聚合酶链反应和沉淀集菌法检测结核杆菌的比较

肺结核病是严重危害我国劳动人民身体健康的传染病之一,近年来的发病率日趋上升.查找痰液中结核杆菌在临床上具有重要意义.传统的检验方法如涂片镜检法虽简便但敏感性低,特异性差,培养法比较费时,Kary Muuis于1985年发明的PCR法,是根据DNA复制原理而设计的一种体外核酸扩增技术.能直接检测痰标本中的结核菌,被国内外应用于肺结核病的快速诊断.我们用PCR法和沉淀集菌法对57例病人的痰标本检测结果加以比较,总结报道如下.

离心沉淀集菌涂片法检查痰内结核分枝杆菌

目的 建立一种操作简单、阳性检出率高的痰涂片结核分枝杆菌检查方法。方法 采用离心沉淀集菌涂片技术 ,检测 5 3例肺结核患者痰内结核分枝杆菌 ,与漂浮集菌涂片、直接涂片法进行比较。结果 5 3例肺结核患者痰内结核分枝杆菌检出率改良离心沉淀集菌涂片法为 6 2 .3% ,漂浮集菌涂片法为 39.6 % ,直接涂片法为 45 .3%。结论 离心沉淀集菌涂片法痰内结核分枝杆菌检出率显著高于漂浮集菌涂片法和直接涂片法 ,值得推广应用。

集菌涂片染色法在检测痰液中抗酸杆菌的临床应用

目的探讨离心沉淀集菌法对痰涂片抗酸染色法检查结核分枝杆菌阳性率的影响。方法计算2015-2018年江苏省使用离心沉淀集菌法的南京、无锡和苏州3市与本省其他未使用该方法地区的涂阳病人发现率,采用描述性流行病学方法比较不同年份、城市和不同方法涂阳病人发现率。结果采用离心沉淀集菌法的南京、无锡和苏州市,2015-2018年平均涂阳病人占总病人数分别为39.11%、38.34%和40.01%,高于其他未使用地区(平均32.20%),差异均有统计学意义(P值均<0.05);与未使用该方法地区相比,使用该方法地区平均涂阳病人发现率显著升高(P值均<0.05)。结论离心沉淀集菌法可有效增强痰标本抗酸杆菌染色镜检的灵敏度。该方法相对简便、易于操作,提高了含菌量低标本的检出率,适合在基层实验室推广。

低温高速离心沉淀集菌涂片法查分枝杆菌与直接涂片法查分枝杆菌的比较研究

目的探析比较低温高速离心沉淀集菌涂片法查分枝杆菌与直接涂片法查分枝杆菌的检测价值。方法选取我院2011年1月至2014年12月治疗的100例结核病患者,分为两组,分别给予低温高速离心沉淀集菌涂片法与直接涂片法进行分枝杆菌检测,比较两种方法的检验阳性率。结果观察组患者的阳性检出率为70%,对照组为30%,差异有统计学(P<0.05)。初诊过程中,观察组患者的阳性检出率为76.3%,对照组为34.2%,差异性显著(P<0.05)。随访过程中,观察组患者的阳性检出率为66.7%,对照组为25%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论低温高速离心沉淀集菌涂片法提高结核患者的阳性检出率,优于直接涂片法,具备良好的检测统计学意义。

采用快速离心沉淀法检测初诊肺结核患者痰内抗酸杆菌

目的:与罗氏培养法进行比较,分析快速离心沉淀集菌涂片法,检测初诊肺结核患者痰液抗酸杆菌的效果,指导以后结核病的细菌学检查。方法:对90例来我院就诊且诊断为肺结核的初诊患者收集痰液,作快速离心沉淀集菌涂片和罗氏培养。结果:初诊病人离心沉淀集菌涂片法阳性率为73.3%,罗氏培养法阳性率为66.7%;两种方法检出率的差异无显著性(χ2=0.95,P>0.05)。结论:对于初诊病人,留取3份痰标本作快速离心沉淀集菌涂片可以达到和罗氏培养相接近的阳性检出率。

3种结核分枝杆菌检测方法的比较研究

目的比较沉淀集菌法、罗氏培养法和聚合酶链反应(PCR)方法检测结核分枝杆菌的临床价值。方法收集2012年6月至2013年5月张家港市第一人民医院临床确诊且经抗结核治疗两月后结核患者的痰标本102份,用以上3种方法进行平行检查。结果 102份标本中,沉淀集菌法检测结果阳性标本92份,阳性率90.19%,罗氏培养法阳性48份,阳性率47.06%,PCR法阳性77份,阳性率75.49%。沉淀集菌法与罗氏培养法的符合率为56.86%,而PCR法与沉淀集菌法符合率为81.37%,与罗氏培养法符合率为61.76%。结论 3种方法联合运用,可弥补单独采用一种方法阳性率低的缺点,从而提高检测的准确度。

硝酸咪康唑栓中控制菌检查方法的研究

目的建立硝酸咪康唑栓中控制菌铜绿假单胞菌及金黄色葡萄球菌的检查方法。方法采用离心沉淀集菌法与离心薄膜过滤法试验。结果离心沉淀集菌法能有效的消除该药物对铜绿假单胞菌的抑菌成分;离心-薄膜过滤法可消除其对金黄色葡萄球菌的抑菌成分,使待测菌得以检出。结论所建立的控制菌检查方法准确可靠、重现性好。

风油精微生物限度检查法——控制菌的验证

目的选择正确的除去风油精中的抑菌成分的检验方法,可以提高风油精中微生物的检出率,保证结果的正确性与可信性。方法用离子沉淀集菌法来进行实验。结果离心沉淀集菌法可以除去风油精中的抑菌成分。结论用离心沉淀集菌法的方法除去风油精中的抑菌成分,进行微生物限度检查可得到正确可信的结果。

3种涂片方法查痰内抗酸分枝杆菌结果比较分析

痰抗酸分枝杆菌阳性是诊断肺结核病的重要依据.检验方法有痰涂片和痰培养.笔者应用离心沉淀集菌涂片法对3种方法比较,现将结果报告如下.

复方洁霉素滴鼻液细菌微生物限度验证

目的建立复方洁霉素滴鼻液的微生物检查法。方法通过对供试品的离心处理后,联合培养基稀释法,建立复方洁霉素滴鼻液微生物限度验证方法。结果采用上述实验方法,5种验证用菌的回收率都在70%以上。结论检查复方洁霉素滴鼻液微生物限度可用离心沉淀集菌法联合培养基稀释法。

硫酸双肼屈嗪微生物限度检查方法的验证

目的:建立硫酸双肼屈嗪微生物限度检查方法。方法:对硫酸双肼屈嗪进行试验菌回收率测定,分别使用5种试验菌验证。采用试验组与阴性对照组来验证控制菌的检查方法。结果:采用离心沉淀集菌-培养基稀释法及常规法,各试验菌在样品中回收率均高于70%。采用离心沉淀集菌法可有效检出大肠埃希菌。结论:硫酸双肼屈嗪具有较强的抑菌作用,微生物限度检查方法可以采用离心沉淀集菌-培养基稀释法进行细菌数测定;采用常规法进行霉菌及酵母菌数测定;采用离心沉淀集菌法进行控制菌检查。

含酚炉甘石洗剂微生物限度检查方法学的验证

目的为建立含酚炉甘石洗剂微生物限度检查方法提供依据。方法利用悬浮于供试液中的药物颗粒及细菌的质量不同,以离心沉淀集菌法消除供试液中的抑菌成分,避免其对实验的干扰。结果该方法能有效去除含酚炉甘石洗剂的抑菌成分,使阳性试验菌生长良好。结论本方法操作简便、省时,适用于含酚炉甘石洗剂微生物限度检查。

复方羊角片微生物限度检查法方法学验证试验研究

目的:建立复方羊角片微生物限度检查方法。方法:采用低速离心沉淀集菌与培养基稀释联用法、培养基稀释法、常规法。结果:稀释剂对照组和试验组的菌回收率均大于80%:阴性对照组未检出阴性对照菌,试验组检出阳性试验菌。结论:可以用该微生物限度检查法进行复方羊角片的检查。

陈香露白露片微生物限度检查方法验证研究

目的:建立陈香露白露片微生物限度检查方法。方法:根据该样品的微生物限度标准,按《中国药典》2005年版一部附录微生物限度检查法的验证试验指导原则,用委托厂家3个批号的陈香露白露片进行验证试验,以考察确定陈香露白露片微生物限度的检查方法。首先用常规法进行预试验,初步考察该样品对试验菌检测的影响,然后根据预试验结果,用离心沉淀集菌法进行再试验。结果:常规法试验时,大肠埃希菌、白色念珠菌的回收率均大于70%,而金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的回收率小于70%,控制菌检查检出试验菌。采用离心沉淀集菌法试验时,可以有效消除抑菌作用,使金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的回收率大于70%。结论:采用离心沉淀集菌法可以有效消除抑菌作用,简便、准确。

少林正骨精微生物限度检查方法验证试验

目的建立少林正骨精微生物限度检查方法。方法采用人工感染五种阳性菌株的方法,对少林正骨精进行细菌、霉菌及酵母菌的计数检验以及控制菌的检验。结果细菌、霉菌及酵母菌采用离心沉淀集菌法+稀释法的回收率均不低于70%;控制菌采用离心沉淀集菌法检验呈阳性。结论少林正骨精的微生物限度检查细菌、霉菌及酵母菌可采用离心+稀释法;控制菌可采用离心沉淀集菌法。

增乳膏微生物限度检查方法验证试验

目的建立增乳膏微生物限度检查方法。方法采用人工感染五种阳性菌株的方法,对增乳膏进行细菌、霉菌及酵母菌的计数检验以及控制菌的检验。结果细菌采用离心沉淀集菌法、霉菌及酵母菌采用常规法的回收率均不低于70%,控制菌采用常规法检验呈阳性。结论增乳膏的微生物限度检查细菌可采用离心沉淀集菌法,霉菌、酵母菌及控制菌可采用常规法。

丹参益心片微生物限度检查法方法学验证试验研究

目的:建立丹参益心片微生物限度检查方法。方法:采用低速离心沉淀集菌与培养基稀释联用方法、常规法。结果:经用低速离心沉淀集菌与培养基稀释联用方法验证,金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的回收率在80%以上,用常规法验证,大肠埃希菌、白色念珠菌、黑曲霉菌回收率大于80%,控制菌可检出大肠埃希菌。结论:丹参益心片的微生物限度检查,可采用低速离心沉淀集菌法与培养基稀释法联用检查细菌数:常规法检查霉菌、酵母菌数和控制菌。