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重组法国梧桐花粉过敏原2(rPla a2)对诱导型一氧化氮合酶(NOS2)基因启动子活性及基因表达的影响
被引量:
1
1
作者
乔笑芹
王进雅
+2 位作者
路康
曹倩
周国平
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第8期1143-1147,共5页
目的:构建人诱导型一氧化氮合酶(NOS2)基因启动子区,对NOS2启动子序列进行鉴定并分析其活性;探索重组法国梧桐花粉过敏原2(r Pla a2)对人NOS2基因启动子活性及基因表达的影响。方法:利用PCR扩增、限制性内切酶双酶切、DNA连接酶连接、...
目的:构建人诱导型一氧化氮合酶(NOS2)基因启动子区,对NOS2启动子序列进行鉴定并分析其活性;探索重组法国梧桐花粉过敏原2(r Pla a2)对人NOS2基因启动子活性及基因表达的影响。方法:利用PCR扩增、限制性内切酶双酶切、DNA连接酶连接、大肠杆菌转化等方法将NOS2基因启动子区克隆至pGL3-Basic载体上,将所构建重组报告质粒转染至人胚肾(HEK293T)细胞中,利用双荧光素酶活性分析检测该重组报告质粒启动子活性及检测rPla a2对人NOS2基因启动子活性的影响;用实时荧光定量PCR法检测rPla a2对人NOS2基因mRNA水平的影响。结果:成功构建含有NOS2启动子的重组报告质粒,与对照(p GL3-Basic)组相比,含NOS2启动子区的重组质粒转染组荧光素酶活性显著增高;与不加刺激(NOS2)组相比,加入rPla a2刺激后含NOS2启动子区的重组报告质粒转染组荧光素酶活性显著增高,加入rPla a2刺激后NOS2 mRNA相对表达水平显著增高。结论:rPla a2可增强人NOS2基因启动子活性,并增加其基因表达。
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关键词
诱导型一氧化氮合酶(NOS
2
)
重组
法国梧桐
花粉
过敏原
2(
r
Pla
a
2
)
启动子
哮喘
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职称材料
重组法国梧桐花粉过敏原2(rPla a2)通过GATA3上调NIH3T3细胞ORMDL3表达
被引量:
1
2
作者
张慧文
庄丽丽
+2 位作者
金蕊
李楠楠
周国平
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第1期27-32,38,共7页
目的探索重组法国梧桐花粉过敏原2(rPla a2)对小鼠NIH3T3细胞血清类黏蛋白1样蛋白3(ORMDL3)表达的影响及相关调控机制。方法实时定量PCR和Western blot法分别检测rPla a2对NIH3T3细胞ORMDL3和GATA3 mRNA和蛋白水平的影响;通过干扰和过...
目的探索重组法国梧桐花粉过敏原2(rPla a2)对小鼠NIH3T3细胞血清类黏蛋白1样蛋白3(ORMDL3)表达的影响及相关调控机制。方法实时定量PCR和Western blot法分别检测rPla a2对NIH3T3细胞ORMDL3和GATA3 mRNA和蛋白水平的影响;通过干扰和过表达观察GATA结合蛋白3(GATA3)在rPla a2调节ORMDL3表达中的作用;通过双荧光素酶活性分析检测rPla a2和GATA3对ORMDL3基因启动子活性的影响。结果 rPla a2增强NIH3T3细胞ORMDL3基因启动子活性,并增加其mRNA水平和蛋白表达;同时增加GATA3 mRNA和蛋白表达。敲低GATA3抑制rPla a2对ORMDL3基因的诱导作用,过表达GATA3则可增强该诱导作用。结论 GATA3可介导rPla a2对NIH3T3细胞ORMDL3基因的转录调控。
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关键词
气传
过敏原
法国梧桐
花粉
重组
过敏原
2(
r
PLA
a
2
)
小鼠血清类黏蛋白1样蛋白3(O
r
MDL3)
GATA结合蛋白3(GATA3)
转录调控
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职称材料
题名
重组法国梧桐花粉过敏原2(rPla a2)对诱导型一氧化氮合酶(NOS2)基因启动子活性及基因表达的影响
被引量:
1
1
作者
乔笑芹
王进雅
路康
曹倩
周国平
机构
南京医科大学第一附属医院儿科
南京医科大学第二附属医院儿科
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第8期1143-1147,共5页
基金
国家自然科学基金(81500013)
南京市科技计划项目(201503003)资助
文摘
目的:构建人诱导型一氧化氮合酶(NOS2)基因启动子区,对NOS2启动子序列进行鉴定并分析其活性;探索重组法国梧桐花粉过敏原2(r Pla a2)对人NOS2基因启动子活性及基因表达的影响。方法:利用PCR扩增、限制性内切酶双酶切、DNA连接酶连接、大肠杆菌转化等方法将NOS2基因启动子区克隆至pGL3-Basic载体上,将所构建重组报告质粒转染至人胚肾(HEK293T)细胞中,利用双荧光素酶活性分析检测该重组报告质粒启动子活性及检测rPla a2对人NOS2基因启动子活性的影响;用实时荧光定量PCR法检测rPla a2对人NOS2基因mRNA水平的影响。结果:成功构建含有NOS2启动子的重组报告质粒,与对照(p GL3-Basic)组相比,含NOS2启动子区的重组质粒转染组荧光素酶活性显著增高;与不加刺激(NOS2)组相比,加入rPla a2刺激后含NOS2启动子区的重组报告质粒转染组荧光素酶活性显著增高,加入rPla a2刺激后NOS2 mRNA相对表达水平显著增高。结论:rPla a2可增强人NOS2基因启动子活性,并增加其基因表达。
关键词
诱导型一氧化氮合酶(NOS
2
)
重组
法国梧桐
花粉
过敏原
2(
r
Pla
a
2
)
启动子
哮喘
Keywords
NOS
2
r
Pla a
2
P
r
omote
r
Asthma
分类号
R392.8 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
重组法国梧桐花粉过敏原2(rPla a2)通过GATA3上调NIH3T3细胞ORMDL3表达
被引量:
1
2
作者
张慧文
庄丽丽
金蕊
李楠楠
周国平
机构
南京医科大学第一附属医院儿科
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第1期27-32,38,共7页
基金
国家自然科学基金(81170661)
南京市科技计划项目(201503003)
文摘
目的探索重组法国梧桐花粉过敏原2(rPla a2)对小鼠NIH3T3细胞血清类黏蛋白1样蛋白3(ORMDL3)表达的影响及相关调控机制。方法实时定量PCR和Western blot法分别检测rPla a2对NIH3T3细胞ORMDL3和GATA3 mRNA和蛋白水平的影响;通过干扰和过表达观察GATA结合蛋白3(GATA3)在rPla a2调节ORMDL3表达中的作用;通过双荧光素酶活性分析检测rPla a2和GATA3对ORMDL3基因启动子活性的影响。结果 rPla a2增强NIH3T3细胞ORMDL3基因启动子活性,并增加其mRNA水平和蛋白表达;同时增加GATA3 mRNA和蛋白表达。敲低GATA3抑制rPla a2对ORMDL3基因的诱导作用,过表达GATA3则可增强该诱导作用。结论 GATA3可介导rPla a2对NIH3T3细胞ORMDL3基因的转录调控。
关键词
气传
过敏原
法国梧桐
花粉
重组
过敏原
2(
r
PLA
a
2
)
小鼠血清类黏蛋白1样蛋白3(O
r
MDL3)
GATA结合蛋白3(GATA3)
转录调控
Keywords
ae
r
oalle
r
gen
r
Pla a
2
O
r
MDL3
GATA3
t
r
ansc
r
iption
r
egulation
分类号
R392.33 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
重组法国梧桐花粉过敏原2(rPla a2)对诱导型一氧化氮合酶(NOS2)基因启动子活性及基因表达的影响
乔笑芹
王进雅
路康
曹倩
周国平
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018
1
下载PDF
职称材料
2
重组法国梧桐花粉过敏原2(rPla a2)通过GATA3上调NIH3T3细胞ORMDL3表达
张慧文
庄丽丽
金蕊
李楠楠
周国平
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017
1
下载PDF
职称材料
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0
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