一组新的沙蚕蛋白酶同工酶的分离纯化与鉴定

分离纯化一组新的沙蚕蛋白酶同工酶，并对其性质进行鉴定．用硫酸铵盐析、凝胶过滤层析和疏水层析技术从沙蚕中分离得到了沙蚕蛋白酶，经聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）、高效液相色谱（HPLC）、等电聚焦电泳（IEF）和质谱分析（MS）鉴定，发现沙蚕蛋白酶由3个组分组成，均有纤溶活性，其等电点为3．5～4．5，分子量分别为29248．75、29007．66、28954．17，肽指纹图谱分析发现，它们均为未知的新蛋白质，其中2个组分结构相似，具有较高的同源性，与另1个有不同．用抗原抗体反应鉴定其免疫原性，发现3个组分中有2个组分具有相同的免疫原性，另1个组分与2者不同．但3者具有相同的抗原决定簇，证明沙蚕蛋白酶由2个同工酶组成．以4种专一性的抑制剂对其进行抑制，检测酶的活性确定其酶学性质，发现其反应的适宜温度为40℃～50℃、适宜pH值为8～9．沙蚕蛋白酶属于丝氨酸蛋白酶．