沉香山药用植物资源初步调查

沉香山位于粤西沿海地区,地处重要的南药产地,区内植物资源丰富。经初步调查发现,药用植物种类达406种(其中苏铁蕨、土沉香、金毛狗等属珍稀濒危物种),分属106科;植物的药用范围十分广泛,遍及19大类。

基于网络药理学、分子对接与细胞实验研究山沉香对急性肝损伤的作用机制

目的探讨山沉香对急性肝损伤(ALI)的作用机制,并通过细胞实验进行验证。方法通过PubChem数据库并结合文献,根据SwissTarget ADEM、SwissTargetPrediction平台预测山沉香化学成分及其作用靶点;通过GeneCards、OMIM数据库筛选ALI相关靶点,Venny2.l.0平台获取山沉香有效成分与ALI的共有靶点;STRING数据库构建PPI网络,Cytohubba筛选核心靶点;Cyto⁃scape3.9.0软件构建成分-靶点-疾病网络图;David 6.8数据库分析共有靶点并进行GO和KEGG富集分析与分子对接;细胞实验检测ALT、AST、MDA、SOD、GPx、IL-6、IL-1β、TNF-α因子,Western印迹验证PI3K-AKT信号通路。结果山沉香中的67个成分可作用于118个共有靶点并通过AKT1、TNF、SRC等20个核心靶点及PI3K-AKT、MAPK及ErbB等181条信号通路发挥抗ALI作用。分子对接显示山沉香木脂素或为山沉香抗ALI的有效成分。细胞实验显示山沉香可显著降低ALI细胞中MDA与上清液中ALT、AST、IL-6、IL-1β、TNF-α含量并升高细胞中SOD、GPx含量。West⁃ern印迹结果显示山沉香可有显著低ALI细胞中PI3K与AKT含量。结论山沉香木脂素或为蒙药山沉香抗ALI的主要活性成分,其作用机制可能与PI3K-AKT信号通路有关。

基于网络药理学和分子对接探讨山沉香对肝癌的作用机制

目的挖掘山沉香治疗肝癌的作用机制。方法通过山沉香相关文献获取山沉香的化学成分并通过SwissTargetPrediction数据库预测作用靶点;采用Concensus Cluster Plus包、Limma包对TCGA数据库下载的肝癌靶点进行一致性聚类分析、差异基因分析;将差异基因进行GO和KRGG富集分析;构建成分-靶点-通路网络图并进行分子对接。结果山沉香中的86个化学成分可作用于692个靶点发挥抗肝癌作用;主要通过PLK1、TTK、CDC25A、AURKB、MMP1、TNF、MMP9、IGF1R 8个核心靶点以及细胞周期、IL-17信号通路和黄体酮介导的卵母细胞成熟3条通路发挥对肝癌的治疗作用。分子对接结果显示,Vit⁃rofolal E、Umbelliferone、Burselignan可能为山沉香治疗肝癌的有效化合物。结论本文研究初步分析了山沉香治疗肝癌的分子机制,为后期作用机制的研究提供思路。

基于网络药理学的山沉香木脂素抗脑缺血再灌注作用机制研究

目的探索山沉香总木脂素(SPL)抗脑缺血再灌注损伤(CIRI)的作用机制并进行体外验证。方法CNKI、NCBI Pubmed数据库收集SPL活性成分,SwissTargetPrediction预测活性成分靶点;Gene Cards、Drugbank等数据库收集CIRI疾病相关靶点。Cytoscape 3.9.1筛选关键靶点、建立“SPL活性成分-关键靶点”网络。对关键靶点进行GO分析KEGG富集分析,Cytoscape 3.9.1软件构建“SPL活性成分-关键靶点-信号通路”网络。体外检测各实验组细胞存活率、LDH、氧化应激相关指标水平、ROS、炎症因子、通路中相关蛋白的相对表达水平。结果SPL活性成分开环异落叶松树脂酚(SECO)、蛇菰宁、荜澄茄素等可通过PI3K-Akt、FoxO等信号通路发挥抗CIRI的作用。体外研究显示,SECO可显著提升各组细胞存活率、降低LDH释放率、氧化应激反应、炎症反应、胱天蛋白酶3活性。显著升高Blc-2/BAX、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-FoxO-3a/FoxO-3a的相对表达水平。结论SECO或为SPL发挥抗CIRI作用的主要活性成分,其作用机制或与激活PI3K/AKT/FoxO信号通路有关。

山沉香的质量控制研究

目的建立蒙药山沉香的质量标准。方法采用TLC法对不同产地的山沉香进行鉴别研究;用HPLC法测定其中3,3'-二甲氧基-4,4',9,9'-四羟基简单木脂素、3,4(3',4')-二亚甲二氧基-9,9'-二羟基简单木脂素、syripinnalignan A、syripinnalignan B、syripinnalignan C的量。结果 TLC鉴别条件下斑点清晰,重复性好;在所用的实验色谱条件下,5种对照品溶液在检测范围内具有良好的线性关系,r>0.999 0。平均回收率均大于98.00%,RSD均小于3.0%。结论本法操作简便、快速、准确,可用来控制样品的质量。

山沉香挥发油成分的研究

采用自制“蒸馏－萃取”装置提取山沉香棵发油，用毛细管气相色谱法分得３４个成分，质谱法鉴定１７种化合物。从油中分离出的主要成分（占总油量６４．７％）经ＭＳ，￣１ＣＮＭＲ，￣（１３）ＨＮＭＲ，ＩＲ，ＵＶ和Ｘ－射线单晶衍射测定鉴定为花姜酮（ｚｅｒｕｍｂｏｎｅ）。

山沉香超微粉、原粉与沉香超微粉、原粉药理学作用对比研究

目的研究山沉香超微粉(SU,以下同)、原粉(SF,以下同)抗心肌缺血、常压抗缺氧、镇痛、镇静等药理学作用,并与沉香超微粉(AU,以下同)、原粉(AF,以下同)作对比研究。方法各实验中动物均分为11个实验组:SU 1.5,0.75和0.375 g·kg-1三组,SF1.5 g·kg-1组,AU 1.5,0.75和0.375 g·kg-1三组,AF1.5 g·kg-1组,阳性对照组,模型对照组及空白组。各组按不同剂量药物连续灌胃给药7 d后,采用结扎大鼠冠脉方法,分别测定各实验组大鼠心梗面积、心电图、血清CK、LDH、SOD,并观察心肌组织病理切片,对比SU与AU对心肌缺血大鼠心脏的保护作用;采用常压耐缺氧法观察两种超微粉对小鼠存活时间的影响;采用醋酸扭体法观察二者对小鼠扭体次数及疼痛潜伏期的影响;采用戊巴比妥钠协助睡眠法,观察两种超微粉对睡眠潜伏期及睡眠时间的影响。结果山沉香超微粉、原粉与沉香超微粉、原粉均有不同程度的抗缺氧、保护心肌缺血大鼠心脏、镇痛、镇静等作用。1.各给药组均对大鼠急性心肌缺血有保护作用:山沉香和沉香给药组均显示出较模型组低的偏移值,与模型组相比,在大部分时间点上有显著性差异。模型组在缺血损伤后血清中CK活性显著升高,而山沉香、沉香各给药组均能降低血清中CK含量,与模型组比较均有极显著差异,AU0.75 g·kg-1和AF给药组效果明显优于山沉香对应给药组(P<0.01),而SU 0.375和0.125 g·kg-1给药组与对应剂量沉香给药组作用相当。模型组在缺血损伤后血清中LDH活性显著升高,山沉香、沉香给药组均能降低血清LDH含量,与模型组比较均有极显著差异(P<0.001)。同时,AU 0.75g·kg-1给药组作用优于SU 0.75 g·kg-1给药组(P<0.01),SU0.375 g·kg-1给药组的作用与AU 0.375 g·kg-1给药组的相当,SU 0.125 g·kg-1给药组的作用优于AU0.125 g·kg-(1P<0.01),AF给药组的作用明显优于SF(P<0.05)。心肌缺血后,模型组的血清SOD活性显著下降,而山沉香和沉香各给药组与模型组相比SOD活性均有显著提高。AU 0.375 g·kg-1给药组作用优于SU 0.375 g·kg-(1P<0.05),山沉香其他给药组与沉香对应剂量给药组作用相当。山沉香和沉香给药组均能缩小大鼠急性心肌缺血的梗死面积,并与模型组有显著差异(P<0.01)。2.各给药组对小鼠存活时间均有延长作用(P<0.05),SU 1.5 g·kg-1组与AU 1.5 g·kg-1组作用相当。而SU 0.75和0.375 g·kg-1组均优于相同剂量的AU组(P<0.05)。SF组与AF组作用相当。3.镇痛作用:(1)对潜伏期影响:SU 1.5和0.75 g·kg-1,AU 1.5,0.75和0.375 g·kg-1对醋酸致小鼠扭体潜伏期有明显延长作用(P<0.05);SU 0.75和0.375 g·kg-1组与相同剂量AU组(0.75和0.375 g·kg-1)作用相当。(2)对扭体次数影响:山沉香与沉香对应剂量组之间作用相当。4.镇静作用:(1)各给药组能显著增加小鼠戊巴比妥钠阈剂量下入睡百分率,对阈下剂量戊巴比妥钠致小鼠睡眠有协同作用(与模型组相比,P<0.05);山沉香各组与沉香各对应组之间睡眠百分率无统计学差异。(2)各给药组对阈剂量戊巴比妥钠致小鼠入睡的潜伏期均有明显缩短作用(与模型组相比,P<0.05)。山沉香各组缩短作用均优于沉香各对应组(P<0.05)。而且,各给药组对阈剂量戊巴比妥钠致小鼠睡眠持续时间均有明显延长作用(P<0.05)。SU 0.75和0.375 g·kg-1组延长作用与相同剂量AU组相当,SF延长作用大于AF组(P<0.05)。结论山沉香与沉香均具有抗缺氧、保护心肌缺血大鼠心脏、镇痛、镇静等作用,SU和AU与SF和AF在同剂量时或超微粉是原粉剂量的1/2、1/4时,超微粉在抗缺氧、保护心肌缺血大鼠心脏、镇痛、镇静等作用方面能够显示出优于原粉的药理学作用。SU三个剂量组中至少2组剂量呈现等于或大于AU的作用,且SU能在镇静、镇痛、常压抗缺氧、心肌缺血保护作用等方面变现与AU相似的作用。

蒙药山沉香抗心肌缺血及其作用机制研究

目的:探讨蒙药山沉香抗心肌缺血的作用及可能机制,从而为该药后续的开发研究提供科学依据,也为其临床应用奠定部分基础。方法:Wistar大鼠分别给予山沉香原粉、醇提物、挥发油、醇提物+挥发油,采用皮下注射异丙肾上腺素(ISO)造成急性心肌缺血模型,末次给药后观察心电图变化,HE染色观察大鼠心肌组织病理变化,RT-PCR法检测Bcl-2、Bax基因的表达。结果:心电监测结果表明,山沉香各处理组均对ISO所致急性心肌缺血具有治疗作用,其中醇提物组治疗作用最明显,能够显著改善大鼠心电图ST段抬高(P<0.05);大鼠心肌组织HE染色结果表明,与模型组相比,山沉香各处理组显微镜下观察均病变减轻,其中醇提物组与原粉组心肌组织病变最轻;RT-PCR结果表明,除挥发油组外,山沉香其余各处理组均能下调促凋亡因子Bax的表达,上调抗凋亡因子Bcl-2的表达,Bcl-2/Bax比值显著高于模型组。其中醇提物组明显优于其他各组(P<0.01)。结论:蒙药山沉香能够对ISO所致急性心肌缺血形成保护作用,综合比较显示山沉香醇提物作用最显著。山沉香抗心肌缺血的作用机制可能是通过上调抗凋亡因子Bcl-2的表达,下调促凋亡因子Bax的表达,抑制细胞凋亡发挥作用。

蒙药山沉香的生药学研究

本文对蒙药山沉香药用部位之一———贺兰山丁香的枝干进行了生药学研究 ,就其性状、组织结构、粉末特征和理化鉴别做了较为详细的描述 。

蒙药山沉香护肝、抗氧化活性部位研究

目的研究蒙药山沉香不同提取物护肝、抗氧化作用,筛查山沉香具有护肝、抗氧化作用的活性部位。方法以浓度为95%乙醇回流提取山沉香粉末浓缩得到乙醇提取物浸膏,用水分散制成混悬液后按极性从小到大依次用石油醚、乙醚、乙酸乙酯、正丁醇按比例1∶3萃取,减压浓缩干燥后称质量用于药效学实验。将80只雄性昆明种小鼠随机分成空白组(羧甲基纤维素钠CMC-Na)、模型组(CCl4-花生油)、阳性对照组(联苯双酯)、山沉香乙醇部位提取物组、山沉香石油醚部位提取物组、山沉香乙醚部位提取物组、山沉香乙酸乙酯部位提取物组、山沉香正丁醇部位提取物组,每组10只。每天按20 mL·kg^-1的剂量灌胃给药1次,连续灌胃7 d。最后一次给药1 h后除空白组外其余组均注射0.1%CCl4-花生油(20 mL·kg^-1)造成急性肝损伤模型,空白组注射等量花生油。12 h后观察小鼠的毛色及活动情况,检测小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)含量,肝匀浆中丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、超氧化物歧化酶(SOD)含量,并观察肝组织形态外观、切片病理特征及对其进行Ishak评分。结果与空白组比较,模型组小鼠体型偏瘦,毛发黯淡无光且较稀疏,灵活度下降,容易聚堆;血清ALT、AST含量明显升高(P<0.01);肝匀浆MDA含量明显升高(P<0.01),GPx和SOD含量明显降低(P<0.01);模型组小鼠肝组织外观呈暗棕色,体积增大;病理切片表现为肝小叶中央静脉周围出现凝固性坏死、肝索肝窦排列不整齐Ishak评分明显升高(P<0.01)。与模型组比较,山沉香乙醇提取物组和乙酸乙酯提取物组小鼠毛色光泽,体型较为丰满;血清ALT、AST含量明显降低(P<0.01);山沉香乙酸乙酯提取物组小鼠肝匀浆MDA含量明显降低(P<0.01),GPx(P<0.01)和SOD(P<0.05)含量明显升高;且该组肝组织形态外观与空白组接近,病理损伤有明显改善,Ishak评分明显降低(P<0.01)。结论蒙药山沉香具有护肝作用,而且可通过抗脂质过氧化来保护肝脏,山沉香95%醇提物的乙酸乙酯提取物是其护肝、抗氧化的活性部位。

蒙药山沉香化学成分的研究进展

蒙药山沉香为木犀科(Oleaceae)丁香属羽叶丁香(Syringa pinnatifolia Hemsl),临床主要用于治疗心绞痛、头痛头晕、失眠多梦、心悸气喘等。蒙药山沉香的化学成分及生物活性为近年来国内研究热点,研究发现山沉香主要成分为挥发油及木脂素,分离难度较大,故其化学成分研究并不深入,尚未完全阐释其药效物质基础,本文从山沉香的化学成分、提取方法及药理活性等方面对其进行归纳总结,并对其未来的发展趋势进行展望。

山沉香和沉香两种溶剂提取物的HPLC、TLC和UV鉴别研究

目的:通过对山沉香和沉香两种溶剂提取物的HPLC、TLC色谱特征和UV光谱特征的分析,建立山沉香和沉香的鉴别方法.方法:采用UV、HPLC和TLC法对山沉香和沉香的两种溶剂提取物进行了鉴别研究.结果:根据TLC和HPLC鉴别结果可知,山沉香和沉香的两种溶剂提取物没有共同的特征斑点和共有峰,这说明两种药材中化学成分有明显的差异;山沉香和沉香的UV扫描图可知,两种药材的UV图完全不一致.结论:本实验所建立的HPLC、TLC和UV法,可用于鉴别山沉香和沉香,结果可靠、准确.

蒙药山沉香挥发油成分分析

本文先对山沉香的化学成分和其挥发油的分离作简要概述,进而重点阐述液相微萃取法测定山沉香中花姜酮的实验方法及要点。

蒙药山沉香及丁香属植物药理作用研究进展

蒙医药是我国具有民族特色的医药体系,但是由于其现代研究起步较晚,很多蒙药的有效物质基础和药理作用尚不明确。山沉香就是其中之一,作为丁香属药材,山沉香可以有效应用于治疗冠心病等心血管疾病。本文从蒙药山沉香化学成分、药理作用等方面简要概述其发展现状,结合丁香属植物的药理作用,以期为相关药物的深入研究提供指导。

正交试验优化超临界CO_2萃取贺兰山丁香挥发油工艺及其成分分析

以天然及人工种植贺兰山丁香（别名山沉香,以下简称山沉香）为原料,以其挥发油出油率为考察指标,研究了超临界CO2萃取山沉香挥发油的分离工艺.通过正交试验,优选了最佳萃取工艺条件：萃取温度55℃、萃取压力21 MPa、萃取时间120 min、CO2流量9～12 L/h.在此条件下天然及人工种植山沉香挥发油的出油率分别为1.22％及0.79％.并用气相色谱-质谱法（G-C-MS）分析了贺兰山丁香挥发油中各组分的相对质量分数和结构,从而比较了天然及人工种植山沉香的主要有效成分及其相对含量,探讨了人工种植山沉香替代天然山沉香的趋势.

山沉香中11个新倍半萜成分

山沉香是一种特色蒙古族药,具有抑赫依、清热、止痛、利呼吸的功效,临床用于冠心病、失眠、哮喘等心肺疾病治疗。作为山沉香药效物质系统研究的一部分,该研究通过LC-MS和1H-NMR导向分离法,从山沉香乙醇提取物的多个含有萜类的流分中,分离得到11个新倍半萜类成分,其平面结构经质谱、1D NMR和2D NMR数据分析鉴定,依次定名为羽叶萜C和D(1、2)、阿拉善丁香萜T~ZI(3~11),结构类型包括羽叶烷、蛇麻烷、裂环蛇麻烷、愈创木烷、石竹烷、裂环艾里莫酚烷、isodaucane等,但因为化合物含量低、手性中心多或结构本身的柔性、无紫外吸收等原因,立体构型有待确定。类型多样的倍半萜成分,进一步丰富了丁香属和本种植物的化学成分谱,并为进一步阐明山沉香的药效物质提供了参考信息。

山沉香中3个新木脂素的提取与结构解析

目的研究羽叶丁香Syringa pinnatifolia去皮的干燥根和枝干的化学成分。方法采用硅胶和Sephadex LH-20柱色谱法及HPLC进行分离,运用谱学分析鉴定所得化合物的结构。结果从山沉香乙醇提取物分离得到了3个木脂素类化合物,分别鉴定为3,3′,4-三甲氧基-4′,8,9,9′-四羟基简单木脂素(1)、3,3′,4,9-四甲氧基-4′,8-二羟基-9′-乙氧基简单木脂素(2)和3,3′,4,9-四甲氧基-4′,8,9′-三羟基简单木脂素(3)。结论化合物1～3为未见文献报道的新化合物,分别命名为山沉香木脂素C、山沉香木脂素D和山沉香木脂素E。

山沉香超微粉与普通粉抗心肌缺血对比研究

目的:研究蒙药山沉香超微粉抗心肌缺血的药理学作用,并与山沉香原粉作对比研究。方法:采用冠脉结扎方法观察山沉香对心肌缺血大鼠心脏的保护作用(测定心梗面积、心电图、血清牛肌酸激酶(CK)、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸盐脱氢酶(LDH)及病理组织观察)。结果:山沉香超微粉和原粉均有不同程度的大鼠心肌缺血保护作用:可降低大鼠血清CK、LDH的含量,升高血清SOD的含量,并能减小心肌缺血的面积,明显改善心电图,且超微粉0.75,0.375 g·kg^(-1)剂量组明显优于原粉(P<0.05);超微粉0.125 g·kg^(-1)剂量组相当于原粉0.75 g·kg^(-1)剂量组(P>0.05)。结论:相同剂量,山沉香超微粉保护心肌缺血作用优于原粉,1/2,1/4剂量超微粉保护心肌缺血作用与原粉相当。

蒙药山沉香化学成分的鉴测

目的:研究山沉香乙醇提取物的石油醚和氯仿萃取物中的化学成分。方法:采用硅胶和LH-20柱色谱法、薄层色谱法和制备HPLC法进行分离,运用波谱分析和标准品对照法鉴定分离所得化合物的结构。结果:分离鉴定了10个化合物:7-甲氧基香豆素(1);6,7-羟基香豆素(2);7-羟基香豆素(3);松柏醛(4);咖啡酸(5);阿魏酸(6);肉桂酸(7);3,3′-二甲氧基-4,4′,9,9′-四羟基简单木脂素(8);3,4(3′,4′)-二亚甲二氧基-9,9′-二羟基简单木脂素(9);O-[β-D-xylopyranosyl(1-6)β-D-glucopyranosyl]-7-hydroxycoumarin(10)。结论:所有化合物均为首次该植物中分得。

蒙药山沉香普通粉与超微粉气相色谱指纹图谱的研究

目的:建立蒙药山沉香药材气相色谱法的特征指纹图谱研究方法,揭示超微粉碎对山沉香挥发性成分溶出的影响。方法:采用气相色谱分析手段对山沉香挥发性成分进行分析,利用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"2004A版进行比较分析,NIST05普库检索对主要指纹峰进行归属。结果:建立了山沉香药材气相色谱指纹图谱共用模式,10批山沉香药材相似度分析结果为相似度均>0.95;通过对普通粉与超微粉指纹图谱的分析证明,山沉香超微粉碎后,化学成分种类数目并未发生改变,但其主要化学成分的含量明显提高(P<0.05)。结论:该分析方法简便快速、准确可靠,重现性好,可作为山沉香药材的鉴定和质量控制的有效方法。