法尼醇X受体激动剂对非酒精性脂肪性肝炎治疗作用研究进展

代谢相关脂肪性肝病(metabolic dysfunction-associated fatty liver disease,MAFLD)的全球患病率为20%~40%,伴随着沉重的疾病负担和晚期疾病相关的高病死率,目前尚无批准治疗MAFLD的标准药物。法尼醇X受体(farnesoid X receptor,FXR)具有调控糖脂代谢和改善胰岛素抵抗的作用,其中奥贝胆酸作为FXR激动剂,已被多项研究证实可改善MAFLD患者的肝组织学特征。本文主要阐述FXR激动剂的作用机制和研究现状以供临床参考。

法尼醇对白念珠菌生物膜葡聚糖的影响及白念珠菌耐药相关性

目的探索法尼醇对白念珠菌生物膜细胞壁葡聚糖的影响及白念珠菌的耐药相关性。方法采用浓度梯度递增法诱导构建白念珠菌耐药株,KONT真菌显色MIC药敏系统鉴定耐药株模型。本实验分为对照组、法尼醇处理组和耐药株组。利用透射电镜观察各组生物膜细胞壁,通过qPCR比较分析各组葡聚糖相关基因PIR1、PHR2、BGL2和GSC1的表达。结果本实验白念珠菌耐药株模型构建成功。透射电镜观察发现,法尼醇处理后各时相白念珠菌生物膜细胞壁出现形态改变。24 h生物膜中,对照组白念珠菌生物膜细胞壁的厚度为(220.10±2.25)nm;法尼醇处理组白念珠菌细胞壁电子颗粒减少,细胞壁厚度变薄为(145.90±4.05)nm;而耐药株组白念珠菌细胞壁电子颗粒增多,细胞壁厚度增加到(299.47±3.33)nm。qPCR结果显示,与对照组相比,法尼醇处理组PIR1和PHR2表达上调(P<0.05),GSC1表达下调(P<0.05);耐药株组PHR2表达下调(P<0.05),GSC1表达上调(P<0.01)。结论法尼醇可能通过调控葡聚糖相关基因PHR2、PIR1和GSC1影响白念珠菌细胞壁的形态和结构,而细胞壁的形态和结构与白念珠菌耐药性相关。

核苷(酸)类似物联合聚乙二醇干扰素对慢性乙型肝炎大鼠法尼醇X受体-成纤维细胞生长因子19通路、枯否细胞极化的影响

目的 :探究核苷(酸)类似物联合聚乙二醇干扰素对慢性乙型肝炎大鼠法尼醇X受体(FXR)-成纤维细胞生长因子19(FGF19)通路、枯否细胞极化的影响。方法 :选取SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常组、模型组、核苷(酸)类似物(核苷酸)组、聚乙二醇干扰素(干扰素)组、联合组。除正常组外,均采用腹腔注射乙型肝炎病毒进行慢性乙型肝炎建模。建模成功后,对核苷酸组灌胃10 mg/kg拉米夫定,对干扰素组皮下注射5μg/kg聚乙二醇干扰素,对联合组给予拉米夫定联合聚乙二醇干扰素治疗,正常组、模型组同期灌胃同体积生理盐水。酶联免疫吸附法检测血清病毒,全自动生化分析仪检测肝功能,H-E染色法检测肝组织病理形态,免疫印迹法检测FXRFGF19通路蛋白表达,免疫组织化学法检测枯否细胞极化。结果 :与正常组相比,模型组血清乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎E抗原(HBeAg)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)含量、iNOS、CD163阳性表达率显著升高,肝组织FXR、FGF19蛋白表达显著降低。与模型组相比,核苷酸组、干扰素组、联合组血清HBsAg、HBeAg、ALT、AST、TBIL含量、iNOS、CD163阳性表达率显著降低。肝组织FXR、FGF19蛋白表达显著升高,联合组比干扰素组降低显著。结论 :核苷(酸)类似物联合聚乙二醇干扰素,可显著激活FXR-FGF19通路,并抑制枯否细胞M1极化,促进枯否细胞M2极化,对慢性乙型肝炎大鼠具有改善作用。

法尼醇X受体与非酒精性脂肪性肝病关系的研究进展

法尼醇X受体(FXR)是一种胆汁酸受体,在机体生理代谢中具有重要的作用。FXR能通过多种途径增强胰岛素敏感性,降低血糖及游离脂肪酸水平,从而降低非酒精性脂肪肝病(NAFLD)的发生。FXR激动剂可能成为治疗NAFLD等代谢性疾病的新型药物靶点。本文主要对NAFLD与FXR关系的进行综述。

法尼醇X受体影响胆道闭锁肝纤维化机制的研究进展

胆道闭锁是一种罕见的导致新生儿及婴儿胆汁淤积的先天性胆道系统疾病,以肝内外胆管进行性炎症以及肝纤维化为特征,导致胆汁在胆道内大量淤积,并最终引起肝硬化。如不及时治疗,胆道闭锁患儿往往于出生后2年内死于终末期肝病[1-2]。胆道闭锁早期诊断困难的特性与其高病死率一直是困扰小儿外科医师的难题。

法尼醇X受体治疗非酒精性脂肪性肝病研究进展

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是代谢综合征的肝脏表现,其主要表现为肝脂肪变性。近年来法尼醇X受体(FXR)被发现参与胆汁酸、糖脂代谢,抑制炎症参与碳水化合物的代谢,被认为是一类有治疗前景的药物治疗靶点。

法尼醇X受体对肺成纤维细胞衰老的影响

目的探究法尼醇X受体(FXR)对肺成纤维细胞衰老的影响。方法6~8周龄野生型雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、5 mg/kg博来霉素(BLM)致小鼠肺纤维化组,免疫组化染色比较2组小鼠肺组织FXR表达量。体外培养人胚肺成纤维细胞HFL-1,通过加入FXR激动剂GW-4064,同时设转化生长因子-β1(TGF-β1)处理致HFL-1细胞纤维化对照组,观察HFL-1细胞FXR的表达情况;在上述体外处理的情况下,加入FXR抑制剂Z-GS,通过Western blot观察加入FXR激动剂和抑制剂后各组细胞衰老标志物P16、P21和P53的表达情况,通过β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色方法检测细胞SA-β-Gal阳性率。结果与正常对照组相比,无论体内还是体外,纤维化使肺细胞的FXR表达量升高;体外Western blot和SA-β-Gal染色结果显示,加入FXR激动剂后,衰老标志物P16、P21和P53的表达量升高,SA-β-Gal阳性细胞增加;加入FXR抑制剂后,衰老标志物P16、P21和P53的表达量降低,SA-β-Gal阳性细胞减少。结论FXR参与了肺成纤维细胞的衰老,这为进一步研究FXR诱导肺成纤维细胞衰老、促进肺纤维化的作用和机制奠定基础。

群体感应分子——法尼醇与白色念珠菌的相互作用

群体感应最早在细菌中发现,近年来也陆续发现存在于真菌中。群体感应中的关键信号分子被称为群体感应分子,是由微生物自身所分泌、感知、响应并作用于其自身,在引起反应的浓度时对其自身没有毒性的一类物质。法尼醇是白色念珠菌的群体感应分子,影响白色念珠菌的耐药性、菌丝形成、黏附力和凋亡;影响白色念珠菌宿主机体的免疫及宿主细胞的凋亡。此外,白色念珠菌对法尼醇具有高于其他真菌的耐受性,但这种机制尚不明确。目前对群体感应分子法尼醇的作用机制缺乏了解,本文就群体感应分子法尼醇与白色念珠菌之间的相互作用展开综述。

胎盘法尼醇X受体的表达及其与妊娠期肝内胆汁淤积症关系的研究

目的:探讨法尼醇X受体(FXR)在正常晚孕胎盘和妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)胎盘的表达,及其与母血、脐血总胆汁酸(TBA)水平的关系,分析胎盘FXR在ICP病理机制中的作用。方法:收集ICP患者(ICP组)及正常晚孕妇女(对照组)胎盘组织及母血、脐血各33例,并将ICP患者根据母血血清TBA是否≥40μmol/L将ICP组分为轻度ICP组和重度ICP组。并测定母血、脐血TBA水平和胎盘组织中FXRmRNA的相对表达量。结果:①羊水胎粪污染的发生率:ICP组羊水污染发生率高于对照组(χ2=7.543,P=0.013);重度ICP组高于轻度ICP组(χ2=7.637,P=0.013);②胎盘组织中FXRmRNA的表达情况:ICP组胎盘FXRmRNA表达量高于对照组(z=-2.391,P=0.017);重度ICP组胎盘FXRmRNA表达量高于轻度ICP组(z=-2.391,P=0.017);③ICP组胎盘FXRmRNA表达量与母血、脐血TBA呈正相关(rs=0.348,P=0.047;rs=0.284,P=0.027);对照组胎盘FXRmRNA表达量与母血、脐静脉血TBA无相关性(rs=-0.068,P=0.716;rs=0.010,P=0.959)。结论:ICP时增高的胆汁酸水平上调胎盘FXRmRNA的表达,胎盘FXR表达增加可能为ICP时胎盘的一种对抗胎儿胆汁淤积的保护性机制。

激活类法尼醇X核内受体(FXR)可下调载脂蛋白M在HepG2细胞中的表达

类法尼醇X核内受体(farnesoid Xreceptor,FXR)和载脂蛋白M(ApoM)在动脉粥样硬化中发挥重要作用.为研究FXR激动剂鹅脱氧胆酸(chenodexycholic acid,CDCA)和拮抗剂Guggulsterones在人肝癌细胞株HepG2和人胎肝细胞株L02中对载脂蛋白M(apolipoprotein M,ApoM)表达的影响.本研究应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法和Western印迹法检测CDCA和CDCA加Guggulsterones处理后HepG2和L02细胞中ApoM的mRNA水平和HepG2细胞中ApoM的蛋白水平.实验结果显示:FXR天然配体CDCA以剂量依赖的方式显著降低HepG2细胞中ApoM分子(mRNA和蛋白水平)的表达,L02细胞中ApoM分子mRNA水平的表达;FXR抑制剂Guggulsterones不仅能明显阻止CDCA对ApoM表达的下调,而且可引起ApoM表达显著增加.本研究提示,FXR抑制剂Guggulsterones在抗动脉粥样硬化过程中可能发挥重要作用.

法尼醇X受体在高甘油三酯血症大鼠肾脏的表达和定位

目的通过观察法尼醇X受体在高甘油三酯血症大鼠肾脏的表达和定位,探讨脂质肾毒性的作用机制。方法将32只大鼠分为正常对照组(N组)及高果糖组(F组),每组16只。8 w及16 w时分批处死,检测各组大鼠的肾功能、空腹血糖、血脂及24 h尿微量白蛋白;检测大鼠肾皮质甘油三酯含量;油红O染色观察肾脏脂质;采用免疫组化分析法尼醇X受体表达和定位,并观察肾脏病理变化。结果与对照组比较,高果糖组血中甘油三酯和极低密度脂蛋白水平明显升高,肾组织中甘油三酯水平明显增高,肾脏病理改变加重,肾组织法尼醇X受体表达明显下调,且随时间延长而加重(P<0.05)。结论法尼醇X受体在高甘油三酯血症大鼠肾组织中表达下调,从而使肾脏脂质合成增加,进而导致肾脏损伤。

法尼醇-X受体激动剂——奥贝胆酸的药理作用和临床评价

奥贝胆酸(商品名:OcalivaTM)是由美国Intercept制药公司开发的一种法尼醇-X受体激动剂,用于治疗多种肝脏疾病。奥贝胆酸获得美国食品药品管理局(FDA)加速审批联合熊去氧胆酸用于治疗熊去氧胆酸不能充分应答或者单药治疗熊去氧胆酸耐受性差的原发性胆汁性胆管炎成人患者。此适应证已获欧盟批准上市。该文从作用机制、药动学、临床研究和不良反应等方面对奥贝胆酸进行介绍。

一个新型的代谢综合征调控靶点——类法尼醇X受体

类法尼醇X受体(farnesoid X receptor,FXR)是一种胆汁酸的核受体,在胆汁酸、血脂和糖代谢中具有重要调节作用,从而与代谢综合征密切相关,可能成为一个新型的治疗代谢综合征的调控靶点。本文将就FXR与胆汁酸代谢和糖脂代谢的研究进展进行详细论述。

法尼醇X受体表达与胰腺癌患者预后及病理分期相关

目的探索法尼醇X受体(FXR)与胰腺癌患者临床分期及生存时间的相关性。方法培养8株胰腺癌细胞,用Western blot和real-time PCR检测FXR在胰腺癌细胞中的表达水平。临床收集5名正常胰腺组织和50例胰腺癌组织。用免疫组化检测FRX在组织中的蛋白表达水平;根据FXR的不同表达水平分为FXR低和高表达组,并且与胰腺癌患者临床资料进行相关性分析;应用Kaplan-Meier和log-rank方法进行生存分析,COX比例风险回归模型进行多因素分析,研究FXR表达水平与胰腺癌患者预后的相关性。结果 FXR在胰腺癌细胞及胰腺癌组织中呈不同程度的高表达,而且与胰腺癌组织病理G分期密切相关(P<0.05);FXR表达水平与病理G分期均与胰腺癌患者的生存时间具有显著相关性,FXR高表达患者的生存时间明显长于FXR低表达患者的生存时间(P<0.05)。结论胰腺癌患者FXR表达水平与病理G分期密切相关,FXR表达水平和病理G分期均是胰腺癌患者独立的预后因素。

胆酸对大鼠肝部分切除术后肝细胞脂质代谢及法尼醇X受体表达的影响

目的探讨胆酸对肝细胞脂质代谢、法尼醇X受体(FXR)及肝再生的影响。方法建立部分肝切除大鼠模型,随机分成3组:G1组(正常喂养),G2组(给予0.2%胆酸喂养),G3组(正常饮食中加入50%葡萄糖),每组10只,喂养后7 d切除大鼠70%肝组织,于术后72 h取出肝组织及血液标本,检测相关指标。RT-PCR和Western印迹检测SHP、CYP7A1、BSEP的表达;试剂盒检测肝细胞中甘油三酯、胆固醇的水平。结果与G1相比,G2组小异二聚体伴侣(SHP)、胆盐输出泵(BSEP)表达显著升高(P<0.05),胆固醇7α-羟化醇(CYP7A1)表达显著降低(P<0.05);G3组SHP、BSEP表达略增高(P<0.05),CYP7A1显著升高(P<0.05)。G2组甘油三酯(TG)水平显著降低,胆固醇(TC)含量显著升高,而G3组TG略升高,TC含量降低(均P<0.05)。结论胆酸可促进肝细胞再生,FXR在调控肝细胞代谢中发挥重要作用。

法尼醇X受体对甘油三酯的代谢调节

法尼醋X受体(farnesoid x receptor,FXR)属于配体依赖的核转录因子,FXR主要在肝脏、肠道、肾脏、肾上腺等表达,FXR因其可被内源性配体胆汁酸激活,故又称胆汁酸受体,他是孤儿核受体超家族中的一员.被内源性配体胆汁酸激活后的FXR在甘油三酯(triglyceride,TG)代谢过程中起着重要作用,FXR可通过调控与TG代谢的关键酶、脂蛋白和相应受体,从而使肝脏及循环血液中TG含量达到稳态平衡,本文就FXR对TG的代谢调节作一综述.

法尼醇X受体在糖尿病肾病肾组织中的表达及意义

目的探讨法尼醇X受体(farnesoid X receptor,FXR)在糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)肾组织中的表达及其与巨噬细胞浸润、肾损伤之间的关系。方法免疫组织化学染色观察正常肾组织(正常组,n=5)和DN肾组织(DN组,n=15)中FXR、CD68阳性细胞表达。结果 FXR主要表达在肾小球内皮细胞、系膜细胞和肾小管上皮细胞。DN肾组织FXR阳性表达积分较正常肾组织升高(P<0.01),且与CD68阳性细胞数以及血清低密度脂蛋白胆固醇和甘油三酯水平呈负相关(r分别为-0.742、-0.654、-0.632,P均<0.01),与肾小球系膜区扩张指数和肾小管-间质病变也呈负相关(r分别为-0.587、-0.636,P均<0.01),与24小时尿蛋白定量无相关性。结论 DN肾组织FXR阳性表达升高,可能参与DN炎症反应的发生,其具体表达机制和病理生理意义需要进一步研究。

胰腺导管腺癌组织中法尼醇X受体的表达及其与患者临床病理特征和预后的关系

目的观察胰腺导管癌组织中法尼醇X受体(FXR)/核因子受体1H4(NR1H4)mRNA和蛋白的表达状况,分析其与患者临床病理特征及预后的关系。方法选取2013年至2016年海军军医大学(第二军医大学)长海医院胰腺经外科手术切除的胰腺导管腺癌组织标本176例,同时收集患者临床病理资料。将176例胰腺导管腺癌组织标本制作成组织芯片,用RNAscope原位杂交技术和NR1H4探针检测胰腺导管腺癌组织芯片中NR1H4 mRNA的表达,用多聚物二步法的免疫组织化学(IHC)技术检测FXR/NR1H4蛋白的表达。采用χ^2检验分析FXR/NR1H4 mRNA和蛋白表达与临床病理特征的关系,以Kaplan-Meier生存分析和Cox比例风险回归模型研究FXR/NR1H4 mRNA和蛋白表达与预后的关系。结果 176例人胰腺导管腺癌组织中,RNAscope原位杂交技术所测的NR1H4 mRNA阳性表达率为68.75%(121/176),IHC技术所测的FXR/NR1H4蛋白阳性表达率为77.27%(136/176)。FXR/NR1H4 mRNA和蛋白表达均与肿瘤临床分期(χ^2=5.391,P=0.020;χ^2=4.108,P=0.042)、肿瘤分化程度(χ^2=6.560,P=0.010;χ^2=4.969,P=0.026)有关,蛋白的表达也与肿瘤大小有关(χ^2=4.957,P=0.026);两者与患者性别、年龄、神经浸润、肿瘤部位、淋巴结转移均无关(P均>0.05)。Kaplan-Meier生存分析结果显示,FXR/NR1H4 mRNA和蛋白高表达的患者无进展生存期及总生存期均短于低表达的患者(P均<0.05)。Cox比例风险回归分析结果显示,FXR/NR1H4蛋白高表达为胰腺导管腺癌患者无进展生存期(RR=1.701,95% CI 1.235~2.432,P<0.05)和总生存期(RR=2.356,95% CI 1.983~2.832,P<0.05)的独立危险因素。结论 RNAscope原位杂交技术与IHC技术可以相互印证,保证检测结果的可靠性。胰腺导管腺癌组织中FXR/NR1H4的表达与患者的临床分期和分化程度有关,其高表达是影响患者预后的独立危险因素。

鹅去氧胆酸对高果糖喂养大鼠肾组织中法尼醇X受体和小异源二聚体伴侣的影响

目的通过观察高果糖喂养大鼠肾组织中法尼醇X受体(FXR)及小异源二聚体伴侣(SHP)的表达,探讨高果糖致肾损伤的机制。通过鹅去氧胆酸的干预,初步探讨其保护作用机制。方法将48只大鼠分为正常对照组(对照组,n=16),高果糖组(n=16)及鹅去氧胆酸组(n=16),8周及16周时分批处死,检测各组大鼠的肾功能、空腹血糖、血脂及24 h尿微量白蛋白;检测大鼠肾皮质三酰甘油含量;免疫组织化学染色检测FXR的表达和定位;FXR及SHP的表达采用实时荧光定量PCR分析技术,并应用Western-blot法分析FXR及SHP的蛋白表达。结果与对照组比较,高果糖组大鼠左肾重/体重,血中三酰甘油和极低密度脂蛋白水平明显升高,24 h尿白蛋白增加,肾组织中三酰甘油水平明显增高,且随时间延长而加重(P<0.05);高果糖组大鼠肾组织FXR表达明显下调,FXR及SHP的基因及蛋白表达明显减少,且随时间延长其表达减弱(P<0.01)。鹅去氧胆酸组上述指标明显改善(P<0.05)。结论高果糖饮食喂养可导致大鼠高三酰甘油血症、高极低密度脂蛋白血症、高尿酸血症和尿微量白蛋白水平增加,可引起大鼠肾皮质三酰甘油蓄积,使大鼠肾组织FXR及SHP的基因及蛋白表达明显减少,从而使肾脏脂质合成增加,进而导致肾脏损伤。鹅去氧胆酸可上调高果糖喂养大鼠肾组织FXR及SHP的基因及蛋白表达,减轻肾损伤。

法尼醇受体通过下调miR-21水平抑制非小细胞肺癌细胞增殖及侵袭能力

目的观察法尼醇受体(FXR)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织和细胞系中的表达水平,探讨了FXR在NSCLC细胞增殖和侵袭中的作用是否与调控miR-21水平相关。方法在2010年至2012年间,取本院手术切除的80例NSCLC组织及配对的正常组织。通过免疫组化或Western blot分析NSCLC组织和细胞系中FXR表达。以NSCLC细胞A549为研究对象,通过CCK-8法、Transwell法和qRT-PCR法评估不同浓度的GW3965(1~5μmol/L)对细胞活力、侵袭和miR-21水平影响。通过转染技术来过表达或敲低miR-21表达,并评估其对细胞活力、侵袭的影响。采用双荧光素酶报告分析FXR与miR-21之间的关系。结果与邻近的非肿瘤正常组织相比,FXR在NSCLC组织中的表达显著降低(P<0.001)。Kaplan-Meier分析显示FXR低表达预示NSCLC患者预后较差(χ~2=4.496,P=0.033)。FXR高、低表达的NSCLC在临床分期、肿瘤大小、T分期和淋巴结转移(N分期)上有显著性差异(P<0.05)。GW3965以剂量依赖方式促进了A549细胞中FXR蛋白表达,抑制了细胞的增殖和侵袭,并降低了miR-21表达。miR-21过表达显著逆转了FXR对NSCLC细胞生长和侵袭的抑制作用(P<0.05),并且miR-21沉默显著增强FXR对NSCLC细胞生长和侵袭的抑制作用(P<0.05)。双荧光素酶报告证实FXR通过靶向miR-21来抑制NSCLC细胞增殖和侵袭。Spearman分析显示,NSCLC标本中FXR与miR-21的表达呈强负相关(P<0.001)。KaplanMeier分析显示,"FXR低表达"和"miR-21高表达"共存模式预测了NSCLC患者最差的预后(χ~2=8.201,P=0.004)。结论 FXR通过下调miR-21抑制NSCLC细胞的生长,提示调控FXR/miR-21可能是治疗NSCLC的潜在策略。