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沙眼衣原体质粒编码蛋白3的致病性及免疫保护性研究
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作者 邓晗 程瑞琴 +7 位作者 陈土地 宋雅欣 梁银迎 李平露 赵婉星 马璟玥 王惠平 侯淑萍 《中国中西医结合皮肤性病学杂志》 CAS 2024年第1期6-11,共6页
目的 探索沙眼衣原体(CT)质粒编码蛋白3(Pgp3)的致病性及免疫保护性。方法 CT L2构建株(GFP)、野生株(WT)和质粒缺失株(PF)分别感染Hela细胞,蛋白质免疫印迹法(Western blotting)和间接免疫荧光法(IFA)检测Pgp3蛋白表达水平;L2 GFP、WT... 目的 探索沙眼衣原体(CT)质粒编码蛋白3(Pgp3)的致病性及免疫保护性。方法 CT L2构建株(GFP)、野生株(WT)和质粒缺失株(PF)分别感染Hela细胞,蛋白质免疫印迹法(Western blotting)和间接免疫荧光法(IFA)检测Pgp3蛋白表达水平;L2 GFP、WT和PF菌株经阴道分别感染C3H小鼠,感染后不同时间点经IFA评估生殖道包涵体形成单位(IFU)数量;组氨酸标记的Pgp3(His-Pgp3)体外刺激人输卵管上皮细胞,24 h后经Hoechst 33 528染色和流式细胞术检测细胞凋亡情况;L2 WT体外感染L929和L929-Pgp3细胞,在感染后30、60及80 h固定细胞并计算IFU和细胞核数量。L2 GFP和WT菌株经阴道分别感染C3H小鼠,50 d后各组均以L2 WT菌株攻毒,攻毒后不同时间点评估生殖道IFU数量。结果 L2 GFP Pgp3蛋白表达水平高于L2 WT,L2 PF无Pgp3蛋白表达;小鼠感染后第3、7、10和14天,L2 GFP感染组IFU数量显著高于L2 WT和L2 PF感染组,且L2 GFP组感染周期最长;Pgp3体外干预组细胞凋亡率显著低于空白组,L2 WT体外感染L929和L929-Pgp3细胞60 h和80 h后,L929-Pgp3组IFU值显著高于L929组,且宿主细胞消亡数量显著低于L929组;动物实验显示L2 GFP组经L2 WT菌株攻毒后下生殖道IFU数量显著低于L2 WT组,且L2 GFP组感染周期显著短于L2 WT组。结论 Pgp3可抑制宿主细胞凋亡并促进CT在细胞间播散感染;内源性Pgp3有良好的免疫保护性。 展开更多
关键词 沙眼原体 质粒编码蛋白3 致病性 免疫保护性
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沙眼衣原体外膜复合物蛋白B的研究进展
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作者 孙悠娴 齐蔓莉 《皮肤性病诊疗学杂志》 2024年第2期123-128,共6页
沙眼衣原体(CT)是最常见的引起性传播疾病的病原体,由于其症状的隐匿性,感染者往往无法在疾病早期得到诊疗,最终导致疾病慢性迁延,出现一系列严重的并发症和后遗症。沙眼衣原体外膜复合物蛋白B(OmcB)是衣原体中含量第二丰富的多功能外... 沙眼衣原体(CT)是最常见的引起性传播疾病的病原体,由于其症状的隐匿性,感染者往往无法在疾病早期得到诊疗,最终导致疾病慢性迁延,出现一系列严重的并发症和后遗症。沙眼衣原体外膜复合物蛋白B(OmcB)是衣原体中含量第二丰富的多功能外膜蛋白。OmcB在衣原体内丰富的含量以及在衣原体感染过程中表现出的强大的免疫原性,使其在帮助CT感染的诊断以及疫苗研发方面具有很好的应用前景。本文对OmcB的结构、定位及CT感染过程中的相关机理进行综述。 展开更多
关键词 沙眼原体 外膜复合物蛋白B 免疫优势蛋白
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SiO_(2)-Pickering乳液佐剂增强沙眼衣原体Pgp3蛋白免疫效果
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作者 史可靓 方春霞 +2 位作者 赵兰华 周辉 李忠玉 《中南医学科学杂志》 CAS 2023年第3期319-324,共6页
目的优化二氧化硅(SiO_(2))Pickering(SPE)乳液佐剂,研究其对沙眼衣原体(Ct)Pgp3蛋白的免疫增强效应,为预防Ct感染性疾病提供实验依据。方法优化SiO_(2)质量浓度、水油比及超声功率,超声乳化制备SPE佐剂。30只小鼠均分为SPE+Pgp3组(Pgp... 目的优化二氧化硅(SiO_(2))Pickering(SPE)乳液佐剂,研究其对沙眼衣原体(Ct)Pgp3蛋白的免疫增强效应,为预防Ct感染性疾病提供实验依据。方法优化SiO_(2)质量浓度、水油比及超声功率,超声乳化制备SPE佐剂。30只小鼠均分为SPE+Pgp3组(Pgp3蛋白和SPE混合免疫)、Pgp3组(Pgp3蛋白单独免疫)和PBS组。ELISA检测各组小鼠血清抗体水平和脾细胞上清细胞因子水平,流式细胞术检测脾细胞γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)水平。结果SPE最优制备条件为超声功率337 W、水油比10∶2、SiO_(2)质量浓度1 g/L,最优条件下SPE直径为(300.12±44.26)nm,聚合物分散性指数为0.33±0.12。除PBS组外,其他组均检测到了特异性抗体,SPE+Pgp3组总抗体IgG及其亚类IgG1、IgG2a抗体水平高于Pgp3组,且以IgG2a升高为主(P<0.05)。SPE+Pgp3组、Pgp3组脾细胞IFN-γ和刺激指数高于PBS组,且SPE+Pgp3组高于Pgp3组(P<0.05);IFN-γ主要由CD4^(+)T细胞和CD8^(+)T细胞分泌。各组IL-4含量均较低。结论SPE乳液佐剂具有良好的佐剂效应,能有效增强Pgp3蛋白体液免疫和细胞免疫,且可优势诱导Th1型免疫反应。 展开更多
关键词 SPE乳液佐剂 沙眼原体 Pgp3蛋白 免疫反应
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宫颈分泌物中沙眼衣原体、解脲支原体和分泌型免疫球蛋白、干扰素-γ的检测对宫颈糜烂的诊疗价值 被引量:6
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作者 郭维娟 倪懿 《医学临床研究》 CAS 2020年第11期1637-1639,共3页
【目的】探讨宫颈分泌物中沙眼衣原体(CT)、解脲支原体(Uu)和分泌型免疫球蛋白(sIgA)、干扰素-γ(IFN-γ)检测对宫颈糜烂患者的诊疗价值。【方法】选取2018年2月至2019年3月在本院诊治的宫颈糜烂患者110例(观察组),另外选取同期在本院... 【目的】探讨宫颈分泌物中沙眼衣原体(CT)、解脲支原体(Uu)和分泌型免疫球蛋白(sIgA)、干扰素-γ(IFN-γ)检测对宫颈糜烂患者的诊疗价值。【方法】选取2018年2月至2019年3月在本院诊治的宫颈糜烂患者110例(观察组),另外选取同期在本院体检的健康志愿者60例作为对照组,检测各组宫颈分泌物中CT、Uu、sIgA、IFN-γ的表达情况。【结果】观察组宫颈分泌物中CT、Uu感染率和sIgAJFN-γ水平明显高于对照组(P<0.05),但两组CT和Uu混合感染率比较差异无统计学意义(P>0.05);观察组重度患者宫颈分泌物中CT、Uu感染率和sIgAJFN-γ水平明显高于轻中度患者(P<0.05),但轻中度患者、重度患者CT和Uu混合感染率比较差异无统计学意义(P>0.05)。观察组宫颈分泌物CT、Uu感染者sIgA和IFN-γ明显高于非病原感染患者(P<0.05).【结论】宫颈糜烂患者CT、Uu感染率上升,同时sIgA、IFN-γ水平升高,且与病情严重程度有一定关系。 展开更多
关键词 宫颈糜烂/诊断 子宫颈/微生物学 沙眼原体 解脲支原体 免疫球蛋白A 分泌
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沙眼衣原体质粒蛋白pORF5原核表达及免疫原性鉴定 被引量:5
5
作者 李忠玉 汪世平 +2 位作者 吴移谋 朱翠明 何卓 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期517-520,共4页
目的构建沙眼衣原体(CT)pORF5蛋白基因重组质粒pGEX-6p/pORF5,表达并纯化质粒蛋白pORF5,并鉴定其免疫原性。方法用PCR法扩增pORF5基因,定向插入pGEX-6p原核表达载体构建原核表达重组体pGEX-6p/pORF5,重组体经酶切、PCR及测序鉴定后,经I... 目的构建沙眼衣原体(CT)pORF5蛋白基因重组质粒pGEX-6p/pORF5,表达并纯化质粒蛋白pORF5,并鉴定其免疫原性。方法用PCR法扩增pORF5基因,定向插入pGEX-6p原核表达载体构建原核表达重组体pGEX-6p/pORF5,重组体经酶切、PCR及测序鉴定后,经IPTG诱导在大肠杆菌中表达pORF5融合蛋白,融合蛋白纯化后免疫BALB/c鼠,ELISA及Western-blot分析pORF5质粒蛋白免疫原性及免疫反应性。结果PCR扩增出795 bp基因片段,序列测定证实重组质粒插入片段与GenBank登陆的D型Ct一致;pORF5融合蛋白在大肠杆菌中获得高效表达;ELISA检测免疫小鼠的血清效价为1∶25 600。结论pORF5蛋白在原核细胞中可有效表达并具有较好的免疫原性,为进一步研究该蛋白的结构功能、阐明Ct的致病机制、研制基因工程疫苗提供了有利的条件。 展开更多
关键词 沙眼原体 pORF5基因 免疫原性 原核表达
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质粒蛋白pORF5在沙眼衣原体感染细胞中的定位及免疫原性研究(英文) 被引量:4
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作者 李忠玉 吴移谋 +3 位作者 黄秋林 钟光明 周洲 粟盛梅 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期93-97,104,共6页
目的分析沙眼衣原体隐蔽性质粒编码的质粒蛋白pORF5在感染细胞中的定位并初步探讨免疫原性特征。方法 PCR扩增pORF5质粒蛋白编码基因,构建原核表达重组体pGEX-6p/pORF5,重组体转化大肠杆菌XL1-blue中诱导表达融合蛋白;融合蛋白经Glutath... 目的分析沙眼衣原体隐蔽性质粒编码的质粒蛋白pORF5在感染细胞中的定位并初步探讨免疫原性特征。方法 PCR扩增pORF5质粒蛋白编码基因,构建原核表达重组体pGEX-6p/pORF5,重组体转化大肠杆菌XL1-blue中诱导表达融合蛋白;融合蛋白经Glutathione Sepharose亲和层析纯化后免疫小鼠,制备单克隆抗体和多克隆抗体,间接免疫荧光技术及免疫印迹鉴定抗体的特异性,并分析pORF5质粒蛋白在感染细胞中的分布特征。采用ELISA方法分析pORF5质粒蛋白的免疫原性。结果 pORF5原核表达重组体成功构建,融合蛋白在大肠杆菌中可溶性表达;pORF5主要分布于宿主细胞胞浆,但也少量分布在EB、RB上;pORF5能与衣原体患者血清及鼠免疫血清发生强烈地免疫反应。结论 pORF5为衣原体分泌蛋白,并具有很强的免疫原性。 展开更多
关键词 沙眼原体 质粒 分泌蛋白 pORF5 免疫原性
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蛋白质组学筛选沙眼衣原体感染依赖性免疫优势抗原 被引量:3
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作者 陆春雪 彭波 +6 位作者 陈超群 孙豫辉 栾秀丽 伍海英 孙珍洁 彭昕珂 吴移谋 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1684-1689,共6页
目的:采用蛋白质组学方法筛选沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)感染依赖性免疫优势抗原。方法:将纯化的Ct D型标准株EB经紫外线照射制备UV-EB,然后将未经处理的活EB和紫外线处理的UV-EB分别感染体外培养的He La细胞,间接免疫荧光... 目的:采用蛋白质组学方法筛选沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)感染依赖性免疫优势抗原。方法:将纯化的Ct D型标准株EB经紫外线照射制备UV-EB,然后将未经处理的活EB和紫外线处理的UV-EB分别感染体外培养的He La细胞,间接免疫荧光法检测紫外线对EB的灭活效果;分别将低剂量活EB滴鼻感染小鼠或将较高剂量UV-EB经肌肉接种免疫小鼠,首先检测两种接种方式下Ct在体内的增殖情况,然后收集两组小鼠的血清,分别与Ct D型全基因组908个开放读码框编码的GST-Ct融合蛋白进行ELISA反应,蛋白质组学筛选仅与活EB感染组小鼠血清反应且反应频率高的Ct感染依赖性免疫优势抗原;最后用筛选到的抗原体外刺激Ct生殖道感染小鼠的脾细胞,ELISA法检测细胞因子IFN-γ的产生情况。结果:经紫外线灭活的UV-EB体外不能感染He La细胞,肌肉接种免疫小鼠后也不能在小鼠肌肉组织内增殖,而活EB滴鼻感染组小鼠的肺组织中可检出大量的Ct;活EB滴鼻感染组小鼠与UV-EB肌肉接种免疫组小鼠的血清抗Ct抗体滴度差异无显著统计学意义;将两组小鼠血清分别与Ct全基因组编码的蛋白反应,通过蛋白质组学方法共鉴定出60个抗原能被至少1份小鼠血清识别; 22个抗原能同时被两组或任一组血清以≥50%的频率识别,为Ct免疫优势抗原,其中5个抗原仅被活EB滴鼻免疫组血清优势识别,即为Ct感染依赖性免疫优势抗原;该类抗原体外刺激小鼠脾细胞,能诱导良好的Th1型细胞免疫回忆应答。结论:筛选获得了Ct D型感染依赖性免疫优势抗原,为Ct亚单位疫苗研究提供了新的研究靶标。 展开更多
关键词 沙眼原体 蛋白质组学 感染依赖性抗原 免疫优势抗原
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沙眼衣原体主要外膜蛋白核酸疫苗诱导小鼠产生特异性细胞和体液免疫应答(英文) 被引量:2
8
作者 李忠玉 吴移谋 +1 位作者 余敏君 陈超群 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期457-459,共3页
目的构建沙眼衣原体主要外膜蛋白核酸疫苗,并观察其诱导小鼠产生的体液免疫和细胞免疫。方法将核酸疫苗(pcDNA3.1MOMP)或对照空质粒(pcDNA3.1)注射于4~6周龄小鼠后腿股四头肌,每次剂量为100mg。间隔2周加强免疫2次。末次免疫后,ELISA... 目的构建沙眼衣原体主要外膜蛋白核酸疫苗,并观察其诱导小鼠产生的体液免疫和细胞免疫。方法将核酸疫苗(pcDNA3.1MOMP)或对照空质粒(pcDNA3.1)注射于4~6周龄小鼠后腿股四头肌,每次剂量为100mg。间隔2周加强免疫2次。末次免疫后,ELISA法测定脾淋巴细胞培养上清液中IFNγ及小鼠血清中抗MOMP水平;MTT法测定脾淋巴细胞特异性增殖反应。结果小鼠接种核酸疫苗后,能产生特异性抗体,第3次免疫后抗体最高滴度达1∶1024,培养上清液中IFNγ达(532.0±45.4)pg/mL;实验组小鼠脾淋巴细胞刺激指数为3.94±0.25,其抗原特异性反应明显高于对照组。结论沙眼衣原体主要外膜蛋白核酸疫苗能刺激机体产生特异的细胞免疫和体液免疫。 展开更多
关键词 沙眼原体 DNA疫苗 体液免疫应答 细胞免疫应答
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小檗碱联合丙种球蛋白治疗沙眼衣原体致尿道、宫颈炎疗效观察 被引量:2
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作者 刘迎春 张瑞 许英杰 《山东医药》 CAS 北大核心 2009年第26期56-56,共1页
目的观察小檗碱联合丙种球蛋白对沙眼衣原体所致的尿道、宫颈炎的治疗效果。方法将82例沙眼衣原体致尿道、宫颈炎患者随机分为两组。A组42例,口服小檗碱0.4g、3次/d,静滴丙种球蛋白0.4g/kg、每周1次,连用14d;B组40例,口服多西环素0.1g、... 目的观察小檗碱联合丙种球蛋白对沙眼衣原体所致的尿道、宫颈炎的治疗效果。方法将82例沙眼衣原体致尿道、宫颈炎患者随机分为两组。A组42例,口服小檗碱0.4g、3次/d,静滴丙种球蛋白0.4g/kg、每周1次,连用14d;B组40例,口服多西环素0.1g、2次/d,连用14d。结果A组总有效率、沙眼衣原体清除率分别为95.2%、85.7%,B组分别为85.0%、60.0%,两组相比,P均<0.05。结论小檗碱联合丙种球蛋白治疗沙眼衣原体致尿道、宫颈炎疗效较好。 展开更多
关键词 小檗碱 丙种球蛋白 沙眼原体 尿道炎 宫颈炎
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天津市性活跃人群血清沙眼衣原体免疫优势蛋白抗体的检测 被引量:2
10
作者 张新美 乔福萌 +4 位作者 高西波 刘原君 刘全忠 冯斌 齐蔓莉 《中国皮肤性病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期337-340,共4页
目的了解新建立免疫吸附(ELISA)法对人血清沙眼衣原体感染检测的敏感性和特异性。方法收集2014年3月一12月天津医科大学总医院非性病门诊15—40岁就诊者血清共300例。采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测其血清中抗衣原体质粒编码蛋白3(... 目的了解新建立免疫吸附(ELISA)法对人血清沙眼衣原体感染检测的敏感性和特异性。方法收集2014年3月一12月天津医科大学总医院非性病门诊15—40岁就诊者血清共300例。采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测其血清中抗衣原体质粒编码蛋白3(Pgp3)、CT875编码蛋白(CT875)、CT694编码蛋白(CT694)的抗体。同时采用微量免疫荧光(MIF)法对血清样本进行检测。比较两种方法的检测结果。结果ELISA法共筛选出三种免疫优势蛋白抗体阳性者63例,其中MIF法证实阳性者62例。300例就诊者血清中三种免疫优势蛋白抗体的总检出率为21.00%。以MIF法为标准,新建立ELISA法的灵敏度为95.38%,特异度为99.57%。结论新建立的ELISA方法具有较高的敏感度与特异度,适合用于沙眼衣原体感染的初筛。 展开更多
关键词 沙眼原体 免疫优势蛋白
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宫颈糜烂患者宫颈分泌物中沙眼衣原体、解脲支原体感染和分泌型免疫球蛋白、干扰素-γ水平及意义 被引量:2
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作者 侯春霞 孟梦 郭利彩 《黑龙江医学》 2021年第13期1423-1425,共3页
目的:探讨宫颈糜烂患者宫颈分泌物中沙眼衣原体(CT)、解脲支原体(Uu)感染和分泌型免疫球蛋白(sI-gA)、干扰素-γ(IFN-γ)水平及意义。方法:选取2018年2月—2019年3月在鹤壁市京立医院治疗的宫颈糜烂患者110例(观察组),同时选取健康志愿... 目的:探讨宫颈糜烂患者宫颈分泌物中沙眼衣原体(CT)、解脲支原体(Uu)感染和分泌型免疫球蛋白(sI-gA)、干扰素-γ(IFN-γ)水平及意义。方法:选取2018年2月—2019年3月在鹤壁市京立医院治疗的宫颈糜烂患者110例(观察组),同时选取健康志愿者60例作为对照组,检测宫颈分泌物中CT、Uu感染及sIgA、IFN-γ水平。结果:观察组宫颈分泌物中CT、Uu感染率分别为23.64%和31.82%,sIgA和IFN-γ分别为(80.64±9.97)μg/mL和(81.14±9.54)ng/L,明显高于对照组(P<0.05);观察组重度患者宫颈分泌物中CT、Uu感染率分别为35.56%和48.89%,sIgA和IFN-γ分别为(92.72±9.55)μg/mL和(89.21±9.98)ng/L,明显高于轻中度患者(P<0.05);观察组宫颈分泌物CT、Uu感染者sIgA和IFN-γ分别为(84.45±10.15)μg/mL和(85.02±9.97)ng/L,明显高于非病原感染患者(P<0.05)。结论:宫颈糜烂患者宫颈分泌物中CT、Uu感染率上升,同时sIgA、IFN-水平升高,与病情严重程度有一定关系。 展开更多
关键词 宫颈糜烂 宫颈分泌物 沙眼原体 解脲支原体 分泌型免疫球蛋白 干扰素-Γ
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沙眼衣原体E型重组主外膜蛋白疫苗和DNA疫苗免疫效应的比较 被引量:1
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作者 盛彩虹 刘原君 +3 位作者 齐蔓莉 侯淑萍 姚卫锋 刘全忠 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2010年第2期99-102,共4页
目的比较E型重组主外膜蛋白(rMOMP)疫苗和MOMP DNA疫苗诱导小鼠产生的特异性免疫效应。方法用纯化的rMOMP和DNA疫苗分别通过股四头肌肌注和阴道黏膜涂布的途径免疫BALB/C雌鼠。通过检测小鼠血清IgG抗体水平和阴道冲洗液sIgA抗体水平、... 目的比较E型重组主外膜蛋白(rMOMP)疫苗和MOMP DNA疫苗诱导小鼠产生的特异性免疫效应。方法用纯化的rMOMP和DNA疫苗分别通过股四头肌肌注和阴道黏膜涂布的途径免疫BALB/C雌鼠。通过检测小鼠血清IgG抗体水平和阴道冲洗液sIgA抗体水平、脾淋巴细胞增殖、迟发型超敏反应、细胞因子检测、阴道脱落细胞种植等指标进行两组免疫效应的比较。结果rMOMP肌注组小鼠:血清IgG抗体水平OD450值为0.424±0.075,迟发型超敏反应小鼠足垫增厚0.272±0.054mm;DNA肌注组:血清IgG抗体水平OD450值为0.332±0.033,迟发型超敏反应小鼠右足垫增厚0.258±0.041mm。通过肌注途径诱发的保护性免疫应答rMOMP蛋白疫苗好于DNA疫苗(P<0.05)。结论rMOMP蛋白疫苗的免疫应答强于DNA疫苗,通过阴道涂布途径不能诱导小鼠产生特异性体液和细胞免疫应答。 展开更多
关键词 沙眼原体 重组主外膜蛋白 DNA疫苗 免疫效应
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沙眼衣原体pORF5质粒蛋白免疫优势片段的筛选与鉴定 被引量:1
13
作者 何战胜 邹燕 +2 位作者 粟胜梅 雷文波 李忠玉 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期59-64,共6页
目的:鉴定沙眼衣原体pORF5质粒蛋白的免疫原性,并进一步筛选和确定pORF5质粒蛋白免疫优势片段。方法:以沙眼衣原体D血清型DNA为模板,设计pORF5基因全长和9个不同片段特异引物进行PCR扩增,PCR产物经Bam HⅠ、NotⅠ双酶切后插入经同样双... 目的:鉴定沙眼衣原体pORF5质粒蛋白的免疫原性,并进一步筛选和确定pORF5质粒蛋白免疫优势片段。方法:以沙眼衣原体D血清型DNA为模板,设计pORF5基因全长和9个不同片段特异引物进行PCR扩增,PCR产物经Bam HⅠ、NotⅠ双酶切后插入经同样双酶切的原核表达载体pGEX-6p中,构建pORF5质粒蛋白不同长度片段的原核表达重组体,重组体经PCR和测序鉴定后,转化XL1 Blue大肠杆菌表达10种不同长度的GST融合蛋白;ELISA方法检测pORF5质粒蛋白的免疫原性,Western blot鉴定pORF5质粒蛋白的免疫反应性;ELISA测定10个不同片段与沙眼衣原体生殖道感染患者血清、鼠免疫血清以及抗pORF5单克隆抗体的免疫反应性,鉴定pORF5质粒蛋白免疫优势片段。结果:pORF5质粒蛋白免疫原性强,能刺激机体产生高效价抗体;破坏pORF5质粒蛋白天然空间结构,其免疫反应性基本消失;在ELISA反应中,N端缺失66氨基酸的F6片段的免疫反应强度与pORF5全长基本相似,F2与F3出现较弱的免疫反应,其余片段免疫反应消失。结论:pORF5质粒蛋白为构象依赖性免疫优势抗原,其免疫优势表位和构象表位位于C端,本研究为进一步探讨pORF5质粒蛋白的生物学功能和疫苗的研制提供实验依据。 展开更多
关键词 沙眼原体 pORF5质粒蛋白 免疫原性 免疫优势表位
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沙眼衣原体CT703蛋白原核表达及免疫原性鉴定 被引量:1
14
作者 杜昆 余平 +1 位作者 魏运梅 郑群 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2011年第6期426-429,共4页
目的构建沙眼衣原体CT703原核表达质粒pGEX/CT703,在大肠杆菌BL21中表达CT703蛋白,并鉴定其免疫原性。方法从沙眼衣原体(chlamydia trachomatis,CT)L2血清型基因组中提取总RNA,用RT-PCR方法扩增出全长CT703基因,亚克隆到原核表达载体pGE... 目的构建沙眼衣原体CT703原核表达质粒pGEX/CT703,在大肠杆菌BL21中表达CT703蛋白,并鉴定其免疫原性。方法从沙眼衣原体(chlamydia trachomatis,CT)L2血清型基因组中提取总RNA,用RT-PCR方法扩增出全长CT703基因,亚克隆到原核表达载体pGEX中。重组质粒经酶切和测序鉴定后,转化到E.coli BL21感受态细胞中,IPTG诱导融合蛋白表达。融合蛋白纯化后免疫BALB/c小鼠,ELISA和Western blot实验检测CT703蛋白的免疫原性及免疫反应性。结果经酶切和测序鉴定,成功构建了原核重组表达质粒pGEX/CT703,IPTG诱导后,表达出相对分子量81kD的融合蛋白,Western blot检测免疫小鼠血清能与CT703蛋白特异性结合,ELISA检测免疫小鼠的血清效价为1:32000。结论 CT703蛋白在大肠杆菌BL21中能有效表达,并具有较好的免疫原性。 展开更多
关键词 沙眼原体 CT703 原核表达 免疫原性
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沙眼衣原体主要外膜蛋白_(21-387)的原核表达及其免疫原性 被引量:1
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作者 刘巧琼 涂建欣 +4 位作者 林晓云 熊一融 朱珊丽 陈韶 张丽芳 《温州医学院学报》 CAS 2015年第2期95-99,105,共6页
目的:探讨沙眼衣原体(Ct)E血清型主要外膜蛋白(MOMP21-387)的原核表达及其免疫原性。方法:利用PCR方法扩增Ct E血清型MOMP第21至第387氨基酸的基因序列,克隆至p ET21a(+)原核表达载体构建重组质粒p ET21a(+)/MOMP21-387,并进行原核表达... 目的:探讨沙眼衣原体(Ct)E血清型主要外膜蛋白(MOMP21-387)的原核表达及其免疫原性。方法:利用PCR方法扩增Ct E血清型MOMP第21至第387氨基酸的基因序列,克隆至p ET21a(+)原核表达载体构建重组质粒p ET21a(+)/MOMP21-387,并进行原核表达和纯化,经SDS-PAGE和Western blot法分析鉴定后,通过BALB/c小鼠免疫检测MOMP21-387蛋白的免疫原性,即通过ELISA法检测小鼠血清Ig G和生殖道分泌物Ig A抗体反应,乳酸脱氢酶(LDH)法检测其脾细胞的特异性杀伤作用。结果:在原核表达系统成功表达了MOMP21-387融合蛋白,经SDS-PAGE及Western blot法鉴定在相对分子质量(Mr)约44 000处出现特异性条带;并经NiNTA亲和层析的方法获得了纯化的MOMP21-387融合蛋白,免疫BALB/c小鼠可诱导产生特异性血清Ig G抗体和生殖道分泌物Ig A抗体,至第6周达到高峰,MOMP21-387组的Ig G和Ig A抗体较PBS组差异均有统计学意义(P<0.05);LDH检测结果显示,MOMP21-387组小鼠脾细胞对靶细胞的杀伤率,在10:1、20:1和40:1和80:1时均明显高于PBS组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Ct E型MOMP21-387融合蛋白具有良好的免疫原性,为基于MOMP21-387的Ct的ELISA法检测方法的开发和疫苗研究奠定了基础。 展开更多
关键词 沙眼原体 主要外膜蛋白 原核表达 免疫原性
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静脉用免疫球蛋白无反应型川崎病合并肺炎支原体衣原体感染1例报告并文献复习
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作者 乐高钟 吴小秧 +1 位作者 文如泉 罗勤 《甘肃医药》 2022年第12期1145-1149,共5页
分析1例儿童静脉用免疫球蛋白(IVIG)无反应型川崎病(KD)合并肺炎支原体(MP)、肺炎衣原体(CP)感染的临床资料,并结合相关文献进行分析总结。患儿临床以发热、皮疹为主要表现,双侧颈部淋巴结肿大,躯干及大腿部多形性斑丘疹,双侧结膜充血,... 分析1例儿童静脉用免疫球蛋白(IVIG)无反应型川崎病(KD)合并肺炎支原体(MP)、肺炎衣原体(CP)感染的临床资料,并结合相关文献进行分析总结。患儿临床以发热、皮疹为主要表现,双侧颈部淋巴结肿大,躯干及大腿部多形性斑丘疹,双侧结膜充血,口唇皲裂,杨梅舌,指趾端硬肿、脱皮,肛周脱皮。急性期外周血WBC、CRP、降钙素原(PCT)及N端脑利钠肽前体(BNP)、D-二聚体(D-D)、血沉(ESR)明显升高,恢复期降低。胸部CT提示左肺炎症并实变,左侧胸腔积液;心脏彩超提示左侧冠状动脉扩张(开口内径0.27mm,Z=+2.79)。患儿入院给予阿奇霉素+阿莫西林克拉维酸钾/哌拉西林钠他唑巴坦抗感染,甲泼尼龙琥珀酸钠+2个疗程免疫球蛋白+阿司匹林+双嘧达莫+肝素钠抗凝等综合治疗,28天后病情好转出院;出院复查WBC、CRP、PCT、BNP、D-D、ESR均恢复正常,胸部CT复查示左侧炎症较前明显吸收、左侧无胸腔积液。心脏彩超示左侧冠状动脉无扩张(开口内径0.2mm,Z=-0.352)。 展开更多
关键词 川崎病 静脉用免疫球蛋白 肺炎支原体 肺炎原体 感染
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沙眼衣原体免疫优势蛋白的研究进展
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作者 肖萌 刘全忠 齐蔓莉 《中国麻风皮肤病杂志》 2013年第6期394-396,共3页
沙眼衣原体是人类性传播疾病的主要病原体,可引起多种疾病和严重并发症,其致病性与免疫优势蛋白具有密切关系,本文主要对近年来发现的几种沙眼衣原体免疫优势蛋白即质粒蛋白pgp3、蛋白酶样活性因子CPAF、外膜蛋白复合物蛋白B(OmcB)和CT... 沙眼衣原体是人类性传播疾病的主要病原体,可引起多种疾病和严重并发症,其致病性与免疫优势蛋白具有密切关系,本文主要对近年来发现的几种沙眼衣原体免疫优势蛋白即质粒蛋白pgp3、蛋白酶样活性因子CPAF、外膜蛋白复合物蛋白B(OmcB)和CT841编码蛋白的结构、功能和生物学特性以及它们在沙眼衣原体感染宿主细胞时表现出的高抗原性等研究进展作一综述。 展开更多
关键词 沙眼原体 免疫优势蛋白 研究进展
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80例沙眼衣原体性宫颈炎患者治疗前后局部免疫状态变化的对比分析
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作者 张淑霞 《当代医药论丛》 2023年第12期33-36,共4页
目的:对比分析80例沙眼衣原体性宫颈炎患者治疗前后局部免疫状态的变化。方法:选取2021年1月至2022年1月期间秭归县人民医院收治的沙眼衣原体性宫颈炎患者80例,设为观察组,另选取同期女性健康体检者100例,设为对照组。观察组入院后给予... 目的:对比分析80例沙眼衣原体性宫颈炎患者治疗前后局部免疫状态的变化。方法:选取2021年1月至2022年1月期间秭归县人民医院收治的沙眼衣原体性宫颈炎患者80例,设为观察组,另选取同期女性健康体检者100例,设为对照组。观察组入院后给予阿奇霉素联合干扰素治疗,对比观察组治疗前后及观察组与对照组的局部免疫状态。结果:观察组80例患者中,治疗效果符合临床治愈、有效、无效标准的患者分别有65例、12例、3例,占比分别为81.25%、15.00%、3.75%,总有效率为96.25%(77/80)。两组受检者入院当日阴道冲洗液中IL-4、IL-8、IFN-γ、TNF-α浓度的对比,观察组的IL-4浓度低于对照组,P<0.05;观察组的IL-8、IFN-γ、TNF-α浓度均高于对照组,P<0.05。观察组治疗前后阴道冲洗液中IL-4、IL-8、TNF-α、IFN-γ浓度的对比,治疗后的IL-4浓度高于治疗前,P<0.05;治疗后的IL-8、IFN-γ、TNF-α浓度均低于治疗前,P<0.05。结论:经针对性治疗,80例沙眼衣原体性宫颈炎患者的局部免疫状态明显好转。临床应对沙眼衣原体性宫颈炎患者行局部免疫检测,以利于诊断疾病,评估疗效。 展开更多
关键词 沙眼原体 宫颈炎 局部免疫状态
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沙眼衣原体MIP蛋白的原核表达、纯化及免疫学特性鉴定 被引量:2
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作者 彭昕珂 彭波 +4 位作者 陈超群 贺庆芝 陈丽丽 孙豫辉 陆春雪 《中南医学科学杂志》 CAS 2016年第6期625-629,共5页
目的采用p GEX-6p载体原核表达沙眼衣原体(Ct)巨噬细胞感染增强因子(MIP),进一步纯化后免疫小鼠,评价该蛋白作为Ct疫苗候选抗原的可行性。方法聚合酶链反应技术从Ct D型基因组扩增MIP编码基因,构建p GEX-6p-1/MIP重组质粒并转化大肠杆菌... 目的采用p GEX-6p载体原核表达沙眼衣原体(Ct)巨噬细胞感染增强因子(MIP),进一步纯化后免疫小鼠,评价该蛋白作为Ct疫苗候选抗原的可行性。方法聚合酶链反应技术从Ct D型基因组扩增MIP编码基因,构建p GEX-6p-1/MIP重组质粒并转化大肠杆菌,IPTG诱导重组菌表达GST-MIP融合蛋白,Pre Scission蛋白酶切除GST标签后免疫Balb/c小鼠,ELISA法检测MIP的免疫学特性。结果 MIP编码基因正确插入p GEX-6p-1载体,核苷酸序列与Gen Bank登陆的Ct D型MIP基因完全一致;重组融合蛋白在E.coli中稳定高效表达,酶切后纯度达90%以上;MIP蛋白具有良好的免疫原性,诱导小鼠产生高滴度特异性Ig G型抗体,亚型以Ig G2a为主;MIP免疫组小鼠脾淋巴细胞受MIP蛋白刺激,分泌高水平IFN-γ。结论重组表达的Ct MIP蛋白具有良好的免疫原性,能诱导小鼠产生高特异性的体液及细胞免疫应答,可进一步探讨其作为Ct亚单位疫苗的可行性。 展开更多
关键词 沙眼原体 MIP 免疫原性 疫苗
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输卵管性不孕病人沙眼衣原体热休克蛋白-60、肿瘤坏死因子-α的免疫组化分析 被引量:6
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作者 赵海珍 李红发 《华中医学杂志》 CAS 2005年第1期9-10,共2页
目的 探讨肿瘤坏死因子 α(TNF α)、热休克蛋白 60(HSP 60)在沙眼衣原体(CT)感染的输卵管性不孕(TFI) 中的作用及CT感染导致粘连的机制。方法 用免疫组化法测定60例TFI者和对照组30例输卵管TNF α、HSP 60的表达, 其中TFI者又按宫颈... 目的 探讨肿瘤坏死因子 α(TNF α)、热休克蛋白 60(HSP 60)在沙眼衣原体(CT)感染的输卵管性不孕(TFI) 中的作用及CT感染导致粘连的机制。方法 用免疫组化法测定60例TFI者和对照组30例输卵管TNF α、HSP 60的表达, 其中TFI者又按宫颈分泌物CT DNA分为A组(CT DNA阳性)和B组(CT DNA阴性)。并用计算机图像分析系统进行半定量 分析。结果 A组TNF α、HSP 60在输卵管上皮细胞中表达强于对照组,差异有极显著性(P<0.01)。HSP 60的检出率较 CT DNA高,且TNF α、HSP 60的表达强度与输卵管损伤程度呈正相关。结论 TNF α、HSP 60在CT感染的TFI者中对输卵 管损伤和输卵管纤维化起重要的介质作用。 展开更多
关键词 HSP 输卵管性不孕 TNF-α 沙眼原体 热休克蛋白 表达 免疫组化分析 DNA 上皮细胞 纤维化
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