沉默调节蛋白1对脂多糖诱导大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞损伤的影响

目的 探讨沉默调节蛋白1(SIRT1)在脂多糖(LPS)诱导的大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞损伤中的作用及机制。方法 分离大鼠原代Ⅱ型肺泡上皮细胞,并分为对照组、模型组和实验组。模型组和实验组分别用空白和SIRT1 shRNA慢病毒感染后,再加入LPS诱导细胞损伤。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)和Western blot检测SIRT1的表达;采用CCK-8实验检测细胞活力;采用实时荧光定量PCR和酶联免疫吸附测定(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)的表达;采用JC-1染色法检测线粒体膜电位;采用化学显色法检测细胞丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果 与对照组相比,模型组Ⅱ型肺泡上皮细胞SIRT1 mRNA和蛋白表达水平升高,细胞活力下降,促炎因子TNF-α和IL-1β的mRNA表达水平和分泌水平升高,线粒体膜电位下降,MDA水平升高,SOD活性下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,实验组Ⅱ型肺泡上皮细胞SIRT1 mRNA和蛋白表达水平下降,细胞活力升高,促炎因子TNF-α和IL-1β的mRNA表达水平和分泌水平下降,线粒体膜电位升高,MDA水平下降,SOD活性升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 SIRT1通过影响线粒体活性和细胞氧化还原稳态促进LPS诱导的Ⅱ型肺泡上皮细胞损伤。

白藜芦醇通过沉默调节蛋白1-解偶联蛋白2信号通路降低小鼠睾丸间质细胞TM3的氧化损伤

本试验旨在研究白藜芦醇(RES)对氧化损伤小鼠睾丸间质细胞TM3的保护作用,并探索其可能的作用机制。首先,用不同浓度(0、150、200、250、300μmol/L)的过氧化氢(H2O2)处理小鼠睾丸间质细胞TM3 8 h,确定建立氧化损伤细胞模型的适宜H2O2浓度;然后,用不同浓度(0、2.5、5.0和10.0μmol/L)的RES分别处理正常细胞24 h,确定RES安全浓度;最后,用安全浓度的RES处理氧化损伤细胞24 h。在整个培养过程中采用i CELLigence实时无标记细胞功能分析仪监测细胞的增殖情况;待安全浓度的RES处理氧化损伤细胞结束后采用2',7'-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)探针法检测细胞中活性氧(ROS)的含量,实时荧光定量PCR(RT-q PCR)和蛋白质印迹(Western blotting)法分别检测沉默调节蛋白1(SIRT1)/解偶联蛋白2(UCP2)信号通路中关键因子SIRT1和UCP2 mRNA和蛋白质的相对表达量。结果表明:1)用浓度为150μmol/L及以上的H2O2处理细胞8 h后,极显著降低细胞存活率(P<0.01),因此确定150μmol/L为建立氧化损伤细胞模型的适宜H2O2浓度。2)用10.0μmol/L及以下浓度的RES处理正常细胞24 h后,细胞存活率均无显著变化(P>0.05);用2.5、5.0和10.0μmol/L的RES处理氧化损伤细胞24 h后,细胞存活率均显著提高(P<0.05),且各浓度RES组间无显著差异(P>0.05)。因此,选用5.0μmol/L为RES的安全浓度。3)用5.0μmol/L的RES处理氧化损伤细胞24 h后,细胞中ROS的含量极显著降低(P<0.01);细胞中SIRT1 mRNA和蛋白质的相对表达量极显著增加(P<0.01),而UCP2 mRNA和蛋白质的相对表达量则显著或极显著降低(P<0.01或P<0.05)。由此可见,适宜浓度的RES可激活SIRT1同时抑制UCP2的表达,UCP2通过负反馈调节方式减少细胞内ROS的生成,从而在一定程度上抑制TM 3细胞的氧化损伤。

沉默调节蛋白1在非酒精性脂肪性肝病发生发展中的作用

沉默调节蛋白1(SIRT1)为Sirtuin家族的一员,是依赖于烟酰腺嘌呤二核苷酸(NAD+)的去乙酰化酶,其主要作用是参与能量代谢﹑细胞生存、衰老及凋亡。而非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是一种与胰岛素抵抗、氧化应激及脂质过氧化等密切相关的慢性肝脏疾病。从SIRT1与NAFLD者的能量代谢关系﹑SIRT1与氧化应激、脂质过氧化、内质网应激等方面进行了阐述,认为SIRT1与NAFLD的发生发展密切相关。

微小RNA217靶向人沉默调节蛋白1对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的探讨微小RNA-217(miR-217)对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响途径。方法采用反转录实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测人正常结肠上皮细胞NCM460和人结直肠癌细胞SW620、RKO、HT-29、HCT116中miR-217表达水平。将miR-217模拟物(mimic)与阴性对照(mimic NC)分别转染于RKO细胞系, 检测miR-217表达水平。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)与平板克隆实验检测细胞增殖活力;采用划痕愈合实验、Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力;采用RT-qPCR与蛋白质印迹法(Western blot)检测沉默信息调节因子1(SIRT1) mRNA与蛋白表达水平。两组间比较采用t检验, 多组间比较采用单因素方差分析(ANOVA)。结果 miR-217在人结直肠癌细胞系中表达水平降低, 其中RKO细胞系明显低于NCM460细胞系[(0.286±0.022)倍比(1.000±0.090)倍, t=13.360, P<0.01], 差异有统计学意义。RKO细胞系转染miR-217 mimic后, miR-217表达水平高于NC组[(5.276±0.437)倍比(1.000±0.168)倍, t=15.820, P<0.01], 差异有统计学意义。CCK-8实验表明miR-217 mimic组细胞24、48、72 h吸光度值低于NC组[(0.867±0.030)倍比(1.260±0.0222)倍, t=18.440, P<0.01], 差异有统计学意义。平板克隆实验表明miR-217 mimic组细胞集落形成能力低于NC组[(80.570±43.320)倍比(116.600±81.230)倍, t=3.823, P<0.01], 差异有统计学意义。划痕实验及Transwell实验证实miR-217 mimic组细胞迁移及侵袭能力低于NC组[划痕实验:(0.133±0.009)倍比(0.365±0.010)倍, t=29.960, P<0.01;Transwell迁移实验:(157.000±3.000)倍比(248.300±13.580)倍, t=11.380, P<0.01;Transwell侵袭实验:(149.000±7.937)倍比(287.000±5.568)倍, t=24.650, P<0.01], 差异有统计学意义。通过生物信息学分析并筛选出miR-217靶基因人SIRT1, RT-qPCR结果表明miR-217 mimic组细胞中SIRT1 mRNA表达水平低于NC组[(0.682±0.162)倍比(1.000±0.075)倍, t=3.090, P<0.05], 差异有统计学意义。Western blot表明, 转染miR-217 mimic后, 结直肠癌细胞中SIRT1蛋白表达水平发生显著下降。结论 miR-217在人结直肠癌中低表达, 且可能通过SIRT1抑制结直肠癌细胞增殖、迁移、侵袭能力。

烟酰胺磷酸核糖基转移酶及沉默信息调节因子2同源蛋白1在乳腺癌组织中的表达及与患者临床病理特征的关系

目的:探讨在乳腺癌组织中烟酰胺磷酸核糖基转移酶(NAMPT)及沉默信息调节因子2同源蛋白1(SIRT-1)的表达率及与患者临床病理特征的关系。方法:选取手术成功切除乳房的381例乳腺癌患者为研究对象,均随访5年或随访至患者死亡,采用免疫组织化学方法检测三阴性乳腺癌患者、非三阴性乳腺癌患者NAMPT及SIRT-1的蛋白表达,并分析其与临床病特征的关系及NAMPT表达与SIRT-1表达的关系,分析NAMPT、SIRT-1表达与临床特征之间的相关性。结果:三阴性乳腺癌患者NAMPT高表达率高于非三阴性乳腺癌患者(P<0.05);年龄≥56岁、有淋巴结转移、无病生存期<55个月的乳腺癌患者NAMPT高表达率高于年龄<56岁、无淋巴结转移、无病生存期≥55个月的乳腺癌患者(均P<0.05);有淋巴结转移、无病生存期<55个月的乳腺癌患者SIRT-1高表达率高于年龄<56岁、无病生存期≥55个月的乳腺癌患者(均P<0.05);NAMPT高表达的乳腺癌患者SIRT-1高表达率高于SIRT-1低表达率(P<0.05),乳腺癌患者NAMPT、SIRT-1表达与淋巴结转移、无病生存期呈正相关(r=0.079、0.505;0.462、0.497,P<0.05)。结论:NAMPT在三阴性乳腺癌中表达上调,NAMPT可影响SIRT-1的表达,同时年龄可影响NAMPT及SIRT-1的表达,且两者高表达预示患者可能出现淋巴结转移、预后差。

细胞沉默调节蛋白1在氟中毒大鼠脑组织中的表达

目的探讨细胞沉默调节蛋白1（SIRTl）在不同剂量染氟致脑损伤大鼠脑组织中的表达。方法清洁级SD大鼠48只，按体质量（90～100g）采用随机数字表法分为4组：对照组（正常饲料，含氟量为4．5mg／kg）、低氟组（饲料含氟量为25．0mg／kg）、中氟组（饲料含氟量为50．0mg／kg）和高氟组（饲料含氟量为100．0mg／kg），每组12只，雌雄各半。各组大鼠自由饮用自来水，低、中、高氟组自由食用课题设计不同配方的原煤加拌泥煤烘烤的玉米饲料，饲料中其他成分与对照组饲料相同，于染氟90d处死大鼠。在处死大鼠前7d，采用Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力；处死大鼠后立即取脑组织和大腿长骨。尿氟和骨氟测定采用氟离子选择电极法，脑组织SIRT1mRNA和蛋白表达检测采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）和蛋白免疫印迹法（Westem Blot）。结果在空间探索实验中，对照组和低、中、高氟组首次穿越平台时间[（9．8±5．5）、（15．8±5．1）、（22．2±7．9）、（30．5±8．5）s]组间比较差异有统计学意义（F=10．853，P〈0．05）；对照组和低、中、高氟组大鼠穿越平台次数[（5．2±2．1）、（3．3±1．6）、（1．3±1．1）、（1．2±0．8）次／608]组间比较差异有统计学意义（F=10．105，P〈0．05）；对照组和低、中、高氟组大鼠原平台象限停留时间[（30．5±9．8）、（22．7±4．6）、（13．8±4．8）、（7．0±2．4）s]组间比较差异有统计学意义（F=17．433，P〈0．05），其中中、高氟组明显低于对照组（P均〈0．05）；随染氟剂量增加，首次穿越平台时间逐渐延长，穿越平台次数和原平台象限停留时间逐渐降低，中、高氟组与低氟组比较差异均有统计学意义（P均〈0．05）。对照组和低、中、高氟组SIRT1mRNA表达（0．979±0．088、0．907±0．050、0．426±0．073、0．219±0．092）组间比较差异有统计学意义（F=136．837，P〈0．05）；对照组和低、中、高氟组SIRT1蛋白表达（1．224±0．139、0．988±0．096、0．581±0．084、0．269±0．066）组间比较差异有统计学意义（F=107．961，P〈0．05）；随染氟剂量的增加，SIRT1mRNA和蛋白表达水平均逐渐降低，中、高氟组与低氟组比较差异均有统计学意义（P均〈0．05）。结论氟中毒可影响大鼠学习记忆能力，大鼠脑组织中SIRT1mRNA和蛋白表达水平降低，随染氟剂量的增加，变化更为明显。

沉默调节蛋白1抗胰岛INS-1细胞凋亡作用的研究

目的通过观察游离脂肪酸(FFA)对INS-1细胞沉默调节蛋白1(SIRTl)、活性氧(ROS)水平和凋亡的影响,探讨FFA损害胰岛β细胞功能及SIRTl保护细胞的机制。方法将INS-1细胞分为牛血清白蛋白(BSA)对照组和FFA组,作用36h后分别检测SIRT1 mRNA水平、ROS水平和凋亡变化。构建SIRT1过表达质粒,转染INS-1细胞,再在上述两组条件下作用36h后分别检测ROS水平和凋亡变化。结果与BSA组比较,FFA组SIRT1 mRNA相对表达量下降(0.50±0.12 vs 1.02土0.08,P<0.01)、ROS水平明显增加(458.15±134.94 vs132.86±51.80,P<0.01)、凋亡增加(36.55±8.16vs 5.85±1.65,P<0.01)。在FFA作用下,SIRTl过表达质粒转染INS-I细胞后较转染前ROS水平下降(284.80±87.97 vs 458.15±134.94,P<0.01),凋亡减少(18.72±7.13vs 36.55±8.16,P<0.01)。结论 FFA对IN S-1细胞功能的损害与氧化应激有关,而SIRT1过表达可减少ROS产生,减少凋亡,从而保护INS1细胞功能。

田蓟苷调节AMPK/SIRT1/PGC1α信号通路对脑出血大鼠认知功能和神经元损伤的影响

目的:探讨田蓟苷(TIL)对脑出血(ICH)大鼠认知功能、神经元损伤及腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)/沉默调节蛋白1(SIRT1)/过氧化物酶体增殖活化受体γ辅助活化因子1α(PGC1α)信号通路的影响。方法:采用Ⅳ型胶原酶注射法构建ICH大鼠模型,将造模成功的ICH大鼠随机分为模型组(ICH组)、TIL组(16 mg/kg)、AMPK抑制剂组(Compound C组,250μg/kg)、TIL+AMPK抑制剂组(TIL+Compound C组),另设假手术组(Sham组),每组12只。采用改良的Garcia JH法、Morris水迷宫实验和敞箱实验评价大鼠的神经功能和认知功能;苏木素-伊红(HE)和脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法行脑组织病理学和神经元凋亡观察;蛋白质印迹法(Western Blot)检测AMPK/SIRT1/PGC1α通路蛋白表达。结果:与Sham组相比,ICH组大鼠脑组织出现细胞核皱缩、排列紊乱等损伤,神经功能评分、穿越平台次数、垂直活动得分和水平活动得分、磷酸化AMPK(p-AMPK)/AMPK、SIRT1、PGC1α蛋白水平均明显下降(P<0.05),找寻平台时间、神经元凋亡率、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白表达水平均明显增加(P<0.05);与ICH组相比,TIL组大鼠脑组织损伤减轻,神经功能评分、穿越平台次数、垂直活动得分和水平活动得分、p-AMPK/AMPK、SIRT1、PGC1α蛋白水平均明显增加(P<0.05),找寻平台时间、神经元凋亡率、Caspase-3、Bcl-2蛋白表达水平均明显降低(P<0.05);而Compound C组大鼠以上指标呈现相反的趋势。且TIL对ICH大鼠脑组织及认知功能的保护作用均被AMPK抑制剂Compound C减弱(P<0.05)。结论:TIL可能通过激活AMPK/SIRT1/PGC1α通路,改善ICH大鼠认知功能,减轻神经元损伤。

白藜芦醇通过调节SIRT1/AMPK信号通路介导自噬反应对膝关节骨性关节炎大鼠细胞凋亡的影响

目的:从沉默信息调节因子1(SIRT1)/腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)信号通路介导自噬角度,探讨白藜芦醇对大鼠膝关节骨性关节炎(KOA)软骨细胞凋亡的影响。方法:50只健康Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、白藜芦醇组、白藜芦醇+SIRT1抑制剂组、自噬激活剂组,每组10只。除对照组外其余大鼠均通过注射弗氏完全佐剂造模法复制KOA大鼠模型,白藜芦醇组、白藜芦醇+AMPK抑制剂组、自噬激活剂组分别使用10μmol/kg白藜芦醇、10μmol/kg白藜芦醇+10 mg/kg EX527、2 mg/kg雷帕霉素进行干预,4周后,观察大鼠Lequesne MG膝关节级别;测定大鼠膝关节液中IL-6、肿瘤坏死因子β(TNF-β)水平;HE染色与TUNEL染色观测大鼠膝关节软骨组织形态及凋亡情况;透射电子显微镜观察大鼠软骨细胞自噬情况;Western blot法检测SIRT1、p-AMPK、AMPK、LC3、Beclin-1蛋白表达。结果:与对照组相比,模型组局部反应、步态反应、关节活动、关节肿胀程度加重(P<0.05);与模型组相比,白藜芦醇组、自噬激活剂组局部反应、步态反应、关节活动、关节肿胀程度减轻(P<0.05)。与对照组相比,模型组大鼠软骨组织细胞排列紊乱,粗糙,存在纤维化变性、边缘丘状隆起,细胞器减少,可见空泡变性,自噬小体数目增多,膝关节液IL-6、TNF-β水平、软骨细胞凋亡率、Beclin-1和LC3B/A升高(P<0.05),软骨组织SIRT1、p-AMPK/AMPK降低(P<0.05);与模型组相比,白藜芦醇组、自噬激活剂组大鼠软骨组织细胞排列紊乱、边缘丘状隆起等现象有改善,自噬小体数目增多,膝关节液IL-6、TNF-β水平、软骨细胞凋亡率降低(P<0.05),软骨组织SIRT1、p-AMPK/AMPK、Beclin-1和LC3B/A水平升高(P<0.05);SIRT1抑制剂可逆转白藜芦醇组对大鼠软骨细胞的保护作用。结论:白藜芦醇可能是通过激活SIRT1/AMPK通路介导自噬KOA大鼠软骨细胞凋亡,SIRT1抑制剂可逆转此过程。

沉默信息调节蛋白1对神经变性疾病的神经保护作用研究进展

随着人类寿命延长,神经变性疾病的发病率明显增高,对个人、家庭和社会都造成巨大负担。目前治疗神经变性疾病的手段有限,且效果不佳。最近研究结果显示,沉默信息调节蛋白1(SIRT1)可能具有治疗神经变性性疾病的潜能。SIRT1有广泛的生物学作用,能够提高神经元对毒性物质(如MPTP、淀粉样蛋白和突变的SOD等)的抵抗力,促进神经网络的形成。本文就SIRT1在神经变性疾病中可能治疗机制进行综述。

沉默信息调节因子2同源蛋白1(SIRT1)与阿尔茨海默病研究进展

沉默信息调节因子2同源蛋白1(SIRT1)激动可通过抑制β淀粉样蛋白沉积、tau蛋白磷酸化、炎症反应,调节突触可塑性,以及与Akt/蛋白激酶B通路共同作用,改善阿尔茨海默病(AD)的认知功能障碍。该文就SIRT1与AD研究进展进行综述。

沉默信息调节蛋白1在缺血性脑损伤中的神经保护作用

近年来,沉默信息调节蛋白1(silent information regulator protein 1,SIRT1)作为依赖NAD+的组蛋白去乙酰化酶被广泛地研究。SIRT1存在于机体各组织细胞中,通过去乙酰化修饰,调节细胞的多种生理过程,在能量守恒、细胞氧化、衰老及凋亡等方面发挥重要作用。目前认为,SIRT1在缺血性脑损伤中起到神经保护作用,可能通过调控细胞能量代谢,抗炎性反应、抗细胞凋亡等方面发挥作用。本文主要综述了SIRT1在缺血性脑损伤中的神经保护作用。

沉默信息调节因子2同源蛋白1在甲状腺乳头状癌组织中的表达及其临床意义

目的研究沉默信息调节因子2同源蛋白1(SIRT1)在甲状腺乳头状癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学法和组织芯片技术检测88例甲状腺乳头状癌组织中SIRT1的表达,分析SIRT1蛋白的表达情况及其与甲状腺乳头状癌临床病理特征的关系。结果SIRT1阳性染色主要集中在细胞核中,呈黄色或者棕色颗粒。根据免疫组织化学染色评分,88例甲状腺乳头状癌组织中SIRT1阳性率为48.9%。χ~2检验结果显示,SIRT1表达与颈部淋巴结转移、TNM分期显著相关(P<0.05),SIRT1表达与年龄、性别、肿瘤大小、癌灶多少、甲状腺包膜浸润不相关(P>0.05)。Logistic回归分析显示,SIRT1阳性是甲状腺乳头状癌颈部淋巴结转移的独立危险因素(P<0.05)。结论 SIRT1可能参与甲状腺乳头状癌的发生发展和颈部淋巴结转移,并可能成为甲状腺乳头状癌颈部淋巴结转移的治疗靶点。

顺铂耐药宫颈癌细胞中沉默交配型信息调节因子2同源蛋白1的表达及其对细胞增殖的影响

目的探讨顺铂(DDP)耐药宫颈癌细胞中沉默交配型信息调节因子2同源蛋白1(SIRT1)的表达及其对细胞增殖的影响。方法将宫颈癌HeLa和SiHa细胞分别分为耐药组和敏感组。敏感组细胞不做任何处理;耐药组细胞在培养过程中逐步增加培养液中顺铂的浓度,建立对对顺铂耐药的HeLa/DDP和SiHa/DDP细胞系。再将HeLa/DDP和SiHa/DDP细胞系分为HeLa/DDP-NC组、HeLa/DDP-siRNA组以及SiHa/DDP-NC组、SiHa/DDP-siRNA组,并分别转染相应的siRNA。检测耐药组和敏感组细胞SIRT1蛋白及mRNA表达水平;检测DDP-NC组与DDP-siRNA组细胞SIRT1蛋白及mRNA表达水平及增殖情况。结果耐药组HeLa及SiHa细胞SIRT1蛋白及mRNA表达水平均高于敏感组(均P<0.05)。DDP-NC组HeLa及SiHa细胞增殖水平高于DDP-siRNA组(均P<0.05)。结论顺铂耐药宫颈癌细胞SIRT1表达水平升高,抑制SIRT1表达可以抑制耐药细胞的增殖。

sirtinol与地塞米松对哮喘模型小鼠体内沉默信息调节蛋白1和白细胞介素5水平的影响

背景:哮喘是一种由多种炎性细胞介导的呼吸道慢性炎症性疾病,沉默信息调节蛋白1(recombinant sirtuin 1,SIRT1)与哮喘的发生及气道高反应有着密切的联系。目的:比较不同浓度sirtinol(SIRT1的特异性抑制剂)与地塞米松对哮喘小鼠体内SIRT1基因及白细胞介素5表达水平的影响,为SIRT1在哮喘发病机制和相关治疗中的作用提供理论依据。方法:将42只Balb/c雌性小鼠随机分为7组。哮喘模型组、地塞米松干预组、sirtinol干预1,2,3,4组小鼠于第1,8,15天腹腔注射0.2 mL抗原混悬液(鸡卵清蛋白100μg+氢氧化铝2 mg+生理盐水0.2 mL)致敏,第16天开始鼻腔滴入40μL 2%鸡卵清蛋白溶液(即鸡卵清蛋白2 g+生理盐水100 mL)连续7 d激发气道高反应制备小鼠哮喘模型,空白对照组以等量生理盐水替代。地塞米松干预组在激发前30 min腹腔注射地塞米松溶液0.2 mL(3 mg/kg),sirtinol干预1,2,3,4组在首次激发前1 h和末次激发后3 h分别腹腔注射0.12 mL sirtinol溶液(sirtinol溶液含量分别为0,0.05,0.5,3.0 mg/kg),其中sirtinol干预1组腹腔注射0.125%的二甲亚砜溶液0.12 mL。于末次激发24 h后麻醉处死小鼠,苏木精-伊红染色观察肺组织形态,Western blotting检测小鼠肺组织中SIRT1的表达,实时荧光定量PCR法检测小鼠肺组织中SIRT1和内参基因(β-actin)的mRNA含量,ELISA法检测肺泡灌洗液中白细胞介素5的质量浓度。结果与结论:(1)与哮喘模型组相比,地塞米松干预组炎症减轻,sirtinol干预1组炎症减轻不明显,sirtinol干预2,3,4组炎症减轻程度逐渐降低;(2)与哮喘模型组相比,地塞米松干预组和sirtinol干预1,2,3,4组的SIRT1的表达下降,其中sirtinol干预2组最弱;(3)肺组织SIRT1mRNA在哮喘模型组表达量最高,空白对照组中最低,哮喘模型组比地塞米松干预组、sirtinol干预2,3组的表达量高(P<0.05),地塞米松干预组、sirtinol干预2,3组组间比较差异无显著性意义(P>0.05);(4)空白对照组肺泡灌洗液中白细胞介素5水平最低,哮喘模型组白细胞介素5水平最高,sirtinol干预4组白细胞介素5表达量明显高于sirtinol干预2,3组及地塞米松干预组(P<0.05),而地塞米松干预组与sirtinol干预2,3组比较差异无显著性意义(P>0.05);(5)地塞米松和sirtinol均可降低哮喘小鼠体内SIRT1和白细胞介素5的表达水平,减轻气道炎症,二者的作用上没有显著差异,但后者作用与浓度有关。

中医药干预沉默信息调节蛋白1抗动脉粥样硬化的研究进展

动脉粥样硬化严重威胁人类身体健康。其特征是血管炎症和动脉粥样硬化斑块的生长,最终导致动脉增厚并变硬、血管腔狭窄。动脉粥样硬化是一种慢性炎症反应,涉及血管内皮功能障碍、炎症、氧化应激、斑块形成等多种病理过程。沉默信息调节蛋白(Sirtuin,SIRT)1是一种高度保守的组蛋白去乙酰化酶,通过对相关因子去乙酰化抑制这些病理反应。大量研究表明,SIRT1与动脉粥样硬化的发病机制密切相关,在动脉粥样硬化发生、发展的过程中有重要的病理生理意义。中医药治疗动脉粥样硬化具有多靶点、多环节、多功效的特点,疗效显著。文章就中医药干预SIRT1抗动脉粥样硬化的作用机制作一综述。

沉默信息调节蛋白1与心肌缺血/再灌注损伤的研究进展

体外循环(CPB)是现如今心内直视手术所必需的技术手段,而心肌缺血再灌注损伤(MIRI)是心内直视手术术后导致心功能障碍甚至死亡的主要原因之一。体外循环术后心肌出现严重的胰岛素抵抗、能量底物葡萄糖和脂肪酸代谢紊乱。近年来发现沉默信息调节蛋白1(SIRT1)作为能量调节的枢纽,不仅在调节心肌细胞能量代谢和糖脂代谢方面发挥重要作用,而且在抗氧化应激、减轻炎症、调节自噬、抗凋亡坏死等方面也发挥着保护心肌免受I/R损伤。因此本文就SIRT1在心肌缺血再灌注损伤中的作用及相关通路的研究进展作一综述,为临床预防或治疗心肌缺血再灌注损伤寻求新的靶点。

松油烯-4-醇调节SIRT1/Nrf2信号抑制慢性肾病血管氧化应激损伤

目的探讨松油烯-4-醇(T4O)对慢性肾脏疾病(CKD)模型小鼠血管氧化应激损伤的作用及信号机制。方法采用高磷饲料联合腺嘌呤制备CKD小鼠模型,正常对照组给予等体积生理盐水灌胃。通过尾静脉注射慢病毒SIRT1 RNAi,建立SIRT1体内低表达的CKD小鼠模型用于信号机制研究。给药组以T4O低、高剂量(10 mg/kg和20 mg/kg)连续灌胃给药6周。收集小鼠血清检测尿素氮(BUN)和肌酐(CRE)水平,采用HE染色观察小鼠胸主动脉和肾脏组织形态,试剂盒检测血管组织丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)含量,免疫荧光检测血管组织ROS水平;Western blot法检测Nrf2、HO-1、NQO-1及SIRT1的表达。结果T4O可降低CKD小鼠血清BUN和CRE水平,改善肾脏病理损伤和主动脉血管形态结构,降低血管组织MDA含量,增加SOD含量,降低ROS水平;T4O干预能够促进Nrf2核易位及上调HO-1、NQO-1以及SIRT1的蛋白表达。分子机制研究表明,LV-SIRT1 RNAi+T4O+CKD组能够抑制T4O对CKD诱导的MDA和SOD含量的影响,部分抵消T4O上调Nrf2核易位以及SIRT1、HO-1、NQO-1的蛋白表达水平的作用。结论T4O对CKD小鼠胸主动脉氧化应激损伤具有保护作用,其分子信号机制可能与调节SIRT1/Nrf2级联信号有关。

SIRT1调节突触蛋白Synapsin 1表达和神经元树突生长

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)早期就出现突触功能紊乱。沉默调节蛋白1(silent information regulator 1,SIRT1)是与AD相关的重要去乙酰化酶。本研究探讨了SIRT1对突触蛋白1(synapsin 1)表达和对神经元树突生长的影响。Western印迹检测结果显示,SIRT1显著抑制小鼠神经瘤母细胞系N2a细胞和海马神经元细胞内突触蛋白1的蛋白质表达(P<0.01)。而自噬溶酶体降解途径抑制剂(3-Methyladenine,3-MA)处理可使突触蛋白1的蛋白质表达水平显著上升(P<0.01),说明其抑制作用可能与突触蛋白1的自噬溶酶体途径降解有关。利用免疫荧光检测SIRT1活化剂白藜芦醇(resveratrol,RSV)对神经元树突生长的影响,发现RSV可促进海马神经元树突生长,并抑制其分支生成。SIRT1^+/-杂合子小鼠脑内突触蛋白1的蛋白质表达较之正常组显著增高(P<0.05),树突棘密度显著增加(P<0.05)。综上所述,SIRT1可抑制突触蛋白1表达并且调节神经元树突的生长。

沉默信息调节因子2同源蛋白1与肿瘤

沉默信息调节因子2同源蛋白1(silent mating type information regulation 2 homolog 1,SIRT1/sirtuin 1)为III型去乙酰化酶,依赖于烟酰胺腺嘌呤二核苷酸辅酶(nicotinamide adenine dinucleotide,NAD+)调控基因转录、细胞凋亡等一系列细胞功能。近年研究发现,SIRT1表达水平改变对于某些肿瘤具有很强的抑制作用,本文从SIRT1的基本结构以及在癌症中的研究现状和与癌细胞的侵袭与转移和凋亡机制两方面阐述SIRT1与肿瘤调节之间的关系。