艾叶中法尼基转移酶和香叶基香叶基转移酶双重抑制剂的分子对接研究

选择法尼基转移酶(FTase)和香叶基香叶基转移酶(GGTase-I)作为靶标,利用Autodock系列软件,将Artemisian C和Artemisian D两个倍半萜内酯二聚体与FTase和GGTase-I两个蛋白分别进行了分子对接,并分析了各自的作用模式。结果:Artemisian C与Artemisian D与FTase的结合能分别为-44.379和-47.0166 kJ/mol,Artemisian C与Artemisian D与GGTase-I的结合能分别为-33.4066 kJ/mol和-39.2209k J/mol。两个化合物能够以氢键和疏水作用与两种蛋白相结合。结论:ArtemisianC与Artemisian D能够在一定程度上抑制FTase和GGTase-I活性,是这两个靶标的双重抑制剂。两种分子能够以多药多靶的形式协同发挥抗肿瘤作用。

法尼基转移酶抑制的研究进展

1 法尼基转移酶抑制剂抗癌机理 最关键步骤之一.一正常细胞中,ra s蛋白是通过自身GTPase活性从GTP结合的活化形式变为GDP结合的非活化形式.但在肿瘤细胞中,变异的ras基因破坏了GTPase的活性,Ras蛋白始终为结合GTP形式,则连续的生长信号导致细胞的恶生增殖,造成生物组织的癌变.法尼基转移酶抑制剂能通过抑制法尼基化使蛋白脂类修饰受阻,Ras蛋白不能定位于细胞膜,而ras蛋白转导信号有一定的位置要求,即必须停在细胞内侧,因而无法实行其信号转导功能,从而使那些依赖于高活性的ras蛋白的肿瘤生长受到抑制,发挥其抗癌活性.

哌啶酮类法尼基转移酶抑制剂的设计、合成及初步抗肿瘤活性研究

利用计算机辅助药物设计软件Catalyst构建了哌啶酮类法尼基转移酶抑制剂的药效团模型,结合所构建的药效团模型,设计并合成出17个哌啶酮类化合物,其中16个目标化合物未见文献报道,其结构均经IR,MS及1HNMR等确证.利用MTT法得到其对于肿瘤细胞抑制的IC50值.初步生物活性测试表明,目标化合物均具有抑瘤活性,其中11个化合物的IC50值低于阳性对照5-Fu,并且实测值与所构建的药效团模型的预测值相关性较好.

抗肿瘤新药法尼基转移酶抑制剂的研究进展

肿瘤的发生与细胞信号转导系统异常密切相关,针地信号转导通路中的关键酶设计的抑制剂是当前抗肿瘤药物开发的热点。法尼基转移酶是细胞信号转导系统中Ras蛋白翻译后修饰的关键酶。综述了近年来法尼基转移酶抑制剂的研究状况,重点阐述了部分重要化合物的构效关系,指出了法尼基转移酶抑制剂的发展前景。

法尼基转移酶抑制剂的研究进展

Ｒａｓ蛋白法尼基转移酶是一类新型的抗癌药物设计靶点．本文介绍了已合成的４类法尼基转移酶抑制剂及其作用特点，着重分析了四肽类模拟物的构效关系和构象。

法尼基转移酶抑制剂——乳腺癌新的治疗药物

原癌基因ras家族编码是与细胞增殖和生长有关的一些重要细胞信号途径的上游产物。ras基因突变导致Ras激活并具有致癌性。翻译后的Ras蛋白的关键环节是经法尼基转移酶的法尼基化。此酶的抑制剂首先被用于抑制Ras突变肿瘤的治疗。但现在发现法尼基转移酶抑制剂(farnesyltransferaseinhibitors,FTIs)还具有不依赖Ras的活性、对缺乏Ras突变的某些肿瘤的治疗也有效。基础资料显示FTIs可以抑制体内、外乳腺癌细胞的生长;Ⅱ期临床研究显示FTI-R115777对进展期乳腺癌的治疗有效。因此,FTIs单药或联合用药有可能成为乳腺癌治疗的新方法。

哌啶酮类法尼基转移酶抑制药的微波幅射合成与抗肿瘤活性

目的合成设计哌啶酮类法尼基转移酶抑制药,并对其抗肿瘤活性进行初步评价.方法以取代苯甲醛为起始原料,经Perkin反应和Michael加成,最后在微波辐射条件下环合得到目标化合物,并用MTT法测试它们抑制人Hela细胞和ANC-1细胞的IC50值.结果采用微波辐射技术合成哌啶酮类化合物,反应时间为20～45 min,产率为36.0%～67.1%.经1H-NMR、ESI-MS及IR对化合物的结构确证,总共合成11个新化合物.初步抗肿瘤活性测试结果显示11个目标化合物均有抑瘤活性,其中8个化合物IC50值低于氟尿嘧啶.结论哌啶酮类法尼基转移酶抑制药的合成路线可靠,具有显著抗肿瘤活性.

法尼基转移酶及其抑制剂在肿瘤治疗中的研究进展

法尼基转移酶(farnesyltransferase,FTase)是一种膜结合蛋白,其可通过对靶蛋白的法尼基化而实现对靶蛋白功能的调控。其中Ras蛋白是FTase最为重要的靶蛋白之一,这是因为大约三分之一的肿瘤存在Ras原癌基因突变。而因Ras蛋白独特的分子结构,致使其缺乏合适的药物分子结合口袋,并难以形成小分子化合物有效的作用靶点,所以对Ras蛋白功能具有重要调控作用的FTase逐渐成了研究焦点,许多FTase抑制剂(FTase inhibitors,FTIs)被研发并被应用于肿瘤的临床治疗,该文将简述FTase对Ras蛋白功能的调控及FTase对肿瘤发生发展的影响,重点综述近几年来FTase作为靶点的抗癌药物研究进展。

法尼基转移酶抑制剂的抗肿瘤作用机制及临床试验进展

法尼基转移酶抑制剂是一类靶向作用于肿瘤细胞增殖、存活信号途径的新药,通过抑制细胞内包括Ras在内的蛋白法尼基化修饰发挥抗肿瘤作用。本文就该药的抗肿瘤作用机制和临床试验进展作一综述。

哌啶酮类法尼基转移酶抑制剂的合成及抑瘤活性研究

目的:合成哌啶酮类法尼基转移酶抑制药,并且评价其抗肿瘤活性。方法:在其他基团保持最佳的基础上,哌啶酮环的1-位氮原子上用咪唑基、羧基和取代氨基等不同的基团取代得到目标化合物,用MTT法检测它们抑制人Raji细胞的IC_(50)值,比较它们对肿瘤细胞的抑制活性。结果:合成出了9个哌啶酮类新化合物,抗肿瘤生物活性实验结果表明9个目标化合物都有抑瘤活性。结论:用不同的基团取代哌啶-2-酮衍生物1位N后活性有一定的改变,能够与锌离子结合的基团活性较高,表明该位置上基团可能是与酶分子中的锌离子作用。

沉默法尼基转移酶对人涎腺腺样囊性癌细胞迁移、侵袭及上皮间充质转化的作用

目的通过体外实验探讨法尼基转移酶(FTase)对涎腺腺样囊性癌SACC-LM和SACC-83细胞迁移侵袭及上皮间充质转化(EMT)的作用及其机制。方法针对人FTase基因序列设计构建3条小干扰RNA(si-RNA),采用处于对数生长期的SACC-LM及SACC-83细胞,经脂质体瞬时转染技术抑制细胞FTase表达,分别命名为FTase-siRNA-1组、FTase-siRNA-2组、FTase-siRNA-3组,同时设置阴性对照组(NC-siRNA),空白对照组(仅加入转染试剂)。采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测FTase、HRAS的mRNA表达,选择沉默效率最高的FTase-siRNA进行后续实验;蛋白质免疫印迹法检测FTase、HRAS、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化AKT、p65、磷酸化p65(Ser563)、上皮钙依赖黏附蛋白、波形蛋白、基质金属蛋白酶9(MMP-9)的蛋白表达以及HRAS膜蛋白表达;Transwell小室及细胞划痕实验检测细胞的侵袭和迁移能力。结果与空白对照组及阴性对照组相比,FTase-siRNA-1组mRNA及蛋白相对表达量均降低(P<0.05),HRASmRNA和总蛋白表达的差异无统计学意义(P>0.05),HRAS膜蛋白相对表达量降低(P<0.05),上皮钙依赖黏附蛋白相对表达量升高(P<0.05),波形蛋白相对表达量降低(P<0.05),MMP-9蛋白相对表达量降低(P<0.05),RAS/PI3K/AKT/核因子-κB信号通路相关蛋白AKT、p65相对表达量的差异无统计学意义(P>0.05),但磷酸化AKT、磷酸化p65蛋白相对表达量降低;与空白及阴性对照组相比,FTase-siRNA-1组细胞侵袭及迁移能力显著下降(P<0.05)。结论体外沉默FTase可有效抑制人涎腺腺样囊性癌细胞SACC-LM和SACC-83的侵袭、迁移能力,其作用可能是通过干扰HRAS膜蛋白的定位,调控RAS/PI3K/AKT/核因子-κB信号通路,介导EMT而实现。

法尼基转移酶抑制剂CA-7的抗肿瘤作用

目的 研究经筛选出的法尼基转移酶抑制剂 (farnesyltransferaseinhibitors ,FTIs)CA 7的抗肿瘤作用。方法 用放射标记沉淀法筛选FTIs,结合MTT和SRB实验方法 ,对化合物CA 7进行研究 ,以生长曲线和集落形成试验研究其对不同类型细胞作用的特点 ,动物移植瘤实验观察CA 7的体内抑瘤作用。结果 在初筛的 6 0多个化合物中CA 7对法尼基转移酶 (farne syltransferase ,FTase)抑制作用最强 ,IC50 为 7.5× 10 -8mol·L-1。CA 7对几种被选瘤株表现出一定的选择性抑制作用 ,对小鼠实体型肝癌H2 2及Lewis肺癌有一定的治疗作用。结论 CA 7是一种作用于法尼基转移酶的潜在的抗肿瘤药物。

法尼基转移酶抑制剂与肿瘤的生物治疗

近年来随着分子生物学技术的发展 ,确定并克隆了包括 Ras在内的许多调节细胞正常生理功能的蛋白质 ,阐明了它们在疾病状态下的作用。许多疾病与信号传导途径异常有关 ,例如大约30 %的人类肿瘤与 Ras蛋白的高表达有关 ,因此 Ras蛋白可以作为抗肿瘤药物设计的靶点。本文所述的法尼基转移酶抑制剂是处于研究热点的一类有前途的新型抗肿瘤化疗药物。它通过抑制细胞内包括 Ras在内的蛋白法尼基化修饰加工而发挥抗肿瘤作用。

胃癌组织中法尼基转移酶基因表达与临床病理特点及H-ras突变的关系

目的:检测人胃癌及相应癌旁组织中法尼基转移酶(FTase)β-亚单位mRNA表达和H-ras基因第12密码子点突变探讨FTaseβ-亚单位基因在胃癌中的表达与临床病理特点、H-ras基因突变的关系.方法:收集胃癌及相应癌旁正常组织标本43例.应用半定量逆转录酶-聚合酶链反应(RT-PCR)测定FTaseβ-亚单位mRNA基因表达水平,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析H-ras基因第12密码子点突变情况.采用秩和检验分析胃癌和癌旁组织的FTaseβ亚单位mRNA表达的配对数据的差异;采用多元逐步回归分析胃癌组织中FTaseβ亚单位mRNA表达活性与临床病理特点及H-ras基因突变间的关系.结果:胃癌组织中FTaseβ亚单位mRNA的平均值明显高于癌旁组织(0.89±0.48vs0.69±0.40),两者相比有显著性差异(Z=2.469,P=0.014).在43例胃癌组织中有1例发现突变(1/43,2.3%),癌旁组织中未发现突变.胃癌组织的FTaseβ亚单位mRNA表达活性与年龄、肿瘤部位、组织学分级、有无淋巴结转移及有无H-ras基因突变无关,在女性,病理分型为印戒细胞癌的胃癌组织中有较高的FTaseβ亚单位mRNA表达活性.结论:FTaseβ亚单位mRNA在胃癌组织中表达升高.胃癌组织中H-ras基因第12密码子点突变率低,在胃癌的发生中不起主要作用,并且与FTaseβ亚单位mRNA的表达无相关.

宫颈癌组织中法尼基转移酶β-亚单位基因的表达变化及意义

目的观察宫颈癌组织中法尼基转移酶β(FTaseβ)-亚单位基因的表达变化,并探讨其临床意义。方法采用RT-PCR技术检测45例宫颈癌和20例正常宫颈组织中的FTaseβ亚单位mRNA。结果 45例宫颈癌和正常宫颈组织中的FTaseβ亚单位mRNA表达水平分别为1.065 8±0.630 8、0.763 2±0.190 9,两者比较,P<0.05。FTaseβ亚单位mRNA表达水平与宫颈癌分化程度有关(P<0.05)。结论宫颈癌组织中FTaseβ亚单位mRNA水平明显增高,FTaseβ亚单位可能与宫颈癌的发生发展有关。

法尼基转移酶抑制剂诱导小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞凋亡的实验研究

目的探讨法尼基转移酶抑制剂对小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞的抑制生长和诱导凋亡作用,为其作为抗肿瘤药物提供理论基础。方法体外培养小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞Beta-TC-6,用不同稀释度的法尼基转移酶抑制剂R115777处理对数生长期的Beta-TC-6细胞,用MTT法观察不同浓度R115777对Beta-TC-6细胞增殖的抑制作用,用碘化丙啶染色荧光显微镜下观察R115777处理后Beta-TC-6细胞的形态学改变。用流式细胞术检测分析DNA含量直方图、亚G1期细胞所占百分比和细胞周期改变。结果R115777使小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞Beta-TC-6的增殖受到明显抑制,并出现显著的凋亡现象,其作用与R115777的浓度成正相关。结论法尼基转移酶抑制剂R115777能抑制小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞Beta-TC-6增殖,有必要作为一种可选的抗肿瘤药物而进一步研究。

长春花法尼基转移酶β-亚基基因的克隆及其在黄龙病菌感染过程中的表达分析

为了探讨长春花法尼基转移酶β-亚基(crFTB)在黄龙病菌侵染过程中的表达模式及作用,采用RACE技术扩增长春花 crFTB 基因的cDNA全长序列,并进行生物信息学分析,采用实时荧光定量PCR技术检测叶片组织中 crFTB 在黄龙病菌(CLas)侵染长春花不同时间点的表达变化。结果显示, crFTB cDNA全长为1 826 bp,包含150 bp 5′UTR、308 bp 3′UTR和1 368 bp开放阅读框,编码455个氨基酸,理论分子质量和等电点分别为50.45 ku和4.67。FTB蛋白在物种间有较好的保守性,系统进化树表明,crFTB与油橄榄樟子松变种FTB蛋白的亲缘关系最近。CLas侵染长春花过程中, crFTB 在叶片组织中的表达量呈现先升后降的模式,从接种后4 d开始 crFTB 基因的表达量升高,到24 d时达到峰值,然后表达量开始下降,直到试验结束时仍显著高于健康植株中 crFTB 基因的表达量。分析认为,crFTB在长春花抵抗CLas侵染过程中起重要作用。

体外沉默法尼基转移酶对舌鳞状细胞癌迁移和侵袭的影响

目的通过RNA干扰沉默法尼基转移酶(FTase),探讨沉默FTase对舌鳞状细胞癌迁移和侵袭的影响及其相关机制。方法针对FTase设计并构建3条小干扰RNA(siRNA),转染人舌鳞状细胞癌CAL27和SCC-4细胞(实验组),同时设置阴性对照组(转染NC-siRNA)和空白对照组(不转染siRNA)。应用实时荧光定量PCR检测各组细胞FTase、HRAS的mRNA表达,根据FTase mRNA的表达量,选取沉默效率最高的FTase-siRNA转染组作为进一步研究的实验组。蛋白质免疫印迹法检测各组细胞FTase、HRAS、p65、p-p65(S536)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、低氧诱导因子1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)的蛋白表达,Transwell侵袭实验和细胞划痕实验检测各组细胞的侵袭和迁移能力。结果与阴性对照组和空白对照组相比,实验组FTase的mRNA和蛋白表达下降(P<0.05),HRAS的mRNA和蛋白表达无明显变化(P>0.05),p-p65(S536)、MMP-9、HIF-1α、VEGF蛋白表达下降(P<0.05),p65蛋白表达无明显变化(P>0.05);实验组的细胞侵袭和迁移能力降低(P<0.05)。结论体外沉默舌鳞状细胞癌细胞FTase,可以抑制细胞体外迁移和侵袭能力,为FTase可能作为舌癌治疗的分子靶点提供了一定的理论和实验依据。

法尼基转移酶抑制剂和香叶基香叶基转移酶抑制剂对皮肤角质形成细胞增殖的抑制作用

目的探讨法尼基转移酶抑制剂(FTI)和香叶基香叶基转移酶抑制剂(GGTI)对皮肤角质形成细胞(KCs)增殖的影响。方法使用不同浓度的FTI、GGTI对KCs进行处理,细胞活力测定实验(MTS)法分析KCs增殖受各处理组的影响;利用流式细胞术检测各加药组细胞周期受一定浓度FTI、GGTI的影响;Western blot分析各加药组细胞周期蛋白CyclinB1、CyclinE和P21及pAKT和pERK1/2表达量受一定浓度FTI、GGTI的影响。结果MTS显示FTI、GGTI对KCs增殖有抑制作用,并呈浓度依赖性,FTI(5μmol/L)、GGTI(5μmol/L)时KCs细胞活力最小,抑制率分别为14.7%、24.5%。流式周期结果表示FTI、GGTI阻滞KCs在G1、G2、S各期不明显。Western blot结果表明FTI、GGTI均能够下调CyclinB1,并且可以上调P21和CyclinE的表达。同时,FTI、GGTI能促进P13K-AKT信号通路的激活,抑制MAPKS-ERK1/2信号通路的激活。结论FTI、GGTI对原代KCs的增殖有抑制作用。