油桐尺蠖核型多角体病毒毒力的生物测定

我们分离的油桐尺蠖(Buzura suppressaria)核型多角体病毒(BsNPV)GW-846是一种极有潜力的生物杀虫剂。本文通过叶片感染,添食饲喂进行其毒力的生物测定,感染剂量与三龄幼虫死亡率的回归直线方程为y=2.23+x。由此计算的LD_(50)为5.91×10~2/cm^2叶片。当感染剂量为1.25和2.0×10~4PB/头虫时,LT_(50)为4.8和4.9d,各龄幼虫均很敏感。五龄幼虫的LT_(50)也只有7.7d。工作中,我们推导了一个计算死亡率的公式,有一定的实用价值。

油桐尺蠖核型多角体病毒DNA在3株昆虫细胞系中的转染

使用 DNA 磷酸钙共沉淀方法,把油桐尺蠖核型多角体病毒 DNA 导入3株昆虫细胞株。结果表明,同源细胞株的被转染率显著高于非同源细胞株。用间接免疫酶技术检测细胞中病毒多角体蛋白的存在来确定转染率的方法,可在转染21小时后就获得结果,该方法快速、简便。同时,还研究了吸附时间和病毒 DNA 浓度对转染的影响。

油桐尺蠖核型多角体病毒不同分离株的比较

该文对油桐尺蠖核型多角体病毒(Buzura suppressatia nucleopolyd rovirus,BusuNPV)的不同毒株进行了比较研究。毒株LF,SF,WF对2～3龄油桐尺蠖幼虫的LC50分别为4.39×104,6.65×104,1.02×105PIB/mL;LT50分别为5.59,5.69,5.17 d。各分离株均为单粒包埋核型多角体病毒,病毒粒子大小为(0.195～0.246)μm×(0.054～0.072)μm,多角体直径为0.85～1.50μm。对BusuNPV全基因组序列进行单酶解时,除EcoRⅠ外其它内切酶酶解条带均较少,分子量大,不易进行分离株比较。双酶解BusuNPV全基因组序列时,DNA充分被消化,条带较多,但各分离株的酶切条带数目、大小不存在差别。

油桐尺蠖核型多角体病毒的空斑测定

在油桐尺蠖卵巢细胞系上对油桐尺蠖核型多角体病毒(BsNPV)进行了空斑测定。用此方法测定了BsNPV的感染力,并将所得的结果与其TCID_(50)进行比较,结果显示这两种方法在测定病毒感染力时敏感性相似。

油桐尺蠖核型多角体病毒及其基因组某些理化性质研究

油桐尺蠼核型多角体病毒(BsNPV)的多角体大小为1～1.5μm×0.8～1.6μm。病毒粒子长度为0.31～0.8μm。直径为0.05～0.06μm。在0.1×SSC溶液中测得其基因组DNA T_m值为76.5℃,(G+C)%为55.14%,电镜法测得其DNA分子平均长度为41.3μm,计算出对应分子量为81.36×10~6 daltons。用限制性内切酶混合酶解后琼脂塘凝胶电泳,测出DNA积加分子量为79.36×10~6 daltons(120.23kb)。

油桐尺蠖核型多角体病毒p35基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

用PCR技术从油桐尺蠖核型多角体病毒基因组中扩增得到p35基因的DNA序列,把PCR产物克隆到pMD 18载体上,核苷酸序列测定表明此片段与AcNPVp35基因同源性为100%,继而构建了表达质粒pGBp35,诱导后经SDS PAGE检测表明获得了BsNPVp35基因在大肠杆菌BL21中包涵体形式的特异表达。