法医物证学DNA实验室质量控制标准及开放式管理模式的探索

从提高法医物证学DNA实验室的科研教学质量和对外服务水平的角度出发,阐述了法医物证学实验室的质量控制标准、对外开放服务管理的体系及制度建设要求,以实现实验室资源共享,促进实验室健康、可持续发展.

略论法医物证学DNA实验室质量控制

法医物证学DNA实验室质量控制关系到鉴定结果的准确性，不仅需要遵循技术原则、法律要求及道德标准要求，同时也要遵循一定的标准，比如人员标准、仪器设备标准及分析检验程序标准。为了尽可能地降低错误，制定实验室错误纠正措施、定期进行专业测试与评估及保证物证检材具有重复检测的可能性显得尤为重要。

加强法医物证学实验室建设和管理的探索

为了达到提高法医物证实验室教学、科研和社会服务能力,规范实验室管理,确保实验室安全高效运行而进行实验室建设和管理的部分尝试的目的。采取了对实验室从进行合理布局、装修和软硬件建设,到加强实验室科学管理、完备服务,实验室安全的教育等进行尝试,确保实验室高效运行,保质、质量保证完成教学、科研和服务社会工作等方法。经过上述一系列实验室建设和管理方式、方法的探索,使实验室规划符合要求,分区恰当,功能合理,软硬件建设规范;管理制度健全,人员分工协作,实验室运行高效和管理科学,实验室创新能力大大提升;实验室服务和质量保证体系完备;实验室资源发挥最大效能;实验室安全水平大大提高,实验室开放服务大众的能力极大释放。证明系统的实验室建设和管理方式、方法的探索是提升实验室水平有效和可行的。

法医物证学实验室运行机制的探讨

法医物证学实验室运行机制的改革包括实验室管理体制的改革和实验教学的改革.笔者对高校法医物证学实验室的运行机制和管理体制模式做了一些探索和研究,提出了自己的观点和看法.

中国法医学会物证专业委员会法医DNA分析的若干建议

中国法医学会法医物证学专业委员会与国际法医遗传学会中文专委会于2006年10月在成都召开学术会议。我们的讨论强调有必要将国际法医遗传学会的信息及时传递到中国。因此,按照国际法医遗传学会的指南,我们推荐混合斑分析,法医DNA数据库及新遗传标记选择标准供同行参考。

PBL-CBL联合教学在法医物证教学中的应用

法医物证学是法医学一门重要的分支学科,其与遗传学、生物学、统计学、法学等相互交叉,内容繁多、涉及广泛。如何提高学生学习效率,是当前法医物证教学模式中存在的问题。文章建议在法医专业学生已具备法医物证学理论知识的基础上,在教学实验之前开展综合性的PBL-CBL法医物证专题课程,通过融合式教学进行教学效果探索。PBL-CBL教学基于具体案例的问题链,通过分组讨论与协作探究解决方案,引导学生从全链条理解法医物证的采样、DNA提取、DNA分型及出具报告等过程,培养学生法医案件分析的逻辑思维,疑难检材破解的科研思维,以期激发学生的探索欲望、提高积极性,从而使其掌握课程内容。

抗污染扩增试剂在法医物证检验中的应用

客观、准确的法医遗传检验结果是作出准确鉴定意见的基础。随着检验设备、扩增检测试剂检验灵敏度日益增加,防控实验室污染、样品污染的压力与日俱增,其中PCR扩增产物对检测结果的污染最难防控。本文测试一款抗污染扩增试剂盒NH-18A,该试剂盒包含16个常染色体STR基因座,1个性别识别基因座(Amel)和一个Y染色体插入缺失基因座(Indel),NH-18A通过STR复合扩增可得到含有尿嘧啶碱基的DNA片段,该类型的DNA片段在50℃时可被尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG)高效水解,每次新一轮PCR扩增前增加一步50℃保温孵育可以彻底消除既往扩增产物对结果的污染威胁。经实验验证,NH-18A具有优异的抗扩增产物污染能力,且替换碱基扩增不改变DNA分型结果,检测灵敏度和DNA产物片段稳定性不降低,后续电泳分析不受影响。利用此试剂盒可以有效消除扩增产物对鉴定结果的污染。

DNA鉴定技术在法医物证学中的现状和展望

DNA鉴定技术是当代法医物证检验中最为重要的鉴定技术,是以遗传学为理论基础,以生物检材中的DNA分子为研究对象,解决个体识别和亲子鉴定问题。本文探讨其DNA STR分型技术、min STR技术,单核苷酸多态性(SNP)分型技术,线粒体DNA遗传标记及表观遗传学遗传标记等在法医物证学应用的现状和展望。

法医DNA实验室剪刀清洗和防污染探析

目的探索一种法医物证检验过程中简捷有效的剪刀清洗方法。方法取50把洁净剪刀,用于重度污染(20把)和轻度污染(30把)模拟试验。在重度污染模拟组的每把剪刀刀刃处涂抹血液并于室温晾干后平均分为A、B两组,A组采用清洗机直接清洗,B组采用84消毒液浸泡后再以清洗机清洗;而轻度污染模拟组的30把洁净剪刀,以每把剪取血斑样本后平均分为C、D、E三组,C组用装有去离子水的喷壶喷洗刀刃,D组用酒精棉擦拭刀刃,E组不做任何处理。用植绒拭子擦拭所有剪刀刀刃,采用磁珠法提取DNA并实时定量,PCR复合扩增与毛细管电泳获取STR分型。结果B组除1例特殊情况外其余均未检出STR分型,D组均未获得完整STR分型,其余3组均获得部分或完整STR分型。结论84消毒液浸泡加清洗机清洗可以有效降低实验室剪刀污染。应杜绝重复使用剪刀且只能在样本确定的区域剪取。

DNA提取自动化工作站在法医学领域的应用

自动化工作站是指运用生化技术对生物性检材进行批量处理分析的全自动化工作平台,它可在短时间内批量进行移液,加样,混合等操作,特别适合用于大量生物性检材的PCR模板的制备。本文仅对DNA提取自动化工作站的基本模式、基本方法、法医学应用等进行综述,以期使该技术在法医DNA分析中得到更广泛的应用。

人类线粒体DNA异质性研究进展及在法医学中的应用

线粒体DNA(mtDNA)异质性的存在使其在法医学应用变得复杂。本文对mtDNA异质性形成的可能原因、异质性的分布和遗传特点、异质性的筛查和定量方法、异质性对法医学的影响以及异质性的研究和展望等方面进行综述,探讨异质性在法医学上的应用价值。

中国蒙古族群体mtDNA测序的聚类分析及其法医学意义

目的建立一种既节省模板、又能延长测序长度的m tDNA单倍型（群）分析方法,构建中国蒙古族mtDNA单倍型类型关系树。方法用复合扩增、巢式PCR对201名中国蒙古族m tDNA样本进行D-环区、3010～3460、4640～5204、10171～10659和14478～15204编码区域的测序分析,部份样品进行L3953/H4508等区域的测序;根据其多态界定各样本单倍型并进行聚类分析。结果L15996/H107等巢式PCR扩增产物经测序检验结果互不干扰,其分型以A等东亚人群常见的单倍型（群）为主,包括部份HV、K、J、I和U等欧洲人群优势单倍型（群）,23个单倍群和共53个单倍型全部归为欧亚人群特有的M和N两大类单倍类群并呈巢式聚类。结论本研究选取的测序区域适用于构建我国各民群的m tDNA单倍型（群）;复合扩增、巢式PCR法既节省模板DNA,又延长测序的长度,适用于法医学、考古学研究中的微量样本的检测。

口腔粘膜脱落细胞DNA多态性分型检测在法医学应用的初步研究

目的研究各类口腔粘膜脱落细胞的微量生物性捡材中DNA提取和检验的方法,初步论证牙刷等载体作为法医物证检材的可能性。方法分别采用Chelex-100法、有机萃取法、联合抽提法三种方法提取口腔粘膜脱落细胞载体的样本DNA,进行CTTv四个STR位点单步复合扩增和两步级联扩增两种STR-PCR方式的扩增及各位点的等位基因检测。结果实验样本中,除了1例牙刷和2例牙签未能STR位点的正确分型外,其余各无关个体口腔粘膜脱落细胞载体均可以得到与标准血痕阳性相同的STR基因型。结论根据检材的PCR相对模板DNA量,选择适宜的DNA多态性检测分型方法,各类常见的含有口腔粘膜脱落细胞检材可以进行DNA检测分型,这类检材在法医检案中具有应用价值。

人线粒体DNA序列分析在法医学中的应用研究及其进展

综述人线粒体DNA(m tDNA)序列分析在法医学种属鉴别、个体识别,以及个体年龄推断中的应用研究及其进展,展望对m tDNA异质性的研究及建立人m tDNA数据库,并具有重要的法医学实践意义。

法医物证DNA自动化检验技术体系的研究

目的建立自动化工作站同步提取不同种类涉案法医生物检材DNA的新方法。方法选用TECAN Freedom EVO 100-4、75-2型自动化提取、加样工作站,采用磁珠法及Chelex-100法对各类涉案生物检材进行DNA提取、PCR扩增、毛细管电泳检测其STR分型,进行比较测试。在"全国公安机关DNA数据库应用系统"中建立并应用实验室信息管理系统(LIMS)模拟实施规范化DNA检案。结果1552份各类检材,采用工作站-磁珠法提取DNA效果最佳,STR检测成功率为95%,工作站-Chelex法为88%;二者分别与其手工提取法比较,成功率无明显差异。92个样本同期检测,自动化工作站较手工操作DNA检案时间可缩减1.25倍。结论工作站磁珠法提取涉案检材DNA,可获得满意的STR分型结果。应用LIMS管控,可有效防控污染,明显提高检案效率及鉴定质量。

植物DNA提取方法的研究进展

随着分子生物学的快速发展,植物DNA提取技术在植物科学研究、农业生产、环境保护和法医物证学等领域发挥着至关重要的作用。传统方法如CTAB法、SDS法和高盐低pH法,虽然在提取效率和纯度方面取得了一定的成功,但存在操作繁琐、耗时长、试剂对人体有害等问题。为了克服这些问题,研究者开发了一系列快速、高效的提取方法,如微针贴片法、纤维素滤纸法、EZ-D法和碱裂解法。这些方法在提高提取速度和纯度的同时,减少了对环境和操作人员的影响。本文总结了植物DNA提取的传统方法和近年来发展起来的快速提取新技术的优缺点。

试析法医物证领域中亲子鉴定的应用

亲子鉴定技术作为法医物证学中最核心的学科,在刑事案件、确定身份不明的尸体身份、认领尸体、移民、子女户口登记、财产继承纠纷等多个领域中应用广泛且具有重要价值。受到科技发展逐渐迅速与DNA检测技术愈加成熟的影响,亲子鉴定的主要路径也逐渐完成了从单一检测血型至同时检测DNA技术转变,既是为更准确的亲子鉴定结果提供基础,同时也是亲子鉴定领域迈向了全新时代的重要标志。具体表现在从蛋白质检测转变为基因检测,同时将排除法逐渐替换为精准确定,提高检测精确度。本文对法医物证领域中亲子鉴定技术的应用进行了阐述,以达到为诉讼与刑侦等领域的亲子鉴定的信息技术应用提出支持。

三种常用抗凝剂处理血液样本后DNA提取方法探讨

目的:探究血液样本在经过三种常见抗凝剂以不同浓度处理后,适宜的DNA提取方法。方法:使用肝素钠、柠檬酸钠、EDTA-Na2三种抗凝剂以1 mg/ml,2 mg/ml,4 mg/ml,8 mg/ml四种浓度剂量对血液样本进行抗凝处理,分别采用直接扩增法、Chelex-100法和硅珠法三种不同的DNA提取方法提取血液样本中的DNA,随后进行荧光复合扩增及STR自动分型,使用直接计数法对STR分型结果进行评价,并进行统计学分析和结果比较。结果:采用三种提取方法均能提取3种抗凝剂处理的血样中的DNA,并得到不同效果的STR分型。直接扩增法处理抗凝剂浓度为1 mg/ml,2 mg/ml,4 mg/ml的血样时,STR分型结果无显著性差异(P > 0.05),抗凝剂浓度为8 mg/ml时,结果有显著性差异(P 0.05)。结论:在研究的范围内,Chelex-100法和硅珠法提取的血液样本DNA质量不受三种抗凝剂的影响。血液样本经高浓度(≥8 mg/ml)抗凝剂处理后的DNA提取方法,不宜选用直接扩增法。