冠心病患者血清脂蛋白相关磷脂酶A2水平与锰超氧化物歧化酶9 Ala/Val基因多态性关系探讨

目的探讨锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)基因多态性与脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2)联合检测在冠心病(CHD)早期诊断中的临床价值。方法选取冠心病患者组92例与健康对照组78例,分别检测各组血清中Lp-PLA2活性,Mn-SOD活性以及Mn-SOD基因多态性,分析血清Mn-SOD,Lp-PLA2及Mn-SOD基因多态性与CHD的相关性。测定项目所用方法:Mn-SOD采用比色法,Lp-PLA2采用连续监测法,应用测序法检测Mn-SOD 9 Ala/Val基因多态性的基因型。结果CHD组Mn-SOD 9 VV基因型患者血清Lp-PLA2活性显著高于AV+AA基因型患者,差异具有统计学意义(P<0.01);VV基因型患者血清Mn-SOD活性显著低于AV+AA基因型患者,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论联合检测Mn-SOD 9 Ala/Val基因多态性和血清Lp-PLA2活性,可作为CHD早期诊断、预测的重要依据。

系统性红斑狼疮患者血清D-二聚体、补体C3、清蛋白、超氧化物歧化酶水平与病情活动度的关联性

目的 探讨血清D-二聚体(DD)、补体C3、清蛋白(Alb)、超氧化物歧化酶(SOD)水平与系统性红斑狼疮(SLE)患者病情活动度的关联性。方法 收集2016年8月至2017年2月于解放军总医院第一医学中心就诊的153例SLE患者(SLE组)及同期60例健康查体人员(对照组)的残余血清标本,检测血清DD、补体C3、Alb、SOD水平,比较SLE组和对照组血清相关指标水平变化。根据系统性红斑狼疮疾病活动指数(SLEDAI)评分将SLE患者分为轻度活动组(74例)和中重度活动组(79例),比较两组相关指标的变化。结果 SLE组血清DD水平高于对照组(P<0.05),补体C3、Alb,SOD水平低于对照组(P<0.05);SLE中重度活动组患者血清DD水平高于轻度活动组(P<0.05),补体C3、Alb、SOD水平低于轻度活动组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析模型显示血清DD水平升高,补体C3、SOD水平降低是患者中重度活动度的独立危险因素(P<0.05),且预测模型曲线下面积(AUC)为0.910(95%CI 0.866~0.955,P<0.05),灵敏度为0.785,特异度为0.892。结论 血清DD、补体C3、Alb、SOD与SLE患者病情进展有关,且在患者病情活动度上有一定的预测价值。

2型糖尿病患者糖化血红蛋白、超氧化物歧化酶水平与角膜神经损伤的相关性

目的探讨糖化血红蛋白、超氧化物歧化酶在2型糖尿病(T2DM)患者中的表达以及其与角膜神经损伤的相关性。方法选取焦作市第二人民医院2019年12月至2021年12月收治的80例T2DM患者为研究组,选取同期95例健康体检人群作为对照组。检测受试者糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹血糖(FPG)、餐后2h血糖(2hPG)和超氧化物歧化酶(SOD)水平,并检测角膜神经纤维密度(CNFD)、角膜神经分支密度(CNBD)和角膜神经纤维长度(CNFL),根据角膜神经损伤参数将患者分为损伤组与未损伤组。比较血液指标与角膜神经参数并通过Pearson相关性分析两者相关性。结果研究组HbA1c、FPG和2hPG水平高于对照组,SOD水平低于对照组(P<0.05)。研究组CNFD、CNBD和CNFL水平低于对照组(P<0.05)。研究组角膜神经损伤患者32例,未损伤患者48例。损伤组患者HbA1c、FPG和2hPG均高于未损伤组,SOD水平低于未损伤组(P<0.05)。损伤组患者CNFD、CNBD和CNFL均低于未损伤组(P<0.05)。相关性分析结果显示,CNFD、CNBD和CNFL与HbA1c、FPG和2hPG呈负相关,与SOD呈正相关(P<0.05)。结论T2DM患者的角膜神经损伤参数CNFD、CNBD和CNFL与血液指标HbA1c、FPG和2hPG呈正相关性,与血清SOD表达呈负相关性,患者角膜神经损伤越严重,机体血糖水平越高,血清SOD水平越低。

急性肺部感染超氧化物歧化酶及β_2微球蛋白含量变化的临床意义

对60例肺部感染患者进行SOD-1及β_2-MG含量变化检测,发现感染组SOD-1及β_2-MG含量明显高于对照组,P<0.01。急性肺部感染组中,急慢性支气管炎与肺炎之间无差异,求出SOD-1与脏器损伤相关回归方程,γ=0.7999,P<0.01,证明SOD-1含量变化与脏器损伤程度呈正相关。

糖化血红蛋白、超氧化物歧化酶、胱抑素C、β_2-微球蛋白联合检测对糖尿病患者的临床意义

目的探讨对糖尿病患者的糖化血红蛋白(HbA_1c)、超氧化物歧化酶(SOD)、胱抑素C(Cys-C)、β_2-微球蛋白(β_2-MG)联合检测的临床意义。方法对100例精尿病患者、50例健康人群的HbA_1c、SOD、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、Cys-C、β_2-MG含量进行测定。结果(1)糖尿病患者的HbA_1c、BUN、Cr、Cys-C和β_2-MG指标均显著高于健康对照组,而SOD指标则显著低于健康对照组,与健康对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)根据糖尿病患者的HbA_1c水平不同,将其分为两组。HbA_1 c≤7.0%者为第1组,HbA_1 c>7.0%为第2组;第1组患者的HbA_1 c、BUN、Cr、Cys-C和β_2-MG检测指标较第2组低,而SOD指标较第2组高,两组上述指标比较,差异也有统计学意义(P<0.05)。(3)两组糖尿病患者的SOD、Cys-C、β_2-MG的阳性检出率均高于本组BUN、Cr的阳性检出率,且第2组各项指标的阳性检出率均大于第1组和健康对照组的阳性检出率,差异有统计学意义(P<0.05)。结论对糖尿病患者的HbA_1c、SOD、Cys-C、β_2-MG指标进行联合检测有助于糖尿病肾病的早期诊断。

大豆球蛋白对小肠Ca^(2+)吸收相关酶Ca^(2+)-ATP酶和超氧化物歧化酶活性的影响

为探讨大豆球蛋白对小肠内微量元素Ca2+吸收的影响及相关机制。采用自动生化分析仪测定小肠囊内液中Ca2+浓度,并测定小肠囊中段组织中与Ca2+吸收相关的Ca2+-ATP酶和超氧化物歧化酶活性。结果显示,单独应用大豆球蛋白(0.4~1 mg·mL-1)对小肠囊Ca2+吸收无明显影响,但可剂量依赖性抑制小肠粘膜内Ca2+-ATP酶活性,同时剂量依赖性的反馈性诱导增强小肠粘膜内超氧化物歧化酶活性。1 mg·mL-1大豆球蛋白通过抑制Ca2+-ATP酶活性抑制葡萄糖酸钙Ca2+吸收。综上表明,大豆球蛋白通过抑制Ca2+-ATP酶活性阻碍Ca2+的吸收及转运,并可能通过反馈性的增强SOD的活性以减少氧化自由基对粘膜的进一步损伤。

2型糖尿病伴视网膜病变患者的尿微量白蛋白和超氧化物歧化酶的变化特征

目的分析超氧化物歧化酶(SOD)和尿微量白蛋白与2型糖尿病视网膜病变的关系。方法收集2型糖尿病152例,行眼底镜检查、OCT+眼底照相检查或者眼底血管荧光造影检查,记录患者的一般临床资料,检测空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c%)、总胆固醇(CHOL)、甘油三酯(TRIG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、尿素氮(BUN)、血肌酐(CRE)、超氧化物歧化酶(SOD)以及8h尿液中的微量白蛋白。根据眼底检查结果对这些糖尿病患者进行分组,分析不同指标之间的变化;按照尿液微量白蛋白进行分组,分析DR发生率和SOD在不同组之间的差异。统计分析时,对于定量资料:两组间比较采用成组t检验,三组间比较采用单因素方差分析;对于计数资料:两组间比较采用卡方检验,三组间比较采用k样本的非参数统计。结果根据眼底结果分组,血SOD、血CRE、血BUN以及8h尿微量白蛋白在不同的组之间有统计学差异(P<0.05);按照8h尿微量白蛋白的不同程度分组,DR的发病率随着尿微量白蛋白的排出增加而升高(P<0.05),SOD是随着尿微量白蛋白排出的增加而降低。结论血SOD和尿微量白蛋白在糖尿病视网膜病变的过程中发挥一定的作用。

脑脊液中β2-微球蛋白、超氧化物歧化酶、铁蛋白检测在中枢神经系统白血病诊断中的应用价值

目的探讨脑脊液中β2-微球蛋白、超氧化物歧化酶(SOD)、铁蛋白检测在中枢神经系统白血病(CNSL)诊断中的应用价值。方法将2014年11月至2018年11月南京医科大学附属逸夫医院确诊的138例白血病患者纳入研究,其中CNSL患者70例(CNSL组),非CNSL患者68例(非CNSL组)。将同期该院收治的65例血液系统正常的脑外科患者作为对照组。分析比较上述3组人群脑脊液中β2-微球蛋白、SOD及铁蛋白水平,并分析单独或联合检测脑脊液中β2-微球蛋白、SOD、铁蛋白对CNSL的诊断效能。结果与对照组比较,白血病患者脑脊液中β2-微球蛋白、SOD、铁蛋白水平均显著升高(P<0.05),且CNSL组患者脑脊液中β2-微球蛋白、SOD、铁蛋白水平明显高于非CNSL组患者(P<0.05)。铁蛋白、β2-微球蛋白、SOD 3项指标联合检测灵敏度、特异度、准确度最高,此时ROC曲线下面积最大。结论联合检测脑脊液中β2-微球蛋白、SOD、铁蛋白水平能明显提高CNSL的诊断准确度、灵敏度及特异度,该方法值得推荐。

锰超氧化物歧化酶模拟化合物通过Fas途径诱导白血病K562细胞凋亡

目的:探讨锰超氧化物歧化酶模拟化合物(mi mics of manganese superoxide dismutase,MnSODm)对人白血病K562细胞的凋亡诱导效应及作用机制。方法:应用MTT比色法、An-nexin V/PI双标记和细胞形态学法观察细胞凋亡;流式细胞术(FCM)测定Fas蛋白表达水平;RT-PCR检测Caspase-3mRNA的表达水平,比色法测定Caspase-3活性变化。结果:MnSODm作用后K562细胞的增殖受到抑制,Annexin V/PI染色显示凋亡细胞明显增多,透射电镜观察呈现典型的凋亡形态改变。同时,Fas蛋白表达水平显著增高,Caspase-3mRNA表达水平明显升高,活性显著增强。结论:MnSODm可能通过Fas途径诱导白血病K562细胞凋亡。

血清脂蛋白相关磷脂酶A2和超氧化物歧化酶在脑小血管病患者轻度认知障碍中的临床价值

目的探讨血清脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)和超氧化物歧化酶(SOD)在脑小血管病(CSVD)患者轻度认知障碍(MCI)中的临床价值。方法选取CSVD患者120例,根据患者入院时的蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分结果分为MCI组(MoCA评分<26分)和对照组(MoCA评分≥26分)。收集患者的一般资料、既往病史,检测其血浆Lp-PLA2和SOD水平。采用Pearson相关分析评估Lp-PLA2、SOD与MoCA评分的相关性。采用多因素Logistic回归分析评估MCI的危险因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价Lp-PLA2、SOD辅助诊断MCI的价值。结果MCI组Lp-PLA2水平高于对照组(P<0.05),SOD水平低于对照组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,Lp-PLA2是MCI的危险因素[比值比(OR)=3.241,95%可信区间(CI)为2.014~5.362],SOD是MCI的保护性因素(OR=0.652,95%CI为0.407~0.964)。Pearson相关分析结果显示,Lp-PLA2与MoCA评分呈负相关(r=-0.535,P=0.017),SOD与MoCA评分呈正相关(r=0.684,P=0.008)。Lp-PLA2、SOD单项检测和联合检测诊断MCI的曲线下面积(AUC)分别为0.813、0.738、0.903,联合检测效能优于单项检测(P<0.05)。结论Lp-PLA2和SOD均为CSVD患者MCI的影响因素,两者联合检测有助于MCI的辅助诊断。

肝细胞癌超氧化物歧化酶铜伴侣蛋白表达水平与肝癌恶性生物学指标的相关性

【目的】探讨肝细胞癌(HCC)超氧化物歧化酶铜伴侣蛋白(CCS)表达水平与肿瘤恶性生物学指标之间的相关性。【方法】收集2018年1月至2018年12月在中山大学附属第一医院行外科切除的10例肝细胞癌肿瘤标本以及患者的临床及病理资料,采用蛋白免疫印迹法(WB)检测肝癌及相应癌旁组织CCS表达水平,采用免疫组化(IHC)染色法检测Ki67,CD34,vimentin及glypican-3(GPC3)表达情况。用Wilcoxon秩和检验法分析CCS表达水平与各肝细胞癌恶性相关生物学指标Ki67,CD34,vimentin及GPC3表达水平之间的关系;采用Fisher精确概率法分析CCS表达水平与肝细胞癌患者临床及病理特征之间的关系。【结果】10例肝癌患者的肝癌组织标本中,7例CCS表达水平较癌旁组织低(7/10),3例CCS表达水平较癌旁组织高(3/10)。肝细胞癌CCS低表达组的Ki67,vimentin及GPC3表达水平高于CCS高表达组(Z=-2.400,P=0.016;Z=-2.423,P=0.015;Z=-2.400,P=0.016);肝细胞癌CCS低表达组CD34表达水平低于CCS低表达组(Z=-2.423,P=0.015);CCS高表达组与低表达组之间在年龄、性别、乙肝病史、肝硬化、术前AFP水平、肿瘤大小、ES分级、微血管侵犯各临床及病理特征方面均未呈现显著统计学差异。【结论】本研究显示多数肝细胞癌的CCS表达水平低于相应癌旁组织,且与CCS高表达的肝细胞癌相比,CCS低表达的肝细胞癌Ki67,vimentin及GPC3表达水平较高,提示CCS表达降低与肝细胞癌增殖、侵袭、转移等恶性生物学行为相关。CCS低表达组CD34表达水平低于CCS高表达组,但其相关机制有待于进一步探究。本研究结果显示,与正常肝脏组织相比,CCS在肝癌中的表达多呈下降趋势,其表达水平可能成为肝细胞癌治疗预后的预测指标。

白藜芦醇激活超氧化物歧化酶2减轻失血性休克大鼠的肠屏障损伤

目的探讨白藜芦醇改善失血性休克肠损伤的作用机制。方法SPF级雄性SD大鼠64只，按随机数字表法分为假手术组（Sham组，麻醉后仅行动静脉置管术）、失血性休克模型组（模型组，大鼠麻醉后行动静脉置管术，休克后给予0．3mL溶剂）、白藜芦醇组（大鼠麻醉后行动静脉置管术，休克后给予白藜芦醇15mg／kg）、超氧化物歧化酶2（SOD2）特异性抑制剂（2-ME）组（在白藜芦醇组基础上加用2-ME，浓度为0．1mmol／L）。采用股动脉放血的方法复制大鼠失血性休克模型。大鼠给药后分成两批，一批用以观察各组24h存活率和存活时间；另一批在休克2h后取血测定血清D-乳酸含量，取小肠组织观察病理学改变和Chiu评分，并比较小肠组织紧密连接蛋白Occludin、Claudin、ZO—1的蛋白表达水平和氧化应激相关指标SOD，活性及还原型谷胱甘肽（GSH）、氧化型谷胱甘肽（CSSC）、丙二醛（MDA）含量的差异。结果与Sham组比较，模型组大鼠存活率、SOD，活性、GSH、GSH／GSSG均降低，生存时间缩短，D-乳酸、Chiu评分和MDA含量均明显升高，小肠组织紧密连接蛋白表达减少。与模型组比较，白藜芦醇组大鼠存活率明显升高[75．0％（6／8）比37．5％（3／8）]，生存时间显著延长（h：21．0±4.3比10．4±5．8，P〈0．05），血D-乳酸含量、小肠组织病理评分明显降低[D-乳酸（μg／L）：380．18±70．59比500．88±97．53，Chiu评分（分）：1．75±0．71比4．00±0．53，均P〈0．05]，紧密连接蛋白表达、SOD2活性、GSH和GSH／GSSG明显升高[Occludin蛋白（灰度值）：0．89±0．10比0．43±0．07，Claudin蛋白（灰度值）：0．78±0．06比0．33±0．05，ZO-1蛋白（灰度值）：0．83±0．06比0．34±0．07，SOD2（kU／L）：0．85±0．12比0．51±0．11，GSH（μmol／L）：7．25±1．01比3．86±0．54，GSH／GSSG：6．39±1．14比1．56±0．25，均P〈0．05]，MDA显著降低（ng／g：5．00±1．31比8．63±0．92，P〈0．05）。与白藜芦醇组比较，2-ME组大鼠存活率明显降低[50．0％（4／8）比75．0％（6／8）]，生存时间再度缩短（h：12．2±5．7比21．0±4．3，P〈0．05），D-乳酸含量增加（μg／L：463．88±60．16比380．18±70．59）和Chiu评分评分升高（分：3．13±0．99比1．75±0．71，P〈0．05），紧密蛋白表达降低[Occludin蛋白（灰度值）：0．55±0．04比0．89±0．10，Claudin蛋白（灰度值）：0．38±0．05比0．78±0．06，ZO-1蛋白（灰度值）：0．41±0．04比0．83±0．06，均P〈0．05]，SOD，活性、GSH、GSH／GSSG下降[SOD2活性（kU／L）：0．58±0．13比0．85±0．12，GSH（μmol／L）：4．49±0．52比7．25±1．01，GSH／GSSG：1．57±0．39比6．39±1．14]，MDA含量增加（ng／g：6．25±1．04比5．00±1．31，P〈0．05）。Sham组小肠组织基本正常未见明显病理学改变；模型组小肠上皮绒毛倒塌，黏膜屏障破坏明显；白藜芦醇组小肠绒毛和小肠屏障的破坏明显减轻；2-ME组病理学改变较白藜芦醇组明显。结论白藜芦醇能改善失血性休克大鼠的肠屏障损伤，其机制可能与激活SOD，有关。

梅州地区2型糖尿病患者血清超氧化物歧化酶水平及其影响因素的分析

目的测定梅州地区2型糖尿病(T2DM)患者血清超氧化物歧化酶(SOD)水平,并分析其影响因素。方法方便选取2019年3—12月期间T2DM患者(T2DM组)212例和健康体检者(对照组)210名,测定血清SOD、糖化血红蛋白(HbA1c)、葡萄糖(Glu)、胰岛素C肽(C-P)及胰岛素(Ins)水平,并进行统计学分析。结果T2DM组血清SOD水平显著低于对照组[208(186~234)U/mL vs 213(180~252)U/mL,差异有统计学意义(U=44.624,P<0.010);在T2DM组中,男性与女性的血清SOD水平[209(184~229)U/mL vs 206(186~252)U/mL],差异无统计学意义(t=1.529,P>0.05);T2DM组中,各年龄段血清SOD水平有显著性差异,且血清SOD水平与年龄呈负相关(r=-0.267,P<0.010);回归分析显示,血清SOD水平降低与HbA1c水平相关。结论T2DM患者的血清SOD水平较正常人低,且主要与年龄与HbA1c水平相关。

白藜芦醇通过沉默调节蛋白1-解偶联蛋白2信号通路降低小鼠睾丸间质细胞TM3的氧化损伤

本试验旨在研究白藜芦醇(RES)对氧化损伤小鼠睾丸间质细胞TM3的保护作用,并探索其可能的作用机制。首先,用不同浓度(0、150、200、250、300μmol/L)的过氧化氢(H2O2)处理小鼠睾丸间质细胞TM3 8 h,确定建立氧化损伤细胞模型的适宜H2O2浓度;然后,用不同浓度(0、2.5、5.0和10.0μmol/L)的RES分别处理正常细胞24 h,确定RES安全浓度;最后,用安全浓度的RES处理氧化损伤细胞24 h。在整个培养过程中采用i CELLigence实时无标记细胞功能分析仪监测细胞的增殖情况;待安全浓度的RES处理氧化损伤细胞结束后采用2',7'-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)探针法检测细胞中活性氧(ROS)的含量,实时荧光定量PCR(RT-q PCR)和蛋白质印迹(Western blotting)法分别检测沉默调节蛋白1(SIRT1)/解偶联蛋白2(UCP2)信号通路中关键因子SIRT1和UCP2 mRNA和蛋白质的相对表达量。结果表明:1)用浓度为150μmol/L及以上的H2O2处理细胞8 h后,极显著降低细胞存活率(P<0.01),因此确定150μmol/L为建立氧化损伤细胞模型的适宜H2O2浓度。2)用10.0μmol/L及以下浓度的RES处理正常细胞24 h后,细胞存活率均无显著变化(P>0.05);用2.5、5.0和10.0μmol/L的RES处理氧化损伤细胞24 h后,细胞存活率均显著提高(P<0.05),且各浓度RES组间无显著差异(P>0.05)。因此,选用5.0μmol/L为RES的安全浓度。3)用5.0μmol/L的RES处理氧化损伤细胞24 h后,细胞中ROS的含量极显著降低(P<0.01);细胞中SIRT1 mRNA和蛋白质的相对表达量极显著增加(P<0.01),而UCP2 mRNA和蛋白质的相对表达量则显著或极显著降低(P<0.01或P<0.05)。由此可见,适宜浓度的RES可激活SIRT1同时抑制UCP2的表达,UCP2通过负反馈调节方式减少细胞内ROS的生成,从而在一定程度上抑制TM 3细胞的氧化损伤。

锰超氧化物歧化酶基因V(16)A多态性的种族差异及与糖尿病肾病的关系

目的:探讨锰超氧化物歧化酶(MnSOD)基因V(16)A多态性的种族差异及与糖尿病肾病(DN)的关系.方法:在中国昆明地区汉族人中对187例2型糖尿病患者(其中正常白蛋白尿即DN0组50例,微量白蛋白尿DN1组64例,大量白蛋白尿即DN2组73例)和97例健康对照者的MnSOD基因V(16)A多态性进行检测,并比较不同种族中该位点基因型和等位基因分布及频率.结果:(1)中国昆明地区汉族人中存在MnSOD基因V(16)A多态性;(2)与日本人群、俄罗斯人群相比其基因型和等位基因频都存在显著性差异,中国和日本人群以VV型为主,俄罗斯人群以AA和AV型为主;(3)DN组(DN1+DN2)VV基因型和V等位基因频率显著高于不伴肾病的DN0组(分别为χ2=6·42和5·08,P<0·05),Logistic回归分析表明VV基因型相对于VA+AA基因型是DN发生的遗传危险因素.结论:MnSODV(16)A多态性分布存在种族异质性,在中国昆明汉族人2型糖尿病患者中MnSOD基因V(16)A多态性与DN发生相关.不同种族人群MnSODV(16)A多态性分布的差异,可能是亚裔人群比白种人群2型糖尿病患者DN发病率高的原因之一.

沉默1,25-二羟维生素D_3受体基因对高糖诱导的肾小管上皮细胞解偶联蛋白2表达及氧化应激的影响

目的:观察1,25-二羟维生素D_3(1,25-dihydroxyvitamin D_3,1,25-(OH)_2Vit D_3)及其受体(vitamin D receptor,VDR)对高糖诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)解偶联蛋白2(UCP2)表达及氧化应激的影响,探讨1,25-(OH)_2Vit D_3在糖尿病肾病(DN)进展中的作用。方法:利用RNAi技术构建基因干扰表达载体质粒p GIPZ-VDR,脂质体介导质粒转染HK-2细胞,构建稳定转染细胞系。细胞分组:未转染低糖对照组(NG组,5.5 mmol/L D-葡萄糖)、稳转低糖控制组(CG组,5.5 mmol/L D-葡萄糖)、未转染高糖诱导组(HG组,30 mmol/L D-葡萄糖)、稳转高糖诱导组(THG组,30 mmol/L D-葡萄糖)、未转染高糖+Vit D_3处理组(VG组,30 mmol/L D-葡萄糖+10-7mol/LVit D_3)、稳转高糖+Vit D_3处理组(TVG组,30 mmol/L D-葡萄糖+10-7mol/LVit D_3)、稳转高渗对照组(MG组,5.5 mmol/L D-葡萄糖+24.5 mmol/L D-甘露醇)、稳转无水乙醇溶剂对照组(SG组,30 mmol/L D-葡萄糖+6.86×10-2mmol/L无水乙醇)。实时荧光定量PCR及Western blot法检测HK-2细胞中VDR及UCP2的mRNA和蛋白表达;比色法检测胞内总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力和丙二醛(MDA)水平。结果:(1)稳转细胞中VDR mRNA和蛋白表达显著低于转染空载质粒组(P<0.01);(2)与CG组比较,HG组、THG组、TVG组中T-SOD活力均降低(P<0.05)而MDA水平均显著升高(P<0.05),但此三组之间比较T-SOD活力及MDA水平差异无统计学意义(P>0.05);与THG组比较,VG组T-SOD活力显著升高(P<0.05),MDA水平显著下降(P<0.05);(3)与NG组比较,CG组UCP2 mRNA和蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);与CG组比较,HG组和THG组UCP2mRNA及蛋白表达显著升高(P<0.05),但此二组之间差异无统计学意义;与THG组比较,VG组UCP2mRNA和蛋白表达显著下降(P<0.05),而TVG组UCP2mRNA和蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:沉默VDR基因并不影响高糖诱导HK-2细胞时胞内UCP2高表达以及氧化应激水平增高;1,25-(OH)_2Vit D_3可能通过VDR介导的途径来调节细胞内UCP2的表达并抑制高糖诱导下的氧化应激反应。

沉默交配型信息调节因子2同源蛋白3在肿瘤中的双重作用

沉默交配型信息调节因子2同源蛋白3(SIRT3)是定位于线粒体的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸依赖的去乙酰化酶,能够系统地调控线粒体蛋白的乙酰化水平,在调控活性氧水平、调节线粒体代谢、维持线粒体动态平衡等方面起着至关重要的作用。因此,SIRT3在癌症发生和发展中的作用也受到了学者们的广泛关注。研究发现,在不同的癌症类型中,SIRT3扮演着促癌或抑癌的双重角色,这与癌症的个体差异及SIRT3所调控的靶点不同有关。本文主要探讨SIRT3的生物学功能及其在不同癌症中的作用机制,为SIRT3作为肿瘤精准化治疗的潜在靶点提供理论参考。

毛蕊异黄酮调节SIRT3/SOD2信号通路对小鼠气道上皮细胞损伤的改善作用

目的探讨毛蕊异黄酮(CA)对香烟烟雾(CS)诱导的小鼠气道上皮细胞损伤及沉默蛋白3/超氧化物歧化酶2(SIRT3/SOD2)信号通路的影响。方法将90只雄性BALB/c小鼠随机分为对照(Control)组、CS组、CA低剂量处理组(CA-L组)、CA高剂量处理组(CA-H组)、CA高剂量处理+SIRT3抑制剂3-TYP组(CA-H+3-TYP组),每组18只。采用小动物全身体积描记检测系统检测肺功能指标潮气量(TV)、呼气峰流速(PEF);酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清炎性因子[白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α]及氧化应激[活性氧(ROS)、SOD]水平;HE染色观察肺组织气道上皮细胞损伤;免疫组化检测气道上皮细胞屏障相关蛋白[闭合蛋白(OCLN)、闭锁小带蛋白1(ZO-1)]表达;蛋白免疫印迹检测SIRT3/SOD2信号通路相关蛋白表达。结果与Control组相比,CS组TV、PEF、MAN和SOD水平及OCLN、ZO-1、SIRT3、SOD2蛋白表达水平降低,MLI及IL-6、TNF-α、ROS水平升高(P<0.05);CS组较Control组肺组织结构明显破坏,肺泡增大明显,肺泡周围伴有炎性细胞浸润,气道上皮细胞脱落明显。不同剂量CA均可减轻肺组织破坏,改善肺泡结构,减轻炎性细胞浸润,减少气道上皮细胞脱落,升高TV、PEF、MAN和SOD水平及OCLN、ZO-1、SIRT3、SOD2蛋白表达水平,降低MLI及IL-6、TNF-α、ROS水平,且高剂量CA的作用较低剂量CA显著(P<0.05);SIRT3/SOD2信号通路抑制剂3-TYP可逆转CA对CS诱导的小鼠气道上皮细胞损伤的改善作用。结论CA可改善CS诱导的小鼠气道上皮细胞损伤,其作用机制与激活SIRT3/SOD2信号通路有关。

Keap1/Nrf2信号通路在非小细胞肺癌氧化应激机制中的作用

目的检测非小细胞肺癌(NSCLC)组织中Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白表达水平,分析其与临床病理参数、氧化应激指标的相关性,为临床治疗提供潜在靶点。方法选取2017年4月至2020年4月郑州市第三人民医院收治的100例NSCLC患者为研究对象,免疫组化法检测并比较癌组织、癌旁组织中Keap1、Nrf2蛋白表达水平;比较不同临床病理参数患者Keap1、Nrf2蛋白表达水平;比较不同Keap1、Nrf2蛋白表达患者血清超氧化物歧化酶(SOD)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、丙二醛(MDA)水平,并采用Spearman法分析SOD、i NOS、MDA与临床病理参数的相关性,采用Pearson法分析SOD、iNOS、MDA与Keap1、Nrf2蛋白水平的的相关性;比较不同Keap1、Nrf2蛋白表达患者的生存率。结果癌组织、癌旁组织Keap1蛋白阳性率分别为77.00%、53.00%,Nrf2蛋白阳性率分别为74.00%、45.00%,Keap1蛋白OD值分别为0.41±0.07、0.33±0.05,Nrf2蛋白OD值分别为0.39±0.06、0.31±0.06,癌组织Keap1、Nrf2蛋白阳性率及OD值明显高于癌旁组织,差异均有统计学意义(P<0.05);Keap1蛋白阳性表达与病理分级、T分期呈正相关(r=0.569、0.574,P<0.01),Nrf2蛋白阳性表达与病理分级、T分期呈正相关(r=0.527、0.539,P<0.01);Keap1蛋白阳性者、阴性者的血清SOD水平分别为(86.78±9.14)U/m L、(115.07±12.13)U/m L,MDA水平分别为(4.42±0.82)mmol/L、(3.24±0.56)mmol/L,i NOS水平分别为(22.74±4.31)U/m L、(15.59±3.02)U/mL,Nrf2蛋白阳性者、阴性者血清SOD水平分别为(84.94±9.12)U/mL、(117.06±12.37)U/mL,MDA水平分别为(4.48±0.85)mmol/L、(3.21±0.52)mmol/L,iNOS水平分别为(23.02±4.28)U/mL、(15.64±3.10)U/mL,Keap1、Nrf2蛋白阳性者血清SOD水平明显低于阴性者,MDA、iNOS水平明显高于阴性者,差异均有统计学意义(P<0.05);Keap1、Nrf2蛋白表达与SOD呈负相关(r=-0.612、-0.614,P<0.01),与MDA、iNOS呈正相关(r_(Keap1)=0.609、0.614,P<0.01;r_(Nrf2)=0.610、0.608,P<0.01);Keap1、Nrf2蛋白阳性表达者3年生存率为85.71%、83.78%,明显低于阴性表达者的95.65%、100.00%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论NSCLC组织中Keap1、Nrf2蛋白表达水平升高,且与病理分级、T分期密切相关,该信号通路活化可参与氧化应激反应过程,且对预判患者预后具有一定临床意义。