IFN-γ体外诱导沙眼衣原体持续性感染细胞模型的建立

目的:建立γ-干扰素(IFN-γ)体外诱导沙眼衣原体持续性感染的细胞模型。方法:衣原体感染Mc Coy细胞,实验组加入0.5 ng/m L IFN-γ诱导沙眼衣原体,对照组无IFN-γ诱导,空白组为正常培养的Mc Coy细胞,培养72 h后通过光学显微镜、荧光显微镜、电子显微镜分别观察诱导后衣原体的细胞形态。实验组72 h解除IFN-γ诱导,继续培养48 h,观察衣原体细胞形态学变化。结果:实验组在0.5 ng/m L IFN-γ作用72 h后,碘液染色发现衣原体包涵体的数量比对照组减少,包涵体变小;荧光抗体染色显示衣原体包涵体质地疏松,染色不均匀;透射电子显微镜可见包涵体变小和网状体体积增大等特征的典型异形包涵体。去除IFN-γ作用后,包涵体内致密的EB颗粒数量增加。对照组培养72 h后碘液染色和荧光染色可见典型包涵体,透射电子显微镜可见典型的网状体和原体,充满整个包涵体。结论:成功建立了IFN-γ体外沙眼衣原体持续性感染的细胞模型,为进一步进行沙眼衣原体持续性感染形成机制的研究奠定了基础。

生殖道沙眼衣原体持续性感染研究进展

沙眼衣原体（Chlamydia trachomatis,CT）是引起泌尿生殖道感染性疾病及性传播疾病的一种常见的致病菌。近几年,CT 感染率及 CT 感染引起并发症的发病率不断上升,其对人类健康造成了严重危害。生殖道 CT“持续性感染”是指在泌尿生殖系统感染 CT 后,如果病原体未被有效清除,在不利的环境下,生物活性降低,出现形态异常、体积扩大、停止分裂的网状体,持续时间不定,从数月到数年不等。网状体为 CT 存在的一种特殊状态,生物活性较低,新陈代谢处于静止状态,对抗生素具有一定的耐药性,易引发该病原体进入慢性持续感染状态。持续感染状态为衣原体在不利环境下存在的一种可逆状态。衣原体持续感染状态具有两大主要特征,第一,与衣原体各种并发症的发生密切相关；第二,具有耐药性。生殖道 CT“持续性感染”会导致泌尿生殖道炎症的反复发作,而抗生素治疗 CT效果不佳甚至有耐药性,导致炎症趋向慢性,并可能引起输卵管炎、慢性盆腔炎、宫颈炎、异位妊娠、不孕、宫外孕等一系列的较严重并发症。本文就 CT 病原学、CT 持续性感染的诱发条件、CT 持续性感染的发病机制、CT 形态学改变、预防及诊断技术、治疗等方面进行综述。

E型沙眼衣原体持续性感染模型的建立与鉴定

目的构建E型沙眼衣原体(Ct)持续性感染细胞模型,为深入研究Ct致病机制提供实验基础。方法用不同剂量人重组干扰素-γ(IFN-γ)处理Ct感染的HeLa细胞,体外诱导Ct持续性感染,间接免疫荧光法检测不同剂量IFN-γ下Ct包涵体形态的变化;移除处理因素,继续培养16 h后观察Ct包涵体形态,并计算Ct包涵体形成单位(IFUs)。实时定量PCR检测Ct DNA修复和重组(dnaA和dnaK)、细菌分裂(ftsK)、蛋白水解和肽转运(oppA.4和htrA)、膜结构(ompA)、发育调节(htcA)和分子伴侣(groEL)等相关基因转录水平。流式细胞术和Hoechst染色检测持续性感染12 h、24 h、40 h时肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导后的HeLa细胞凋亡率。结果75 U/mL IFN-γ可显著降低Ct感染能力,包涵体形态亦发生明显改变;移除IFN-γ后Ct IFUs为(12.60±0.52)×10^(9)/L,而未移除IFN-γ组IFUs为(3.60±0.52)×10^(9)/L,Ct感染力得到显著提高(P<0.05)。持续性感染组dnaA、dnaK、groEL、ompA、ftsK和htcA基因转录水平在不同的感染时间发生不同程度的改变;而oppA.4和htrA在急性和持续性感染状态下转录水平差异无显著性(P>0.05)。凋亡诱导后,与HeLa细胞凋亡率33.63%比较,流式细胞检测Ct持续性感染12 h、24 h、40 h时细胞凋亡率分别为14.77%(P<0.05)、18.71%(P<0.05)、26.32%(P>0.05);Ct在感染12 h和24 h时呈现抗凋亡效应,随着感染时间延长,衣原体抗凋亡能力下降。结论成功构建IFN-γ诱导的E型Ct持续性感染体外模型,持续性感染状态的Ct能抑制细胞凋亡。

银甲丸加减方对衣原体持续性感染输卵管炎模型小鼠输卵管病理及炎性因子的影响

目的:观察银甲丸加减方对生殖道衣原体(CT)持续性感染输卵管炎小鼠输卵管病理、CT清除率及炎性因子IL-10、IFN-γ和TGF-β的调节作用。方法:36只BALB/c小鼠随机分为6组,除空白组以外,其余组小鼠阴道内均接种衣原体建立CT持续性感染模型。造模成功后分组给药,第28天处死,HE染色观察小鼠上生殖道组织病理改变,q RT-PCR测定小鼠生殖道CT含量,ELISA检测小鼠血清IL-10、IFN-γ和TGF-β表达水平。结果:与空白对照组比较,模型组CT基因表达量显著增高(P<0.01)。与模型组比较银甲丸加减方中、高剂量组和阳性药物(阿奇霉素)对照组CT基因表达显著降低(P<0.05)。IL-10、IFN-γ含量显著上调(P<0.05),TGF-β含量显著下降(P<0.05)。结论:银甲丸加减方有助于缓解衣原体生殖道感染模型小鼠的输卵管炎病理状态,促进持续性感染CT的清除,其机制可能是通过调节细胞因子IL-10、IFN-γ和TGF-β的表达来实现。

生殖道沙眼衣原体持续性感染研究进展

沙眼衣原体（Chlamydiatrachomatis，ct）为性传播疾病的主要病原体，已知有19个基本血清型，生殖道Ct感染主要由D-K型导致。生殖道Ct“持续性感染”是泌尿生殖系统感染Ct后，

泌尿生殖道沙眼衣原体持续性复发性感染的分子机制研究

沙眼衣原体感染可以引起多种疾病。而持续性和复发性是沙眼衣原体感染疾病的一个重要特点,了解导致其持续性的原因对于沙眼衣原体疾病的治疗,减少后遗症有重要作用。就近年来的一些相关研究,简要介绍了干扰素γ抑制被感染细胞凋亡,肿瘤坏死因子-α诱导T细胞凋亡,色氨酸合成酶的不同等几方面可能导致其持续性的原因。

沙眼衣原体持续感染的诊断和治疗

国内外目前只改了非淋菌性尿道炎的概念,相应的诊断标准和治疗方案没有相应的更改,原因只有一个——国内外都没有新概念下的诊断标准和治疗方案的循证医学证据。而沙眼衣原体存在慢性的、持续性的感染,尤其是在上行感染后。本文详述了各个部位的衣原体感染的诊治,但没有很强的依据,尤其是一些治疗方案,只是为应对目前临床的迫切需要,提供参考而已。我们非常需要全国性病学者协作,进行多中心、严密的临床研究,积累疗效观察和经验。

生殖道沙眼衣原体的感染流行特征及空间聚集性分析:基于2014—2023年广州市海珠区数据

目的 了解广州市海珠区生殖道沙眼衣原体感染的流行特征,为制定干预措施提供参考依据。方法 通过“中国疾病预防控制信息系统传染病监测报告管理”模块收集2014—2023年广州市海珠区生殖道沙眼衣原体感染疫情数据,进行流行病学和空间聚集性分析。结果 广州市海珠区生殖道沙眼衣原体感染报告发病率从2014年的90.02/10万下降到2023年的51.55/10万,年均发病率下降6.01%,呈缓慢下降趋势(Z=-11.44,P<0.001);男性报告发病率略平稳,女性报告发病率呈下降趋势(Z=-13.38,P<0.001);发病年龄主要集中在20~39岁人群(占82.48%);职业以家务及待业、商业服务人员、职业不详为主。2017、2019—2023年报告病例数存在正向空间自相关性(均Moran′s I指数>0,Z>1.960,P<0.05),其中空间聚集程度2020年最高,2017年最低;“高-高”聚集区域主要集中在赤岗街道和凤阳街道;“低-高”聚集区域为琶洲街道。结论 2014—2023年广州市海珠区生殖道沙眼衣原体感染发病率呈缓慢下降趋势,在人群和空间分布上有显著聚集性,需加强重点人群的防治工作,控制疫情流行。

体外诱导沙眼衣原体持续性感染对宿主细胞凋亡的调控

目的探讨阿奇霉素诱导持续性感染下沙眼衣原体对Hela229细胞凋亡的调控作用。方法沙眼衣原体感染Hela229细胞22h后，加入含0．08mg／L阿奇霉素的DMEM培养液继续培养至感染48h，构建持续性感染细胞模型，以不含阿奇霉素的DMEM培养液培养构建急性感染细胞模型。感染48h后，去除阿奇霉素继续培养进行沙眼衣原体复活试验。免疫荧光和电镜检测技术验证持续性感染模型。将沙眼衣原体急性感染和持续性感染的Hela229细胞用星状孢子素处理4h诱导凋亡后，用Hoechst33258染色和膜联蛋白V-碘化丙锭流式细胞仪检测宿主细胞凋亡，以未感染Hela229细胞为对照。结果加入阿奇霉素后，沙眼衣原体感染的细胞内形成异形包涵体，其内为畸形网状体。去除阿奇霉素继续培养至96h，沙眼衣原体包涵体内见具有感染性的原体。Hoechst染色显示，经星状孢子素诱导细胞凋亡，持续性感染的细胞染色质疏松，而无沙眼衣原体感染的细胞染色质浓缩。在感染24h时诱导凋亡，持续性感染组和急性感染组细胞凋亡率分别为45．567％±2．631％和38．567％±1．701％，两者差异有统计学意义（t=2．686，P=0．028），持续性感染组与未感染组（69．800％±2．835％）差异有统计学意义（t=8．187，P〈0．001）。在感染48h时诱导凋亡，持续性感染和急性感染组细胞凋亡率分别为46．700％±5．257％和61．767％±1．815％，两者差异有统计学意义（t=5．781，P〈0．001）；持续性感染组与未感染组（68．667％±3．156％）差异有统计学意义（t=7．421，P〈0．001）。结论阿奇霉素诱导沙眼衣原体持续性感染可调控宿主细胞凋亡，且作用持久至48h。

天津地区泌尿生殖道沙眼衣原体慢性持续感染的流行病学研究

目的:了解天津地区性病门诊2009~2011年泌尿生殖道沙眼衣原体慢性持续感染的流行病学特征。方法:对天津市性病研究所门诊泌尿生殖道沙眼衣原体慢性持续感染患者的临床资料进行统计分析。结果:辖区内2009~2011年共有泌尿生殖道沙眼衣原体慢性持续感染患者158例,年龄19~67岁,其中20~29岁和30~39岁年龄组最多,分别占39.24%和34.81%。以商业职业居多,占36.71%;文化程度以大专及以上学历比例最高,占55.06%;性伴职业以洗浴中心、歌厅及宾馆饭店等特殊职业的服务员和配偶为主,分别占41.77%和32.91%;女性发生持续感染的概率为59.49%,明显高于男性;合并支原体、梅毒、白念珠菌、尖锐湿疣感染的情况较多。结论:天津地区泌尿生殖道沙眼衣原体慢性持续感染流行趋势仍很严峻,应根据新的流行特征,制定相应的防治措施。

沙眼衣原体持续感染状态下STAT3-TLR2信号轴的变化初探

目的:探索在沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)持续感染状态下,STAT3-TLR2信号轴的变化,以及相关炎性细胞因子的异常分泌情况。方法:以He La细胞为研究对象,建立Ct的急性感染和IFN-γ诱导的持续性感染模型,采用qRT-PCR、Western blot、ELISA等方法比较不同感染状态下,He La细胞STAT3-TLR2信号轴相关分子如TLR2、STAT3及IL-1α等的变化。结果:在Ct持续性感染状态下,上皮细胞分泌的IL-1α以及STAT3和TLR2的表达均明显增加,且IL-1α的分泌、TLR2的表达与STAT3的蛋白表达和活化呈一致性的升高。结论:在IFN-γ诱导的Ct持续感染状态下,STAT3-TLR2信号轴相关分子存在明显活化。

体外沙眼衣原体持续感染快速鉴定方法探索

目的探索沙眼衣原体持续感染简易而快速的鉴定方法。方法沙眼衣原体E株感染McCoy细胞后分别给予或不给予青霉素处理,于不同时间段收集感染细胞,先经电镜鉴定处于持续感染还是急性感染状态,后经Giemsa染色置光镜下观察两者的形态特点。结果持续感染与急性感染的沙眼衣原体经Giemsa染色后在光镜下的形态存在明显差异,包括形态、数目和着色等方面。结论根据沙眼衣原体在光镜下的形态特点可初步鉴定衣原体持续感染,为国内开展沙眼衣原体持续感染的研究提供一个简单、快速且切实可行的鉴定方法。

持续复发性沙眼衣原体感染治疗的研究进展

沙眼衣原体是一种专性细胞内寄生的原核细胞微生物,感染人体可引起沙眼、包涵体性结膜炎、泌尿生殖道衣原体感染、性病淋巴肉芽肿和沙眼衣原体肺炎。既往研究将衣原体引起的生殖道感染定义为非淋球菌性尿道炎（NGU）,美国和中国疾病预防控制中心（CDC）分别于2002年和2006年将其正式更名为沙眼衣原体泌尿生殖道感染,男性包括尿道炎、前列腺炎、附睾炎、直肠炎、Reiter综合征;女性包括黏液性宫颈炎、尿道炎、子宫内膜炎、盆腔炎、肝周炎。

自噬在沙眼衣原体持续感染中的可能作用

沙眼衣原体的持续感染是现阶段临床最难解决的问题,可以引起如沙眼性失明、输卵管性不孕和长期的上生殖道感染等。抗生素难以清除部分患者体内的沙眼衣原体。另一个难以解释的问题是沙眼衣原体为什么能在人体长期存在?沙眼衣原体感染难以激发人体的有效免疫、那么自噬机制能在衣原体持续感染中起到什么作用?近几年来,随着对沙眼衣原体感染与自噬机制的关系研究逐渐增多,对于沙眼衣原体通过抑制宿主细胞的自噬机制而自身繁殖以及通过增强自噬机制加强胞内清除沙眼衣原体有了一定的认识,本文就此作一综述。

沙眼衣原体持续感染的研究进展

沙眼衣原体持续感染是指在不利生长条件下产生的一种可逆状态。持续感染状态下的沙眼衣原体有活力,但呈肿大的异常型,且新陈代谢处于静止状态。包括营养缺乏,合并病毒感染、噬菌体、抗生素效应、细胞因子,疾病和个体及男女差异在内的多种因素都可导致沙眼衣原体持续感染。沙眼衣原体持续感染迁延难愈并可导致严重并发症,故成为目前沙眼衣原体研究的热点。近年来,随着对沙眼衣原体持续感染的不断深入研究,抗生素联合应用、乳胞素、色氨酸分解酶抑制剂等新型药物、免疫调节剂、新型疫苗及噬菌体成为治疗沙眼衣原体的新手段。

衣原体持续性感染机制的研究进展

人类致病性衣原体主要有肺炎嗜衣原体（Chlamydophila pneumoniae,Cpn）和沙眼衣原体（Chlamydia trachomatis,Ct）。其中Cpn是引起人类急性呼吸道感染的重要病原菌,可引起多种呼吸系统感染性疾病,如新生儿肺炎、支气管炎、咽炎等,

沙眼衣原体持续感染的研究进展

沙眼衣原体持续感染是指衣原体在不利生长的条件下,为逃逸宿主的免疫防御产生的一种可逆状态。临床治疗实践、对未加工的rRNA检测和基因分型等方法证实持续感染存在于体内。体外研究发现与病毒共同感染、细胞因子、营养缺陷、抗生素效应诱发持续感染。抗生素联合治疗、抗生素联合色氨酸治疗、疫苗和噬菌体有利于CT的清除。

沙眼衣原体持续感染的进展

沙眼衣原体持续感染是指衣原体在不利生长的条件下，为逃逸宿主的免疫防御产生的一种可逆状态。体外研究发现细胞因子、非容纳细胞、营养缺陷、抗生素效应诱发持续感染。对未加工的，RNA检测和基因分型等方法证实持续感染存在于体内。宿主免疫缺陷、炎症反应的降低以及衣原体对细胞凋亡的调节、特殊的组织定位有利于衣原体维持持续感染。

泌尿生殖道沙眼衣原体持续性感染的常见暴露因素

泌尿生殖道沙眼衣原体持续性感染是沙眼衣原体在对自身有害环境下为逃避宿主的抗感染免疫而形成的一种可逆状态。目前研究表明,接受同样暴露条件,仅少部分人在感染沙眼衣原体后出现持续性感染状态甚至严重并发症,但具体机制尚未明确。现从泌尿生殖道沙眼衣原体持续性感染的发生、发展与各种暴露因素之间存在何种关联进行分析,以了解造成沙眼衣原体持续性感染的可能暴露因素,为防治提供依据。

沙眼衣原体持续感染的研究进展

沙眼衣原体持续感染是临床常见疾病,诊治困难。目前对沙眼衣原体持续感染的认识仍然不足,临床医生警惕性不高,重视不够。对其基础与临床的研究也处于较早期阶段,以致于临床诊断及治疗方法受到限制。所以,近年来,有关持续感染的研究是沙眼衣原体基础研究的重点之一,并取得了很多新的进展。本文就此作一综述。