3%高渗盐水对重型颅脑损伤患者血清神经元特异性烯醇化酶与泛素羧基末端水解酶-L1水平的影响

目的分析3%高渗盐水对重型颅脑损伤患者血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)与泛素羧基末端水解酶(UCH)-L1水平的影响。方法重型颅脑损伤患者76例按抽签法随机分为试验组[采用静脉输注3%高渗盐水(HTS)]和对照组[采用静脉输注20%甘露醇(MT)]各38例,比较两组血清NSE与UCH-L1蛋白含量水平及预后。结果试验组入院后1、3、5和7 d的颅内压、NSE、UCH-L1含量显著低于对照组(P<0. 05)。试验组良好和中残的预后病例数显著高于对照组,重残、植物状态和死亡的预后病例数显著低于对照组(P<0. 05)。试验组肺部感染、消化道出血、电解质紊乱、肾功能障碍、心律不齐和血糖的并发症病例数显著低于对照组(P<0. 05)。结论与20%MT相比,3%HTS能降低重型颅脑损伤患者血清NSE与UCH-L1含量水平,提高患者预后恢复情况。

重型颅脑损伤急性期颅内压变化与泛素C末端水解酶L1、神经元特异性烯醇化酶血清浓度的关系

目的探讨重型颅脑损伤患者急性期颅内压(ICP)变化与泛素C末端水解酶L1(UCH-L1)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)表达的关系。方法选择32例重型颅脑损患者,记录其6、12、24、48及72 h ICP变化,以及UCHL1、NSE浓度。结果 72 h内UCH-L1血浆浓度与ICP呈正相关(≥0.466,均<0.05),48 h内NSE血浆浓度与ICP呈正相关(≥0.417,均<0.05)。结论早期检测UCH-L1、NSE对ICP变化的判断有重要的临床意义。

轻型颅脑损伤病人血清高迁移率族蛋白B1、泛素C末端水解酶L1和神经元特异性烯醇化酶水平变化及与预后的相关性分析

目的分析轻型颅脑损伤(MHI)病人血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、泛素C末端水解酶L1(UCH-L1)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平变化及与预后的相关性.方法2017年1月~2019年1月收治的84例MHI病人为MHI组,根据格拉斯哥预后量表(GOS)分为预后不良组(23例)和预后良好组(61例),另选取同时期57例来我院体检健康者为对照组.对比各组血清HMGB1、UCH-L1、NSE水平.多因素Logistic回归分析MHI病人预后不良影响因素,ROC分析血清HMGB1、UCH-L1、NSE水平对MHI病人不良预后的预测价值.结果MHI组血清HMGB1、UCH-L1、NSE水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).预后不良组复合损伤、并发症比例和血清HMGB1、UCH-L1、NSE水平高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05).复合损伤、HMGB1、UCH-L1、NSE为MHI病人预后不良独立影响因素(P<0.05).ROC曲线显示,HMGB1+UCH-L1+NSE预测MHI不良预后的AUC明显大于HMGB1、UCH-L1、NSE单独预测.结论MHI病人血清HMGB1、UCH-L1、NSE水平明显提升,与预后密切相关,联合检测可提升MHI不良预后预测价值.

泛素特异性肽酶22诱导胰腺癌细胞对吉西他滨耐药的观察

目的:探讨泛素特异性肽酶22(ubiquitin specific peptidase 22,USP22)在胰腺癌吉西他滨耐药中的作用。方法:采用Western blot检测吉西他滨诱导不同胰腺癌细胞株对USP22表达情况的影响。利用胰腺癌SW1990亲本细胞株,构建吉西他滨耐药细胞株SW1990/Gem及USP22siRNA稳定表达细胞株(表示为SW1990-sh USP22、SW1990/Gem-sh USP22);采用CCK-8实验检测抑制USP22表达对胰腺癌细胞吉西他滨敏感性的影响。结果:1μmol/L或10μmol/吉西他滨诱导人胰腺癌PANC-1和SW1990细胞后,USP22表达均增高(P<0.05或P<0.01)。耐药细胞株SW1990/Gem中USP22蛋白表达显著高于SW1990亲本细胞株(P<0.01)。USP22 siRNA稳定表达细胞株SW1990-sh USP22,SW1990/Gem-sh USP22中USP22蛋白表达水平与相应对照组SW1990-NC,SW1990/Gem-NC相比,分别显著下调约65%(P<0.01)和60%(P<0.01)。SW1990-NC组和SW1990-sh USP22组对吉西他滨的IC50分别为(1 850.96±87.37)nmol/L和(534.83±49.68)nmol/L,差异具有统计学意义(P<0.01)。SW1990/Gem-sh USP22组对吉西他滨的IC50为(2 157.08±120.32)nmol/L,与SW1990/Gem-NC组(29 850.96±345.78)nmol/L相比,差异具有统计学意义(P<0.01);与SW1990-NC组(1 387.58±96.56)nmol/L相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:吉西他滨可诱导胰腺癌细胞USP22表达增高。抑制USP22表达可增加胰腺癌细胞对吉西他滨的药物敏感性,并可有效逆转胰腺癌细胞对吉西他滨的耐药。本研究揭示胰腺癌细胞对吉西他滨耐药的新机制,为改善胰腺癌个体化化疗方案提供新思路。

特异性泛素蛋白酶22在急性白血病细胞中的表达及其临床意义

目的探讨特异性泛素蛋白酶22(USP22)在急性白血病(AL)细胞中的表达及其临床意义。方法采用荧光定量PCR及Western blot检测USP22基因及蛋白在Jurkat、HL-60、K562、molt-4和NB4细胞系、急性白血病患者及阴性对照者骨髓单个核细胞中的表达量情况。结果 USP22在Jurkat、HL-60、K562、molt-4和NB4细胞系均有所表达。USP22 mRNA在急性白血病患者初诊组(33.90±9.58)、缓解组(1.81±0.53)中的表达量与阴性对照组(1.05±0.33)相比均上调,USP22蛋白在急性白血病患者初诊组(0.58±0.15)、缓解组(0.10±0.03)中的表达量与阴性对照组(0.05±0.02)相比均上调,差异均具有统计学意义(P<0.001);其中USP22 mRNA在初诊组高白细胞AL患者中的表达量(45.23±10.92)高于非高白细胞患者(26.73±6.12),USP22蛋白在初诊组高白细胞急性白血病患者中的表达量(0.69±0.16)高于非高白细胞患者(0.42±0.10),差异均具有统计学意义(P<0.001)。但USP22基因和蛋白在初诊组急性髓系白血病(AML)与急性淋巴细胞白血病(ALL)患者间的表达差异无统计学意义(P=0.531,0.377),并且本研究对急性白血病患者的临床转归进行了观察,与低表达USP22的急性白血病患者初次诱导缓解率(88.0%)相比,高表达的缓解率(66.67%)较低。结论 USP22在急性白血病中表达率较高,它的表达水平可能与白细胞数目有关,USP22可作为判断急性白血病患者预后的标志基因之一。

MicroRNA-30e-5p通过下调泛素特异性蛋白酶22抑制非小细胞肺癌的发生和发展

目的探讨microRNA-30e-5p(miR-30e-5p)是否可通过下调泛素特异性蛋白酶22(USP22)抑制非小细胞肺癌(NSCLC)的发生和发展。方法采用qPCR、蛋白质印迹法和免疫组织化学染色法检测miR-30e-5p、USP22在NSCLC组织和癌旁组织中的表达。NSCLC细胞株H460转染miR-30e-5p模拟物或miR-30e-5p抑制物后,利用qPCR和蛋白质印迹法检测细胞中miR-30e-5p、USP22的表达。构建USP22突变载体,采用荧光素酶报告基因检测miR-30e-5p在USP22基因中的结合位点。采用MTT法检测转染后H460细胞的增殖情况,并采用异种移植法检测裸鼠体内肿瘤生长情况。流式细胞术检测转染后H460细胞的周期阻滞和凋亡情况。结果 MiR-30e-5p、USP22在肿瘤组织中的表达均高于癌旁组织(P均<0.01)。在H460细胞中过表达miR-30e-5p后USP22 mRNA和蛋白的表达均下调(P均<0.01),而抑制miR-30e-5p表达后USP22mRNA和蛋白的表达均上调(P均<0.01)。NSCLC组织中miR-30e-5p与USP22的表达呈负相关(P<0.01)。miR-30e-5p可通过结合在3′UTR的特异序列负调控USP22的表达。过表达miR-30e-5p可抑制H460细胞的增殖、诱导细胞周期阻滞和凋亡,并抑制裸鼠体内肿瘤的生长(P<0.05,P<0.01);而抑制miR-30e-5p的表达可促进H460细胞的增殖、抑制细胞周期阻滞和凋亡(P<0.05,P<0.01)。结论 MiR-30e-5p可以下调USP22的表达,从而抑制NSCLC的发生和发展,提示其可作为NSCLC患者的潜在治疗靶点。

泛素特异性蛋白酶22与原发性中枢神经系统淋巴瘤预后的关系

目的探讨泛素特异性蛋白酶22(USP22)在原发性中枢神经系统淋巴瘤(PCNSL)预后中的作用。方法收集48例PCNSL患者脑组织,同时收集27例脑挫裂伤患者挫伤灶脑组织。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blotting检测USP22 mRNA和蛋白的表达情况,并采用Kaplan-Meier法和Cox模型探讨USP22对PCNSL患者预后的影响。结果qRT-PCR和Western blotting的结果显示,PCNSL组织中USP22 mRNA和蛋白的表达水平均高于挫伤灶脑组织(P<0.05)。随着USP22蛋白表达水平升高,肿瘤的大小和数量也相应增加。生存分析结果显示,USP22蛋白表达水平越高,患者预后越差(P<0.05)。结论USP22高表达与PCNSL的不良预后密切相关,今后可作为治疗的靶点以改善PCNSL患者的预后。

泛素特异性蛋白酶22通过调控雌激素受体α的转录活性抑制磷诱导的人动脉平滑肌细胞钙化

目的探讨泛素特异性蛋白酶22(USP22)与雌激素/雌激素受体(ER)之间的关系,并明确USP22在血管钙化过程中的作用及机制。方法用高磷培养基处理人动脉平滑肌细胞(HASMCs),建立血管钙化的细胞模型,并通过钙含量比色检测试剂盒及茜素红染色对该模型进行评价;Western blotting观察钙化过程中USP22蛋白水平的变化情况;双荧光素酶报告试验检测USP22对于ERα的转录调控作用;免疫共沉淀试验(co-IP)检测USP22与ERα之间的相互作用;对HASMCs进行过表达/沉默USP22之后再通过钙含量比色检测试剂盒检测钙化的改变。结果成功建立HASMCs钙化模型,钙含量比色检测试剂盒测定结果显示,细胞钙含量明显升高(P<0.05),茜素红染色也提示平滑肌细胞钙化阳性。随着钙化培养基处理时间的延长,Western blotting检测发现HASMCs的Runt相关转录因子(Runx2)与USP22蛋白表达量均有所升高。双荧光素酶报告试验结果显示,USP22可以抑制ERα的转录活性(P<0.05)。co-IP证实USP22与ERα之间可以结合。过表达USP22时,细胞钙化加重,Runx2表达也升高;沉默USP22时,细胞钙化减轻,Runx2表达也下降(P<0.05)。结论高磷条件可以诱导HASMCs钙化,HASMCs钙化时USP22表达水平升高,USP22可以通过与ERα直接结合的方式抑制其转录活性,USP22通过ERα促进钙化。

泛素特异性肽酶22、滋养层细胞表面抗原-2表达与鼻咽癌临床病理特征的关系及对预后的影响

目的探讨泛素特异性肽酶22(USP22)、滋养层细胞表面抗原-2(Trop2)表达与鼻咽癌(NPC)病人临床病理特征的关系及对预后的影响。方法选取2014年1月至2016年6月安阳市眼科医院NPC病人及其组织标本92例作为观察组,另选取同期慢性鼻咽炎病人及其组织标本95例作为对照组,检测对比两组USP22、Trop2蛋白表达水平及USP22、Trop2诊断价值。比较不同临床病理特征病人USP22、Trop2蛋白表达水平及其与NPC临床病理特征关联性。并对比不同USP22、Trop2表达水平病人3年无进展生存期及总生存期。结果观察组USP22(59.78%比12.63%)、Trop2(66.30%比15.79%)蛋白阳性表达率高于对照组(P<0.05);logistic回归显示:TNM分期、淋巴结转移、分化程度等3个因素均为USP22、Trop2蛋白表达的影响因素或关联因素(P<0.05);USP22、Trop2联合诊断准确性、敏感性高于二者单一诊断;TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、低分化、淋巴结转移的NPC病人组织标本中USP22、Trop2蛋白阳性表达率高于TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、中高分化、无淋巴结转移者(P<0.05);USP22、Trop2蛋白水平与TNM分期、淋巴结转移呈正相关,与分化程度呈负相关(P<0.05);USP22、Trop2蛋白阳性表达病人3年总生存率、无进展生存率低于阴性表达病人(P<0.05);USP22蛋白、Trop2蛋白高危组、低危组生存率对比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Trop2、USP22蛋白表达水平在NPC病人中呈异常高表达状态,与TNM分期、分化程度、淋巴结转移存在一定关联性,加强Trop2、USP22蛋白表达水平联合检测,对早期识别NPC、评估预后具有重要指导意义。

特异性泛素蛋白酶—22生物学功能研究现状

特异性泛素蛋白酶22(USP22)是一种新的细胞标记物,本文就其分子结构、理化性质和主要生物学功能做一综述。

泛素特异性蛋白酶22与多系统肿瘤的研究进展

泛素特异性蛋白酶22(USP22)为USP家族成员之一,是乙酰转移酶复合体(SAGA)的关键亚基,是B淋巴瘤莫洛尼鼠白血病病毒插入位点1(BMI1)通路上11个标记基因中的一个。近年来的研究表明,USP22在多种恶性肿瘤中高表达,涉及肿瘤细胞的增殖、转移和药物敏感性。寻找更好的生物标志物来实现肿瘤的诊断及治疗是非常迫切的。本文着重讨论USP22与各系统肿瘤发生发展的关系,为肿瘤的治疗提供新的靶点。

小儿主动脉缩窄围术期泛素羧基末端水解酶L1的变化与临床意义

目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)和非CPB下行手术的主动脉缩窄患儿中血清泛素羧基末端水解酶L1(ubiquitin carboxyl-terminal esterase-L1,UCH-L1)浓度变化,评价UCH-L1是否是一个主动脉弓部手术后CPB相关脑损伤的预测指标。方法 2012年1月和2013年6月首都医科大学附属北京儿童医院共39例主动脉缩窄患儿接受了主动脉成型手术;其中A组17例未行CPB,B组22例应用选择性脑灌注分别在6个时间点(麻醉诱导后,关胸,术后2、8、24、48 h)收集血清标本,采用酶联免疫吸附法分别测定UCH-L1、神经胶质蛋白S-100β和神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)浓度。在术后8 h,拔除气管插管后6 h和出院前进行神经系统功能评分。结果 2组血清中UCH-L1浓度在术前基本相同[A组(0.184±0.066)μg/L vs B组(0.194±0.067)μg/L]。B组术后2 h后血清UCH-L1浓度较A组明显升高[A组(0.238±0.067)μg/L vs B组(0.327±0.151)μg/L,P<0.05],并于术后8 h达到高峰。在术后24 h,2组血清UCH-L1浓度差异无统计学意义[A组(0.208±0.078)μg/L vs B组(0.201±0.081)μg/L,P>0.05]。B组血清UCH-L1的峰值浓度和CPB时间明显相关(r=0.575,P=0.005)。术后所有患者均未出现持续存在的严重神经系统合并症。结论与非CPB手术相比,应用选择性脑灌注的小儿主动脉弓部手术可引起血清UCH-L1浓度显著升高,并且与CPB时间密切相关。UCH-L1可以作为一个CPB相关脑损伤诊断的潜在生物标志物。

去泛素化酶对TGF-β/Smads通路调控机制研究进展

去泛素化是指在蛋白质底物与泛素分子结合的复合物中去除泛素蛋白的一种重要翻译后修饰方式(post translational modifications,PTMs),可通过蛋白功能调节多种细胞生理功能;TGF-β/Smads通路可调控细胞增殖、凋亡、细胞周期、迁移、DNA修复参与炎症、胚胎发育、组织修复、调节免疫功能。文献报道,去泛素化酶可以调控TGF-β/Smads通路,但是具体作用机制尚不清楚。本文对不同去泛素化酶调控TGF-β/Smads通路具体作用机制进行综述。

冠心病病人外周血单个核细胞中USP22、miR-520b表达与冠状动脉CTA钙化积分的相关性分析

目的:探讨冠心病(CHD)病人外周血单个核细胞(PBMC)中泛素特异性蛋白酶22(USP22)、微小RNA(miR)-520b表达与冠状动脉CTA钙化积分(CACS)的相关性。方法:以110例CHD病人为CHD组,同期健康志愿者为对照组,采集外周血测定PBMC中USP22、miR-520b表达水平。CHD组根据CACS分级标准分为:无冠状动脉钙化(CAC)组(20例)、少CAC组(16例)、轻CAC组(23例)、中CAC组(29例)、重CAC组(22例)。比较各组USP22、miR-520b表达水平差异,分析CHD病人发生CAC的影响因素。Pearson系数分析USP22、miR-520b表达水平与CACS的相关性。结果:CHD组USP22表达水平(1.87±0.28)显著高于对照组(1.12±0.16)(P<0.01),miR-520b表达水平(0.64±0.12)低于对照组(1.06±0.15)(P<0.01)。CHD组不同钙化程度分组间:USP22表达水平符合无CAC组<少CAC组<轻CAC组<中CAC组<重CAC组(P<0.01),miR-520b表达水平符合无CAC组>少CAC组>轻CAC组>中CAC组>重CAC组(P<0.01)。CHD组PBMC中USP22表达水平与CACS呈正相关关系(r=0.560,P<0.01),miR-520b表达水平与CACS呈负相关关系(r=-0.593,P<0.01)。随着冠状动脉病变支数增加,USP22表达水平升高,miR-520b表达水平降低(P<0.01)。PBMC中USP22、miR-520b是影响CHD病人发生CAC的相关因素(P<0.01和P<0.05)。结论:CHD病人PBMC中USP22表达水平升高,miR-520b表达水平降低,且与CAC存在显著相关性,并对临床预测CHD病人CAC有一定参考价值。

microRNA-588通过调控USP22基因表达对神经母细胞瘤增殖和迁移的影响及机制研究

目的:探究miR-588通过调控泛素特异性蛋白酶22(USP22)表达对神经母细胞瘤(NB)增殖和迁移的影响及机制。方法:通过双荧光素酶报告验证miR-588与USP22的靶向关系。将SK-N-SH细胞分为NC组、miR-588组、miR-588^(+)USP22组和USP22组,通过转染miR-588 mimic和/或USP22质粒过表达其水平。通过qPCR和Western blot检测USP22 mRNA和蛋白水平验证靶向关系。检测各组细胞的增殖、迁移、侵袭能力。通过ELISA检测免疫抑制相关指标肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)水平。结果:miR-588与USP22 mRNA 3’端的非翻译区域(3’-UTR)通过碱基互补配对的方式结合。miR-588组USP22 mRNA和蛋白显著低于NC组(P<0.05),miR-588^(+)USP22组USP22 mRNA和蛋白水平显著高于miR-588组而低于USP22组(P<0.05)。与NC组比较,miR-588组细胞增殖、迁移、侵袭能力显著升高(P<0.05)。USP22作用与miR-588相反(P<0.05),并且miR-588^(+)USP22组增殖、迁移、侵袭能力显著高于miR-588组而低于USP22组(P<0.05)。与NC组比较,miR-588组TNF-α[(8.97±0.90)pg/ml]和sIL-2R[(6.68±0.75)pg/ml]水平显著升高,USP22组TNF-α[(2.04±0.31)pg/ml]和sIL-2R[(1.48±0.19)pg/ml]水平显著降低(P<0.05),miR-588^(+)USP22组TNF-α[(4.16±0.49)pg/ml]和sIL-2R[(3.21±0.41)pg/ml]水平显著低于mi R-588组但高于USP22组(P<0.05)。结论:miR-588可靶向抑制USP22表达诱导TNF-α和sIL-2R分泌,从而缓解免疫抑制,进而抑制NB细胞增殖和转移。

血清泛素羧基末端水解酶L1、神经元特异性烯醇化酶指标水平与创伤性颅脑损伤患者预后康复质量的相关性分析

目的探讨血清泛素羧基末端水解酶L1(UCH-L1)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)指标水平与创伤性颅脑损伤患者预后的相关性。方法将2017年4月-2019年4月本院收治的129例创伤性颅脑外伤患者作为研究组,另选取同期本院健康体检者50例为健康对照组。通过酶联免疫吸附试验测定2组人员的血清UCH-L1、NSE指标水平,并经GOS评分(格拉斯哥预后评分)判定患者预后;选择Spearman相关性分析法分析血清UCH-L1、NSE指标水平和预后相关性。结果研究组患者的血清UCH-L1、NSE指标水平均高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);重型组、中型组创伤性颅脑损伤患者的血清UCH-L1、NSE指标水平均高于轻型组,且重型组高于中型组,差异有统计学意义(P<0.05);预后不良组患者的血清UCH-L1、NSE指标水平均高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05);经Spearman相关性分析发现,血清UCH-L1、NSE指标水平和预后GOS评分显示为负相关(r值分别为-0.713、-0.751,P均<0.05)。结论监测血清UCH-L1、NSE指标水平能对创伤性颅脑损伤患者的病情严重程度进行反映,为临床医师评估创伤性颅脑损伤患者预后康复质量提供参考,即血清UCH-L1、NSE指标水平越高,创伤性颅脑损伤患者预后越差。

创伤性脑损伤患者血清泛素羧基末端水解酶L1和神经元特异性烯醇化酶含量测定及临床意义

目的测定创伤性脑损伤患者血清泛素羧基末端水解酶L1(UCH-L1)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)的含量,探讨其临床意义。方法选择创伤性脑损伤患者55例,按格拉斯哥昏迷评分(GCS)分轻中度组(9-15分,25例)和重度组(3-8分,30例);选择30例正常体检者作为对照组。采集伤后12h静脉血,以ELISA法测定三组血清UCH-L1及NSE的含量,分析其与损伤程度及预后的关系。结果与对照组相比,轻中度、重度组患者伤后12h血清UCH-L1及NSE浓度升高(P<0.05);且重度组高于轻中度组(P<0.05)。血清UCH-L1及NSE水平与创伤性脑损伤患者的预后呈负相关(r=-0.657,r=-0.728,P<0.01)。结论创伤性脑损伤患者血清UCH-L1和NSE检测有助于判断损伤程度和预后。

siRNA沉默USP22基因对胃癌细胞增殖的抑制作用

目的:探讨小干扰RNA(siRNA)沉默泛素特异性肽酶22(ubiquitin specific peptidase22,USP22)对胃癌细胞增殖的影响.方法:针对USP22基因设计3条siRNA及阴性siRNA,用脂质体Lipofectamine 2000转染胃癌AGS细胞,通过实时定量PCR和Western blot检测转染后AGS细胞USP22基因中mRNA和蛋白表达水平的变化情况,流式细胞术检测细胞周期分布变化情况,CCK8法检测细胞增殖率及抑制率.结果:转染48h后,3条siRNA均能显著抑制USP22 mRNA和蛋白的表达.其中,以转染USP22 siRNA3后效果最明显,mRNA和蛋白表达分别下降80.47%±2.99%和79.40%±3.58%.细胞增殖明显受到抑制,USP22 siR-NA3组细胞增殖抑制率为27.33%±3.49%.细胞周期中G0/G1期细胞增多,S期细胞减少.结论:采用RNA干扰技术能够有效地沉默USP22基因的表达,并显著抑制胃癌细胞的增殖.

siRNA沉默USP22基因对胶质瘤细胞增殖的抑制作用

目的探讨小干扰RNA(si RNA)沉默泛素特异性肽酶22(ubiquitin specific protease 22,USP22)对胶质瘤细胞增殖的影响和作用机制。方法合成USP22 si RNA及阴性对照si RNA(control si RNA),用脂质体Lipofectamine 2000转染至人胶质瘤U87和U251细胞,分别设为实验组和阴性对照组。通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测两组胶质瘤细胞USP22 mRNA和蛋白表达水平的变化。采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)检测USP22 si RNA对两组胶质瘤细胞的增殖抑制率。流式细胞术定量检测USP22 si RNA对胶质瘤细胞凋亡及细胞周期分布的影响。Western blot检测胶质瘤细胞凋亡蛋白和周期调控蛋白的表达。结果与阴性对照组比较,实验组胶质瘤细胞中USP22 mRNA和蛋白表达显著下降(P<0.05),细胞增殖明显受到抑制(P<0.05),凋亡率明显上升(P<0.05),细胞周期中G2/M期的细胞比例明显增高(P<0.05)。Western blot结果显示:细胞凋亡蛋白Procaspase-3、Procaspase-8、Procaspase-9表达明显下降(P<0.05);细胞周期蛋白CDK1、CDK2、Cyclin B1表达水平明显下降(P<0.05),Cyclin D1表达水平无明显变化(P>0.05)。结论 USP22基因在胶质瘤细胞的增殖中发挥重要作用,其机制可能为调节细胞凋亡和细胞周期。

急性腹泻伴良性惊厥患儿血清NSE、H_2S、UCH-L1水平变化及对预测复发的临床价值分析

目的 探讨急性腹泻伴良性惊厥患儿血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、硫化氢(H_(2)S)、泛素羧基末端水解酶L1(UCH-L1)水平变化及其对疾病复发的预测效能。方法 选择秦皇岛市第一医院2018年8月—2021年8月收治的急性腹泻伴良性惊厥的104例患儿进行前瞻性研究,另选同期于秦皇岛市第一医院行健康体检的30例健康儿童为对照组,所有儿童均取空腹静脉血检测血清NSE、H_(2)S、UCH-L1水平,并对比两组儿童及观察组不同病情患儿的血清NSE、H_(2)S、UCH-L1水平差异;观察组患儿随访2年以观察复发情况,对比有无复发患儿血清NSE、H_(2)S、UCH-L1水平差异,并采用受试者工作特征曲线(ROC)分析急性腹泻伴良性惊厥患儿血清NSE、H_(2)S、UCH-L1水平对复发的预测效能。结果 观察组血清NSE、UCH-L1水平明显高于对照组,H_(2)S水平明显低于对照组(P<0.05);相较于腹泻3~5次/d、惊厥发作1次、单次惊厥持续时间<5 min、惊厥局灶性发作的患儿,腹泻≥6次/d、惊厥发作≥2次、单次惊厥持续时间≥5 min、惊厥全面性发作患儿的血清NSE,UCH-L1水平均明显更高(P<0.05),血清H_(2)S水平明显更低(P<0.05);复发组患儿的血清NSE、UCH-L1水平明显高于未复发组(P<0.05),血清H_(2)S水平明显低于未复发组(P<0.05);ROC曲线分析显示,急性腹泻伴良性惊厥患儿血清NSE、H_(2)S、UCH-L1水平及联合检测均对复发有预测效能(P<0.05),其中单项检测时血清NSE对复发的预测效能较高,曲线下面积(AUC)为0.787,敏感为77.78%,特异度为81.05%;联合检测的预测效能最高,AUC为0.804,敏感性为88.89%,特异度为75.79%。结论 急性腹泻伴良性惊厥患儿的血清NSE、UCH-L1水平明显升高,血清H_(2)S水平降低,且与病情程度存在相关性,可用于预测惊厥复发。