醇法提取沙棘籽蛋白的工艺研究

本研究以沙棘籽粕为原料,采用醇法提取沙棘籽蛋白,在单因素试验的基础上,通过正交试验优化工艺,讨论乙醇浓度、料液比、提取温度、提取次数对产品中蛋白质含量的影响。正交试验得到的最佳工艺参数为:乙醇浓度70%、料液比1∶7、提取温度55℃、提取5次。产品中蛋白质含量为55.18%,蛋白得率为78.65%。

沙棘籽蛋白肽对db/db小鼠降血糖活性及肾脏保护作用

本文研究了沙棘籽蛋白肽对2型糖尿病小鼠的降血糖活性及肾脏的保护作用。以m/m小鼠为正常对照组(NC),db/db糖尿病模型小鼠为研究对象,阳性对照组(PC)灌胃盐酸二甲双胍300 mg/kg/d,沙棘籽蛋白肽(SSPE)干预组分为低、中、高剂量组(50、150、250 mg/kg/d),持续灌胃8周。测定其体重、血糖、脏器指数、肾脏相关指标以及肾脏组织病理切片来评估SSPE的降血糖活性以及对肾脏的保护作用。db/db为基因缺陷型糖尿病小鼠,治疗初期表现出高血糖、肥胖、多饮多食多尿等症状,实验进行4周后,空白对照组(BC)小鼠较SSPE组出现较为严重的"三多一少"症状。干预8周后,SSPE组的血糖值(低中高分别为:19.53、19.94、20.00 mmol/L)显著低于BC组血糖峰值(29.56 mmol/L)。SSPE组的脏器指数、肾脏相关的各项血清指标均处显著低于BC组(P<0.05),肾脏组织病理切片也显示糖尿病肾病的典型症状得到改善。实验表明SSPE可显著降低糖尿病小鼠的血糖水平,对肾功能有一定的保护作用。

沙棘籽蛋白与大豆蛋白的氨基酸成分分析比较

测定了沙棘籽蛋白和大豆蛋白中所含氨基酸种类及其质量分数,经过分析比较发现:沙棘籽蛋白不仅与大豆蛋白一样具有较高的营养价值,而且有着显著特点。沙棘籽蛋白有一定的开发利用价值。

沙棘籽粕蛋白肽的稳定性及分离纯化

以沙棘籽粕蛋白为原料,酶解制备具有抑制胰脂肪酶活性的多肽,通过超滤、大孔树脂分离、超高效液相色谱-串联质谱和分子对接对沙棘籽粕蛋白肽(seabuckthorn seed peptides from alcalase hydrolysates,SSPA)进行分离纯化、结构鉴定和筛选。以猪胰脂肪酶(porcine pancreatic lipase,PPL)抑制率为指标,稳定性分析表明,SSPA具有热稳定性和pH值稳定性,适量Na^(+)和Mg^(2+)可显著提高SSPA的PPL抑制活性,SSPA在短期贮藏过程中不会因暴露于空气而影响PPL抑制活性。超高效液相色谱-串联质谱鉴定得到31种多肽,结合分子对接筛选得到6个肽段,小于3 kDa组分中上述寡肽含量分别为VR(2.90%)、FR(7.40%)、RDR(1.10%)、APYR(1.50%)、NLLHR(1.40%)和EEAASLR(1.10%)。固相合成测定其IC_(50)值分别为VR(371.07μg/mL)、FR(243.07μg/mL)、RDR(250.50μg/mL)、APYR(350.41μg/mL)、NLLHR(220.70μg/mL)、EEAASLR(510.55μg/mL)。分子对接表明以上多肽通过氢键、π-π堆积与PPL结合。Pearson相关性分析表明,分子对接结合能与SSPA的PPL抑制率之间存在显著正相关(R^(2)=0.865,P<0.05)。

沙棘籽粕蛋白提取工艺技术研究

通过沙棘籽粕蛋白的提取工艺研究,确定适用于产业化生产的提取工艺及参数,提高沙棘蛋白产品含量,改善口感和溶解性等特点,为沙棘蛋白的产业化生产奠定基础。方法 :采用醇洗+碱提酸沉+酶解的高效提取方法制备高质量的沙棘籽蛋白产品,以提取率和沙棘蛋白含量为考察对象,优化提取料液比、pH值、温度和时间等参数,确定最佳工艺及参数。结果:通过醇洗+碱提酸沉+酶解的方法可有效提高沙棘籽蛋白提取率和含量,产业化生产的最佳提取工艺参数为碱性蛋白酶加入量为240U/g,料液比为1:14,pH值为10.0,提取温度为45℃,提取时间为50min。在此条件下,沙棘籽粕蛋白提取率平均为78.45%,含量平均为82.04%。同时,通过醇洗去原花青素、油脂和部分色素,再将残渣进一步酶解,改善了沙棘籽蛋白色泽和口感。

沙棘籽粕蛋白控制酶解富含精氨酸肽的工艺优化

该试验旨在研究沙棘籽粕蛋白控制酶解制备富含精氨酸功能性肽的最优工艺。以蛋白质回收率和精氨酸含量为指标,利用单因素试验结合响应面模型优化出胰蛋白酶酶解最优工艺:pH 11,温度50℃,酶添加量0.18%。在此条件下,蛋白质回收率为88.75%,精氨酸含量为0.155 g/g。实际测得蛋白质回收率为88.01%,与模型预测值无显著性差异。氨基酸测定表明胰蛋白酶酶解产物中的精氨酸含量较高,达到16.50%,酶解产物几乎无苦味。