汉防已甲素对慢性低氧性肺动脉高压大鼠肺内bFGF表达的影响

目的 观察汉防已甲素 ( tetrandrine,Tet)对慢性低氧大鼠肺组织碱性成纤维细胞生长因子( b FGF)表达的影响 ,探讨 Tet降低低氧性肺动脉高压的机制。方法 建立低氧性肺动脉高压大鼠模型 ,检测血流动力学 ,观察肺腺泡内动脉 ( IAPA)结构的变化 ,用免疫组化法检测肺组织 b FGF表达。结果 Tet能明显降低肺动脉压 ,抑制肺腺泡内动脉壁 b FGF表达 ,阻抑肺腺泡内动脉重建。结论 Tet通过抑制 b FGF表达 。

汉防已甲素对非小细胞肺癌放疗增敏作用的临床研究

目的:研究汉防已甲素(Tet)用于放疗增敏治疗非小细胞肺癌(NSCLC)的疗效及毒副反应。方法:86例NSCLC患者随机分为两组,每组43例。增敏组:在放疗第1天开始服用Tet,每次40mg,每日3次,直至放疗结束,照射方法采用常规分割外放射治疗,均采用15MVX线照射,总剂量66～70Gy/33～35f,6～7周完成。对照组:单纯放疗,方法同增敏组。结果:近期有效率增敏组为69.8%,对照组为41.9%,前者近期疗效明显提高且具有统计学差异(P<0.05);增敏组放疗期间血压、血糖、血常规、心电图、肝肾功能及常见放疗副反应等与对照组比较无显著性差异(P>0.05)。结论:Tet是安全有效的放射增敏剂,并可能减少照射剂量。

汉防已甲素辅助直流电场治疗急性脊髓损伤的实验研究

目的: 探讨汉防已甲素辅助直流电场治疗完全性急性脊髓损伤的疗效。方法:33只家犬随机分成 3组, 用AllenWD法致脊髓完全损伤。A组为对照组; B组汉防已甲素治疗组; C组脊髓损伤 2h静滴汉防已甲素, 脊髓损伤 6h再置入电刺激器组。观察各组伤后 1、2、3个月神经功能、皮层体感诱发电位、神经元数量、神经元截面积和尼氏体密度恢复情况。结果: B、C组上述各项指标均优于同时期A组 (P≤0. 01)。此外, C组优于B组, 差异有显著性意义。结论: 汉防已甲素能减轻组织继发性损伤, 对实验性脊髓损伤有保护作用。直流电场与汉防已甲素联合应用能更有效地协同治疗脊髓损伤, 特别是促进神经功能早期、更好地恢复, 疗效明显优于单独使用汉防已甲素。

汉防已甲素抑制人结肠癌细胞增殖与TGF-β1的关联机制研究

目的研究汉防已甲素(tetrandrine,Tet)抑制人结肠癌细胞增殖与TGF-β1的关系。方法利用细胞增殖抑制实验、定量PCR、流式细胞术、Annexin V-EGFP染色以及Western blot实验,分析Tet对HCT116细胞增殖和凋亡的影响;利用定量PCR、Western blot、细胞增殖抑制和免疫荧光实验,分析在结肠癌细胞中Tet抗结肠癌作用与TGF-β1的关系,以及TGF-β1介导Tet抗结肠癌作用可能的分子机制。结果与对照组相比,Tet抑制HCT116细胞增殖、诱导G1阻滞和细胞凋亡;Tet增加TGF-β1在HCT116细胞中的m RNA和蛋白表达水平,TGF-β1增强Tet抑制HCT116细胞增殖和促进其凋亡,抑制TGF-β1明显减弱Tet的这种作用;Tet降低Akt1/2/3的磷酸化水平,抑制PI3K增强Tet对结肠癌细胞增殖的抑制作用;TGF-β1增强Tet对Akt1/2/3磷酸化的抑制作用,而Tet降低Akt1/2/3磷酸化水平的作用可被TGF-β1抑制剂部分逆转;沉默PTEN促进Akt1/2/3磷酸化,但TGF-β1能翻转沉默PTEN对Akt1/2/3磷酸化的促进作用。结论 Tet能抑制结肠癌细胞增殖和促进凋亡,机制可能与其通过促进TGF-β1表达,抑制Akt1/2/3磷酸化有关。

汉防已甲素、罗通定及川芎嗪对肿瘤细胞株KBV200多药耐药性逆转作用的研究

目的探讨中药汉防已甲素、罗通定及川芎嗪逆转肿瘤细胞株KBV200多药耐药性作用。方法用四唑盐比色法检测细胞株对药物敏感性,用逆转录多聚酶链反应检测耐药株用药前后肿瘤多药耐药基因的表达。结果在最适逆转浓度下,汉防已甲素(10-6mol/L),罗通定(10-5mol/L)对KBV200耐药性有明显逆转作用,川芎嗪(10-4mol/L)有一定作用,使长春新碱对耐药细胞株KBV200半数致死量由1 122nmol/L分别降至32 nmol/L、35.8nmol/L及541nmol/L。在上述浓度下,3种逆转剂分别与长春新碱(400nmol/L)合用,细胞存活率分别为0.32±0.1、0.29±0.05、0.56±0.1,较对照0.76±0.05有显著差异(P<0.001)。在同样浓度下,3种逆转剂都能使耐药株肿瘤多药耐药基因mRNA表达降低,但与对照比,无显著性差异。结论汉防已甲素、罗通定逆转肿瘤多药耐药性效果好,川芎嗪有一定逆转作用,它们不良反应小,有良好临床应用前景。

汉防已甲素对肝细胞生长增殖的影响

采用流式细胞技术观察不同浓度的汉防已甲素（Ｔｅｔ）对大鼠ＲＢＬ肝细胞生长增殖的影响。结果表明，随着Ｔｅｔ浓度的增加（１０～６０μｇ／ｍｌ），Ｇ２→Ｓ期的进程加速，且Ｓ期ＤＮＡ含量及Ｇ１和Ｇ２期蛋白质含量增加呈一定的量效关系。经加入外源性Ｃａ￣（２＋）及ＡＴＰ证实Ｔｅｔ促进肝细胞生长增殖的作用与阻断Ｃａ￣（２＋）内流无关。提示具有钙通道阻断作用的Ｔｅｔ可促进肝细胞生长增殖。

汉防已甲素对大鼠实验性脑梗塞的影响

目的和方法：选用热凝造成大脑中动脉阻断（ＭＣＡＯ）而致实验性大鼠脑局灶性缺血模型，观察汉防己甲素（ｔｅｔｒａｎｄｒｉｎｅ，ＴＥＴ）对大鼠脑局灶性缺血的防治作用。结果：ＴＥＴ组用药七天，脑梗塞范围明显小于缺血组，缺血区脑组织Ｃａ２＋、Ｎａ＋、过氧化脂质（ＬＰＯ）、血浆血栓素Ｂ２（ＴＸＢ２）明显低于缺血组，而超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）明显高于缺血组，６－酮－前列腺素Ｆ１α（６－ｋｅｔｏＰＧＦ１α）无显著改变，ＴＸＢ２／６－酮（Ｔ／Ｋ）比值明显低于缺血组。结论：ＴＥＴ具有对大鼠ＭＣＡＯ局灶性脑缺血有效的防治作用，其机制可能与减少脑组织缺血区Ｃａ２＋、Ｎａ＋、ＬＰＯ含量，降低ＴＸＢ２，使Ｔ／Ｋ比值趋于正常有关。

汉防已甲素对肺间质胶原增生的实验研究

肺纤维化(PF)的主要病理基础为肺间质弥漫性进行性胶原纤维增生。近年的研究表明,中药粉防的提取成份——汉防已甲索(Tet)具有抗纤维化作用。本实验旨在观察 Tet 对博莱霉索(BLM)诱导的实验性PF 肺胶原含量及动脉血氧分压(PaO_2)的作用。

汉防已甲素对大鼠急性缺血性肾衰的保护作用

目的 研究汉防已甲素对急性缺血性肾衰的保护作用。方法 术前 ３ｄ开始每天 １次及术前 １ｈ ｉｇ汉防已甲素 ２０ｍｇ／ｋｇ、４０ ｍｇ／ｋｇ。然后制作大鼠肾脏缺血再灌注致急性缺血性肾衰模型，测定肾组织中 ＭＤＡ、ＳＯＤ、Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶和Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶含量及切片观察肾脏形态。结果 缺血6０ｍｉｎ再灌注２０ｍｉｎ后肾组织中 ＭＤＡ明显升高，ＳＯＤ、Ｎａ＋、Ｋ＋－ＡＴＰ酶和 Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶均显著降低。用药组 ＭＤＡ显著下降，ＳＯＤ和 ＡＴＰ酶均明显升高。病理结果提示再灌注组肾小管上皮明显变性，而用药组损害明显减轻。结论 汉防已甲素对急性缺血性肾衰有一定的保护作用。

汉防已甲素对人食管癌细胞株Eca-109增殖抑制和诱导凋亡的机制研究

目的探讨汉防已甲素(Tet)对人食管癌细胞株Eca-109增殖和凋亡的影响。方法将人食管癌细胞株Eca-109设不同浓度Tet处理组,并设立空白对照组。采用MTT法观察Tet对Eca-109细胞体外生长的抑制作用;采用透射电镜、流式细胞术观察Tet对Eca-109细胞凋亡的影响;采用Western blotting、RT-PCR观察Tet对Eca-109细胞凋亡相关蛋白和mRNA表达的影响。结果 Tet对Eca-109细胞的抑制作用呈时间-剂量依赖性(P<0.05),Tet干预48、72h Eca-109细胞的IC50分别为(20.886±0.215)μmol/L和(14.352±0.102)μmol/L。30μmol/L Tet处理细胞48h后,电镜下可见细胞缩小,核裂解,凋亡小体形成。分别以20、30、40μmol/L的Tet干预Eca-109细胞48h后,流式细胞术显示早期凋亡率依次为0.12%、0.34%和0.31%,中晚期凋亡率依次为4.02%、7.43%和77.42%;RT-PCR和Western blotting显示,Bcl-2蛋白和mRNA表达均随Tet浓度的增加而逐渐下调(P<0.05),Bax蛋白和mRNA表达均随Tet浓度增加而逐渐上调(P<0.05),而p53蛋白水平在处理前后无明显变化。结论 Tet可以抑制食管癌Eca-109细胞生长,促进其凋亡,其作用机制可能与下调Bcl-2表达,上调Bax表达有关。

汉防已甲素注射液与呋塞米注射液存在配伍禁忌

汉防已甲素注射液（商品名：亿希安），适用于关节痛、神经痛；小剂量放射合并用于肿瘤、肺癌。汉防已甲素注射液不宜与化疗药物阿霉素并用。呋塞米注射液（又名速尿）适用于治疗充血性心力衰竭、肝硬化、肾脏疾病。汉防已甲素注射液与呋塞米注射液的配伍禁忌情况在《459种中西药注射液配伍变化及临床应用检索表》中无记载。在临床工作中笔者发现汉防已甲素注射液与呋塞米注射液存在配伍禁忌。

汉防已甲素对四氧化碳损伤大鼠肝的保护作用

本研究发现,汉防已甲素一次性预处理能使大鼠肝脏对毒性物质的损伤产生保护作用。用四氯化碳造成大鼠急性肝损伤模型,若预先2小时腹腔注射汉防已甲素(50mg/kg),则血清谷丙转氨酶、胆红素及死亡率都显著降低,肝组织学检查也显示损伤程度明显减轻。

汉防已甲素对扩张型心肌病心力衰竭患者血流动力学影响的研究

目的观察静脉注射汉防已甲素（90~120mg）对扩张型心肌病心力衰竭患者血流动力学影响,评价其临床疗效。方法采用Swan-Ganz导管的实验方法,测定用药前及用药后30、60、90、120s血流动力学参数的变化。结果扩张型心肌病心力衰竭患者静注汉防已甲素后5min,SAP（收缩压）、DAP（舒张压）、MAP、RAP（右房压）、TSR、TPVR、PVR开始降低,30~60min时,TSR显著降低（P〈0.01）,SAP、DAP、MAP显著降低（P〈0.05）,90min后作用开始减弱,作用持续120min恢复到用药前水平。30~60min,MPAP（平均肺动脉压）降低非常显著（P〈0.01）,PCWP（肺小动脉楔压）降低显著（P〈0.05）。以上参数降低的同时,CO、CI、SVI、SWI升高,用药后30~60minCO、CI较用药前显著升高。结论汉防已甲素降低扩张型心肌病心力衰竭患者的RAP、SAP、DAP、MAP、PCWP、MPAP、TSR、TPVR、PVR及SAP×HR,提高CO、CI、SVI、SWI,降低心脏前后负荷及心肌耗氧量,使心功能改善,对充血性心力衰竭患者有良好的血流动力学作用。

汉防已甲素对电刺激心脏去甲肾上腺素释放的影响

目的研究汉防已甲素对电刺激心脏去甲肾上腺素释放的影响。方法运用经典的和改良的Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ方法，观察离体和体灌流下的豚鼠心脏，在电刺激左颈胸交感神经节和电场刺激下，汉防已甲（Ｔｄ）对心脏交感神经递质释放的影响。用高压液相色谱仪测定所收集的心脏流出液中去甲肾上腺素（ＮＡ）及 在神经细胞内的代谢产物二羟基苯乙二醇（ＤＯＰＥＧ）的含量。结果在含０．

汉防己甲素缓释微囊肺靶向给药系统的研究

目的 制备肺靶向汉防己甲素缓释微囊 ,以提高药物降低肺动脉高压的作用并降低其毒性。方法 汉防己甲素用喷雾干燥 热变性微囊化 ,用UV测定汉防己甲素微囊的体外释放特性 ,用反相高效液相测定小鼠体内分布 ,经大鼠肺动脉插管测定其压力。结果 汉防己甲素微囊外观呈圆球形 ,带正电荷 ,载药量 37 88% ,微囊的体外释药规律符合Higuchi方程。小鼠肺部的药物浓度明显提高 ,平均滞留时间延长 ,大鼠肺动脉高压的降压作用从15 7 1h延长到 2 2 3 6h ,体内降压百分数与体外释药百分数之间具有相关性。结论 汉防己甲素经喷雾干燥 热变性微囊化可使其高效。

汉防己甲素对人鼻咽癌CNE1和CNE2细胞株的放疗增敏作用

目的:探讨最大非毒性剂量汉防己甲素(tetrandrine,Tet)对人鼻咽癌细胞株CNE1和CNE2的放疗增敏机制。方法:分别采用最大非毒性剂量Tet(对CNE1细胞为1.5μmol/L;对CNE2细胞为1.8μmol/L)、4 Gy放疗和最大非毒性剂量Tet联合放疗处理CNE1和CNE2细胞;流式细胞术检测各组细胞周期分布,Western blot检测各组细胞γ-H2AX、cleaved caspase-3、p-CDC25C、CDK1、p-CDK1、cyclin B1、ERK和p-ERK的蛋白水平。结果:最大非毒性剂量Tet联合放疗后可上调CNE1和CNE2细胞中γ-H2AX的表达。放疗组CNE1和CNE2细胞G_2/M期的比例分别为(18.09±0.42)%和(18.48±1.32)%,联合处理组CNE1和CNE2细胞G_2/M期的比例降为(15.88±1.04)%和(13.80±0.82)%,与放疗组比较差异有统计学意义(P<0.05)。联合处理可增加放疗所致的cleaved caspase-3的蛋白水平(P<0.05)。不同浓度Tet处理CNE1和CNE2细胞后,p-CDC25C和p-CDK1的蛋白水平随Tet浓度增加而升高(P<0.05),CDK1的表达无明显改变;最大非毒性剂量Tet不影响p-CDC25C、p-CDK1和CDK1的蛋白水平。在CNE1和CNE2细胞中,联合处理可明显降低放疗引起的p-CDC25C和p-CDK1的蛋白水平(P<0.05),上调放疗后cyclin B1的表达,而对总CDK1的表达无明显调节作用;联合处理可显著抑制放疗所致的pERK蛋白水平(P<0.05)。结论:最大非毒性剂量Tet可以增加放疗引起的CNE1和CNE2细胞的DNA断裂及细胞凋亡,其放疗增敏的机制可能与Tet调控ERK/CDC25C/CDK1/cyclin B1通路、去除放疗导致的G2/M期阻滞有关。

汉防己甲素诱导人胃癌BGC-823细胞自噬和凋亡的作用及机制

目的观察汉防己甲素诱导人胃癌BGC-823细胞自噬与凋亡的作用,并探讨两者发生以及相互关联的分子机制。方法用不同浓度的汉防己甲素作用于人胃癌BGC-823细胞,用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测细胞增殖率;流式细胞术检测细胞凋亡情况;Western-blot法检测各组细胞Bcl-2和自噬标记蛋白LC3、Beclin1的表达,MDC自噬特异性染料荧光染色观察自噬泡的聚集。结果 TET对BGC-823细胞的生长有显著抑制作用,呈明显的时间、剂量依赖性;TET可诱导BGC-823细胞发生凋亡;TET可诱导BGC-823细胞发生自噬,自噬作用在8、10μg/mL TET给药组达到高峰,后随着浓度的增加逐渐下降;在TET给药前用3-甲基腺嘌呤(3-MA)阻断自噬后,低浓度(8μg/mL)TET诱导的凋亡率明显升高;高浓度(20μg/mL)TET诱导的凋亡率差别无统计学意义。结论 TET能明显抑制人胃癌BGC-823细胞的生长,并诱导其发生凋亡和自噬。TET诱导的自噬作为保护性机制,可发挥拮抗凋亡的作用。

汉防己甲素抗过敏作用的观察

汉防已甲素具有广泛的抗过敏作用,能抑制大鼠PCA与致敏豚鼠离体回肠的过敏性收缩。能对抗过敏介质的作用,如抑制组胺、乙酰胆碱引起的豚鼠哮喘和离体豚鼠回肠的收缩以及5-羟色胺引起的大鼠皮肤血管通透性增加。同时,还能抑制过敏介质的释放,如抑制致敏豚鼠肺由抗原引起的过敏介质或SRS-A的释放以及由右旋糖酐诱发的大鼠腹腔肥大细胞组胺的释放。初步认为它不仅是一个过敏介质拮抗剂,也是过敏介质阻释剂。

汉防已甲素抑制兔Epi-LASIK术后上皮下雾状混浊形成的组织病理研究

目的 观察汉防已甲素对微型号角膜刀法准分子激光上皮瓣下角膜磨镶术（Epi-lasik）术后角膜上皮下角雾状混浊（Haze）的治疗效果。方法 健康新西兰大耳兔27只,双眼行-10.00D激光切削的Epi-LASIK手术,采用自身对照按眼别随机分3组,分别为阴性对照（negative control,NC）组、汉防已甲素（Tetrandrine,Tet）组、艾氟龙（Fluoromethalone,FML）组,每组18只眼。定期在裂隙灯下对兔Epi-LASIK术后Haze进行分级评估。分别于术后0.5月、1月、2月共3个时间点每组随机选取6眼,取角膜行光镜、透射电镜、胶原纤维染色等方法观察。结果 术后0.5月和1月,Haze分级水平与Ⅲ型胶原表达结果显示：组间比较差异均有统计学意义（P〈0.05）,Tet组和FML组Haze分级水平明显低于NC组（P〈0.01）,但Tet组和FML组相比,差异无统计学意义（P〉0.01）;术后2月组间整体比较差异无统计学意义（P〉0.05）;Ⅰ型胶原在术后各时间点的表达,组间差异均无统计学意义（P〉0.05）;HE染色和透射电镜检测结果发现,各组不同时间点上皮层结构清晰完整,而Tet组和FML组上皮下手术区前基质层增生反应程度明显弱于NC组,提示这两种药物对成纤维细胞的增生均有抑制作用。结论 Tet通过抑制基质层角膜细胞增殖和降低Ⅲ型胶原表达,能有效抑制兔Epi-LASIK术后Haze形成,其疗效与FML相似。