糖肾方调控FXR/vimentin/α-SMA通路减轻糖尿病肾脏疾病肾脏纤维化的研究

目的通过体内及体外实验,观察益气养阴、活血通络中药复方糖肾方对法尼醇X受体(FXR)/波形蛋白(vimentin)/α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)通路介导的糖尿病肾脏疾病肾脏纤维化的作用。方法(1)体内实验。8周龄雄性db/db小鼠分为模型组和糖肾方组,同遗传背景db/m小鼠为对照组。糖肾方组灌胃糖肾方配方颗粒(3.6 g/kg),1次/d,连续给药12周。观察小鼠的一般状态和体质量,监测血糖,检测血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN),计算尿白蛋白肌酐比(UACR)。过碘酸希夫染色、Masson染色观察肾脏形态结构变化,使用蛋白质印迹法及激光共聚焦显微镜检测肾脏FXR、vimentin及α-SMA蛋白表达水平。(2)体外实验:构建棕榈酸钠诱导的肾小管上皮细胞(mTECs)损伤模型,给予糖肾方(250或500 mg/L)干预后,使用蛋白质印迹法及激光共聚焦显微镜检测mTECs中FXR、vimentin、α-SMA蛋白表达水平,并用FXR干扰小RNA(FXR-siRNA)验证糖肾方激活FXR来抑制mTECs纤维化的分子机制。结果(1)糖肾方可降低db/db小鼠血清Scr水平;改善肾脏病理损伤,上调肾脏FXR蛋白表达,同时抑制肾脏vimentin及α-SMA蛋白表达。(2)糖肾方可上调棕榈酸钠诱导的mTECs中FXR蛋白表达,同时抑制vimentin及α-SMA蛋白表达;FXR-siRNA干预后减弱了糖肾方上调FXR蛋白表达、抑制vimentin及α-SMA表达的作用。结论糖肾方可减轻糖尿病肾脏疾病小鼠肾脏纤维化,其作用机制与调控FXR/vimentin/α-SMA通路有关。