江浙蝮蛇毒镇痛组分对吗啡依赖大鼠尾状核神经肽的调控作用

目的:研究江浙蝮蛇毒镇痛C4组分对大鼠尾状核中神经肽水平的调控作用。方法:应用微透析技术,探针定位于大鼠尾状体,以人工脑脊液透析,HPLC检测亮氨酸脑啡肽、β-内啡肽和P物质的含量,动态监测其变化。结果:在吗啡依赖大鼠给予C4组分后,尾状核亮氨酸脑啡肽含量显著增高,为可乐定组的1.5倍,并持续作用8h以上,而β-内啡肽和P物质含量变化较小。结论:C4组分主要作用于亮氨酸脑啡肽,通过提高其含量发挥镇痛作用。

江浙蝮蛇毒C_4组分的分离纯化及药理性质研究

目的:分离筛选江浙蝮蛇毒的C4组分,研究其毒性、机体耐受性和依赖性等药理学性质。方法:采用离子交换和分子筛,以柱层析法分离蛇毒C4组分,并用急性毒性实验和自然戒断实验、耐受性实验考察其毒性、依赖性和耐受性。结果:经分离筛选后得到C4组分,并获得蛇毒C4组分的毒性作用、机体耐受性和依赖性等性质。结论:C4组分作为江浙蝮毒中的一个有效组分,在一定剂量范围内安全性良好,未发现耐受性和依赖性,值得进一步开发利用。

精制抗江浙蝮蛇毒血清与韩国三种蝮蛇毒的交叉中和作用

目的 考察本所精制抗江浙蝮蛇毒血清能否中和三种韩国蝮蛇毒及其中和能力。方法 用免疫双扩散法鉴定抗江浙蝮蛇毒血清与三种韩国蝮蛇毒交叉反应。并根据动物实验结果计算出每毫升抗血清中和三种韩国蝮蛇毒的致死毒及出血毒的量。结果 中国精制抗江浙蝮蛇毒血清 1.0ml可分别中和韩国黑眉蝮蛇毒、短尾蛇毒和乌苏里蝮蛇毒液态原毒的致死毒 1、3.9和 2 .5mg ;同时可分别中和上述 3种蛇毒蛋白 0 .8、3.15和 2 0mg中和出血毒。结论 中国精制抗江浙蝮蛇毒血清具有中和上述三种韩国蝮科蛇毒的作用。

江浙蝮蛇毒镇痛组分的中枢作用机制研究

目的 探讨江浙蝮蛇毒镇痛C4组分的可能作用途径。方法 通过C4组分与阿托品、利血平、纳络酮药物的相互作用 ,探索其与乙酰胆碱受体、囊泡递质、阿片受体间可能的作用 ;通过脊髓化鼠实验、侧脑室给药和足跖定压实验揭示其中枢性作用 ;通过不同脑区的组织匀浆测定神经肽含量 ,考察C4组分对不同中枢部位的作用大小。结果 C4组分不通过乙酰胆碱受体作用 ,而与阿片受体相关 ,它通过中枢起效 ,主要作用部位集中在丘脑、尾状核和红核等 ,对亮氨酸脑啡肽的含量有刺激增高作用。

江浙蝮蛇毒C_4组分的中枢镇痛作用及其机理研究

目的:研究江浙蝮蛇毒镇痛C4组分的中枢镇痛作用并初步探讨其镇痛机理。方法:通过侧脑室给药、脊髓化鼠镇痛实验和足跖定压刺激试验研究C4组分的镇痛作用部位;通过C4组分与阿托品、利血平、纳络酮药物的相互作用,研究其与乙酰胆碱受体、阿片受体间的作用关系。结果:C4组分的镇痛部位主要在脑中枢,且C4组分不通过乙酰胆碱受体作用,而与阿片受体相关。结论:江浙蝮蛇毒C4组分镇痛通过中枢起效,提示江浙蝮蛇毒C4组分可能与增加内源性阿片肽系统的活动有关。

正交晶型江浙蝮蛇毒碱性磷脂酶A2初步结晶学研究

The basic phospholipase A2 from the venom of Agkistrodon halys pallas possesses the ability to cause hemolysis in contrast to the other two phospholipase A2 from the same venom. A new form of crystals of this enzyme was grown. The crystals belong to space group of P212121 with unit cell parameters of a=9. 175nm, b=10.080nm , c=2.287nm.The crystals diffract to high resolution, and are suitable for detailed structural studies. The data were collected up to 0.25nm resolutiorl using synchrotron radiation-imaging plate-Weissenberg camera system. Preliminary analysis reveals the presence of two molecules in the asymmetric uint and the molecule may pack with the smallest dimension approximately parallel to the c axis. The new crystal form is more attractive than the monoclinic one previously reported for crystallographic structure determination as it contains fewermolecules in the asymmetric unit.

江浙蝮蛇毒的质量分析

目的 :建立江浙蝮蛇毒的质量分析方法。方法 :采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对江浙蝮蛇毒进行定性鉴别 ,以Lowry法测定江浙蝮蛇毒的总蛋白量。结果 :聚丙烯酰胺凝胶电泳法能较好的鉴别江浙蝮蛇毒 ;Lowry法测定 ,表明江浙蝮蛇毒总蛋白量在 2 5 μg·mL-1～ 2 5 0 μg·mL-1范围内有较满意的线性关系 ,回归方程为Y =0 .0 14 7+ 1.4 5 5 3X ,r=0 .9992 ,平均回收率为 10 0 .0 9% ,RSD =1.76 % (n =6 )。结论 :上述方法简便、精确 ,可以作为江浙蝮蛇毒的质量控制方法。

江浙蝮蛇毒镇痛组分对小鼠镇痛的药理实验研究

目的 :将分离纯化的江浙蝮蛇镇痛组分进行小鼠镇痛实验 ,研究其毒性及其镇痛效果。方法 :采用小鼠热板法和醋酸扭体法 ,对分离的江浙蝮蛇毒各组分进行实验 ,经Bliss法计算LD50 和ED50 ,测定治疗指数筛选最佳镇痛组分。结果 :筛选出 3、6号组分 ,其治疗指数分镇痛为 5 5 .32、17.35。结论 :3号组分具有较高的安全性和有效性 ,为江浙蝮蛇毒最佳镇痛组分。

江浙蝮蛇毒对体外培养人滑膜细胞凋亡的影响

目的探讨江浙腹蛇毒(AHV)诱导类风湿性关节炎(RA)患者滑膜细胞凋亡的作用及对相关蛋白Caspase-3表达的影响。方法 AHV处理培养的滑膜细胞后,采用MTT比色法检测AHV对滑膜细胞增殖的抑制作用,并采用流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率,以免疫组织化学法检测Caspase-3蛋白的表达。结果 MTT的检测结果显示5μg/mL AHV处理组滑膜细胞增殖抑制率达67.2%,且与时间、剂量具有正相关关系(P<0.05),AHV体外作用滑膜细胞24 h的IC50为3.508μg/mL。流式细胞仪结果显示,与对照组相比,AHV各剂量组凋亡率明显增加(P<0.05),并与剂量呈正相关。AHV体外作用滑膜细胞24 h时出现了明显的Caspase-3蛋白表达,其蛋白表达率明显高于对照组。结论 AHV对滑膜细胞具有较强的增殖抑制作用,细胞凋亡率明显增加可能与AHV诱导滑膜细胞Caspase-3活化相关。

江浙蝮蛇(Agkistrodon halys Pallas)毒的抑菌作用及其抑菌组分L-氨基酸氧化酶的分离纯化

我们用平皿测活法研究了江浙蝮蛇毒对真菌和大肠杆菌生长的抑制作用,并对其抗细菌的组分进行柱层析分离纯化,得到组分单一的LAO:不仅有抑菌作用还有L-氨基酸氧化酶的活性。纯化后LAO的比活力为808U/mg。蛇毒经酸性聚丙烯酰胺电泳后测抑菌活性发现有3个抑菌组分(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),LAO为抑菌组分Ⅱ。

两种蝮蛇毒的蛋白质组凝胶内差异显示电泳分析

目的:建立具有高分辨率和稳定性的江浙蝮蛇毒与白眉蝮蛇毒蛋白质组的双向电泳图谱,并对其进行差异蛋白质组分析。方法:取江浙蝮蛇毒与白眉蝮蛇毒,分别用Cy3和Cy5标记,将所有的实验样品等量混合而组成内标,用Cy2标记,上样于同一胶中进行电泳分离,经不同光激发下扫描得到不同样品的蛋白质组图谱。所获得的图谱经DeCyder软件分析。结果:江浙蝮蛇毒与白眉蝮蛇毒共有457个蛋白质表达水平相似;较白眉蝮蛇毒,江浙蝮蛇毒有97个蛋白质表达水平显著较好,另外119个蛋白质表达水平显著较低。结论:江浙蝮蛇毒与白眉蝮蛇毒所含蛋白质组具有较大差异,应用时应加以区别。

几种蛇毒抑菌作用的比较

本文通过平板扩散实验观察了蛇岛蝮蛇毒、长白山白眉蝮蛇毒、江浙蝮蛇毒及中华眼镜蛇毒对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的抑菌作用。结果表明四种蛇毒对试验菌株均有不同程度的抑菌作用；其中白眉蝮蛇毒对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为０．６３ｍｇ／ｍｌ，对大肠杆菌为５．０ｍｇ／ｍｌ。抑菌作用与蛇毒中Ｌ—氨基酸氧化酶的活力有相关性。利用ＣＭ—ＳｅｐｈａｄｅｘＣ－２５ＳｅｐｈｄｅｘＧ—７５一对江浙蝮蛇毒的抑菌成份进行初步的柱层析分离，从纯化的各组份看，Ｌ—氨基酸氧化酶活力高的其抑菌活性也高。

蝮蛇抗栓酶3号治疗银屑病5例

我院应用中国医科大学老年病防治中心提供的江浙蝮蛇抗栓酶3号(Svet—3)治疗银屑病5例,现将临床疗效报告如下。 5例均为住院病人。男3例,女2例,年龄24～55岁,病程15天～23年。诊断根据临床表现或既往病史,临床分型为寻常型4例(均为进行期),红皮病型1例。患者确诊后,查血小板计数、出凝血时间及纤维蛋白原,正常者用1/250浓度Svet-3皮试,阴性者以100U加生理盐水250ml静滴。

蝮蛇抗栓酶治疗皮肤病

蝮蛇抗栓酶为一种酶制剂药物,70年代末,中国医科大学郝文学教授等首先从蝮蛇毒液中提取成功。现代药理学研究证实,蝮蛇抗栓酶包括精氨酸脂酶、蛋白水解酶、激肽释放酶、磷酸脂酶A2等17种酶类。并含有神经生长因子等多种生物活性物质。国内的尖吻蝮蛇毒“去纤酶”、东北白眉蛇毒“清栓酶”、江浙蝮蛇毒“江浙蝮蛇抗栓酶”等蛇毒抗凝剂药物名称不尽相同,其主要成分和蝮蛇抗栓酶一致。蝮蛇抗栓酶具有抗凝、抗栓、溶栓、扩张血管、增强免疫功能及抗炎等许多作用,临床主要用于血栓性疾病的治疗。