汽车尾气提取物对hOGG1低表达细胞的氧化损伤作用

[目的]研究汽车尾气提取物对DNA碱基切除修复基因hOGG1低表达细胞的氧化损伤作用,为揭示汽车尾气提取物通过氧化损伤导致肺癌的发病机制提供更有力的证据。[方法]以肺腺癌A549细胞和通过稳定转染hOGG1核酶而使hOGG1低表达的A549-R细胞为研究对象,用MTT试验铡定汽车尾气提取物处理后两种细胞的生存能力;彗星试验检测两种细胞DNA损伤与修复的差异;并通过测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,比较两种细胞抗氧化水平。[结果]A549-R细胞的IC50显著低于A549细胞(P<0．05);汽车尾气提取物作用下两种细胞均有不同程度DNA损伤,A549-R细胞的拖尾率和DNA迁移长度显著大于A549细胞(P<0．05);损伤后A549细胞修复发生较A549-R快,与A549细胞相比A549-R细胞更不易修复;汽车尾气提取物作用下两种细胞内SOD及GSH-Px活性均下降,A549-R细胞的抗氧化水平较A549细胞更低。[结论]hOGG1低表达使肺腺癌细胞:DNA修复能力降低,从而使其对汽车尾气提取物的敏感性增强,汽车尾气提取物可能通过氧化损伤途径导致肺癌的发生。

基因重组酵母测评系统在筛选环境样品雌激素活性中的应用研究

目的用重组酵母测评系统研究DDTs和汽车尾气提取物的拟雌激素活性。方法将终浓度为10-9～10-15mol/L的17β-雌二醇、终浓度为10-4～10-9mol/L的DDTs(p,p’-DDT、o,p’-DDT、p,p’-DDD、p,p’-DDE)和终浓度为0.25～8.00ml/ml的汽车尾气提取物加入酵母细胞培养液,作用4h,通过定量测定β-半乳糖苷酶活力表达受试物的雌激素作用强度。结果DDTs是一类可直接象配体一样与雌激素受体(ER)结合并发挥雌激素效应的环境雌激素,单独作用时o,p’-DDT雌激素活性较高,p,p’-DDE的雌激素活性较低;汽油燃料车尾气在终浓度为2.00～4.00ml/ml时,其β-半乳糖苷酶活力与DMSO对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05),天然气尾气各剂量组的β-半乳糖苷酶活力与对照组(蒸馏水)相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论DDTs是经ER介导的环境雌激素,其中o,p’-DDT的拟雌激素活性最高。汽车尾气提取物中汽油燃料车尾气具有弱雌激素活性,天然气燃料车尾气未检出雌激素活性。