、DAPK、PAX1基因启动子甲基化检测和HPV E6/E7 mRNA情况,分析CALCA、DAPK、PAX1基因启动子甲基化和HPV E6/E7 mRNA检测情况与宫颈病变的相关性,并评估CALCA、DAPK、PAX1基因启动子甲基化和HPV E6/E7 mRNA检测对高度鳞状上皮内病变(high-grade squamous intraepithelial lesions,HSIL)及宫颈癌的诊断效能。结果192例宫颈病变患者中,包括宫颈癌31例、HSIL 58例、低度鳞状上皮内病变(low-grade squamous intraepithelial lesions,LSIL)34例、慢性宫颈炎69例;宫颈炎组、LSIL组、HSIL组、宫颈癌组的CALCA、DAPK、PAX1基因启动子甲基化阳性率以及HPV E6/E7 mRNA阳性率逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05);Spearman相关分析结果显示,CALCA、DAPK、PAX1基因启动子甲基化阳性率及HPV E6/E7 mRNA阳性率与宫颈病变级别均呈显著正相关(P<0.05);联合检测对HSIL及宫颈癌的AUC为0.806,高于CALCA、DAPK、PAX1基因启动子甲基化和HPV E6/E7 mRNA检测的0.765、0.726、0.735、0.722。结论宫颈病变越严重,CALCA、DAPK、PAX1基因启动子甲基化和HPV E6/E7 mRNA阳性率越高,且各指标联合检测有助于提升对HSIL及宫颈癌的诊断效能。

散发性大肠管状腺瘤癌变过程中NGX6 ILK和c-Jun的表达及意义

目的:探讨NGX6、ILK和c-Jun在散发性大肠管状腺瘤癌变过程中的可能作用。方法:采用免疫组化法检测22例异型增生性畸变隐窝灶(ACF)、68例大肠管状腺瘤伴上皮不同程度异型增生、21例大肠管状腺瘤癌变和21例正常对照中NGX6、ILK和c-Jun的表达情况结果:NGX6蛋白在正常对照、异型增生性ACF、大肠管状腺瘤伴上皮异型增生及大肠管状腺瘤癌变组中阳性表达率逐步降低,而ILK蛋白和c-Jun蛋白的阳性表达率则明显升高(P<0.05)异型增生性ACF、大肠管状腺瘤伴上皮轻、中、重度异型增生组中NGX6蛋白的阳性表达率分别为77.27%、70.83%、37.50%、35.00%,其中,大肠管状腺瘤伴上皮中、重度异型增生组中NGX6蛋白的阳性表达率明显低于异型增生性ACF及腺瘤伴上皮轻度异型增生组(P<0.05)。异型增生性ACF、大肠管状腺瘤伴上皮轻、中度异型增生组中ILK蛋白的阳性表达率明显低于腺瘤伴上皮重度异型组(P<0.05);C-Jun蛋白阳性表达率在大肠管状腺瘤伴上皮轻、中、重度异型增生和大肠管状腺瘤癌变组明显高于异型增生性ACF(P<0.05)。在大肠管状腺瘤癌变过程中NGX6和ILK间呈负相关(r=-0.455,P<0.05);NGX6和c-Jun间呈负相关(r=-0.417,P<0.05);ILK和c-Jun之间呈正相关(r=0.390,P<0.05)。结论:NGX6低表达可能与ILK及c-Jun高表达有关,这可能在散发性大肠管状腺瘤形成及癌变过程中发挥一定作用。

铜绿假单胞菌对肺血管内皮细胞功能的影响及其机制

目的探究铜绿假单胞菌(PA)感染对肺血管内皮细胞功能的影响,并探讨其加重小鼠肺部炎症反应的可能机制。方法PAO1菌株感染人肺微血管内皮细胞HULEC-5a 2 h后,采用逆转录实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测自噬相关基因5(ATG5)、6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶3(PFKFB3)和钙黏蛋白5(CDH5)的mRNA表达,免疫荧光检测ATG5、PFKFB3和血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)的蛋白表达。采用小干扰RNA(siRNA)分别敲减ATG5、PFKFB3后,RT-qPCR检测ATG5、PFKFB3和CDH5的mRNA表达,免疫荧光检测PFKFB3和VE-cadherin的蛋白表达,并采用乳酸测定试剂盒检测细胞内乳酸的水平。采用PAO1菌株感染小鼠后,肺组织切片病理染色观察小鼠肺部炎症,激光共聚焦显微镜观察并分析荧光标记的内皮细胞PFKFB3和VE-cadherin的表达量。结果与对照组比较,PAO1感染HULEC-5a细胞后,PFKFB3 mRNA和蛋白表达均增加(P均<0.05),CDH5 mRNA表达减少(P=0.023),VE-cadherin蛋白表达减少(P<0.001),且连续性被破坏,乳酸含量升高(P=0.017)。与PAO1感染HULEC-5a细胞比较,PAO1感染敲减PFKFB3的HULEC-5a细胞后,CDH5 mRNA表达增加(P=0.043),VE-cadherin荧光连续性得到恢复,乳酸含量降低(P=0.047);PAO1感染敲减ATG5的HULEC-5a细胞后,PFKFB3 mRNA(P=0.013)和蛋白表达(P=0.003)均增加,CDH5 mRNA(P=0.020)和VE-cadherin蛋白表达(P=0.001)均减少,乳酸含量升高(P=0.015)。PAO1感染小鼠后,病理HE染色结果显示,肺泡内明显的红细胞渗漏,炎症细胞浸润,肺泡间隔增宽和部分血管内皮细胞脱落。免疫荧光染色结果显示,与正常小鼠比较,PAO1感染小鼠内皮细胞PFKFB3表达增加,VE-cadherin荧光减弱,且不连续。结论PA可能通过AGT5调控PFKFB3通路,破坏肺血管内皮细胞功能,进而加重小鼠肺部炎症反应。

mTOR-S6K1-Gli1信号通路在小鼠慢性瘙痒中的作用

目的:探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白-核糖体蛋白S6激酶1-胶质瘤相关癌基因同源蛋白-1(mTOR-S6K1-Gli1)信号通路在慢性瘙痒中的作用。方法:取雄性昆明小鼠40只,分为空白对照组、溶剂对照组、致痒组、致痒+抑制剂组和致痒+抑制剂溶剂组,每组8只。后3组小鼠采用定期反复予恶唑酮溶液(乙醇为溶剂)涂抹腰背部皮肤的方法建立慢性瘙痒模型,溶剂对照组给予乙醇,致痒+抑制剂组和致痒+抑制剂溶剂组除致痒处理外,分别给予GANT61(Gli1抑制剂)溶液和相应溶剂鞘内注射。实验第0、7、9、12、14、16、19天记录涂抹恶唑酮溶液后30 min内小鼠搔抓次数;实验第19天,5组小鼠各取3只处死,取给药处皮肤行HE染色,观察局部病理变化,同时用Western blot法测定脊髓组织Gli1蛋白的表达;取溶剂对照组和致痒组小鼠各3只,采用免疫组化法观察mTOR、S6K1、Gli1蛋白在脊髓组织的定位。结果:与空白对照组和溶剂对照组相比,致痒组小鼠搔抓次数增加(P<0.05),局部皮肤出现广泛炎症细胞浸润,提示建模成功。与致痒组相比,致痒+抑制剂组小鼠搔抓次数减少(P<0.05),皮肤组织炎症细胞减少。与溶剂对照组相比,致痒组脊髓组织Gli1蛋白的表达升高(P<0.05),而致痒+抑制剂组无明显变化(P>0.05)。免疫组化结果显示mTOR、S6K1、Gli1主要表达在致痒组小鼠脊髓背角浅层。结论:mTOR-S6K1-Gli1信号通路可能参与了慢性瘙痒的发生。

成人抗MDA5抗体阳性皮肌炎临床特征

目的分析成人抗黑色素瘤分化相关基因5(MDA5)抗体阳性皮肌炎(DM)的临床特征,并与抗MDA5抗体阴性DM进行比较。方法收集2021年1月1日至12月31日郑州大学第一附属医院101例成人DM患者资料,根据抗MDA5抗体阳性与否分为抗MDA5抗体阳性(MDA5^(+))组和抗MDA5抗体阴性(MDA5^(-))组,对两组数据进行比较。收集抗MDA5抗体水平定量检测结果,分析其与其他实验室指标的相关性。结果MDA5^(+)组较MDA5^(-)组初诊住院时间长,1 a内住院次数多,发热和咳嗽咳痰症状出现频率较高,差异具有统计学意义(P<0.05)。与MDA5^(-)组相比,MDA5^(+)组红细胞沉降率、涎液化糖链抗原-6(KL-6)、铁蛋白水平升高,中性粒细胞、淋巴细胞、血小板、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关分析显示,抗MDA5抗体水平与D-二聚体、免疫球蛋白G、免疫球蛋白M水平呈正相关,与肌酸激酶同工酶水平呈负相关(P<0.05)。高分辨率CT显示,MDA5^(+)组肺间质性改变较MDA5^(-)组发生率高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论MDA5^(+)DM较MDA5^(-)DM患者发热、咳嗽咳痰发生率高,肌肉受累较轻,易发生肺间质改变,病情较重,治疗较复杂。KL-6、铁蛋白、抗MDA5抗体水平可作为评估MDA5^(+)DM病情活动的指标。

斑蝥酸钠维生素B6诱导人肝癌HepG2细胞凋亡及周期阻滞

目的:研究斑蝥酸钠维生素B6(艾易舒)注射液对人肝癌HepG2细胞增殖、细胞周期与凋亡的影响,探讨其分子机制。方法:将不同浓度的斑蝥酸钠维生素B6注射液(0,1,5,10 mg·L-1)作用于人肝癌HepG2细胞12,24,48 h,MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞学技术检测细胞凋亡率及细胞周期的变化,Western blot检测蛋白激酶B(Akt),磷酸化蛋白激酶B(pAkt),B细胞淋巴瘤-2基因相关X蛋白(Bax),B细胞淋巴瘤-2基因(Bcl-2)及细胞周期依赖性激酶抑制因子p21蛋白表达变化,RT-PCR检测Bax,Bcl-2及p21 mRNA表达变化。结果:斑蝥酸钠维生素B6可显著抑制HepG2细胞的增殖,诱导细胞凋亡,具有显著的时间和浓度效应(P<0.05);同时G0/G1期细胞比例显著升高,S期细胞比例显著降低(P<0.05)。Western blot结果显示斑蝥酸钠维生素B6可下调HepG2细胞中pAkt和Bcl-2蛋白的表达,上调Bax和p21蛋白的表达(P<0.05)。RT-PCR结果显示Bax,p21 mRNA的表达水平明显升高,而Bcl-2 mRNA的表达水平下降(P<0.05)。结论:斑蝥酸钠维生素B6可抑制人肝癌HepG2细胞的增殖,诱导其凋亡并引发G0/G1期阻滞,其机制可能与斑蝥酸钠维生素B6参与调控磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路有关。

氧化型低密度脂蛋白通过Akt／mTOR／p70S6K通路诱导血管内皮细胞自噬

目的探讨氧化型低密度脂蛋白（oxidized low-density lipoprotein, oxLDL）对人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells, HUVECs）自噬和Akt/mTOR/p70S6K信号通路的影响。方法将培养的HUVECs分为oxLDL组和对照组，分别用100 μg/ml oxLDL和等体积磷酸盐缓冲液处理。在培养6 h和12 h后收集细胞。应用透射电子显微镜观察自噬小体，实时荧光定量聚合酶链反应检测微管相关蛋白1轻链3（microtubule-associated protein 1 light chain 3, LC3）和p62 mRNA表达，应用蛋白质印迹法检测LC3、p62、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR和p-p70S6K/p70S6K蛋白表达。结果与对照组相比，oxLDL处理组细胞内的自噬小体数量明显增多（P〈0.05），LC3 mRNA及蛋白表达水平均显著增高（P均〈0.05），而p62 mRNA和蛋白表达水平均显著降低（P均〈0.05）。此外，oxLDL处理组Akt、mTOR、p70S6K磷酸化蛋白表达水平均较对照组显著降低（P均〈0.01），但Akt、mTOR和p70S6K总蛋白表达水平与对照组无显著差异。结论oxLDL可通过抑制Akt/mTOR/p70S6K信号通路诱导HUVECs自噬。

miR-506-3p对卵巢癌细胞化学治疗敏感性的影响

目的探讨miR-506-3p对卵巢癌(ovarian cancer,OC)细胞化学治疗敏感性的影响及其作用机制。方法用定量反转录聚合酶链反应法检测miR-506-3p和永离有丝分裂基因A相关激酶6(never in mitosis gene A-related kinase 6,NEK6)在OC顺铂(cisplatin,DDP)耐药细胞系(SKOV3/DDP、A2780/DDP和HeyA8/DDP)及其亲本细胞系(SKOV3、A2780和HeyA8)中的表达水平;用Lipofectamine 2000分别转染构建miR-506-3p过表达SKOV3/DDP细胞和DDP敏感SKOV3细胞;四唑盐比色法测定各转染组SKOV3/DDP细胞和敏感SKOV3细胞的存活率及半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC_(50));TargetScan预测miR-506-3p的潜在靶基因,双荧光素酶实验进行验证;免疫印迹法测定转染后NEK6蛋白的表达水平。结果OC耐药细胞系中miR-506-3p低表达,NEK6高表达。转染miR-506-3p模拟物(mimic)可使SKOV3/DDP细胞和敏感SKOV3细胞存活率、IC_(50)值显著降低;敏感SKOV3细胞存活率、IC_(50)值低于SKOV3/DDP细胞,DDP对SKOV3/DDP细胞IC_(50)值是敏感SKOV3细胞的2.1倍。共转染miR-506-3p mimic和LV-NEK6逆转了miR-506-3p mimic单独转染对SKOV3/DDP细胞化学治疗敏感性的影响。说明NEK6是miR-506-3p的潜在靶基因。miR-506-3p负向调控NEK6蛋白的表达。结论miR-506-3p通过靶向抑制NEK6表达增加了OC耐药细胞的化学治疗敏感性。

基于肺癌患者8个抑癌基因启动子CpG岛甲基化构建人工神经网络筛查模型

目的分析外周血P16、死亡相关蛋白激酶(death-associated protein kinase,DAPK)、RAS相关区域家族1A(RAS association domain family protein 1A,RASSF1A)、脆性组氨酸三联体(fragile histidine traid,FHIT)、肠腺瘤性息肉病基因(adenomatous polyposis coii,APC)、人类O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(human O6 methylguanine DNA methyltransfer ase,MGMT)、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)及周期素依赖性激酶10(cyclin-dependent kinase 10,CDK10)基因启动子区CpG岛甲基化水平,探讨基于上述8个抑癌基因构建人工神经网络(artificial neural network,ANN)模型在肺癌筛查中的意义。方法选取2015-03-31-2018-11-30河南省胸科医院和郑州大学第二附属医院呼吸内科与胸外科原发性肺癌患者84例,同时选取2个医院体检健康者84例为对照组。采用实时荧光定量甲基化特异PCR(real-timefluorescent quantitative methylation-specific PCR,qMSP)法检测基因启动子区CpG岛甲基化水平。建立ANN筛查模型,Fisher判别分析模型,数据分组与ANN模型分组相同采用ROC曲线评估模型预测效果。结果小细胞肺癌组FHIT(P=0.357)、CDK10(P=0.199)、P16(P=0.275)、MGMT(P=0.887)、RASSF1A(P=0.137)、APC(P=0.248)、EGFR(P=0.083)、DAPK(P=0.993);非小细胞肺癌组FHIT(P=0.248)、CDK10(P=0.301)、P16(P=0.587)、MGMT(P=0.638)、RASSF1A(P=0.169)、APC(P=0.136)、EGFR(P=0.426)、DAPK(P=0.861)基因启动子甲基化水平高于对照组,均P<0.001。二元logistic回归分析显示年龄(OR=0.697,95%CI:0.235~2.065,P=0.315)、吸烟(OR=2.049,95%CI:1.367~3.071,P=0.031)、性别(OR=1.100,95%CI:0.568~2.131,P=0.623)、肿瘤家族史(OR=1.283,95%CI:0.759~2.168,P=0.435)、FHIT甲基化(OR=2.878,95%CI:1.921~4.313,P=0.016)、CDK10甲基化(OR=1.680,95%CI:1.241~2.273,P=0.005)、P16甲基化(OR=1.784,95%CI:1.335~2.385,P=0.010)、MGMT甲基化(OR=1.780,95%CI:1.356~2.336,P=0.013)、RASSF1A甲基化(OR=2.539,95%CI:1.427~4.517,P=0.028)、APC甲基化(OR=2.478,95%CI:1.513~4.059,P=0.001)、EGFR甲基化(OR=2.478,95%CI:1.465~4.192,P=0.026)、DAPK甲基化(OR=2.410,95%CI:1.378~4.216,P=0.011),吸烟及FHIT、CDK10、P16、MGMT、RASSF1A、APC、EGFR、DAPK基因甲基化水平均为肺癌发生的危险因素,均P<0.05。ROC曲线分析显示ANN模型AUC值0.812(95%CI:0.720~0.885),灵敏度90.48%、特异度97.24%、准确度92.86%。结论FHIT、CDK10、P16、MGMT、RASSF1A、APC、EGFR、DAPK基因启动子区CpG岛甲基化与肺癌有关,均是肺癌发生的危险因素。建立ANN筛查模型,Fisher判别分析模型为早期肺癌诊断及治疗提供参考。