油松花粉中总黄酮提取的响应面优化

以总黄酮得率为响应值,采用响应面实验设计方法(RSD)对油松花粉中总黄酮提取工艺进行研究。其最优提取条件为:温度为80℃,溶剂乙醇浓度为56%,液固比为17.9:1,加热3.2h回流提取。在此条件下,用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH显色法测定的总黄酮为1.49%。

油松花粉多糖分离纯化及结构分析的初步研究

油松花粉经热水提取,Sevag法除蛋白,乙醇沉淀得多糖。采用Sephadex G-100柱层析对多糖进行初步分离纯化,用红外光谱、紫外-可见光谱、气相色谱分析对花粉多糖的结构进行初步研究。结果表明:纯化的油松花粉多糖为杂多糖,至少由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖及半乳糖6种单糖组成。另外,GC图谱显示油松花粉多糖还含有一个未知的单糖,峰面积非常小,含量比较低。UV检测显示油松花粉多糖在波长260nm与280nm处未见有核酸和蛋白特征吸收峰,经IR检测证实油松花粉多糖具有多糖类物质的特征吸收峰。

油松花粉中总黄酮的提取研究

对油松花粉中总黄酮的提取条件进行了研究。其最优提取条件为:温度为70℃,溶剂乙醇浓度为60%,液固比为10:1,加热回流提取。在此条件下,用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH显色法测定的总黄酮为1.41%。

氧化环境对油松花粉保存影响实验研究

花粉保存能力差异是影响花粉谱准确性的重要因素之一,采用KMnO4溶液和HNO3溶液作为氧化剂,模拟自然环境氧化条件对油松花粉保存影响情况。结果表明:同一KMnO4溶液浓度条件下,随时间延长油松花粉完好率呈下降趋势;浸泡相同时间,随KMnO4溶液浓度增大油松花粉完好率亦明显下降.经68%HNO3溶液浸泡18 h后,残留的完好花粉外壁变薄,纹饰变模糊,24 h后花粉几乎完全被溶解.一般认为油松花粉保存能力较强,而经2%KMnO4溶液和68%HNO3溶液处理后,发现在短时间内就足以使油松花粉大量破碎或溶解,表明氧化环境对油松花粉保存影响强烈.氧化环境对油松花粉腐蚀作用强于碱性环境.

油松花粉多糖提取及其清除羟自由基活性研究

通过单因素试验和正交设计试验,研究油松花粉多糖水提取条件。结果表明:提取温度和提取时间是影响多糖提取得率的主要因素,最佳提取条件为:料液比1:25,90℃水浴条件下浸提,每次浸提3h。在此条件下油松花粉多糖提取得率达1.4%;另外采用水杨酸法检测油松花粉多糖对羟基自由基清除作用。结果表明油松花粉多糖对羟基自由基有较明显的清除能力,清除率达50%,所需多糖浓度为0.75mg/ml。

苯酚-硫酸法测定油松花粉多糖含量研究

目的优选苯酚-硫酸法测定油松花粉多糖含量的显色条件,建立测定油松花粉多糖含量的分析方法。方法以葡萄糖为对照,采用苯酚-硫酸法。结果最佳显色条件为:取待测油松花粉多糖2 m l,加入浓度为5%的苯酚1 m l,迅速滴加浓硫酸6.0 m l,摇匀后于沸水中放置10 m in,在483 nm处测定吸光度值。结论此测定方法简单灵敏,显色稳定,不受蛋白质干扰。

大孔树脂分离纯化油松花粉黄酮类化合物的研究

筛选出分离油松花粉总黄酮的最佳树脂,对影响分离的各种因素进行系统研究。采用静态与动态的吸附-解吸两种方法,研究不同工艺条件对总黄酮分离纯化效果。AB-8大孔树脂分离效果最好,其最佳工艺为上样液浓度0.45mg/mL,pH值5.0,上样液流速2mL/min,用80%乙醇溶液以1mL/min的速度洗脱5BV。收集5BV时的洗脱液,其干燥品后的黄酮纯度可达85.13%。

油松花粉多酚抗氧化性研究

通过超声波辅助乙醇浸提法提取油松花粉多酚,采用AB-8大孔吸附树脂分离纯化油松花粉多酚,以V_C为阳性对照,分别采用Fe^(3+)-还原法、DPPH·清除法、水杨酸比色法和邻苯三酚自氧化法来研究油松花粉多酚的还原能力及其对DPPH·、·OH、O_2^-·的清除作用,实验结果显示,当浓度均为6μg/m L时,油松花粉多酚对DPPH·清除率比V_C高出16.33%,显著高于V_C(p<0.05);当浓度均为8μg/m L时,油松花粉多酚对·OH清除率比V_C高出32.03%,显著高于V_C(p<0.05);当浓度均为6μg/m L时,油松花粉多酚对O_2^-·清除率比V_C高出10.53%,高于V_C但不显著;当浓度均为10μg/m L时,油松花粉多酚在700 nm处的吸光度为0.712,显著高于V_C(A_(700 nm)=0.353667,p<0.05),说明油松花粉多酚还原力强于V_C。实验数据表明油松花粉多酚具有较强的还原能力和清除氧自由基的作用,且其还原能力及清除率均高于V_C。结果表明油松花粉多酚具有显著的抗氧化活性。

碱性环境对油松花粉保存影响实验研究

孢粉是恢复古植被、古气候的重要代用指标。然而,即使是同一时代的地层,不同地点、不同岩性提取出的花粉量差异很大,造成这些差异的原因很多,其中花粉在不同沉积环境中的保存差异是重要原因之一。本研究是在实验室内模拟自然条件下碱性环境对油松花粉(Pinus tabulaeform is)的破坏情况:煮水5小时,泡10%NaOH溶液10天,煮10%NaOH溶液5小时对油松花粉破坏都很小;煮20%和30%NaOH溶液1小时对油松花粉影响也不明显;煮40%NaOH溶液1小时,油松花粉壁出现蚀变,加热时间增至5小时,蚀变现象进一步加深。表明油松花粉具有很强的耐碱,耐高温能力。更强碱或更长时间情况下花粉蚀变情况,有待进一步研究。

油松花粉蛋白提取工艺的优化

为了充分利用油松花粉中的蛋白质,对油松花粉的基本组分进行测定,采用碱提酸沉法提取油松花粉中的蛋白,通过正交实验确定出油松花粉蛋白的最佳提取条件。结果表明,油松花粉中水分、灰分、蛋白质、脂肪及还原糖含量分别为8.72%、3.19%、20.32%、2.84%、24.71%。油松花粉蛋白的等电点pI为3.6,在此基础上研究油松花粉在料液比、提取时间、提取温度、提取pH对油松花粉蛋白提取率的影响。经过单因素实验筛选较优水平后,设计正交实验,采用极差分析和方差分析,得出油松花粉蛋白的最佳提取条件为:料液比为1∶40(g/mL),提取pH为11,提取时间为80min,提取温度为55℃,在此提取条件下,油松花粉蛋白的提取率为56.3%。

两种蛋白酶水解油松花粉蛋白的比较

本文研究了碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶水解油松花粉蛋白的工艺条件,对两种蛋白酶水解得到的肽进行了氮溶指数,清除·OH自由基和抗氧化能力方面进行了比较分析。其中,碱性蛋白酶水解得到的肽,其氮溶指数较高;木瓜蛋白酶水解得到肽,其清除·OH自由基和抗氧化能力较强。

油松花粉黄酮和小肽润肤霜的制备及性能评价

通过添加油松花粉小肽及黄酮制备护肤霜类产品,探讨了油松花粉小肽吸湿保湿性,黄酮和小肽的抗氧化性及润肤霜的抗紫外线性。结果表明:在低湿度条件下,油松花粉小肽液的吸湿率达9.63%,保湿率73.62%,在高湿度条件下,油松花粉小肽液的吸湿率达39.40%,保湿率95.32%;油松花粉黄酮的羟基自由基清除率为38.42%;小肽的自由基清除率达11.70%,添加了油松花粉小肽和黄酮的润肤霜在紫外区吸收达50%以上。

油松花粉黄酮的提取及黄酮酒的制备

对油松花粉中的黄酮类物质进行提取、检测，为制作黄酮保健酒提供可靠的工艺路线．采用醇提法对油松花粉中的黄酮进行提取，利用分光光度法以及高效液相色谱法（HPLC）对黄酮的总含量及种类进行了检测．从提取时间、固液比、白酒的酒精体积分数方面考察了最佳的提取条件，确定黄酮的最大提取量，并将之与花粉的浸出实验结果相对比，确定最佳的制作工艺．结果显示，黄酮酒的最佳制作工艺为：采用酒精体积分数为42％的白酒直接浸泡，固液比（g：mL）为1：15，浸泡时间为10-15d，总黄酮的提取量为1．9mg／g．

响应面法优化油松花粉蛋白酶解工艺

以油松花粉蛋白为原料,蛋白水解度为评价指标,对油松花粉蛋白酶解工艺进行研究。首次优选出碱性蛋白酶为最佳水解酶,然后在单因素实验的基础上,采用Plackett-Burman设计挑选出对油松花粉水解工艺有显著影响的三个因素:加酶量、p H和底物浓度。采用Box-Behnken中心组合实验及响应曲面分析法得到油松花粉蛋白水解的最优工艺条件为:加酶量0.04 g/g样品,p H11.1,底物浓度0.09 g/m L,酶解时间5 h,酶解温度50℃,油松花粉蛋白的水解度为79.07%。本文的研究为油松花粉多肽及其功能性食品的开发提供了理论基础。

油松花粉对雄性幼年小白鼠睾丸发育及精子生成的影响

研究了油松花粉对雄性幼年小白鼠睾丸发育及精子生成的影响．并与睾酮组和正常对照组进行了比较．结果表明：油松花粉具有类似睾酮的作用，可促进睾丸的发育及精子的生成，油松花粉作为营养保健品开发，儿童不宜服用。

油松花粉水解液的脱色研究

以活性炭为吸附剂,对油松花粉水解液进行脱色,研究了影响花粉水解液脱色的主要影响因素。实验结果表明,活性炭脱色最佳工艺条件如下:脱色时间30min,脱色温度70℃,加入活性炭量1.0g,pH值5。所得油松花粉水解液无色,氨基氮损失率为2.4%,表明活性炭对花粉水解液有着较强的脱色效果。

油松花粉多糖微波提取及含量测定

目的:从油松花粉多糖中提取多糖,并测定其含量。方法:运用微波提取技术水提醇沉法提取,真空干燥得油松花粉多糖,用苯酚-硫酸法测定多糖含量。结果:测得油松花粉多糖的最佳波长为485nm,多糖含量为3.18g/100g,回收率为99.8%,CV=1.28%(n=3)。结论:首次用微波技术提取油松花粉多糖,操作简便,反应时间短。

响应面优化超声波提取油松花粉多酚的工艺研究

研究了油松花粉多酚的超声波辅助提取工艺。在单因素实验结果的基础之上,通过Plackett-Burman筛选,确定出提取温度、料液比和提取时间为显著影响因子,选用3因素3水平的响应面分析法来优化油松花粉多酚的提取工艺。依据数据进行模型拟合和回归分析,确定影响油松花粉总酚得率的重要因素为提取时间和料液比,得出油松花粉多酚的最佳提取工艺条件为:乙醇体积分数80%、料液比1∶32 g/m L、提取时间为31 min、提取温度为51℃,在此工艺下总酚含量可达6.735 mg/g。实验结果显示,超声波辅助提取有效地优化了油松花粉多酚的提取条件,为其开发利用提供了理论支持。

油松花粉遗传毒性研究

目的探讨油松花粉的遗传毒性,为其应用提供安全性毒理学评价依据。方法用鼠伤寒沙门细菌营养缺陷型突变株TA97(a)、TA 98、TA 100和TA 102,采用平皿掺入法进行Ames实验,将实验分为加和不加代谢激活系统S9 2组平行实验。受实物设5个剂量组(0.008、0.040、0.200、1.000、5.000 mg/皿)。应用小鼠骨髓嗜多染红细胞微核实验,检测小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率;利用小鼠精子畸形实验,观察不同浓度的油松花粉致小鼠精子畸形的数目。结果在Ames实验中,油松花粉各剂量组引起的回变菌落数未超过对照组自发回变菌落数的1倍以上;小鼠骨髓嗜多染红细胞微核实验显示,油松花粉3个剂量组的微核发生率均在正常范围内,与阴性对照组比较差异无显著性(P>0.05),与阳性对照组比较差异显著(P<0.05);小鼠精子畸形实验显示,油松花粉3个剂量组的精子畸形率均在正常范围内,与阴性对照组比较差异无显著性(P>0.05),与阳性对照组比较差异显著(P<0.05)。结论油松花粉对所实菌株、小鼠体细胞及生殖细胞无诱变性。