油脂酵母Trichosporon fermentans HWZ004的分批补料法高密度培养

为提高发酵性丝孢酵母Trichosporon fermentans HWZ004发酵产油脂的能力,采用分批补料的培养方式对其进行高密度培养,考察了初始糖浓度对发酵性丝孢酵母生长及油脂积累的影响,确定初始糖浓度为100 g/L,在该浓度下Trichosporon fermentans HWZ004可获得较高的生物量及油脂产量,且不存在底物抑制现象;然后,在5 L发酵罐中进行分批补料培养,发酵132h后,Trichosporon fermentans HWZ004的生物量、油脂含量及油脂生产强度分别为102g/L、48%和0.37g/(L·h).气相色谱分析结果表明,所得油脂的脂肪酸组成主要为硬脂酸、棕榈酸、油酸、亚油酸,不饱和脂肪酸含量达65%以上,适用于生物柴油的生产.

绿化废弃物定向转化产酵母油脂的技术研究

城市公园建设过程中产生大量的绿化废弃物,是潜在的绿色生物质资源。利用预处理技术破坏绿化废弃物复杂致密的木质纤维素结构并将液体部分直接发酵生产微生物油脂,能够有效实现绿化废弃物的高值化利用。结果表明,圆红冬孢酵母在350 W反应6 min的微波预处理液中长势更佳,累积生物量达1536.67 mg/L,总糖利用率为85.16%,酵母中油脂质量分数最终稳定在21.44%,其基本性质参数符合大多数生物柴油的标准。该联产模式实现了绿化废弃物向酵母油脂的定向转化,整体流程短、操作简便,为进一步开发利用绿化废弃物生产生物油脂的工艺路线和进行绿色生物制造提供了有力的支撑。

丝孢酵母单细胞油脂的研究进展

单细胞油脂(single cell oil,SCO)是指单细胞产油微生物在菌体内大量积累的油脂。丝孢酵母是一种高产油脂的单细胞微生物。本文首先总结了丝孢酵母属常见的产油菌种及其脂肪酸组成,进而详细介绍了碳源、氮源、C/N比、无机盐等培养基成分和接种量、pH值、温度、培养时间等培养条件对其油脂生产的影响,并且全面归纳了丝孢酵母对木质纤维素水解物、工农业废弃物、淀粉类原料等廉价原料的利用,以及丝孢酵母SCO的应用。本文希望为丝孢酵母在SCO开发及利用领域的研究提供参考依据。

圆红冬孢酵母利用废糖蜜合成微生物油脂及类胡萝卜素

圆红冬孢酵母(Rhodosporidium toruloides)具有底物谱广、性能稳定和细胞含油量高等优点,是优良的微生物油脂生产工厂,而且具有高产类胡萝卜素的能力,极具开发潜力。为提高微生物的油脂和类胡萝卜素产量并降低成本,通过糖蜜与葡萄糖共添加的双糖策略、不外源添加有机氮源、限制磷酸盐的方式,成功开发R.toruloides Z11利用廉价碳源糖蜜高产微生物油脂和类胡萝卜素的新型发酵方式。与单一葡萄糖作为碳源发酵培养相比,结合多种发酵策略,可使R.toruloides Z11生物量(OD_(600))提升至379.0±0.3,提高了2.72倍,油脂质量分数达到68.9%、类胡萝卜素含量达到2.58 mg/g。

发酵性丝孢酵母(Trichosporon fermentans)发酵产油脂的研究

通过摇瓶发酵,考察了碳源浓度、氮源种类和浓度对发酵性丝孢酵母(Trichosporonfermentans)发酵产油脂的影响,对发酵产油脂条件的初步优化结果为:在葡萄糖100 g/L、蛋白胨1.8 g/L、初始pH 7.0的培养基中,以10%的接种量,于33℃、190 r/min的摇床上发酵120 h,可得菌体生物量为18.2 g/L,干细胞的油脂含量为68.5%。

产油酵母发酵醪液油脂提取及溶剂筛选

为建立简易高效的微生物油脂提取方法,文章以圆红酵母发酵醪液为原料,直接用溶剂对其进行处理,评估了24种溶剂的提取性能。研究结果表明:弱极性溶剂,如甲基叔丁基醚、氯仿、二氯乙烷等可直接从圆红酵母细胞中提取油脂,而短链醇类极性溶剂及烃类非极性溶剂均不能提取油脂;使用尼罗红和碘化丙啶对细胞进行染色后发现,极性和弱极性溶剂破坏了细胞膜和脂滴膜,有利于提取胞内油脂;利用低毒性的甲基叔丁基醚和乙酸乙酯处理发酵醪液,油脂提取率分别达到了85%和59%,且所得脂质的组成与酸热法提取的油脂相似。

皮状丝孢酵母Trichosporon cutaneum产油脂发酵培养基优化

对皮状丝孢酵母发酵产油脂培养基中的碳氮源种类及添加量、KH_2PO_4添加量、接种量等影响因素进行优化。试验表明,葡萄糖为最佳碳源,蛋白胨为最佳氮源,在葡萄糖40 g/L,蛋白胨1.33 g/L,KH_2PO_4质量浓度1.0 g/L,最佳接种量15%时,油脂得率可达到细胞干质量的62%,比优化前提高了50%。

皮状丝孢酵母利用大米草水解液发酵生产微生物油脂

研究了产油酵母菌皮状丝孢酵母(Trichosporon cutaneum)利用经过简单脱毒处理的大米草水解液,直接发酵生产微生物油脂。首先分别用1%、2%、4%和6%稀硫酸,在122℃水解大米草,大米草/硫酸(固/液比)为10%。结果表明,在6%的酸浓度下水解40 min后总还原糖含量最高。而1%稀硫酸在140℃下水解大米草,2.8 h后,水解液中葡萄糖产量达到最高14.2 g/L。然后将该条件下大米草水解液冷冻干燥浓缩为不同的倍数,作为皮状丝孢酵母菌的发酵培养基,水解液浓缩倍数为4.0时,产油量最高达6.0 g/L。为高效利用大米草,将大米草开发为一种能源植物,提供了新的途径。

斯达氏油脂酵母利用混合糖发酵产油脂

研究了斯达氏油脂酵母Lipomyces starkeyi2#利用葡萄糖-木糖混合糖为碳源生长和油脂积累特性。L.star-keyi2#利用70 g/L葡萄糖和70 g/L木糖作为碳源在30℃下摇瓶发酵96 h,糖利用率均达90%以上,菌体生物量分别为14.1 g/L和13.1 g/L,油脂质量分数分别为55.7%和52.6%。相同条件下该菌株利用混合糖(葡萄糖46 g/L,木糖24 g/L)为碳源时总糖利用率、生物量和油脂质量分数分别为75.1%,15.0 g/L和40.0%。借助于P lackett-Burm an设计法和单因子实验法对培养条件进行了优化,结果表明发酵96 h混合糖利用率可达到97.3%,发酵120 h后混合糖利用率、生物量和菌体油脂质量分数分别达99.5%、19.0 g/L和52.6%。生物量得率和油脂得率分别达到27%和14%。

高产油脂酵母菌选育及摇瓶发酵条件的研究

经紫外线和ＥＭＳ复合诱变选育出一株高产油脂的优良酵母菌株，命名为Ｌｉｐｏｍｙｃｅｓ．ｓｔａｒｋｅｙｉ ＨＬ。通过摇瓶培养，对各项与菌体产油脂相关的因素作了单因子实验，确定了摇瓶发酵培养的最佳产油脂条件：碳源，废糖液１６５．７ｍｌ／Ｌ；氮源，硫酸铵１．０８ｇ／Ｌ；Ｃ／Ｎ：６１：１；培养温度为２８℃；接种量１０％；发酵时间９６ｈ； ｐＨ５．０。最后可得油脂产量 ５．９ｇ／Ｌ；菌体生物量 １１．０ｇ／Ｌ；油脂含量 ５３．６％。对菌体内油脂组成进行了气相色谱与质谱分析，结果如下：软脂酸３３．２％，棕榈油酸３．４％，硬脂酸６．０％，油酸５０．８％，亚油酸３．５５％，亚麻酸１．５３％，其它１．５２％。

对产油脂酵母的细胞破碎方法及油脂提取效果的比较

研究了冻融破碎法、超声波破碎法、酸热法以及冻融和酸热结合法破碎发酵性丝孢酵母(Trichosporon fermentans)细胞,并考察了乙醚-石油醚法和氯仿-甲醇法萃取细胞内油脂.实验结果表明,采用酸热法破碎细胞后以乙醚-石油醚作为萃取溶剂油脂提取效果较好,油脂得率高达29.8%.

高产油脂酵母菌株的选育、发酵条件的优化及油脂成分分析

文中从八株油脂含量较高的酵母菌株中筛选出一株生长快、且油脂含量最高的菌株，以该菌株为始发菌株，用紫外线诱变处理，得到GLR513菌株。该菌株细胞为卵圆型，出芽繁殖，无有性繁殖，菌苔光滑，有光泽，质地粘稠，呈现红色。生理特征为：发酵-；肌醇-；硝酸盐十；豚酶十；DBB＋；淀粉-，具有类胡萝卜色素。经鉴定属于粘红酵母（Rhodotonileglutinis）。通过菌种选育、培养条件优化和油脂成分分析，初步形成了GLR513菌株油脂生产的框架，为进一步理论研究和生产实验提供了依据。

圆红冬孢酵母菌发酵产油脂培养基及发酵条件的优化研究

采用均匀设计和单因子试验法,系统考察了圆红冬孢酵母菌(Rhodosporidiumtoruloides)在不同碳氮比条件下产油发酵情况以及添加无机盐对产油发酵的影响,通过均匀设计软件对二次多项回归方程求解及单因素分析得知在培养基组成分别为葡萄糖70g/L,硫酸铵0.1g/L,酵母粉0.75g/L,磷酸二氢钾0.4g/L,七水硫酸镁1.5g/L,初始pH6.0,在灭菌(121℃15min)后添加ZnSO41.91×10-6mmol/L、CaCl21.50mmol/L、MnCl21.22×10-4mmol/L、CuSO41.00×10-4mmol/L。发酵摇瓶装液量为250mL三角瓶装培养基50mL,接种量为10%(种龄28h)。在上述条件下,30℃振荡(200r/min)培养120h,所得菌体油脂含量高达76.1%,脂肪得率系数可达22.7。

圆红冬孢酵母发酵菊芋块茎产油脂的研究

研究了圆红冬孢酵母Y4发酵菊芋块茎,菊芋品种及其处理方法对发酵产油的影响。结果表明,菊芋浸提汁、酸水解液或菊芋浆均可直接被圆红冬孢酵母Y4利用,发酵积累油脂,但白皮菊芋比紫皮菊芋更有利于油脂发酵。发酵菊芋浸提汁或酸水解液时,无需添加外源营养物,干菌体油脂含量可达到40%(w/w);发酵菊芋浆时,白皮菊芋转化率达到12.1g油/100g去皮干菊芋。菊芋油脂发酵产品主要以16碳和18碳系脂肪酸为主,与常规植物油的脂肪酸组成相似,可作为制备生物柴油的新型替代原料。

1株高产油脂酵母菌株的诱变选育及其发酵条件研究

以子囊菌油脂酵母(Lipomyces tetrasporus)NRRL Y11562为出发菌株,经紫外诱变选育出1株高产油脂的优良酵母UV5菌株.对该菌种的发酵培养基和发酵条件进行优化,发现当以葡萄糖为碳源,硫酸铵为氮源,C/N为308,接种量为10%,初始pH为6.5,培养温度为28℃,培养96 h时,油脂产率最高,达9.09 g?L-1.用气相色谱法对发酵得到的油脂进行脂肪酸组成分析,结果显示该突变株产生的油脂主要由软脂酸(C16:0)、棕榈油酸(C16:1)、硬脂酸(C18:0)、油酸(C18:1)和亚油酸(C18:2n-1)组成,其脂肪酸组成与植物油近似.

高产油脂斯达氏酵母菌株的选育及摇瓶发酵条件的初步研究

以斯达氏油脂酵母Lipomyces starkeyi AS 2．1560为出发菌株．经紫外线诱变选育出了一株高产油脂的优良酵母菌株L．starkeyi M36．通过摇瓶培养，对与菌体产油脂相关的因素进行了单因子试验，确定了摇瓶发酵培养的最佳产油脂条件，碳源为葡萄糖110g／L；氯源为硫酸铵0．6g／L；培养温度30℃；接种量15％；初始pH5．0～7．0；培养144h。最后可得生物量24．2g／L；油脂量14．6g／L．菌油脂肪酸组成分析结果如下：豆蔻酸0．5％，软脂酸35．2％，棕榈油酸4．3％，硬脂酸4．4％，油酸53．0％，亚油酸2．6％．与植物油脂相似．

啤酒生产废水培养斯达油脂酵母发酵产油脂培养基的优化

以啤酒生产废水及添加一定的营养因子为发酵基质,采用单因素和正交试验设计对斯达油脂酵母(Lipomyces starkeyi1809)发酵产油脂和COD降解的培养基进行了优化,并利用气相色谱分析比较了菌体油脂的脂肪酸组成。结果表明:最佳培养基组成为在啤酒生产废水中添加碳源和氮源的C/N为55∶1(即木糖28.88 g/L和硫酸铵1.0 g/L),FeC l3.6H2O 3 mg/L,色醇150μmol/L(在发酵36 h时添加),初始pH 5.5;用此培养基在摇床转速120 r/m in、温度28℃下培养斯达油脂酵母120 h,菌体生物量、油脂产量、油脂含量和废水的COD降解率分别达到12.28 g/L、4.40 g/L、35.80%和50.32%,生物量和油脂产量比优化前分别提高了137.98%和117.82%,所产菌体油脂的不饱和脂肪酸指数(IUFA)达到63.95%,其中油酸的相对含量高达56.29%,比优化前提高了5.45%,优化效果显著。

斯达氏油脂酵母高产油发酵培养条件的优化

【目的】通过摇瓶发酵,对斯达氏油脂酵母的产油发酵条件进行优化。【方法】利用单因素试验,确定最佳碳源、氮源、初始pH值、无机盐的质量浓度;利用4因素3水平正交试验,优化碳源质量浓度、氮源质量浓度、接种量、培养温度等参数;同时考察发酵时间对斯达氏油脂酵母生长及油脂产量的影响。【结果】单因素试验结果表明,以葡萄糖为碳源时,斯达氏油脂酵母发酵生物量及油脂产量明显高于其他碳源;以（NH4）2SO4为氮源时,则生物量、油脂产量均最高;最佳初始pH值为6.0~6.5;无机盐离子的最适添加质量浓度为：MgSO4.7H2O 1.5 g/L,KH2PO43.0 g/L。碳源质量浓度、氮源质量浓度、接种量、培养温度4因素3水平正交试验的极差分析结果表明,培养温度对斯达氏油脂酵母的生物量和油脂产量的影响最大。斯达氏油脂酵母发酵培养基的最优组合为：葡萄糖90g/L,（NH4）2SO43.5 g/L,接种量10%,培养温度28℃。在摇瓶发酵过程中,发酵培养144 h时菌体生物量、油脂产量均最高,OD600值也较高。【结论】在优化条件下对斯达氏油脂酵母进行摇瓶发酵,获得的菌体生物量最高可达16.35g/L,较优化前提高了25.19%;油脂产量为4.94 g/L,较优化前提高了97.84%;菌体含油率最高可达302.1 g/kg。

废弃烟梗提取液为基质的产油脂酵母菌的筛选与鉴定

以废弃烟梗水提取液(Tobacco stem extract,TSE)为唯一基质,采用苏丹黑B染色法从市售鲜葡萄中初筛出12株产油脂酵母菌,进一步结合摇瓶发酵实验复筛出2株在TSE中生长良好且油脂产量较高的酵母菌CC820和CA815。对CC820和CA815的菌落、细胞及生理生化特征进行检测,CC820初步鉴定为假丝酵母(Candida sp),CA815初步鉴定为红酵母(Rhodotorula sp)。在接种量5%、装载量60/250 m L、180 r/min和30℃条件下培养5 d,菌株CC820和CA815油脂产量分别为3.53 g/L和3.29 g/L。

粘红酵母在味精废水中发酵生产油脂

对粘红酵母菌株进行驯化得到一株优良菌株Rh8,利用其在味精废水中发酵以去除废水中的化学需氧量(COD)并生产油脂;考察废水pH以及添加葡萄糖母液、营养因子等对菌株Rh8在味精废水中生长、产油和COD去除效果的影响,发现将废水稀释4倍、调节pH至5.5时,菌株可以较好地生长;而添加废葡萄糖母液、酵母粉、KH2PO4、MgSO4、MnSO4均能够促进菌体的生长、产油和废水中的COD去除,在250 mL摇瓶中,生物量最高可达15.6 g/L,干菌体中油脂质量分数达到29.61%,COD去除率达到45.1%。