立体定向手术治疗脑胶质瘤患者的疗效及其对血清泛素偶联酶2C、CXC趋化因子配体10水平的影响

目的分析立体定向手术治疗脑胶质瘤患者的疗效及其对血清泛素偶联酶2C(UBE2C)、CXC趋化因子配体10(CXCL10)水平的影响。方法收集2018年1月至2023年2月新乡医学院第三附属医院收治的45例脑胶质瘤患者的临床资料,依照手术方式不同分为2组,对照组22例接受传统开颅手术治疗,观察组23例接受立体定向手术治疗,比较2组疗效、术后1 a生存率、术前及术后6个月神经功能[神经功能缺损程度量表(NIHSS)]、免疫细胞[辅助性T细胞(Th)1、Th2、Th17]、生活能力[Barthel指数(BI)]以及血清UBE2C、CXCL10、炎症细胞因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-17(IL-17)、IL-2、IL-6]水平。结果观察组总有效率(100.00%)高于对照组(72.73%;χ^(2)=5.070,P=0.024);观察组术后1 a生存率(86.96%)高于对照组(54.55%;χ^(2)=5.750,P=0.017)。术后6个月,观察组NIHSS评分低于对照组,而BI评分高于对照组(t=6.728,P<0.001;t=5.339,P<0.001);观察组Th1高于对照组,而Th2、Th17均低于对照组(t=3.793,P<0.001;t=4.691,P<0.001;t=5.293,P<0.001);观察组血清UBE2C、CXCL10、TNF-α、IL-17、IL-2、IL-6水平均低于对照组(t=8.778,P<0.001;t=3.543,P=0.001;t=9.831,P<0.001;t=11.148,P<0.001;t=11.516,P<0.001;t=10.954,P<0.001)。结论立体定向手术治疗脑胶质瘤的效果显著,能有效改善患者神经功能、免疫功能、生活能力,抑制炎症细胞因子、UBE2C、CXCL10表达,延长患者生存。

前列腺癌病人血清人类泛素偶联酶E2C的表达及其对DU145细胞增殖、侵袭和转移的影响

目的探寻人类泛素偶联酶E2C(UBE2C)在前列腺癌病人血清中表达及对前列腺癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。方法采用基因表达交互分析数据库(GEPIA)分析UBE2C在前列腺癌组织中的表达情况,筛选2021年1月至2022年6月在河南省人民医院住院治疗的50例前列腺癌病人作为研究对象,另选前列腺增生病人和健康体检者各50例作为对照,采用酶联免疫吸附(ELISA)实验检测血清UBE2C浓度。将si-UBE2C及si-NC转染前列腺癌DU145细胞,采用CCK-8实验和transwell实验检测细胞增殖、侵袭和迁移能力的改变,采用蛋白质印迹法检测细胞中UBE2C、t-Akt、p-Akt、MMP-2和MMP-9的表达。结果GEPIA数据库中,前列腺癌组织中UBE2C表达显著高于癌旁组织(P<0.05);前列腺癌病人血清UBE2C表达水平显著高于前列腺增生组和对照组[0.64(0.41,1.06)μg/L比0.28(0.22,0.39)μg/L和0.19(0.18,0.21)μg/L,P<0.05],血清UBE2C诊断前列腺癌的曲线下面积(AUC)为0.86,诊断灵敏度和特异度分别为76.3%和88.9%,血清UBE2C联合血清前列腺特异性抗原(PSA)诊断前列腺癌的AUC为0.90,诊断灵敏度和特异度分别为82.4%和89.7%。血清UBE2C表达与骨转移、淋巴结转移、gleason评分和TNM分期相关(均P<0.05)。转染si-UBE2C可显著降低DU145细胞中UBE2C表达(P<0.05),p-Akt、MMP-2和MMP-9表达降低(P<0.05),DU145细胞的增殖、侵袭和迁移能力均得到抑制[si-NC组和si-UBE2C组的增殖活性分别为48 h:(0.69±0.03)和(0.57±0.02),72 h:(0.88±0.03)和(0.65±0.03);细胞侵袭数量分别为(225.7±13.6)个和(122.7±14.6)个;细胞迁移数量分别为(129.3±7.6)个和(75.0±11.8)个,均P<0.05]。结论UBE2C在前列腺癌病人血清中表达升高并对肿瘤诊断有一定价值,沉默UBE2C表达可显著抑制前列腺癌DU145细胞的增殖、侵袭和转移。

前列腺癌组织中泛素偶联酶E2C、蛋白激酶B表达及其与预后相关性

目的探讨前列腺癌组织中泛素偶联酶E2C(UBE2C)、蛋白激酶B(AKT1)表达及其预后相关性。方法选取2014年1月至2016年12月四川大学华西医院泌尿外科研究所收集的92例前列腺癌组织(前列腺癌组)、70例良性前列腺增生组织(良性前列腺增生组)进行研究,根据随访结果将前列腺癌组分为两组,预后良好组(68例)、预后不良组(24例)。采用免疫组织化学法检测不同组织中UBE2C、AKT1表达情况进行比较,并分析其与病人临床病理特征关系;采用COX回归模型分析前列腺癌病人预后影响因素。结果与良性前列腺增生组相比,前列腺癌组UBE2C[84.78%(78/92)比22.86%(16/70)]、AKT1[78.26%(72/92)比28.57%(20/70)]阳性表达率均较高(P<0.05);前列腺癌组UBE2C表达与年龄、TNM分期、术前前列腺特异抗原(PSA)水平均无关(P>0.05),与Gleason评分、淋巴结转移均有关(P<0.05),AKT1表达与年龄、淋巴结转移无关(P>0.05),与Gleason评分、TNM分期、术前PSA水平均有关(P<0.05);与预后良好组相比,预后不良组UBE2C[100.00%(100/100)比79.41%(54/68)]、AKT1[95.83%(23/100)比72.06%(49/68)]阳性表达率均较高(P<0.05);COX回归模型分析结果显示,Gleason评分≥7分、Ⅲ/Ⅳ期、伴淋巴结转移、术前PSA水平>10µg/L、UBE2C高表达、AKT1高表达均是影响前列腺癌病人预后状况的独立危险因素(P<0.05)。结论前列腺癌病人病灶组织UBE2C、AKT1均为高表达,且与病人临床病理特征及预后状况密切相关,可能为评估病情及预后提供临床参考依据。

泛素偶联酶UBE2C在消化道肿瘤中的作用

泛素偶联酶UBE2C在消化道肿瘤的发生、发展和增殖中起着重要作用,可能成为消化道肿瘤的新型治疗靶点和/或预后的标志物。介绍UBE2C在细胞周期调控中的作用,可能的调节机制,与消化道肿瘤关系及临床病理特征。

人泛素偶联酶UBE2C/UbcH10基因的克隆、原核表达载体的构建及表达

目的获取泛素偶联酶家族成员之一的UBE2C/UbcH10的基因,构建具有His标签的原核表达载体,在大肠杆菌中表达UBE2C/UbcH10蛋白。方法利用RT-PCR的方法从肝癌细胞HepG2中获得UbcH10的基因,克隆到pMD-19T载体中并测序鉴定,酶切回收后插入原核表达载体pET32a(+)中,构建重组表达载体pET32a-UbcH10,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达。结果重组表达载体pET32a-UbcH10在大肠杆菌BL21中经IPTG诱导4h获得稳定高效的融合表达。重组蛋白以可溶形式存在,大小在29.0kD左右。结论UbcH10重组表达载体的成功构建以及重组蛋白的表达,为进一步其结构和功能的研究奠定了基础,有望揭示该蛋白在癌症发生发展过程中的作用。

泛素偶联酶2C促进肺癌细胞增殖和迁移与抑制细胞衰老

泛素偶联酶2C与多种肿瘤细胞的增殖密切相关,但其与肺癌发生和发展的关系尚不明确。本研究以肺癌A549细胞为材料,通过RT-PCR、Western印迹、免疫荧光、SA-β-Gal细胞衰老染色、细胞划痕和Trans-well实验,阐明UBE2C与肺癌细胞的增殖、衰老和迁移能力的关系。结果显示,UBE2C在肺癌细胞中的表达明显高于正常细胞。利用基因修饰技术瞬时过表达或靶向沉默UBE2C后,在肺癌A549细胞中,UBE2C的mRNA和蛋白质水平显著增加3.5倍或减少0.5倍,显著促进或抑制细胞增殖,进而减少或增加细胞的凋亡率。过表达UBE2C后,显著抑制细胞衰老;但沉默UBE2C后,则增加细胞衰老。此外,过表达UBE2C后,下调转移相关基因E-钙黏着蛋白的mRNA和蛋白质表达水平,且上调波形蛋白基因的表达水平,进而促进肺癌细胞的迁移。但靶向敲除UBE2C后,上调E-钙黏着蛋白,同时下调波形蛋白表达水平,进而抑制肺癌细胞的迁移。本研究的开展将明确UBE2C在肺癌中的作用及其机制,为以UBE2C为靶点,提高病人生存期提供了理论基础。

宫颈鳞癌组织中泛素偶联酶E2、食管癌相关基因4表达情况与预后的关系

目的探究宫颈鳞癌组织中泛素偶联酶E2(UBE2C)、食管癌相关基因4(ECRG4)表达水平及其与病人预后关系。方法选取2010年6月至2014年6月天门市第一人民医院收治的宫颈鳞癌病人73例、宫颈上皮瘤变病人62例、因子宫肌瘤需行全子宫切除术病人54例为研究对象。术中分别收集宫颈鳞癌病人宫颈鳞癌组织、宫颈上皮瘤变病人瘤变组织和子宫肌瘤病人正常宫颈组织。分别采用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)和免疫组织化学染色法检测UBE2C、ECRG4 mRNA和蛋白表达水平。分析二者表达水平与病人临床病理特征及预后关系。结果正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变组织、宫颈鳞癌组织中UBE2C mRNA[(1.01±0.29)、(1.97±0.63)、(3.64±1.21)]表达水平、UBE2C蛋白高表达率(20.37%、51.61%、68.49%)依次显著升高(P<0.05),ECRG4 mRNA[(1.02±0.31)、(0.75±0.26)、(0.51±0.19)]表达水平、ECRG4蛋白高表达率(66.67%、43.55%、26.03%)依次显著降低(P<0.05)。UBE2C、ECRG4蛋白在低、中、高分化宫颈鳞癌病人癌组织中高表达率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。UBE2C、ECRG4蛋白在Ⅰ~Ⅱ、Ⅲ期FIGO分期及有无淋巴结转移病人癌组织中高表达率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。宫颈鳞癌组织中UBE2C mRNA与ECRG4 mRNA表达水平呈负相关(P<0.05)。UBE2C蛋白高表达组病人5年总生存率明显低于UBE2C蛋白低表达组,ECRG4蛋白高表达组病人5年总生存率明显高于ECRG4蛋白低表达组,均差异有统计学意义(34.00%比65.22%,73.68%比33.33%,P<0.05)。FIGO分期Ⅲ期、淋巴结转移、UBE2C高表达、ECRG4低表达均是影响宫颈鳞癌病人发生不良预后的独立危险因素(P<0.05)。结论宫颈鳞癌组织中UBE2C mRNA及蛋白表达水平明显升高,ECRG4 mRNA及蛋白表达水平明显降低,与病人5年总生存率低有关,可能是影响宫颈鳞癌病人发生不良预后的独立危险因素。

过表达泛素偶联酶(UBE2C)对小鼠胚胎发育的影响

UBE2C(Ubiquitin-conjugating enzyme 2C)属于E2泛素偶联酶家族成员,较为明确的作用是调控有丝分裂检验点以及控制细胞周期进程,但其在小鼠胚胎中的作用尚不明确。本文首先探讨了小鼠多种组织以及胚胎不同发育时期UBE2C表达图谱,其次在小鼠受精卵中通过显微注射过表达UBE2C分析其对小鼠早期胚胎发育的影响。结果表明:过表达UBE2C后导致胚胎2-细胞发育阻滞,证明UBE2C在胚胎发育过程中具有重要功能,其作用可能是通过降解卵母细胞储存的母源蛋白,从而确保小鼠早期胚胎正常发育进程。

泛素偶联酶E2C在原发性肝癌中的表达及与临床病理参数和预后的关系

目的分析泛素偶联酶E2C(UBE2C)在原发性肝癌中的表达及与临床病理参数和预后的关系。方法选取2014年1月—2016年12月北部战区总医院普外科手术治疗原发性肝癌患者109例作为研究对象,留取其癌组织和癌旁组织。采用免疫组化法测定原发性肝癌组织和癌旁组织中UBE2C表达水平,分析其与原发性肝癌临床病理参数及患者预后的关系。结果原发性肝癌组织中UBE2C阳性表达率高于癌旁组织(92.16%vs.64.22%,χ^2/P=26.067/0.000)。UBE2C在原发性肝癌组织中的表达水平与患者的性别、年龄、肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移、分化程度无相关性(P>0.05),与TNM分期、淋巴血管间隙浸润、复发呈正相关(r/P=0.506/0.000、0.517/0.000、0.493/0.002)。术后随访,UBE2C高表达原发性肝癌患者中位生存时间为23.32个月,短于UBE2C低表达患者的33.32个月(χ^2/P=9.129/0.003)。COX多因素分析表明,有淋巴血管间隙浸润、复发、UBE2C高表达是影响原发性肝癌患者不良预后的独立危险因素[OR(95%CI)=2.880(1.348~6.153)、2.975(1.091~8.115)、3.475(1.942~6.219)]。结论UBE2C在原发性肝癌组织中阳性表达率显著升高,与患者TNM分期、淋巴血管间隙浸润、复发相关,可能成为评价原发性肝癌患者预后的临床指标。

泛素偶联酶E2C及非转移细胞基因2与乳腺癌临床病理特征关系及其在预后评估中的临床价值

目的探讨乳腺癌病人组织中人类泛素偶联酶E2C(UBE2C)及非转移细胞基因2(NME2)的表达,并分析其作为乳腺癌预后评估模型的临床应用价值。方法通过基因表达谱数据动态分析(GEPIA)在线网站分析1085例乳腺癌组织和291例正常对照组织中UBE2C、NME2表达;利用Kaplan-Meier Plotter在线网站分析UBE2C、NME2表达与乳腺癌病人(1070例)生存情况。选取2018年1月~2019年12月本院127例乳腺癌病人为研究对象。检测组织中UBE2C、NME2水平,并分析与乳腺癌病人临床病理特征的关系;采用多因素Cox回归模型对乳腺癌不良预后的危险因素进行分析;采用受试者工作特征曲线评估模型对乳腺癌不良预后的诊断效能。结果GEPIA在线网站数据提示,乳腺癌组织中UBE2C、NME2蛋白表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);生存曲线分析显示,UBE2C、NME2表达水平增加,病人生存率降低(Logrank P分别为0.029,0.013)。乳腺癌组织中UBE2C、NME2阳性表达率在不同淋巴结转移、临床分期以及病理分级的病人中进行比较,差异有统计学意义(χ^(2)=7.826,4.116,5.460,P=0.005,0.042,0.019;χ^(2)=4.400,6.211,11.63,P=0.036,0.013,0.001);回归模型分析显示,淋巴结转移、临床分期Ⅲ~Ⅳ期、病理分级G3级及UBE2C阳性表达、NME2阳性表达是乳腺癌病人不良预后的危险因素(P=0.031,0.018,0.016,0.019,0.001),由此构建模型组曲线下面积(AUC)0.835,灵敏度为0.7403,特异度为0.9412;验证组AUC为0.826,灵敏度为0.8800,特异度为0.8400。结论乳腺癌病人组织中UBE2C、NME2升高,与淋巴结转移、临床分期、病理分级及乳腺癌不良预后密切相关。由此构建的预警模型对预测乳腺癌不良预后具有重要的临床价值。

茶树菇Agrocybe aegerita新泛素偶联酶蛋白表达及抗肿瘤活性研究

大型真菌茶树菇活性蛋白组分Yt在动物模型中被发现具有抗肿瘤及免疫调节活性。为研究其蛋白组分,构建新鲜蘑菇子实体c DNA文库,对c DNA序列进行测序筛选,获得新型真菌泛素偶联酶(Ub-conjugating enzyme,UBC)的c DNA序列(Gen Bank登录代码:JQ362395),分析其含有UBC家族的保守残基。使用原核表达p ET系统表达和纯化重组UBC蛋白,得率是10 mg/L大肠杆菌培养液。在细胞培养中加入重组UBC蛋白将显著改变细胞形态,通过流式细胞仪发现UBC(1.8、3.6、7.2μM)均能诱导He La细胞凋亡,AnnexinⅤ+/PI-百分比由对照组的1.4%上调至10.7%、15.8%和20.3%,呈浓度依赖性。本文是首次报道真菌UBC具有抗肿瘤活性。该结果暗示,真菌泛素系统成员可能通过改变细胞基本生理功能,成为潜在的候选药物,值得探讨。

泛素偶联酶UBE2C/UbcH10荧光蛋白表达载体的构建及肝癌细胞中的表达

目的构建人泛素偶联酶UBE2C/UbcH10荧光蛋白真核表达载体,并转染肝癌细胞,筛选建立稳定转染细胞株。方法从构建好的pMD19-T/UbcH10载体中PCR扩增UbcH10基因,PCR产物双酶切后克隆入pEGFP-N1真核表达载体中,构建真核表达载体pEGFP-N1/UbcH10,进行双酶切和测序鉴定。将构建好的真核表达载体pEGFP-N1/UbcH10和空载体pEGFP-N1利用脂质体Lip2000TM分别转染进入肝癌细胞SMMC7721中,建立肝癌细胞SMMC7721的G418细胞死亡曲线,选择G418的筛选浓度,经G418结合荧光显微镜观察筛选稳定转染细胞。将筛选获得的肝癌细胞进行有限稀释法单克隆化,收集单个细胞克隆扩大培养备用。结果经双酶切和测序鉴定,带有荧光蛋白标记的真核表达载体pEGFP-N1/UbcH10构建成功,经脂质体介导真核表达载体pEGFP-N1/UbcH10和空载体pEGFP-N1成功转入肝癌细胞SMMC7721中,经800μg/mL G418筛选并进行单克隆化获得稳定转染的细胞株SMMC7721-pEGFP-N1和SMMC7721-pEGFP-N1/UbcH10,阳性转化率达到94%以上。结论人泛素偶联酶UBE2C/UbcH10稳定高表达肝癌细胞株的建立,为该蛋白在肝癌发生发展过程中的具体作用机制的研究奠定了基础。

结肠癌患者泛素偶联酶E2C表达情况分析

目的探讨结肠癌患者泛素偶联酶E2C(UBE2C)表达情况及其诊断效能。方法选取自2016年10月至2018年1月保定市第一中心医院收治的40例结肠癌患者为研究对象。选择同期行体检的健康人群40例为健康组。分析结肠癌患者血清、肿瘤组织及健康组UBE2C表达情况。采用多因素Logistic分析法分析肠癌患者UBE2C表达水平影响因素。结果结肠癌血清组UBE2C水平和结肠癌肿瘤组织组比较,差异无统计学意义(P> 0. 05);结肠癌血清组和结肠癌肿瘤组织组UBE2C水平均显著高于健康组(P <0. 05)。多因素Logistic分析发现,临床病理分期、浆膜受损、癌胚抗原及淋巴结转移与血清UBE2C表达呈正相关(P <0. 05);肿瘤大小与血清UBE2C表达无明显相关(P> 0. 05)。结论结肠癌患者血清及肿瘤中UBE2C水平表达一致,在早期诊断结肠癌有一定的诊断价值,且特异性及敏感度较高。UBE2C水平与临床病理分期、癌胚抗原水平、浆膜损伤及淋巴结转移关系密切。

泛素偶联酶2C对食管鳞癌KYSE-30细胞增殖和凋亡的影响

目的研究泛素偶联酶2C(UBE2C)对食管鳞癌KYSE-30细胞增殖和凋亡的影响。方法将食管鳞癌细胞KYSE-30分成空白对照组(正常培养)、Vector组(UBE2C空载转染)和UBE2C-OE组(UBE2C过表达转染),以逆转录聚合酶链反应法验证转染效率。以细胞计数试剂盒-8法检测细胞增殖率,以流式细胞术检测细胞凋亡情况。以生物信息学方法分析包括食管癌在内的多种实体肿瘤的UBE2C表达和预后。结果空白对照组、Vector组和UBE2C-OE组的UBE2C基因表达量分别为1.00±0.03、1.05±0.10和154.97±5.35;细胞增殖率分别为(1429.58±93.99)%、(1527.80±119.89)%和(2151.93±67.04)%;凋亡率分别为(14.83±0.18)%、(15.15±0.30)%和(6.13±0.27)%。UBE2C-OE组的上述指标与空白对照组和Vector组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。泛癌分析表明,UBE2C在多种肿瘤中均高表达并与患者预后不良有关。癌症基因组图谱数据表明,UBE2C在食管鳞癌中异常高表达,差异倍数2.44,差异有统计学意义(P<0.05);生存分析表明UBE2C与食管鳞癌患者预后无关,但与食管腺癌患者预后有关。结论UBE2C在人类多种实体肿瘤中均高表达,UBE2C过表达可促进食管鳞癌KYSE-30细胞的增殖,并抑制其凋亡。

血清SF、IGF-1、UBE2C在乳腺疾病良恶性诊断中意义及与临床病理参数关联性

目的探讨血清铁蛋白(SF)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、泛素偶联酶E2C(UBE2C)在乳腺疾病良恶性诊断中意义及与临床病理参数关联性。方法前瞻性选取我院乳腺癌患者96例为恶性组、乳腺良性疾病患者68例为良性组,另选取同期健康体检者68例为健康组。收集3组一般资料,比较3组与恶性组不同临床病理参数患者血清SF、IGF-1、UBE2C水平,分析血清各指标与乳腺癌患者血清肿瘤标志物[糖类抗原153(CA153)、糖类抗原125(CA125)、癌胚抗原(CAE)]、临床病理参数关联性,探究血清各指标对乳腺疾病良恶性诊断的价值。结果恶性组血清SF、IGF-1、UBE2C水平高于良性组(P<0.05);血清SF、IGF-1、UBE2C水平与乳腺癌患者血清CA153、CA125、CAE水平呈显著正相关(P<0.05);血清SF、IGF-1、UBE2C联合诊断乳腺肿瘤良恶性的AUC最大,为0.875,敏感度为72.92%、特异度为86.76%;血清SF、IGF-1、UBE2C表达与乳腺癌患者临床分期、淋巴结转移呈显著正相关,与组织分化程度呈显著负相关(P<0.05)。结论血清SF、IGF-1、UBE2C水平表达与乳腺癌患者临床病理参数存在一定相关性,三者联合可成为诊断乳腺疾病良恶性的重要血清标志物。

脑胶质瘤患者血清UBE2C、HIF-1α的水平变化及其意义

目的探讨胶质瘤患者血清UBE2C和HIF-1α水平与脑胶质瘤的临床因素间的相关性。方法收集脑胶质瘤患者80例,同期选择体检健康者55例为对照组。比较2组血清UBE2C和HIF-1α水平。分析血清UBE2C和HIF-1α水平与胶质瘤患者的年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤大小、KPS评分及临床分级等临床因素间的相关性。比较1年随访期间死亡病例和存活病例血清UBE2C和HIF-1α水平。结果胶质瘤患者血清UBE2C和HIF-1α均明显高于对照组(P<0.01)。胶质瘤患者血清UBE2C和HIF-1α水平与年龄、性别、瘤灶直径、肿瘤部位无显著相关性(P>0.05),与临床分级和KPS评分有明显相关(P<0.01)。死亡组患者入院血清UBE2C和HIF-1α水平显著高于存活组(P<0.01)。结论胶质瘤患者血清UBE2C和HIF-1α水平显著升高,与胶质瘤的恶性程度联系密切,可能成为临床评价该病患者预后的有效指标之一。

基于数据库挖掘UBE2C在肺腺癌中的表达及其临床意义

目的:分析泛素偶联酶E2C(ubiquitin conjugating enzyme E2C,UBE2C)在肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)中的表达及其临床意义。方法:通过癌症和基因肿瘤图谱(the Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库、Oncomine数据库、人类蛋白质图谱(human protein atlas,HPA)数据库分析UBE2C在LUAD组织和正常肺组织中mRNA和蛋白质表达水平的差异。采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析评估UBE2C诊断LUAD的价值。通过TCGA、国际癌症基因组联盟(International Cancer Genome Consortium,ICGC)数据库、cbioPortal数据库研究UBE2C表达与LUAD患者临床病理特征和预后的关系。通过基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)分析UBE2C参与LUAD发生和发展的可能通路。结果:LUAD组织中UBE2C mRNA表达水平显著高于正常肺组织(P<0.01),其表达水平与TNM分期、N分期正相关(均P<0.05);与正常肺组织相比,UBE2C蛋白在LUAD组织中表达水平升高(P<0.01)。ROC曲线分析结果显示:UBE2C诊断LUAD的AUC值为0.969(95%CI:0.953~0.984,P<0.01)。UBE2C的表达水平与TNM分期有关(P<0.05)。UBE2C表达高低与年龄、性别、TNM分期、T分期及N分期有关(均P<0.05),且UBE2C高表达组病死率较低表达组高(95/247 vs 68/248,P=0.009)。生存分析结果显示:UBE2C高表达组LUAD患者总生存率(overall survival,OS)显著低于低表达组(P<0.05)。发生UBE2C改变的LUAD患者其OS低于未发生改变者(P<0.01)。UBE2C高表达富集在与细胞周期、P53信号通路、DNA错配修复、DNA复制等通路相关的基因集(均P<0.01)。结论:UBE2C在LUAD组织中表达显著上调,其高表达或发生基因改变提示LUAD患者预后差,UBE2C可作为一个潜在的LUAD分子诊断标志物,是LUAD治疗的潜在靶点。

UBE2C基因沉默对膀胱癌5637细胞增殖、侵袭能力的影响及其机制

目的探讨人类泛素偶联酶E2C(UBE2C)基因沉默对膀胱癌5637细胞增殖和侵袭能力的影响及作用机制。方法将对数生长期的膀胱癌5637细胞随机分为5组,其中UBE2C siRNA1、2、3组及阴性对照组分别采用瞬时转染法转染3条UBE2C小干扰RNA(UBE2C siRNA1、2、3)和阴性对照-siRNA,空白对照组不进行转染。采用RT-PCR法和Western blotting法检测各组UBE2C mRNA及蛋白相对表达量,UBE2C siRNA1、2、3组细胞UBE2C mRNA及蛋白相对表达量均低于阴性对照组、空白对照组,UBE2C siRNA2组明显低于UBE2C siRNA1、3组(P均<0.05);证实UBE2C siRNA2组沉默效果最好。收集UBE2C siRNA2组和阴性对照组、空白对照组细胞,采用MTT法检测培养0、24、48、72、96 h的细胞增殖能力(以OD490表示),Transwell侵袭实验检测侵袭能力(以穿过小室膜的细胞数表示),Western blotting法检测细胞外调节蛋白激酶B(Akt)和磷酸化Akt(p-Akt)蛋白相对表达量。结果随着培养时间的延长,UBE2C siRNA2组、阴性对照组和空白对照组OD490呈升高趋势;UBE2C siRNA2组培养48、72、96 h的OD490均明显低于阴性对照组和空白对照组(P均<0.01)。UBE2C siRNA2组、阴性对照组和空白对照组穿过小室膜的细胞数分别为(58.3±2.2)、(129.3±3.1)、(162.7±5.1)个,组间两两比较P均<0.01。三组细胞Akt蛋白相对表达量比较差异均无统计学意义(P均>0.05),UBE2C siRNA2组p-Akt蛋白相对表达量低于阴性对照组和空白对照组(P均<0.01)。结论 UBE2C基因沉默后膀胱癌5637细胞增殖和侵袭能力降低,抑制Akt信号转导通路可能是其作用机制。

恶性胸腔积液中生物标志物的研究进展

胸腔积液是临床常见的一种并发症,基于诊断或治疗的目的,常需对胸腔积液患者行胸膜腔穿刺术,并对采集到的胸腔积液进行常规、生化、细菌培养及细胞学等检查。根据病因及性质不同可将胸腔积液分为漏出液和渗出液,但其局限性会导致对胸腔积液性质的误判,所以更加灵敏和特异的检查项目亟需确立。正确判断胸腔积液的性质是疾病治疗有效的前提,目前除了常规检查项目之外,对一些胸腔积液中的生物标志物进行检测作为辅助手段也被用于一些疾病的诊断和鉴别诊断。近年来,随着生物医学技术的进步,越来越多的生物标志物被发现并运用于临床,这些生物标志物的发现对病因学的认识、疾病诊断及鉴别诊断、预后评估都有着不可忽视的重要意义。本文将对数个胸腔积液中生物标志物的最新研究进展进行综述。

神经母细胞瘤中KLF4、UBE2C表达水平与细胞黏附、迁移的相关性研究

目的:研究神经母细胞瘤中KLF4、UBE2C表达水平与细胞黏附、迁移的相关性。方法:选择2014年5月~2017年2月期间在恩施土家族苗族自治州中心医院诊断为神经母细胞瘤的56例患儿作为研究的NB组并收集病灶组织,选择同期因严重肾盂积水在恩施土家族苗族自治州中心医院就诊的38例患儿作为研究的对照组并收集正常肾上腺组织。测定临床组织样本中KLF4、UBE2C的mRNA表达量及蛋白表达量以及细胞黏附分子、迁移分子的蛋白表达量。结果:NB组神经母细胞瘤组织内KLF4的mRNA表达量及蛋白表达量均显著低于对照组,UBE2C的mRNA表达量及蛋白表达量均显著高于对照组;NB组神经母细胞瘤组织内PDLIM1、AMF、GPx1、L1CAM、Nrg1、RANK、RANKL、Inβ1、MTA1、MMP9的蛋白表达量均显著高于对照组且与KLF4的蛋白表达量呈负相关,与UBE2C的蛋白表达量呈正相关。结论:神经母细胞瘤中低表达的KLF4以及高表达的UBE2C能够促进肿瘤细胞的黏附和迁移。