3种鳜鱼消化道结构与胃中泌酸胃酶细胞分布比较

利用石蜡切片技术比较了鳜鱼、斑鳜和杂交鳜(斑鳜♀×鳜鱼♂)胃、幽门盲囊、肠道结构特征。3种鳜鱼胃壁均由黏膜层、黏膜下层、肌层组成,黏膜层内能看到固有层;其中,鳜鱼、杂交鳜胃黏膜层相对厚度0.30±0.09、0.30±0.11,斑鳜胃黏膜层相对厚度较薄,约0.21±0.13。肠道由黏膜层、黏膜下层和肌层组成,黏膜层表面含有绒毛,绒毛层含有杯状细胞;鳜鱼与杂交鳜褶皱数、杯状细胞密度间差异不显著(P>0.05),但显著大于斑鳜(P<0.05)。鳜鱼、斑鳜和杂交鳜幽门盲囊平均数目分别为(2.138±0.173)个/μm2、(0.793±0.132)个/μm2和(1.098±0.218)个/μm2。幽门盲囊结构与肠道相似,3种鳜鱼的褶皱数目差异不显著(P>0.05),但斑鳜杯状细胞密度显著小于鳜鱼和杂交鳜(P<0.05)。同时,利用原位杂交技术比较了3种鳜鱼胃中泌酸胃酶细胞的分布特征,3个胃蛋白酶原基因探针均出现紫色杂交信号,且均位于胃黏膜层。同种鱼中,不同基因探针杂交信号细胞密度差异不显著(P>0.05);不同种类间,相同基因探针杂交信号细胞密度大小顺序均为鳜鱼=杂交鳜>斑鳜,且相互间差异显著(P<0.05)。消化道结构与泌酸胃酶细胞分布差异为鳜鱼消化生理学比较研究提供了基础资料。

晚期糖基化终末产物可通过调节V-ATPase a3与ClC-7影响破骨细胞的泌酸功能

背景:晚期糖基化终末产物对破骨细胞骨吸收功能的影响存在争议,作者的前期研究表明晚期糖基化终末产物作用于破骨细胞前体可显著抑制骨吸收功能,但关于其对破骨细胞泌酸功能的影响尚不明晰。目的:探究晚期糖基化终末产物对破骨细胞泌酸功能的影响及其机制。方法:以15μg/L的RANKL对破骨细胞前体RAW 264.7进行定向诱导(正常组),实验组中另加入50-400 mg/L不等的晚期糖基化终末产物及对照用牛血清白蛋白(100 mg/L)。通过骨吸收实验验证晚期糖基化终末产物对骨吸收的抑制效应,并以吖啶橙染色观察晚期糖基化终末产物对破骨细胞泌酸功能的影响;进一步检测质子泵V-ATPase a3及氯离子通道ClC-7的表达情况,分析晚期糖基化终末产物影响破骨细胞泌酸的相关机制。结果与结论:(1)晚期糖基化终末产物组的骨吸收面积较正常组显著减少(P<0.05);(2)吖啶橙染色显示晚期糖基化终末产物组的红色荧光(620 nm)强度较正常组显著减少(P<0.05),抑制程度随着刺激浓度的增高而加重;(3)免疫细胞化学染色、蛋白质免疫印迹及PCR发现,晚期糖基化终末产物组的V-ATPase a3及ClC-7表达量均较正常组显著下降(P<0.05);(4)综上结果表明,晚期糖基化终末产物作用于破骨细胞前体可显著抑制破骨细胞的泌酸功能,其机制可能与晚期糖基化终末产物抑制了质子泵V-ATPase a3及氯离子通道ClC-7的表达相关。

鳜胃蛋白酶原A、胃质子泵基因cDNA全长的克隆与细胞表达定位

利用cDNA末端快速扩增(RACE)技术获得了鳜全长1 322 bp的胃蛋白酶原(pepsinogen,PG)A2 cDNA序列,含1 131 bp的开放阅读框(ORF),共编码376个氨基酸,氨基酸序列包含信号肽、激活肽和胃蛋白酶3部分,胃蛋白酶部分含有2个天冬氨酸活性位点和3个二硫键。鳜胃蛋白酶A2与A1在序列组成、理化性质、功能位点、空间结构上存在明显差异,表明它们可能具有不同的催化功能。胃质子泵(gastric H+/K+-ATPase)是胃酸分泌的关键性酶,研究克隆获得了鳜全长3 581 bp和1 669 bp的胃质子泵α、β亚基cDNA序列。序列相似性分析显示,胃质子泵α亚基具有高度保守性,含多个功能位点,而β亚基具有相对可变性。原位杂交(in situ hybridization,ISH)结果显示,鳜PG A1、PG A2和胃质子泵α亚基mRNA均在胃腺的同一类型细胞中表达,该细胞兼有分泌PG和胃酸的功能,鳜胃腺分泌细胞属于泌酸胃酶细胞。

人与三种哺乳动物消化管中伴刀豆球蛋白A受体的形态学观察

本文采用辣根过氧化物酶标记伴刀豆球蛋白A(Con A-HRP)法来研究人和犬、大小鼠消化管各段Con A受体的分布。结果表明:各段消化管粘膜上皮细胞都具有不同程度的阳性反应。除胃粘膜上皮细胞的核上区为阴性外,其他各段均以核上区反应最强。杯状细胞除人和犬的小肠及大小鼠的大肠阴性反应外,均有程度不等的阳性反应。胃底腺内壁细胞和主细胞的反应有明显的种系差异,人和犬二种细胞都为阳性反应,而大小鼠只有主细胞有阳性反应。肠腺阳性反应。神经元有较强的反应。平滑肌有不同强度的反应,人、犬比大小鼠强。由此提示消化管是一个高度异质性的细胞群体,并有种系差异。

家兔胃的迷走神经切断术对人造溃疡修复影响的实验形态学观察

本研究对10只家兔(其中3只为正常组,2只为对照组,5只为迷走神经切断组)进行了实验性观察,其结果如下:1.对照组动物的人造溃疡在择期杀死时均未痊愈,而迷走神经切断组动物的人造溃疡除两例实行胃前迷走神经切断术的动物未痊愈外,其余的均已痊愈。2.在电镜下观察,对照组动物的壁细胞和胃酶细胞与正常组动物的同类细胞相比,没有发生显著的改变。但迷走神经切断组动物与正常组和对照组动物的同类细胞相比,却发生了显著的退行性改变。壁细胞变化特点是,核呈现不同程度的浓缩和深染;细胞内小管的微绒毛变短变粗或萎缩,排列不规则,微绒毛间间隙加大;管囊泡明显扩张和稍显增多;线粒体嵴模糊不清;溶酶体增多;高尔基复合体变形。胃酶细胞变化特点是,核浓缩;酶原颗粒减少或排空;溶酶体增多;粗面内质网轻度扩张,排列紊乱呈网状,其上的核朊粒明显减少;高尔基复合体变形。3.作者在电镜下观察到家兔胃粘膜中存在着不同类型的嗜银细胞,尤以神经切断组动物内为多,其原因有待进一步研究。根据大体标本和电镜观察,本文为迷走神经切断术治疗溃疡病的机理提供了一定的形态学依据。