沙棘多糖抗衰老的研究进展

中药对抗衰老是目前具有潜力的治疗方案,多糖类中药活性成分因其高安全性和丰富的生物学活性,如抗肿瘤、抗氧化、提高免疫力等受到广泛关注。沙棘多糖可以通过抗炎、抗氧化、提高免疫力等机制起到抗衰老的作用。本文拟梳理沙棘多糖抗衰老机制的研究进展,为沙棘多糖的进一步有效利用提供参考。

沙棘多糖对脑胶质瘤大鼠的抑瘤作用及对HMGB1、MGMT及TLR4表达的影响

目的:探讨沙棘多糖(HRP)对脑胶质瘤大鼠的抑瘤作用及对高迁移率族蛋白1(HMGB1)、O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)和Toll样受体4(TLR4)表达的影响。方法:选取60只SD大鼠,脑部接种C6脑胶质瘤细胞,建立脑胶质瘤模型。造模成功后随机分为模型组(15只)、HRP低剂量组(14只)、HRP高剂量组(14只)、替莫唑胺组(14只)。接种5 d后,HRP低剂量组、HRP高剂量组分别灌胃沙棘多糖100 mg/kg、200 mg/kg,替莫唑胺组灌胃替莫唑胺20 mg/kg,模型组灌胃等量生理盐水,每日1次,连续10 d。磁共振成像(MRI)检查并记录肿瘤大小,测量肿瘤体积,计算抑瘤率;苏木精-伊红(HE)染色观察脑胶质瘤形态学变化情况;流式细胞仪检测肿瘤组织细胞凋亡和细胞周期;实时定量聚合酶链式反应(PCR)检测肿瘤组织中HMGB1、MGMT和TLR4 mRNA水平;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测肿瘤组织HMGB1、MGMT和TLR4蛋白表达。结果:与模型组比较,HRP低剂量组、HRP高剂量组、替莫唑胺组肿瘤体积减小,Sub-G1期、G0/G1期细胞增加,S期、G2/M期细胞减少,凋亡率升高,HMGB1、MGMT和TLR4 mRNA及蛋白相对表达量降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与HRP低剂量组比较,HRP高剂量组、替莫唑胺组肿瘤体积减小,抑瘤率升高,Sub-G1期、G0/G1期细胞增加,S期、G2/M期细胞减少,凋亡率升高,HMGB1、MGMT和TLR4 mRNA及蛋白相对表达量降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与HRP高剂量组比较,替莫唑胺组抑瘤率降低,Sub-G1期、G0/G1期细胞减少,S期、G2/M期细胞增加,凋亡率降低,HMGB1、MGMT和TLR4 mRNA及蛋白相对表达量升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。HE染色显示,模型组脑胶质瘤内肿瘤细胞生长活跃,数量丰富,排列密集,核大深染,肿瘤细胞异型性明显,核浆比例高,核分裂现象多见,呈浸润性生长,无明显细胞萎缩坏死现象;HRP低剂量组、HRP高剂量组和替莫唑胺组细胞数量较模型组减少,细胞生长密度降低,细胞体积减小,出现部分坏死。结论:HRP对脑胶质瘤大鼠具有抑瘤作用,可能与抑制HMGB1、MGMT及TLR4的mRNA转录与蛋白表达有关。

三七总皂苷联合沙棘多糖对小鼠降血脂和保肝作用的研究

目的:分析三七总皂苷联合沙棘多糖对小鼠血脂和保肝作用的影响。方法:将高脂血症模型小鼠分为三七总皂苷组、沙棘多糖组、联合用药组、辛伐他汀对照组和模型对照组。给药4周后,采眼球血测血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)含量。结果:联合用药组TC、TG和LDL低于模型对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);联合用药组的HDL高于三七总皂苷组和沙棘多糖组(P<0.05);联合用药组的AST和ALT水平均显著低于模型对照组(P<0.05);联合用药组的AST水平显著低于三七总皂苷组(P<0.05);联合用药组的AST和ALT水平均显著低于沙棘多糖组(P<0.05)。结论:三七总皂苷联合沙棘多糖保肝作用优于单用三七总皂苷或沙棘多糖。

羧甲基化沙棘多糖钙螯合物稳定性的探究

为探究羧甲基化沙棘多糖(Carboxymethyl Sea Buckthorn polysaccharides,CMS)钙螯合物的稳定性,本研究以沙棘为原料,提取其中的多糖并将其羧甲基化修饰后螯合钙离子,得到羧甲基化沙棘多糖螯合钙(CMS-Ca)。随后探究了CMS-Ca螯合物的酸碱稳定性、热稳定性以及体外模拟胃肠道消化稳定性。研究结果表明:CMS-Ca螯合物具有较好的酸碱稳定性,但热处理温度超过70℃会导致CMS-Ca螯合物钙保留率下降;CMS-Ca螯合物在胃液中钙保留率较低,但在小肠模拟液中有较好的稳定性,其钙保留率始终稳定在80%以上。本研究所得的CMS-Ca稳定性较好,可为开发新型钙补充剂提供参考。

沙棘多糖对急性肝损伤小鼠氧化应激的抑制作用及其对BCL-2/Bax和PPAR-γ的调控

目的:以LPS/D-Gal N诱导的小鼠急性肝损伤作为模型,研究沙棘多糖对急性肝损伤的保护作用及其对BCL-2/Bax和PPAR-γ的调控。方法:C57BL/6系雄性小鼠随机分为六组:正常组(CTRL);模型组(L/G);地塞米松阳性对照组(DXM);沙棘多糖低(SPL)、中(SPM)、高剂量组(SPH)。SPL、SPM和SPH组分别用50、100、200 mg/kg沙棘多糖溶液连续灌胃14 d,然后采用D-Gal N(700 mg/kg)联合LPS(10μg/kg)腹腔注射诱导急性肝损伤。建模4 h后采集血清和并收集肝脏组织,检测ALT、AST的活性和丙二醛(MDA)的含量。通过Western blot检测肝脏组织中SOD2及BCL-2和Bax的表达水平。通过免疫组织化学法测定肝脏PPAR-γ的表达。结果:ALT、AST水平在模型组显著升高(P<0.01),沙棘多糖预处理后剂量依赖地降低了ALT和AST水平(P<0.01);模型组的MDA比正常组显著升高(P<0.01),沙棘多糖各剂量组比模型组都有显著降低(P<0.01)。模型组的SOD比正常组显著降低(P<0.01),沙棘多糖各剂量组比模型组都有显著升高(P<0.01);沙棘多糖预处理后降低了Bax的表达水平,对BCL-2的表达没有明显的影响。沙棘多糖各剂量组中PPAR-γ的表达量与模型组相比明显降低。结论:沙棘多糖对LPS/D-Gal N诱导的氧化应激有抑制作用,其作用与上调SOD2的表达以及抑制Bax的表达有关。

沙棘多糖的研究进展

综述近年来对沙棘多糖的研究进展,主要包括其提取,生物活性方面,并对今后的发展趋势进行展望,以期为沙棘多糖进一步的开发利用提供参考。

沙棘多糖提取物对LPS/D-GalN诱导的小鼠肝损伤的保护作用及其对TLR4,SOCS3表达的调控

目的:研究沙棘多糖提取物对LPS联合D-Gal N诱导的肝损伤的保护作用以及对肝脏TLR4,SOCS3蛋白表达的调控。方法:将C57BL/6系雄性小鼠随机分为6组,即空白对照组、模型组、地塞米松阳性对照组、沙棘多糖低、中、高剂量组;沙棘多糖低、中、高剂量组分别以50、100和200 mg/kg沙棘多糖溶液连续灌胃14 d。通过腹腔注射LPS(10μg/kg)和DGal N(700 mg/kg)建立急性肝损伤模型,阳性药物组在建模前腹腔注射地塞米松(10 mg/kg)。建模4 h后采集血清和肝脏组织,检测血清ALT和AST水平,HE染色观察沙棘多糖提取物对肝损伤的影响。Western blot检测TLR4,SOCS3的表达情况。结果:沙棘多糖提取物显著降低了LPS/D-Gal N诱导的小鼠血清中ALT和AST水平(P<0.01,P<0.05);HE染色观察显示,沙棘多糖明显减轻了肝细胞损伤和炎性细胞浸润。Western blot检测表明,沙棘多糖提取物抑制了LPS/D-Gal N诱导的TLR4的表达,但是对SOCS3的表达影响不明显。结论:沙棘多糖提取物有效抑制了LPS/D-Gal N诱导的肝损伤,这种保护作用可能是通过抑制TLR4的表达来发挥作用的,而非通过调控SOCS3来实现的。

沙棘多糖对巨噬细胞和免疫抑制小鼠的免疫调节作用研究

目的研究沙棘多糖对巨噬细胞激活的影响以及对环磷酰胺诱导的免疫低下小鼠的免疫调节作用。方法体外培养巨噬细胞RAW264.7,采用CCK8法评价沙棘多糖对巨噬细胞体外增殖活力的影响;测定巨噬细胞上清液中一氧化氮(NO)的含量;采用酶联免疫吸附法检测细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、γ-干扰素(IFN-γ)释放情况;同时用环磷酰胺建立免疫低下小鼠模型,分为对照组、模型组、沙棘多糖低剂量组以及高剂量组,分别测定小鼠的脾脏和胸腺指数、外周血白细胞计数、计算腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数,用聚合酶链式反应(PCR)法检测脾脏组织中TNF-α、IL-6、IFN-γmRNA的水平。结果在体外,沙棘多糖能够显著促进巨噬细胞的增殖,促进细胞因子TNF-α、IL-6、IFN-γ、NO的释放;在体内,沙棘多糖能够增强免疫低下小鼠的免疫器官指数、增加外周血白细胞数量、提升小鼠巨噬细胞的吞噬功能、提高脾脏组织中TNF-α、IL-6、IFN-γmRNA的水平。结论沙棘多糖能够激活巨噬细胞并且明显增强环磷酰胺致免疫低下小鼠的免疫功能。

沙棘多糖HRP Ⅰa生物活性初探

研究了沙棘多糖(Hippophae rhamnoidesL.polysaccharide,HRP)保健功能及其抑菌作用。分别对HRP、HRP Ⅰ、HRP Ⅰa进行自由基.OH、O.-2、R.清除、抑菌效果及最小抑菌浓度的测定。HRP Ⅰa对.OH、O.-2及R.清除率最高,清除.OH、O.-2及R.所需最大质量浓度分别为:1 000、400、80μg/mL;HRP Ⅰa对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、腊状芽孢杆菌等菌种均有一定的抑制作用。

超声波-微波协同提取沙棘多糖的工艺优化

[目的]对超声波-微波协同提取沙棘(Hippophae fhamnoides L.)多糖的工艺进行优化。[方法]采用单因素试验考察了提取时间、微波功率和料液比对沙棘多糖得率的影响,采用正交试验确定了最佳工艺参数,并与水提法、微波法和超声波法的提取效果进行对比研究。[结果]超声波-微波协同提取沙棘多糖的最佳工艺条件为:提取时间180s,微波功率450W,料液比1∶30(W/V),在此最佳工艺条件下,沙棘多糖得率最高为22.50mg/g。[结论]超声波-微波协同提取沙棘多糖优于水提法、超声辅助法以及微波法。

基于肝脏特异性PPARγ敲除小鼠研究沙棘多糖减轻脓毒症诱导肝损伤的作用及机制

目的:基于肝脏特异性过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)敲除小鼠研究沙棘多糖减轻脓毒症诱导肝损伤的作用及机制。方法:将野生型(WT)C57BL/6J小鼠随机分为WT组、WT+脓毒症组、WT+脓毒症+沙棘多糖组,将肝脏特异性PPARγ敲除(KO)小鼠随机分为PPARγ-KO组、PPARγ-KO+脓毒症组、PPARγ-KO+脓毒症+沙棘多糖组,采用盲肠结扎穿孔建立脓毒症模型,给予沙棘多糖灌胃干预。比较各组小鼠血清肝酶、肝脏病理改变、PPARγ表达、炎症反应及细胞凋亡的差异。结果:WT+脓毒症组小鼠出现了肝损伤的病理改变,肝脏中PPARγ、Bcl-2的表达水平低于WT组,血清中ALT、AST水平及肝脏中细胞凋亡率、NF-κB、Bax、Cleaved caspase-3表达水平、TNF-α、IL-1β、IL-6含量均高于WT组;WT+脓毒症+沙棘多糖组小鼠肝损伤的病理改变明显减轻,肝脏中PPARγ、Bcl-2的表达水平高于WT+脓毒症组,血清中ALT、AST水平及肝脏中细胞凋亡率、NF-κB、Bax、Cleaved caspase-3表达水平、TNF-α、IL-1β、IL-6含量均低于WT+脓毒症组;敲除PPARγ后,PPARγ-KO+脓毒症+沙棘多糖组小鼠肝损伤的病理改变明显加重,肝脏中PPAR-γ、Bcl-2的表达水平低于WT+脓毒症+沙棘多糖组,血清中ALT、AST水平及肝脏中细胞凋亡率、NF-κB、Bax、Cleaved caspase-3表达水平、TNF-α、IL-1β、IL-6含量均高于WT+脓毒症+沙棘多糖组。结论:沙棘多糖用于脓毒症诱导肝损伤的干预能够改善肝脏病理改变、抑制炎症反应及细胞凋亡,且这一作用与上调PPARγ表达有关。

沙棘多糖抑制PERK/ATF4/CHOP通路缓解糖尿病大鼠胰岛素抵抗和肝肾功能损伤

目的探究沙棘多糖(seabucthorn polysaccharide,SP)对糖尿病大鼠胰岛素抵抗和肝、肾功能损伤的影响。方法将大鼠随机分为对照组、链脲佐菌素(streptozocin,STZ)组、盐酸罗格列酮(rosiglitazone,RSG)组(4 mg·kg^(-1)·d^(-1))和SP低、中、高剂量组(50、100、200 mg·kg^(-1)·d^(-1)),除对照组外其余大鼠均建立为Ⅱ型糖尿病模型。药物处理后,通过天平、血糖仪、Elis检测大鼠体重、双侧肾重、空腹血糖和胰岛素水平,计算肾肥大指数、胰岛素抵抗指数;Elisa检测HbA1C、脂联素;生化分析仪检测TG、TC、LDL-C、HDL-C、PRO、Scr、BUN水平;油红O染色、HE染色观察肝脂肪沉积情况和肾组织形态;Western Blot检测PERK/ATF4/CHOP通路活化水平。结果与STZ组相比,SP中、高剂量组大鼠体重、脂联素、HDL-C升高(P<0.05),血糖、胰岛素抵抗指数、肾肥大指数、HbA1C、血浆胰岛素、TG、TC、LDL-C、PRO、Scr、BUN水平下调(P<0.05),缓解大鼠肝脂质沉积和肾损伤,且抑制PERK/ATF4/CHOP通路活性。结论沙棘多糖可缓解糖尿病大鼠胰岛素抵抗和肝、肾功能损伤,其机制可能与抑制PERK/ATF4/CHOP通路活性有关。

热水提取沙棘多糖工艺研究

研究探讨热水法提取沙棘多糖的工艺及优化。采用单因素试验和正交试验设计研究了提取温度、料液比、时间3个因素对沙棘多糖得率的影响,得到最佳的提取条件为料液比1∶25(g∶m L),温度80℃,时间40 min,在此条件下得到的沙棘多糖粗提液的取得率达到102.36 mg/g。

沙棘多糖提取工艺研究

用正交设计方法分别对热水提取法、微波辅助法、超声波法、酶法、酶法-超声波协同萃取法提取沙棘果渣多糖的工艺条件进行了优化研究。结果表明,五种方法的提取量分别为:102.36mg·g-1、19.04mg·g-1、88.09mg·g-1、65.91mg·g-1、81.5mg·g-1,5种方法的提取效果优劣依序为:热水提取法>超声波法>酶法-超声波协同萃取法>酶法>微波辅助法;综合时间、成本等因素,以采用超声波法提取沙棘果渣多糖效果好,此时最佳工艺条件为提取温度60℃,料液比1:50(g:mL),时间20min,经验证的提取率为88.09mg·g-1。

沙棘多糖提取纯化的工艺研究

对超声波辅助提取沙棘(Hippophae fhamnoides L)多糖的工艺进行优化。采用单因素试验考察提取时间、功率和料液比对沙棘多糖得率的影响,采用正交试验确定最佳工艺参数,并与水提法、微波法和酶法的提取效果进行对比研究。结果显示,超声波辅助提取沙棘多糖的最佳工艺条件为:提取时间45 min,功率100 W,料液比1:30,在此最佳工艺条件下,沙棘多糖得率最高为7.36%。

沙棘多糖对扑热息痛诱导的小鼠肝损伤保护作用的研究

目的:研究沙棘多糖(SP)对扑热息痛(APAP)诱导的小鼠急性肝损伤组织的保护作用和机制。方法:C57BL/6雄性小鼠随机分为6组:空白组(Ctrl),APAP模型组(APAP,350 mg/kg),N-乙酰半胱氨酸组(NAC,150 mg/kg),SP低剂量组(APAP/SP100,100 mg/kg),SP高剂量(APAP/SP200,200 mg/kg),SP对照组(SP200,200 mg/kg),SP连续灌胃30d,30 d后腹腔注射APAP建立急性肝损伤模型,NAC在造模前1 h腹腔注射,16 h后处死小鼠。收集血清检测AST、ALT指标,HE染色检测肝脏组织学变化,实时定量PCR检测肝组织炎症因子,Western blot检测TLR4和p-JNK表达。结果:SP降低了APAP诱导的AST和ALT水平,减轻了肝损伤,抑制了TLR4和p-JNK表达,降低了TNF-α和IL-6的水平。结论:SP通过抑制TLR4-p-JNK通路,减轻了APAP诱导的肝损伤。

沙棘多糖提取工艺研究

对纤维素酶提取沙棘(Hippophae fhamnoides L.)多糖的工艺进行优化。采用单因素试验考察了酶用量、酶作用的pH、酶作用时间和酶作用的温度对沙棘多糖得率的影响,采用正交试验确定了最佳工艺参数,并与水提法、微波法和超声波的提取效果进行对比研究。超声波辅助提取沙棘多糖的最佳工艺条件为:作用时间50min,酶作用的pH值为5.5,酶用量为2%,酶作用温度为55℃,在此最佳工艺条件下,沙棘多糖得率最高为7.36%。

沙棘多糖对发酵乳凝胶特性的影响及沙棘多糖酸奶工艺优化

将不同浓度的沙棘多糖添加到成品酸奶和发酵乳中,研究沙棘多糖对成品酸奶和发酵乳的黏度、pH值、酸度、持水力、色泽、质构、拉丝性等凝胶特性的影响。以酸奶感官评分为指标,在单因素实验的基础上,利用正交实验对沙棘多糖酸奶的工艺进行优化。研究结果表明:沙棘多糖对成品酸奶的pH值和酸度有一定影响,对成品酸奶的黏度、持水力、拉丝性不能产生显著影响,添加沙棘多糖可以提高发酵乳的黏度、酸度、持水力、拉丝性以及改善发酵乳的色泽和质构特性,当沙棘多糖添加量为0.15%时,其硬度、黏性、胶着性、内聚性达到最大。沙棘多糖酸奶的最佳工艺条件为发酵时间7 h,发酵温度42℃,菌种接种量0.1%,沙棘多糖添加量0.15%,此条件下的感官评为97.6分。添加沙棘多糖可有效改善发酵乳的凝胶特性及相关理化指标,增强发酵乳的风味和组织状态,提高发酵乳的品质。

沙棘多糖的分离纯化及其抗运动性疲劳作用

运动性疲劳是一种当训练和比赛负荷超过机体所承受的能力时,产生的短暂的生理机能减退的现象。生物活性成分多糖一般是由多个单糖分子缩合失水而成,多数是由阿拉伯糖(Ara)、半乳糖(Gal)、甘露糖(Man)和葡萄糖(Glc)组成的中性杂多糖,具有较大的分子量。沙棘多糖是其中的一种多糖组分,具有清除自由基、抗氧化、缓解疲劳等作用。通过研究发现沙棘多糖的抗运动疲劳作用具有一定的应用价值,值得国内外学者进行深入研究。因此本文以沙棘多糖分离纯化技术和运动疲劳机制为基础,阐述沙棘多糖不同的分离纯化技术和抗运动性疲劳的作用,以期促进沙棘多糖在抗运动性疲劳方面的发展,并为解决运动性疲劳问题提供借鉴和参考。