白藜芦醇通过调节沉默信息调节因子1/核转录因子-κB通路改善高血压左心室重塑

目的:研究白藜芦醇(resveratrol,RES)对自发性高血压大鼠(spontaneous hypertension rat,SHR)左心室重塑的影响及其对沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)/核转录因子κB(nuclear transcription factor-κB,NF-κB)信号通路的作用。方法:将8只8周龄雄性Wistar-Kyoto(WKY)大鼠作为正常组(WKY组),将40只8周龄雄性SHR随机分为SHR组、RES组、EX527组、RES+EX527组、RES+吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)组,每组8只,予以相应药物干预12周。测量大鼠体质量、收缩压、心脏超声、左心室质量、左心室质量指数(left ventricular mass index,LVMI)、心肌胶原容积分数(collagen volume fraction,CVF)、氧化应激指标、SIRT1和NF-κB以及炎症因子蛋白表达水平,观察HE和Masson染色下的心脏形态病理改变。结果:与WKY组[LVMI(2.12±0.10) mg/g,CVF(0.18±0.09)%,SIRT1蛋白表达量1.40±0.05,NF-κB蛋白表达量0.46±0.06]相比,SHR组[LVMI(3.07±0.07) mg/g,CVF(2.60±0.56)%,SIRT1蛋白表达量0.78±0.08,NF-κB蛋白表达量1.41±0.08]左心室重塑程度严重,氧化应激和炎症因子水平及NF-κB表达明显增加(P<0.05),而SIRT1表达降低(P<0.05)。RES组[LVMI(2.72±0.09) mg/g,CVF(1.10±0.30)%,SIRT1蛋白表达量0.99±0.07,NF-κB蛋白表达量0.98±0.12]较SHR组左心室重塑程度减轻,氧化应激和炎症因子水平及NF-κB表达降低(P<0.05),SIRT1表达增加(P<0.05);而EX527组[LVMI(3.18±0.08) mg/g,CVF(2.83±0.98)%,SIRT1蛋白表达量0.60±0.02,NF-κB蛋白表达量1.68±0.07]结果与RES组相反。与RES组相比,RES+EX527组有逆转RES改善左心室重塑的趋势;而RES+PDTC组更有改善左心室重塑的趋势。结论:RES能改善SHR的左心室重塑,其机制可能与调节SIRT1/NF-κB通路从而减轻氧化应激和炎症反应损伤有关。

右美托咪定通过沉默信息调节因子1/核转录因子信号通路调控脑梗死大鼠海马组织炎症机制研究

目的:探究右美托咪定(Dex)干预对脑梗死大鼠的治疗效果及潜在治疗机制。方法:将60只SPF级SD雄性大鼠随机分为对照组、假手术组、模型组、右美托咪定低剂量组、右美托咪定高剂量组,每组各12只。除对照组、假手术组外,其余各组选用Longa线栓法制备大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,假手术组仅剥离肌肉血管。Dex治疗组分别腹腔注射盐酸右美托咪定溶液,其余各组注射等量0.9%氯化钠溶液。比较各组大鼠缺血脑组织的沉默信息调节因子1(SIRT1)、核转录因子(NK-κB)信使RNA(mRNA)和蛋白的相对表达水平及丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平,同时检测各组大鼠海马区炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平。结果:与对照组大鼠比较,Dex治疗组大鼠SIRT1mRNA和蛋白水平降低、NF-κBmRNA和蛋白水平升高,经Dex治疗后两组大鼠的SIRT1mRNA、蛋白水平升高,且Dex高剂量组更高;同时NF-κBmRNA、蛋白水平下降,且Dex高剂量组低于Dex低剂量组;与对照组、假手术组大鼠比较,其余各组大鼠TNF-α、IL-6、MDA水平升高,SOD水平下降,经Dex治疗后两组大鼠的炎性因子和氧化应激水平降低,且Dex高剂量组TNF-α、IL-6、MDA水平低于Dex低剂量组,同时SOD水平升高,且Dex高剂量组更高,差异具有统计学意义(均P<0.05)。结论:右美托咪定可能通过激活SIRT1/NF-kB信号通路,减轻炎性反应,缓解氧化应激,进而发挥脑保护作用。

沉默信息调节因子1-肝X受体/核因子-κB信号通路在促使动脉粥样硬化斑块消退中的作用

目的研究沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)与泡沫细胞移出动脉粥样硬化斑块相关调控通路肝X受体(liver X receptor,LXR)-趋化因子受体7(chemokine receptor-7,CCR7)和促炎症信号核因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)的相关性。方法体外培养人单核细胞株U937细胞,构建泡沫细胞模型;分别用SIRT1激动剂SRT1720和RNA干扰等方法使SIRT1高表达或抑制其表达,观察SIRT1和其下游靶分子LXR、CCR7以及促炎因子NF-κB、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的表达变化。结果在泡沫细胞模型中,SRT1720使SIRT1蛋白表达水平升高,LXR和其靶分子CCR7蛋白水平无显著变化,而NF-κB以及其靶分子TNF-α蛋白表达水平显著下降。在加入SRT1720的基础上再用RNA干扰抑制SIRT1的表达,结果表明RNA干扰使SIRT1的表达水平显著下降,LXR和其靶分子CCR7表达也随之下降;与此同时,NF-κB及其下游靶基因TNF-α表达水平显著升高。结论在泡沫细胞中SIRT1可能是LXR-CCR7以及NF-κB信号通路的上游,并且有可能通过上调LXR-CCR7信号通路,抑制NF-κB炎症信号来参与调节泡沫细胞从动脉粥样硬化斑块中移出。

心房颤动患者外周血沉默信息调节因子2相关酶1/核因子κB信号通路与认知功能障碍的相关性研究

目的探讨心房颤动(简称房颤)患者外周血沉默信息调节因子2相关酶1(sirtuin 1,SIRT1)/核因子κB(nuclear factorκB,NF-κB)信号通路与认知功能障碍的相关性。方法选取河北北方学院附属第一医院2019年5月至2020年5月收治的100例房颤患者,按蒙特利尔认知评估(Montreal cognitive assessment,MoCA)量表分组,MoCA评分<26分为研究组(53例),MoCA评分≥26分为对照组(47例)。入院后测定两组患者SIRT1/NF-κB信号通路相关分子的表达水平,采用MoCA量表、简易智力状态检查(mini-mental state examination,MMSE)量表对两组患者的进行认知功能评估。MoCA、MMSE评分与SIRT1/NF-κB信号通路相关分子表达水平的关系采用Pearson相关分析。以认知功能障碍为因变量,SIRT1、NF-κB表达水平为自变量对房颤患者认知功能障碍的独立危险因素进行logistic回归分析。结果研究组SIRT1表达水平低于对照组,NF-κB表达水平高于对照组,差异均有显著性(P<0.05)。研究组MMSE评分低于对照组,差异有显著性(P<0.05)。Pearson相关分析显示,研究组SIRT1、NF-κB表达水平与MoCA、MMSE评分具有相关性(r=0.431、-0.324、-0.535、-0.514,P<0.05);校正后发现,SIRT1、NF-κB表达水平与MoCA、MMSE评分之间仍存在明显相关性(r=0.421、-0.352、-0.362、-0.425,P<0.05)。Logistic回归分析显示,SIRT1、NF-κB表达水平为房颤患者认知功能障碍的独立危险因素(P<0.05)。结论房颤患者外周血SIRT1/NF-κB信号通路与认知功能障碍具有明显相关性,SIRT1、NF-κB表达水平为房颤患者认知功能障碍的独立危险因素。

辛伐他汀对慢性心力衰竭兔心肌沉默信息调节因子2相关酶2/核因子-κB信号通路的影响

目的研究辛伐他汀对慢性心力衰竭兔心肌沉默信息调节因子2相关酶2(SIRT2)/核因子-κB(NF-κB)信号通路的影响。方法 24只雄性新西兰大白兔随机分为正常组、心力衰竭组和辛伐他汀组,每组8只。心力衰竭组和辛伐他汀组兔每日经耳缘静脉注射1 g·L-1阿霉素生理盐水注射液建立慢性心力衰竭模型,正常组兔经耳缘静脉注射相同剂量的生理盐水注射液;同时,辛伐他汀组兔每日给予1.5 mg·kg-1辛伐他汀灌胃,正常组和心力衰竭组兔给予相同剂量生理盐水灌胃,均连续12周。造模结束时各组兔做心脏超声观察心功能情况,并处死取左心室做石蜡包埋切片,苏木精-伊红染色观察心肌组织变化,免疫组织化学法检测各组兔心肌细胞中SIRT2、NF-κB蛋白表达,反转录-聚合酶链式反应检测心肌组织中SIRT2 mRNA、NF-κB mRNA的变化。结果与正常组比较,心力衰竭组和辛伐他汀组兔的左心室射血分数(LVEF)降低(P<0.01),左心室舒张末期内径(LVDd)增高(P<0.01);辛伐他汀组兔的LVEF高于心力衰竭组(P<0.01),LVDd低于心力衰竭组(P<0.01)。与正常组比较,心力衰竭组兔心肌细胞SIRT2蛋白阳性表达率降低(P<0.01),辛伐他汀组兔心肌细胞SIRT2蛋白阳性表达率升高(P<0.01),且辛伐他汀组兔心肌细胞SIRT2蛋白阳性表达率高于心力衰竭组(P<0.01)。与正常组比较,心力衰竭组兔心肌细胞NF-κB蛋白阳性表达率升高(P<0.01),辛伐他汀组兔心肌细胞NF-κB蛋白阳性表达率降低(P<0.01),且辛伐他汀组兔心肌细胞NF-κB蛋白阳性表达率低于心力衰竭组(P<0.01)。与正常组比较,心力衰竭组兔心肌组织中SIRT2 mRNA相对表达量降低(P<0.05),辛伐他汀组兔心肌组织中SIRT2 mRNA相对表达量升高(P<0.01)。与心力衰竭组比较,辛伐他汀组兔心肌组织中SIRT2 mRNA相对表达量升高(P<0.01)。与正常组比较,心力衰竭组兔心肌组织中NF-κB mRNA相对表达量升高(P<0.01),辛伐他汀组兔心肌组织中NF-κB mRNA相对表达量降低(P<0.01);与心力衰竭组比较,辛伐他汀组兔心肌组织中NF-κB mRNA相对表达量降低(P<0.01)。结论辛伐他汀可能通过上调SIRT2的表达而抑制NF-κB的表达,从而改善兔的心功能。

核转录因子-κB、细胞外信号调节激酶1/2、转移相关蛋白-3在乳腺肿瘤组织中的表达研究

目的分析核转录因子-κB(NF-κB)、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、转移相关蛋白-3(MTA-3)在乳腺肿瘤中的表达。方法选取我院2017年8月至2019年3月收治的60例乳腺肿瘤患者作为观察组,另取30例同期乳腺增生患者作为对照组。比较两组患者组织样本NF-κB、ERK1/2和MTA-3水平。结果观察组NF-κB、ERK1/2阳性检出率高于对照组;MTA-3阳性检出率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);临床分期越高者、肿瘤直径越大者,NF-κB、ERK1/2阳性检出率越高,MTA-3阳性检出率低越低,差异有统计学意义(P<0.05)。Luminal A型、Luminal B型及HER2阳性分子分型患者NF-κB、ERK1/2阳性检出率高于三阴型,MTA-3阳性检出率低于三阴型,差异有统计学意义(P<0.05)。淋巴结转移患者NF-κB、ERK1/2阳性检出率高于对照组,MTA-3阳性检出率低于无转移患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在乳腺肿瘤组织中存在NF-κB和ERK1/2的高阳性表达和MTA-3和低表达,并且与乳腺增生患者病理组织表达有明显差异,结合三者指标分析对鉴别诊断乳腺肿瘤、改善乳腺肿瘤干预时机有重要意义。

海参皂苷调节SIRT1/NF-κB信号通路对糖尿病大鼠血管炎症的影响

目的:探讨海参皂苷(SSC)对糖尿病大鼠血管炎症的影响及潜在机制。方法:SD大鼠采用高糖高脂饮食和链脲佐菌素(STZ)腹腔注射构建糖尿病模型。实验分为对照(Control)组、模型(model)组、二甲双胍组(600 mg/kg)、SSC组(30 mg/kg)和SSC+沉默信息调节因子1(SIRT1)抑制剂EX-527组(SSC 30 mg/kg+EX-5275 mg/kg)。给予相应的药物干预4周后,检测各组大鼠空腹血糖(FBG)和空腹胰岛素(FINS)水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)水平;苏木精-伊红(HE)染色观察主动脉病理学变化;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测主动脉SIRT1/核因子-κB(NF-κB)通路相关蛋白的表达。结果:与Control组比较,model组大鼠FBG、FINS、HOMA-IR、血清VCAM-1、MCP-1、TNF-α、IL-1β水平、胞核NF-κB p65蛋白水平升高(P<0.05),体质量、主动脉SIRT1、核因子κB抑制蛋白α(IκBα)蛋白水平降低(P<0.05);与model组比较,SSC组和二甲双胍组大鼠FBG、FINS、HOMA-IR、血清VCAM-1、MCP-1、TNF-α、IL-1β水平、胞核NF-κB p65的蛋白水平降低(P<0.05),体质量、主动脉SIRT1、IκBα蛋白水平升高(P<0.05);与SSC组比较,SSC+EX-527组大鼠FBG、FINS、HOMA-IR、血清VCAM-1、MCP-1、TNF-α、IL-1β水平、胞核NF-κB p65蛋白水平升高(P<0.05),体质量、主动脉SIRT1、IκBα蛋白水平降低(P<0.05)。结论:SSC可减轻糖尿病大鼠血管炎症,其作用机制可能与上调SIRT1表达,抑制NF-κB的活化有关。

花黄色素调节AMPK/SIRT1/NF-κB信号通路对冠心病大鼠心肌损伤的影响

目的:探讨花黄色素(SY)调控腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子1(SIRT1)/核转录因子-κB(NF-κB)对冠心病(CHD)大鼠心肌损伤的影响。方法:将60只SD大鼠随机分为正常对照组(NC组,生理盐水)、模型组(Model组,生理盐水)、SY组(100 mg/kg SY)、EX-527组(47 mg/kg EX-527)、SY+EX-527组(100 mg/kg SY+47 mg/kg EX-527),每组12只,持续4周给予相应药物。试剂盒检测血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平和心肌白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平;苏木素-伊红(HE)染色法进行心肌组织病理学观察;末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测心肌细胞凋亡情况;蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测心肌组织AMPK/SIRT1/NF-κB通路相关蛋白表达。结果:与NC组相比,Model组大鼠心肌细胞数量少且排列杂乱,细胞核皱缩,TC、TG、LDL-C、氧化修饰低密度脂蛋白(ox-LDL)、IL-6、TNF-α水平、心肌细胞凋亡率及NF-κB蛋白水平明显上升(P<0.05),SOD、GSH-Px水平及磷酸化-AMPK(p-AMPK)/AMPK、SIRT1蛋白水平明显下降(P<0.05)。与Model组比较,SY组大鼠心肌细胞数量增多且排列整齐有序,TC、TG、LDL-C、ox-LDL、IL-6、TNF-α水平、心肌细胞凋亡率及NF-κB蛋白水平明显下降(P<0.05),SOD、GSH-Px水平及p-AMPK/AMPK、SIRT1蛋白水平明显上升(P<0.05);而EX-527组以上指标呈现相反趋势。与SY组相比,SY+EX-527组大鼠心肌损伤加重,TC、TG、LDL-C、ox-LDL、IL-6、TNF-α水平、心肌细胞凋亡率及NF-κB蛋白水平明显上升(P<0.05),SOD、GSH-Px水平及p-AMPK/AMPK、SIRT1蛋白水平明显下降(P<0.05)。结论:SY可能通过调控AMPK/SIRT1/NF-κB通路降低氧化应激,减轻炎症反应,对冠心病大鼠心肌损伤起到一定改善作用。

沉默信息调节因子2相关酶1通过增强肝X受体及抑制核因子κB信号起到抗动脉粥样硬化作用

目的：探讨冠状动脉粥样硬化患者外周血单个核细胞（PBMCs）中沉默信息调节因子2相关酶1（SIRT1）与肝X受体（LXR）-趋化因子受体7（CCR7）/ATP联结盒转运因子A1（ABCA1）及炎症信号核因子κB（NF-κB）的关系。方法抽取104名正常人（NC组）以及111例冠状动脉粥样硬化患者（AS组）外周血，提取PBMCs，用实时荧光定量多聚酶链反应（qPCR）检测PBMCs中SIRT1、LXR及其下游CCR7/ ABCA1和促炎症信号NF-κB及其下游肿瘤坏死因子（TNF-α）的相对mRNA水平，并收集相关临床数据。所有数据应用SPSS 20.0统计软件进行分析。结果 qPCR结果显示所有AS组患者PBMCs中的SIRT1、LXR及其下游因子CCR7、ABCA1 mRNA含量比NC组低，差异具有统计学意义（P＜0.05）；而NF-κB及其下游因子TNF-α mRNA含量高于NC组（P＜0.05）。相关性分析显示LXR mRNA与HDL呈正相关（P＜0.01， r=0.22），NF-κB、TNF-αmRNA与单核细胞数量呈正相关（P＜0.05，r=0.31，0.23）。结论 SIRT1可能通过抑制NF-κB信号及增强LXR-CCR7/ABCA1信号，抑制炎症，促进胆固醇流出，甚至激活单核-巨噬细胞源性泡沫细胞移出动脉粥样硬化斑块的潜能，从而起到抑制动脉粥样硬化发展甚至逆转动脉粥样硬化的作用。

番茄红素调节AMPK/SIRT1/NF-κB信号通路对过敏性结膜炎小鼠的治疗作用

目的基于腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子1(SIRT1)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路探讨番茄红素(LYC)减轻过敏性结膜炎小鼠炎症的作用机制。方法利用卵清蛋白(OVA)致敏建立AC小鼠模型。将BALB/c小鼠分为正常组(NC组)、模型组(AC组)、LYC低组(5 mg/kg)、LYC中组(10 mg/kg)、LYC高组(20 mg/kg),LYC高+AMPK抑制剂(CC)组(0.2 mg/kg)。观察小鼠眼周情况,采用苏木精-伊红染色观察结膜组织病理学变化,采用流式细胞仪检测脾脏中Th17、Treg细胞比例,采用酶联免疫吸附试验试剂盒检测血清中炎症因子、免疫球蛋白(Ig)E、胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)水平,采用蛋白质印迹法检测结膜组织AMPK/SIRT1/NF-κB信号通路蛋白水平。结果与NC组比较,AC组小鼠眼部出现结膜充血、红肿、溢泪等现象,结膜组织嗜酸性粒细胞较多,Th17细胞比例、白细胞介素(IL)-17、IL-6、IgE、TSLP、磷酸化AMPK(p-AMPK)、核NF-κB p65水平升高,Treg细胞比例、IL-10、转化生长因子(TGF)-β、SIRT1水平降低(P<0.05)。与AC组比较,LYC中、高组小鼠眼部结膜充血、水肿、溢泪等明显减轻,结膜组织嗜酸性粒细胞较少,脾脏中Th17/Treg细胞比例趋向平衡,IL-17、IL-6、IgE、TSLP、核NF-κB p65水平降低,IL-10、TGF-β、p-AMPK、SIRT1水平升高(P<0.05)。CC可抵消LYC对AC小鼠的上述保护作用。结论LYC可减轻AC小鼠的过敏和炎症反应,维护机体免疫平衡,其机制可能与促进AMPK/SIRT1通路活化,抑制NF-κB通路活化有关。

基于SIRT1/NF-κB通路探究秦艽醇提物对脂多糖诱导大鼠背根神经节神经元炎性损伤的保护作用及机制

目的探讨秦艽醇提物对脂多糖诱导大鼠背根神经节神经元(DRGn)炎性损伤的保护作用及其机制。方法大鼠分为假手术组、模型组(建模)、阳性组(建模+16 mg/kg普瑞巴林)和给药组(建模+50 mg/kg秦艽醇提物),测定大鼠建模前及给药前后的机械性触痛阈值(PWPT)。制备正常大鼠血清和秦艽醇提物低、高剂量大鼠含药血清,分离培养DRGn细胞并分为对照组(10%正常大鼠血清)、脂多糖组(100 ng/ml脂多糖+10%正常大鼠血清)、秦艽醇提物低浓度组(100 ng/ml脂多糖+10%秦艽醇提物低剂量大鼠含药血清)、秦艽醇提物高浓度组(100 ng/ml脂多糖+10%秦艽醇提物高剂量大鼠含药血清)及沉默信息调节因子(SIRT)1抑制组(100 ng/ml脂多糖+10%秦艽醇提物高剂量大鼠含药血清+98 nmol/L烟酰胺)。CCK-8测定DRGn细胞活力,流式细胞仪检测DRGn细胞凋亡,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定DRGn细胞培养液中白细胞介素(IL)-6、IL-18、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,Western印迹检测DRGn细胞中SIRT1、乙酰化(Ac)-核因子(NF)-κB p65、NF-κB p65蛋白表达。结果给药前模型组、给药组PWPT较建模前均显著降低(P<0.05);给药后,给药组PWPT较给药前、模型组均显著升高(P<0.05),与阳性组差异无统计学意义(P>0.05);与对照组相比,脂多糖组DRGn细胞活力及细胞中SIRT1蛋白水平显著降低(P<0.05),细胞凋亡率、细胞中Ac-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白水平及细胞培养液中IL-6、IL-18、TNF-α水平显著升高(P<0.05);与脂多糖组相比,秦艽醇提物低、高浓度组DRGn细胞活力及细胞中SIRT1蛋白水平显著升高(P<0.05),细胞凋亡率、细胞中Ac-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白水平及细胞培养液中IL-6、IL-18、TNF-α水平显著降低(P<0.05),且呈剂量依赖性;与秦艽醇提物低、高浓度组相比,SIRT1抑制组DRGn细胞活力及细胞中SIRT1蛋白水平显著降低(P<0.05),细胞凋亡率、细胞中Ac-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白水平及细胞培养液中IL-6、IL-18、TNF-α水平显著升高(P<0.05)。结论秦艽醇提物可激活SIRT1,促进NF-κB p65去乙酰化,减轻脂多糖诱导大鼠DRGn细胞炎性损伤。

慢性阻塞性肺疾病患者外周血单核细胞沉默信息调节因子2相关酶1 mRNA、核因子κB mRNA表达变化与病情及肺功能的相关性分析

目的分析慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血单核细胞沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)mRNA、核因子κB(NF-κB)mRNA表达变化与病情及肺功能的相关性。方法回顾性分析陕西省人民医院2019年5月至2021年1月收治的131例COPD患者(COPD组)的临床资料,按COPD全球倡议(GOLD)中肺功能分级分为极重度组(Ⅳ级,24例)、重度组(Ⅲ级,30例)、中度组(Ⅱ级,42例)、轻度组(Ⅰ级,35例),另选择同期体检的90例健康人群作为健康对照组。比较各组外周血单核细胞SIRT1 mRNA、NF-κB mRNA表达水平,采用Logistic回归筛选影响COPD患者肺功能的独立危险因素,采用Pearson检验分析SIRT1 mRNA、NF-κB mRNA表达与疾病严重程度及肺功能指标的相关性。结果COPD组NF-κB mRNA表达高于健康对照组,而SIRT1 mRNA水平低于健康对照组(7.30±1.12比0.40±0.07、3.80±0.60比6.52±1.04),差异有统计学意义(P<0.05)。轻度组、中度组、重度组、极重度组SIRT1表达水平分别为8.64±1.55、6.15±1.28、4.69±0.93、2.28±0.50,随着病情加重SIRT1 mRNA水平逐渐降低,差异有统计学意义(F=6.06,P<0.05)。轻度组、中度组、重度组、极重度组NF-κB mRNA水平分别为2.15±0.49、4.60±0.94、5.95±1.20、8.40±1.51,随着病情加重NF-κB mRNA表达水平逐渐升高,差异有统计学意义(F=8.17,P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,吸烟和SIRT1 mRNA、NF-κB mRNA表达水平均是影响COPD患者肺功能的独立危险因素(P<0.05)。Pearson检验结果表明,COPD患者外周血单核细胞SIRT1 mRNA表达水平与第1秒用力呼气容积与用力肺活量比值(FEV1/FVC)、第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1%pred)呈正相关(r=0.722、0.668,P<0.01),而NF-κB mRNA表达水平与FEV1/FVC、FEV1%pred呈负相关(r=-0.668、-0.672,P<0.01);SIRT1 mRNA表达水平与病情严重程度呈负相关(r=-0.593,P<0.01),NF-κB表达水平与病情严重程度呈正相关(r=0.590,P<0.01)。结论COPD患者外周血单核细胞中SIRT1、NF-κB信号通路相关分子表达紊乱与疾病严重程度及肺功能改变密切相关,及时监测可为病情评估、预后判断提供依据。

血清SIRT1、sICAM-1及PD-L1联合检测对难治性弥漫性大B细胞淋巴瘤患者预后的评估效能

目的探讨血清沉默信息调节因子1(SIRT1)、可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)及细胞程序性死亡-配体1(PD-L1)联合检测对难治性弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者预后的评估效能。方法选取2022年1月至2023年10月在郑州大学第一附属医院诊治的84例难治DLBCL患者作为研究对象,根据治疗后1个月的疾病状态将患者分为预后良好组(57例)和预后不良组(27例),收集患者的一般临床资料;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测患者血清SIRT1、sICAM-1及PD-L1水平;分析血清SIRT1、sICAM-1及PD-L1水平与患者临床特征、治疗效果及预后的关系;采用多因素logistic回归分析,筛选出患者预后不良的影响因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算曲线下面积(AUC),评价血清SIRT1、sICAM-1及PD-L1水平对难治DLBCL患者预后的预测能力。结果预后不良组血清SIRT1、sICAM-1及PD-L1水平均高于预后良好组(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,血清SIRT1、sICAM-1及PD-L1水平是影响难治性DLBCL患者预后不良的独立危险因素(P<0.05);ROC结果显示,血清SIRT1、sICAM-1及PD-L1单独及三者联合预测难治性DLBCL患者预后不良的AUC分别为0.851、0.843、0.924、0.980,且三者联合的预测价值高于单独预测(P<0.05)。结论血清SIRT1、sICAM-1及PD-L1水平可作为难治DLBCL患者预后评估的重要指标,且三者联合检测的效能优于单项检测,对指导临床治疗及监测疾病进展有重要意义。

沉默信息调节因子1在新生儿坏死性小肠结肠炎肠组织中的表达特点

目的·探究沉默信息调节因子1(silent information regulator transcript 1,SIRT1)在坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis,NEC)肠管组织中的表达特点,初步探讨SIRT1对NEC的影响及可能机制。方法·纳入2018年6月—2020年10月经浙江大学医学院附属儿童医院新生儿外科手术治疗的NEC患儿80例,分为观察组和对照组。观察组组织样本为炎症坏死肠管;对照组为经保守治疗后发生肠狭窄,再次选择外科手术治疗的NEC患儿,组织样本为切缘肠管。收集2组患儿术前24 h内的血清中降钙素原(procalcitonin,PCT)、超敏C反应蛋白(hypersensitive C reactive protein,hs-CRP)、细胞因子[白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、IL-4、IL-6、IL-10、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)]以及性别、孕周等临床资料。采用免疫组织化学法检测2组患儿组织样本中的SIRT1、核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)、转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)和Smad3蛋白的表达水平。体外培养SD雌性大鼠小肠上皮IEC-6细胞,采用干扰小RNA(small interfering RNA,siRNA)技术抑制IEC-6细胞中的SIRT1表达后,使用蛋白质印迹检查NF-κB表达变化,通过Cell Counting Kit-8(CCK8)和Transwell迁移实验检测SIRT1对IEC-6增殖和迁移能力的影响。结果·2组患儿的性别、孕周、出生体质量和分娩方式等一般资料差异无统计学意义。与对照组相比,观察组术前24 h内血清hs-CRP、PCT、IL-6、IL-10升高(均P=0.000)。与对照组NEC肠狭窄切缘肠管组织相比,观察组NEC坏死肠管组织中的SIRT1呈低表达,NF-κB呈过表达(均P=0.000)。Smad3蛋白和TGF-β1蛋白表达2组差异无统计学意义。NEC坏死肠管组织中SIRT1与NF-κB表达呈负相关(r=−0.592,P=0.000)。抑制SIRT1的mRNA和蛋白表达后,IEC-6细胞中的NF-κB相对表达量升高,细胞的增殖能力和迁移能力明显降低。结论·SIRT1可能通过抑制NF-κB的表达来降低NEC中炎症因子的表达,从而减轻NEC的进展。另一个可能的机制是SIRT1通过保护肠上皮细胞,减少其凋亡和迁移,从而减轻NEC的进展。

白藜芦醇对糖尿病白内障大鼠正沉默信息调节因子2相关酶1基因表达的影响

目的探讨白藜芦醇对糖尿病白内障大鼠晶状体正沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)基因表达的影响。方法 80只Wistar大鼠随机分为4组:正常对照组、糖尿病模型组及白藜芦醇低剂量组及白藜芦醇高剂量组。糖尿病模型组、白藜芦醇低剂量组及白藜芦醇高剂量组一次性腹腔注射链脲菌素(STZ)(60 mg/kg)制备糖尿病大鼠模型。成模后低剂量组每日20 mg/kg,高剂量组每日100 mg/kg予白藜芦醇灌胃。裂隙灯显微镜照相机记录各组晶状体变化。12周实验结束时测定各组大鼠晶状体丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化酶含量。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组大鼠晶状体SIRT1、肿瘤抑制因子P53、叉头转录因子1、核转录因子κB(NF-κB)表达情况。结果糖尿病模型组大鼠晶状体均发生不同程度混浊,甚至完全混浊,形成白内障。白内障糖尿病大鼠晶状体MDA(7.96±0.51)nmol/mg·prot较正常对照组(4.21±0.27)nmol/mg·prot升高(P<0.01),糖尿病白内障大鼠晶状体SOD、谷胱甘肽过氧化酶[(31.92±5.03)和(7.43±1.53)u/mg·prot]较正常对照组[(61.86±6.17)和(13.61±2.27)u/mg·prot]降低(P<0.01)。高剂量白藜芦醇组大鼠晶状体MDA(4.64±0.42)nmol/mg·prot较白内障糖尿病大鼠晶状体(7.96±0.51)nmol/mg·prot降低(P<0.01)。高剂量白藜芦醇组大鼠晶状体SOD、谷胱甘肽过氧化酶[(52.41±6.54)和(12.76±1.72)u/mg·prot]较白内障糖尿病大鼠晶状体SOD、谷胱甘肽过氧化酶[(31.92±5.03)和(7.43±1.53)u/mg·prot]增高(P<0.01)。白内障糖尿病大鼠晶状体SIRT1 mRNA表达(0.187±0.034)较正常对照组大鼠(0.523±0.089)降低(P<0.01)。高剂量白藜芦醇组大鼠晶状体SIRT1 mRNA表达(0.497±0.072)较白内障糖尿病大鼠晶状体(0.187±0.034)增强(P<0.01)。白内障糖尿病大鼠晶状体P53、叉头转录因子1、NF-κB mRNA表达(0.816±0.153)、(1.269±0.231)、(0.896±0.029)较正常对照组(0.592±0.104)、(0.674±0.112)、(0.495±0.008)增强(P<0.01)。高剂量白藜芦醇组糖尿病大鼠晶状体P53、叉头转录因子1、NF-κB mRNA表达(0.609±0.107)、(0.713±0.121)、(0.397±0.018)较白内障糖尿病大鼠(0.816±0.153)、(1.269±0.231)、(0.896±0.029)降低(P<0.01)。结论白藜芦醇可能通过调节SIRT1表达,进一步调节下游基因P53、叉头转录因子1、NF-κB的表达,抑制和延缓晶状体上皮细胞凋亡,延缓糖尿病大鼠白内障的发生发展。

哺乳类沉默信息调节因子1激活剂可上调肝X受体α-趋化因子受体7泡沫细胞移出信号和抑制炎症信号通路

目的:研究哺乳类沉默信息调节因子(SIRT)1参与调控单核细胞(U937)源性泡沫细胞从动脉粥样硬化斑块移出信号通路及其机制。方法:在体外模拟限制泡沫细胞移出的条件下检测泡沫细胞中SIRT1、肝X受体(LXR)α、趋化因子受体(CCR)7和转录核因子(NF)-κb的蛋白表达。结果:在SIRT1激动剂SRT1720激活下,SIRT1、LXRα和CCR7的蛋白表达水平上调,而NF-κb表达下调。SIRT1抑制剂尼克酰胺可阻断SRT1720的调节作用。结论:SIRT1可能通过上调LXRα-CCR7信号和抑制NF-κb炎症信号通路正向调节泡沫细胞的移出作用。

沉默信息调节因子2相关酶3调控机制及其在奶牛乳腺炎中的作用

沉默信息调节因子2相关酶3(SIRT3)是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)依赖性去乙酰化酶Sirtuin的家族成员,SIRT3主要调控细胞代谢、生物合成、细胞凋亡及氧化应激等方面。本文主要综述了SIRT3与核因子-κB(NF-κB)、单磷酸腺苷依赖的蛋白激酶(AMPK)、非酯化脂肪酸(NEFA)和活性氧(ROS)通路的调控机制以及SIRT3在奶牛乳腺炎中的作用,以期为奶牛乳腺炎的靶向治疗提供理论支撑。

当归芍药散通过调节Sirt1/NF-κB信号通路改善高脂饮食诱导大鼠非酒精性脂肪肝炎症反应

目的:研究当归芍药散治疗高脂饮食(high-fat diet,HFD)诱导的大鼠非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)炎症反应的作用机制。方法:将大鼠随机分为5组:正常组、HFD组、阿伐他丁组、当归芍药散低剂量组、当归芍药散高剂量组。大鼠给予高脂肪饲料(59.3%脂肪饲料)6周,正常组大鼠同时给予正常饲料。从第5周开始,阿伐他丁组大鼠灌胃给予25 mg/kg阿伐他丁2周,当归芍药散低剂量组大鼠灌胃给予12.9 g/kg当归芍药散2周,当归芍药散高剂量组大鼠灌胃给予25.8 g/kg当归芍药散2周,检测大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、甘油三酯(triglyceride,TG)、胆固醇(cholesterol,TC)、血清细胞因子水平。同时检测大鼠肝脏沉默信息调节因子1(sirtuin 1,Sirt1)/核转录因子-κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)信号通路蛋白表达。结果:与模型组比较,当归芍药散能显著降低血清ALT、AST、TG、TC、血清细胞因子水平,改善肝脏组织病理学改变。此外,显著增加大鼠肝脏Sirt1表达,抑制肝脏NF-κB蛋白表达。结论:当归芍药散通过Sirt1/NF-κB通路治疗HFD大鼠NAFLD。

SIRT1/NF-κB信号通路与脑梗死后认知障碍风险及认知障碍程度的相关性分析

目的探讨沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)/核因子-κB(NF-κB)信号通路与脑梗死后认知障碍风险及认知障碍程度的相关性。方法选取2020年6月—2023年1月青海省人民医院收治的153例急性脑梗死患者,采用简易智力状态检查量表(MMSE)评估患者的认知功能,MMSE评分27~30分的患者作为认知正常组(86例)、MMSE评分≤26分的患者作为认知障碍组(67例)。比较两组蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分及MMSE评分;检测患者SIRT1、NF-κB mRNA相对表达量;采用Pearson法分析SIRT1、NF-κB mRNA相对表达量与MoCA评分和MMSE评分的相关性;绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析SIRT1、NF-κB mRNA相对表达量预测认知功能障碍的价值。结果认知障碍组MMSE评分各项目得分及总分均低于认知正常组(P<0.05)。认知障碍组MoCA评分各项目得分及总分均低于认知正常组(P<0.05)。认知障碍组SIRT1 mRNA相对表达量低于认知正常组,NF-κB mRNA相对表达量高于认知正常组(P<0.05)。重度认知功能障碍患者SIRT1 mRNA相对表达量低于中度和轻度认知功能障碍患者(P<0.05),中度认知功能障碍患者低于轻度认知功能障碍患者(P<0.05),重度认知功能障碍患者NF-κB mRNA相对表达量高于中度和轻度认知功能障碍患者(P<0.05),中度认知功能障碍患者高于轻度认知功能障碍患者(P<0.05)。SIRT1 mRNA相对表达量与MoCA评分和MMSE评分呈正相关(r=0.497和0.532,均P<0.05),NF-κB mRNA相对表达量与MoCA评分和MMSE评分呈负相关(r=-0.518和-0.552,均P<0.05)。ROC曲线结果显示,SIRT1、NF-κB mRNA相对表达量单独及联合预测急性脑梗死认知功能障碍发生的曲线下面积分别为0.825(95%CI:0.749,0.901)、0.897(95%CI:0.826,0.968)、0.948(95%CI:0.916,0.980),敏感性分别为73.1%(95%CI:0.674,0.852)、83.6%(95%CI:0.788,0.949)、88.1%(95%CI:0.835,0.918),特异性分别为75.6%(95%CI:0.648,0.842)、80.2%(95%CI:0.755,0.916)、84.9%(95%CI:0.806,0.882)。结论急性脑梗死后认知功能障碍患者SIRT1 mRNA相对表达量较低,NF-κB mRNA相对表达量较高,且表达量与认知功能障碍程度具有关,通过检测其表达可为预测急性脑梗死后认知功能障碍的发生提供帮助。

七叶皂苷钠调控SIRT1/NF-κB信号通路对帕金森病大鼠的神经保护作用

目的探究七叶皂苷钠通过调控沉默信息调节因子1(SIRT1)/核因子κB(NF-κB)信号通路发挥对帕金森病大鼠的神经保护作用。方法采用6-羟基多巴胺注射法构建帕金森病大鼠模型,将建模成功的48只大鼠随机分为模型组、七叶皂苷钠低剂量组(1.8 mg/kg)、七叶皂苷钠高剂量组(3.6 mg/kg)、七叶皂苷钠+EX527组(七叶皂苷钠3.6 mg/kg+SIRT1抑制剂EX5275 mg/kg),每组12只;另取12只健康大鼠作为假手术组。各药物组大鼠腹腔注射相应药液,每天1次,持续21 d。末次给药结束24 h后,检测大鼠运动及认知功能,观察其黑质区和海马组织CA1区神经元形态,检测其黑质纹状体中多巴胺(DA)含量和黑质区酪氨酸羟化酶(TH)、α突触核蛋白(α-Syn)表达水平,检测其血清中促炎因子[白细胞介素6(IL-6)、IL-18]、抗炎因子(IL-10)水平及黑质纹状体中SIRT1、磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)、NF-κB p65蛋白表达水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠黑质区和海马组织CA1区神经元损伤严重;其旋转圈数、逃避潜伏期、黑质区α-Syn蛋白表达水平、血清中促炎因子水平、黑质纹状体中p-NF-κB p65与NF-κBp65蛋白的相对表达量之比均显著升高或延长(P<0.05),目标象限停留时间、黑质纹状体中DA含量及黑质区TH蛋白表达水平、血清中抗炎因子水平、黑质纹状体中SIRT1蛋白表达水平均显著缩短或降低(P<0.05)。与模型组比较,七叶皂苷钠各剂量组大鼠神经元损伤程度减轻,各定量指标均显著改善,且高剂量组的改善更为明显(P<0.05),而EX527可逆转高剂量七叶皂苷钠的改善作用(P<0.05)。结论七叶皂苷钠可通过上调SIRT1蛋白表达来抑制NF-κB信号激活,从而抑制帕金森病大鼠的神经炎症,改善其运动及认知功能障碍,最终起到神经保护作用。