健骨颗粒对ER表达沉默成骨细胞株ROS1728的分化的研究

目的探讨健骨颗粒对成骨细胞中ERα介导的TERT信号通路的调控作用。方法采用雌激素受体拮抗剂ICI182780(Faslodex)阻断成骨细胞中雌激素受体α(ERα)的表达,建立ER抑制的大鼠成骨细胞株ROS1728细胞模型,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测成骨细胞液中碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、骨钙素(osteocalcin,BGP)、Ⅰ型胶原(collagen I,ColⅠ)的含量。采用实时荧光定量SYBR GREEN法检测ERE、ERα、c-MYCmRNA的表达。采用Western Blot检测TERT、ERα、cMYC蛋白的表达。结果 ELISA法检测结果显示:随着干预时间的延长,培养液中的ALP、BGP、ColⅠ的含量逐渐上升。其中对照组3种信号因子的含量最高血,雌激素组次之,健骨颗粒组再次之,模型组最低,各组比较差异有统计学意义(P<0.05),4组TERT、ERα、c-MYCmRNA及蛋白表达量情况以对照组的蛋白表达含量最高,雌激素组次之,健骨颗粒组再次之,模型组最低。各组比较均有统计学意义(P<0.05)。结论雌激素介导TERT信号通路及其相关因子与成骨细胞分化的关系密切,而补肾健脾中药健骨颗粒可通过雌激素介导TERT信号通路促进成骨细胞分化。