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泛素结合结构域与泛素化信号的识别 被引量:1
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作者 王京伟 《现代检验医学杂志》 CAS 2015年第2期99-104,共6页
泛素化(Ubiquitylation,UB)是目前最为复杂最为多元的翻译后修饰,几乎参与胞内所有的生物学过程。其通过改变底物的分子景观(landscape)、三维结构、位置、活性、影响底物蛋白与其他蛋白的相互作用等方法,从时间和空间上调节底... 泛素化(Ubiquitylation,UB)是目前最为复杂最为多元的翻译后修饰,几乎参与胞内所有的生物学过程。其通过改变底物的分子景观(landscape)、三维结构、位置、活性、影响底物蛋白与其他蛋白的相互作用等方法,从时间和空间上调节底物所参与的生物学过程。而泛素化底物功能的发挥依赖于特异性的泛素结合结构域(Ubiquitin binding domains, UBDs)。UBDs 的表面功能基团特异性识别具有不同修饰类型的泛素化底物,并决定其功能的特异性。已知的20多种UBDs 超家族对泛素化信号网络的有序调节是人们开启泛素化网络的一把钥匙,同时了解 UBD-ubiquitin 的特异性识别是认识泛素化蛋白质组学“ubiquitome”的基础。 展开更多
关键词 泛素 泛素结合结构域 识别 调节机制
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泛素结合结构域在泛素化底物鉴定中的应用
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作者 王京伟 武军驻 《微循环学杂志》 2017年第3期73-79,共7页
泛素化(Ubiquitylation)是目前真核细胞内已知的最复杂的翻译后修饰。泛素化底物的识别需要一类特异性受体蛋白介导,这些受体蛋白往往包含一个或多个泛素结合结构域(UBDs)。UBD-泛素间的特异性结合决定了泛素化底物功能的特异性。目前... 泛素化(Ubiquitylation)是目前真核细胞内已知的最复杂的翻译后修饰。泛素化底物的识别需要一类特异性受体蛋白介导,这些受体蛋白往往包含一个或多个泛素结合结构域(UBDs)。UBD-泛素间的特异性结合决定了泛素化底物功能的特异性。目前已发现20多种UBDs超家族可识别泛素化底物上的特异性功能团进而传递信号。因此深入了解UBD的识别机制对新UBD的发现及泛素化底物的鉴定具有重要意义。 展开更多
关键词 泛素 泛素结合结构域 泛素化蛋白质组学
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基于串联杂合泛素结合结构域探针的多聚泛素化信号免疫组织化学检测技术研究
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作者 黄帅 肖伟弟 +1 位作者 李衍常 徐平 《军事医学》 CAS CSCD 2023年第3期205-209,共5页
目的提高串联杂合泛素结合结构域(ThUBD)探针检测甲醛固定石蜡包埋(FFPE)切片中多聚泛素化信号的灵敏度。方法利用微波炉加热方法,采用不同盐离子种类和pH缓冲液进行抗原修复,在有无高浓度还原剂条件下,用ThUBD探针检测FFPE切片中的多... 目的提高串联杂合泛素结合结构域(ThUBD)探针检测甲醛固定石蜡包埋(FFPE)切片中多聚泛素化信号的灵敏度。方法利用微波炉加热方法,采用不同盐离子种类和pH缓冲液进行抗原修复,在有无高浓度还原剂条件下,用ThUBD探针检测FFPE切片中的多聚泛素化信号。结果在pH 9.5 EDTA缓冲液条件下,加入50 mmol/L DTT可检测到FFPE切片中明显的多聚泛素化信号。结论pH 9.5 EDTA缓冲液中加50 mmol/L DTT有利于多聚泛素链的暴露与复原,显著提升ThUBD探针用于免疫组织化学检测的灵敏度。 展开更多
关键词 甲醛固定石蜡包埋切片 抗原修复 多聚泛素化信号检测 免疫组织化学 串联杂合泛素结合结构域探针
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OTUB2表达下调对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭能力及PI3K/AKT信号通路的影响 被引量:2
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作者 任舒婷 魏晓巍 任传路 《国际检验医学杂志》 CAS 2021年第12期1427-1430,1435,共5页
目的探讨含OTU结构域的泛素醛结合蛋白2(OTUB2)表达下调对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭能力及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路的影响。方法采用Lipofectmine 2000转染试剂向MGC-803细胞中转染OTUB2小干扰RNA(si-OTUB2)序列(s... 目的探讨含OTU结构域的泛素醛结合蛋白2(OTUB2)表达下调对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭能力及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路的影响。方法采用Lipofectmine 2000转染试剂向MGC-803细胞中转染OTUB2小干扰RNA(si-OTUB2)序列(si-OTUB2组)和si-NC序列(si-NC组),以不进行任何转染的胃癌MGC-803细胞作为空白对照组。分别采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞中OTUB2 mRNA及蛋白的表达水平。采用CCK-8法检测细胞增殖能力,Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力,Western blot检测增殖细胞核抗原(PCNA)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、AKT、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白表达水平。结果与空白对照组和si-NC组比较,si-OTUB2组细胞中OTUB2 mRNA及蛋白表达水平降低(P<0.05),细胞增殖能力减弱(P<0.05),细胞迁移数和侵袭数减少(P<0.05),细胞中PCNA、N-cadherin和p-AKT蛋白表达水平降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论下调OTUB2可以抑制胃癌细胞的增殖、迁移、侵袭,其作用机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路有关。 展开更多
关键词 含OTU结构域泛素结合蛋白2 胃癌 增殖 迁移 侵袭 磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路
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拟穴青蟹OTUB的分子克隆及其在性腺发育过程中的表达 被引量:1
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作者 高洁 邹志华 +3 位作者 贾锡伟 林鹏 张子平 王艺磊 《动物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期407-416,共10页
OTUB1是哺乳动物雌激素信号通路中的一个关键因子,它可以使雌激素受体α(ERα)去泛素化并抑制其转录活性。本研究从实验室拟穴青蟹(Scylla paramamosain)转录组测序数据库中筛选出OTUB基因片段,利用SMART RACE技术克隆得到Sp-OTUB的cDN... OTUB1是哺乳动物雌激素信号通路中的一个关键因子,它可以使雌激素受体α(ERα)去泛素化并抑制其转录活性。本研究从实验室拟穴青蟹(Scylla paramamosain)转录组测序数据库中筛选出OTUB基因片段,利用SMART RACE技术克隆得到Sp-OTUB的cDNA全长。该序列全长1 261 bp,包括5'非编码区(5'-UTR)40 bp,开放阅读框(ORF)804 bp和3'非编码区(3'-UTR)417 bp。其ORF编码267个氨基酸,预测其分子量为31 ku。该蛋白序列中包含一个OTU样的半胱氨酸蛋白酶催化结构域和一个由半胱氨酸(C)、天冬氨酸(D)和组氨酸(H)组成的催化三联体。实时定量PCR结果显示,Sp-OTUB在成熟拟穴青蟹各组织器官中均有表达,其中在血淋巴中的表达量最大,精巢中表达量最低。在卵巢发育过程中,Sp-OTUB的表达量在卵巢增值期为最大,与其他各时期具有显著差异;在精巢发育各阶段,Sp-OTUB表达量在精子细胞期达到最大,显著高于精母细胞期和成熟精子期。同源系统进化分析Sp-OTUB与大多数物种的OTUB1聚为一支,与肩突硬蜱(Ixodes scapularis)和紫海胆(Strongylocentrotuspurpuratus)亲缘关系最近。实验结果初步显示Sp-OTUB在拟穴青蟹生殖调控方面可能发挥重要作用。 展开更多
关键词 拟穴青蟹 组织表达 性腺发育 包含OTU结构域泛素乙醛结合蛋白
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Regulatory effects of moxibustion on ubiquitin and NLRP3 proteins in colon of ulcerative colitis rats 被引量:3
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作者 Li Xi-ying Yang Guang +10 位作者 Wu Li-jie Hong Jue Zhao Yue Liu Jie Kong Xie-he Dong Xiao-qing Zhi Fang-yuan Ma Xiao-peng Yang Ling Zhang Dan Yang Yan-ping 《Journal of Acupuncture and Tuina Science》 CSCD 2020年第2期96-104,共9页
Objective:To observe the effects of moxibustion on colonic inflammation,and the expressions of ubiquitin and nucleotide-binding oligomerization domain(Nod)-Iike receptor protein 3(NLRP3)proteins in rats with ulcerativ... Objective:To observe the effects of moxibustion on colonic inflammation,and the expressions of ubiquitin and nucleotide-binding oligomerization domain(Nod)-Iike receptor protein 3(NLRP3)proteins in rats with ulcerative colitis(UC),and to explore the anti-inflammatory mechanism of moxibustion in the UC treatment.Methods:Clean grade male Sprague-Dawley(SD)rats were randomly divided into a normal group(NG),a model group(MG),a moxa-stick moxibustion group(MSMG)and a Western medicine group(WMG).UC model was prepared by freely drinking 35 g/L d ext ran sulfate sodium(DSS)solution.Bilateral Tianshu(ST 25)were selected for mild moxibustion treatment in the MSMG;mesalazine solution was intragastrically administrated in the WMG.Rats in the NG and MG were only grasped and fixed as in the MSMG without any treatment.After treatment,hematoxylin-eosin(HE)staining was performed to observe and score the colonic pathological damage under light microscope;immunofluorescence method was used to determine the expression of colonic ubiquitin protein;immunohistochemical method was used to detect the expressions of colonic interleukin(IL)-1β and NLRP3 proteins.Results:The colon tissue was severely injured,and the pathological score was significantly increased in the MG than in the NG(P<0.01),and the protein expressions of ubiquitin,NLRP3 and IL-1β in the colon were significantly increased(all P<0.01).Compared with the MG,the colonic damage was repaired,the inflammation and pathological scores were reduced,and the ubiquitin,NLRP3 and IL-1β protein expressions were decreased in the MSMG and WMG(all P<0.01).Correlation analysis revealed that the ubiquitin protein expression was correlated with the colonic pathological score and the NLRP3 protein expression(r=0.677,P<0.01;r=0.536,P<0.05).Conclusion:Moxibustion can down-regulate the protein expressions of ubiquitin,NLRP3 and IL-1β in the colon of UC rats,which may be one of the mechanisms to promote the repair of colonic inflammatory lesions and exert anti-inflammatory effects. 展开更多
关键词 Moxibustion Therapy Moxa Stick Moxibustion Point Tianshu(ST 25) Colitis ULCERATIVE UBIQUITIN NLRP3 Protein Interleukin-lbeta RATS
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