猪沙波病毒CH430株p70基因克隆与生物信息学分析

利用RT-PCR方法从猪沙波病毒CH430株中克隆出非结构蛋白p70基因并测序,结果显示,p70基因全长1 995 nt,编码665个氨基酸,经同源性比对及遗传进化树分析表明,CH430株为基因Ⅲ型沙波病毒毒株。生物信息学分析显示该蛋白理论等电点(pI)为5.96,理论分子质量为72 876.6 u;其序列上共发现25个磷酸化位点,分别为Ser(6)、Thr(13)、Tyr(6),而蛋白的磷酸化与信号传导有关,预测该蛋白为一重要的信号传导分子;无信号肽和跨膜区;该蛋白含有胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶和RdRp功能域;胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶功能域核心结构为1个由7个β折叠形成柱状结构和1个由1个α螺旋和7个β折叠扭曲平行形成1个不完全的桶状结构共同组成,RdRp功能域核心结构为1个具有3个子结构域空间结构,该结构与右手掌在形态上非常相似,而3个子结构域也被认为是手指、手掌和拇指。

猪沙波病毒抗体间接ELISA检测方法的建立及初步应用

以原核表达重组蛋白作为抗原建立了猪沙波病毒(SaV)抗体的间接ELISA检测方法。使用矩阵滴定法确定抗原包被浓度为6.4μg/mL,血清稀释倍数为1∶50。试验选用1%BSA作为封闭液,血清和二抗的最佳作用时间分别为60 min和40 min。选择无致癌的TMB为底物,确定TMB最佳反应时间为10 min。通过对20份猪阴性血清样品的检测,计算阳性判定值为0.203。通过交叉试验、批内和批间重复性试验证明,本研究建立的SaV间接ELISA检测方法具有特异性高,重复性好的特点,可用于猪沙波病毒抗体的检测。

福州市首起沙波病毒急性胃肠炎聚集性疫情调查

目的调查分析福州某幼儿园一起沙波病毒引起的急性胃肠炎聚集性疫情,为制定防控措施提供依据。方法采用现场流行病学调查方法,对病例进行回顾性调查,运用描述性流行病学方法分析疫情数据。结果该起急性胃肠炎聚集性疫情累计报告12例,均为大二班学生,幼儿园罹患率为2.4%(12/499),其中大二班学生罹患率达31.6%(12/38);11份肛拭子标本共检测出9份沙波病毒核酸阳性,检出率为81.8%(9/11);采取综合防控措施后,疫情及时控制。该起急性胃肠炎聚集性疫情系沙波病毒感染所致,可能因未及时清理病例呕吐物和消毒厕所,主要传播途径为吸入呕吐物气溶胶和接触传播。结论应大力加强防病知识宣传,重点关注学校、托幼机构的聚集性疫情,做好学生和托幼儿童沙波病毒急性胃肠炎防控工作。

2011～2012年猪腹泻疫情中6种病毒在乳猪肠道的感染检测

2011～2012年,甘肃省大部分地方陆续发生以乳猪高发病率高死亡率、反复发作、抗菌药防治效果差、现有疫苗免疫效果多不明显、夏季继续发生为特征的猪群腹泻,我们采集发病乳猪肠道或腹泻物,应用分子生物学方法,检测了流行性腹泻病毒、传染性胃肠炎病毒、轮状病毒、沙波病毒、嵴病毒和猪博卡病毒。