溶血和黄疸标本对不同核酸提取方法影响的比较

目的比较溶血和黄疸标本对磁珠法、一步法和沉淀煮沸法三种不同核酸提取方法 HBV DNA检测结果的影响。方法制备含有不同浓度梯度血红蛋白或总胆红素的血清,使其HBV DNA浓度相同;检测过程中除核酸提取方法不同外,其余操作完全相同,进行实时荧光定量PCR检测,比较三种核酸提取方法对不同程度的溶血和黄疸标本的抗干扰能力。结果当Hb≤0.5g/L时,3种方法均不受影响,Hb=5.0g/L时,一步法与沉淀煮法呈假性升高,磁珠法受影响不明显;Hb=50.0g/L时,3种方法均受影响明显,一步法与沉淀煮沸法可被抑制呈阴性。不同浓度的总胆红素对磁珠法与沉淀煮沸法无明显影响,对一步法产生的影响显著,其检测结果可通过调整结果判断部分参数得到修正。结论在相同检测条件下,磁珠法对溶血和黄疸的抗干扰能力最好,沉淀煮沸法次之。