龙岩市239株沙门菌毒力基因检测结果分析

目的了解龙岩市沙门菌毒力基因携带与变迁情况,为沙门菌病的防制提供理论依据。方法 对1991-2017年间收集的分离自人体与食品样本的239株沙门菌进行复核鉴定,并用PCR方法检测 invA、sopB、sifA、sscA、sseE、spvB、spvC、spvR、pefA 等9个沙门菌毒力基因的片段。结果 龙岩市沙门菌以肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌为主,占62.3%(149/239),属于SPI1的 invA、sopB 毒力基因检出率为100%,属于SPI2的 sseE、sscA、sifA 毒力基因的检出率分别为99.2%、95.0%、85.4%,毒力质粒基因 spvC 检出率71.1%, pefA、spvB、spvR 检出率均为46.4%。并且其携带数量也随着时间的进程而显著增加;肠炎沙门菌质粒毒力基因携带率显著高于鼠伤寒沙门菌。肠炎沙门菌以检出全部9种毒力基因为主,占83.5%(76/91);鼠伤寒沙门菌以 invA、sopB、sseE、sscA、sifA阳性,spvB、spvR、pefA 阴性结果多见,占77.6%(45/58)。人体与食品样本来源的沙门菌所携带毒力基因数量没有差异。结论 龙岩市沙门菌携带毒力基因数量较多,毒力较强,质粒毒力基因随着时间的进程而累积,人源性与食源性沙门菌交叉污染严重,必须加强人、禽、畜沙门菌病的监测与管理。

鼠伤寒沙门菌质粒毒力基因对耐药表型的影响

目的:探讨沙门菌质粒毒力基因(spv)表达改变对鼠伤寒沙门菌耐药表型的影响。方法:在e GFP基因序列上下游增加启动子及终止子并在两端位点上、下游设计酶切位点,以p ACYC184-e GFP为载体,构建spv基因回补质粒,电转化至前期构建的鼠伤寒沙门菌spv B及spv C基因共同缺陷株获得基因回补株,检测菌株间耐药性的差异及acr AB表达的差异。结果:成功构建鼠伤寒沙门菌spv B、spv C基因荧光回补株,连续培养12代质粒未发生丢失。与野生型菌株及回补株相比,spv基因缺陷变异株对哌拉西林他唑巴坦、头孢噻肟、头孢西丁、四环素、氯霉素及环丙沙星的MIC值下降。spv基因缺陷变异株Acr A周质蛋白水平低于野生菌株及回补株(P<0.05)。结论:在spv B及spv C基因共同缺陷鼠伤寒沙门菌基础上的基因回补株构建成功,spv下调能改变鼠伤寒沙门菌的耐药表型,这可能是通过影响外排泵Acr A来完成的。

浙江省临床分离沙门菌血清型、药物敏感性和毒力基因的研究

目的研究浙江省临床分离沙门菌的血清型分布、耐药状况和携带毒力基因的特征。方法收集2010年至2017年浙江省9个地区临床分离的463株沙门菌,依据沙门菌属Kauffmann-White抗原表对比确定沙门菌属的血清型。采用K-B纸片扩散法进行药物敏感试验。采用聚合酶链反应检测菌株的11种毒力基因。结果463株沙门菌共检出35种血清型,其中优势血清型为鼠伤寒沙门菌[41.90%(194/463)]和肠炎沙门菌[22.25%(103/463)]。对氨苄西林的耐药率[66.52%(308/463)]最高,其次为氨苄西林/舒巴坦[46.87%(217/463];对哌拉西林/他唑巴坦的耐药率[3.24%(15/463)]较低;无亚胺培南和美罗培南耐药株;多重耐药菌株188株(40.60%)。毒力基因hilA、ssrB、marT、siiD、sopB、pagN在所有沙门菌株中都存在。毒力基因vexA只在伤寒沙门菌和都柏林沙门菌中检出;毒力基因icmF主要存在于肠炎沙门菌中;毒力质粒基因spvB和pefA表现为成对出现,且主要分布于猪霍乱沙门菌、肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌中;毒力基因cdtB则主要分布于伤寒沙门菌和甲型副伤寒沙门菌中。结论浙江省临床分离的沙门菌以鼠伤寒沙门菌和肠炎沙门菌为主,多重耐药形势严峻,且携带多种毒力基因。

龙岩市鼠伤寒沙门菌分子分型、毒力基因及耐药性测定

目的分析龙岩市鼠伤寒沙门菌脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型特点、耐药特征和毒力基因的携带情况,为制定防治措施提供参考。方法收集自2010—2017年散发腹泻病例、食物中毒和生禽肉中分离的鼠伤寒沙门菌79株。进行PFGE分析并测定对15种常用药物的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC),同时对其中55株用PCR方法检测沙门菌9个毒力基因(sopB、invA、sifA、sscA、sseE、spvB、pefA、spvR、spvC)片段。结果79株鼠伤寒沙门菌分为61个PFGE型别,其中P1、P3和P21型分别包含10、3和4株。P1带型中的7株来源于1起食物中毒事件。按照85%的分类标准,79株鼠伤寒沙门菌可分为5个优势基因簇(G1~G5)。79株鼠伤寒沙门菌药敏结果以氨苄西林耐药率最高(88.61%),其次是四环素(87.34%)和链霉素(73.41%)。耐3种或3种以上抗菌药物的多重耐药菌占84.81%(67/79)。进行毒力基因检测的全部55株菌均检出invA、sopB、sseE、sscA,其中54株检出sifA,31株(56.4%)检出spvC,分别有10、11、12株检出spvB、spvR、pefA(18%~22%)。检出5种或6种毒力基因的菌株占76.4%(42/55),均为invA、sopB、sseE、sscA、sifA阳性,spvB、spvR、pefA阴性,检出全部9种毒力基因的菌株占18.2%(10/55)。结论龙岩市鼠伤寒沙门菌PFGE型别呈现多态性,存在3个优势PFGE型别簇。在食物中毒事件中,PFGE分子分型检测能快速预警鼠伤寒沙门菌散在暴发和溯源。鼠伤寒沙门菌多重耐药现象应引起重视,需加强对多重耐药株的监控及抗菌药物使用的监管。鼠伤寒沙门菌携带毒力基因数量较多,毒力较强。