龟羚帕安丸对帕金森病大鼠转录因子EB介导自噬调控机制的研究

目的:研究龟羚帕安丸治疗帕金森病(PD)对转录因子EB(TFEB)表达的影响及其机制。方法:将PD大鼠模型随机分为模型组、西药组、中西药组、中药低、中、高剂量组,每组15只,另取15只正常大鼠作为假手术组。模型组及假手术组给予等容积生理盐水,其余组给予相应药物灌胃,各组均连续给药4周。PD大鼠处死后,将中脑黑质组织剥离出来,运用蛋白质印迹法(Western Blotting)检测TFEB、微管相关膜蛋白轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、泛素结合蛋白P62(P62)、酪氨酸羟化酶(TH)、α-突触核蛋白(α-syn)的表达量。结果:与假手术组比较,模型组、西药组、中西药组、中药各剂量组黑质内TFEB、LC3Ⅱ、TH蛋白表达显著降低(P<0.01),P62、α-syn表达显著增高(P<0.01);与模型组比较,西药组、中西药组、中药各剂量组黑质内TFEB、LC3Ⅱ、TH蛋白表达显著增高(P<0.01),P62、α-syn表达显著降低(P<0.01)。结论:龟羚帕安丸可通过TFEB激活自噬-溶酶体系统,增强神经细胞自噬活性,增加LC3Ⅱ、TH表达,促进α-syn、P62降解及清除,发挥神经保护作用。

基于自噬途径探讨当归饮子缓解CU模型小鼠过敏反应的效应机制

目的:探讨当归饮子对慢性荨麻疹(CU)小鼠模型过敏反应的影响及自噬干预机制。方法:选用SPF级BALB/c小鼠,腹腔注射卵白蛋白与氢氧化铝悬液复制CU小鼠模型,设立分组并灌胃给药:空白组(生理盐水20 mL·kg^-1·d^-1),模型组(生理盐水20 mL·kg^-1·d^-1),开瑞坦组(0.0013 g·kg^-1·d^-1),当归饮子高、中、低剂量组(39.3,19.6,9.8 g·kg^-1·d^-1)。苏木素-伊红(HE)染色观察CU小鼠皮肤组织病理学改变;透射电镜观察皮肤组织细胞的自噬形态学;免疫组化(IHC)检测皮肤组织微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)和p62蛋白的表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测皮肤组织LC3B,p62mRNA转录水平。结果:当归饮子可显著改善CU小鼠皮肤真皮水肿、胶原束分离、毛细血管扩张等病理表现;并促进自噬小体形成,改善胞核染色质浓聚、线粒体肿胀、内质网扩张等异常细胞超微结构;与空白组比较,模型组CU小鼠皮肤组织中LC3B蛋白表达显著增加(P<0.01),LC3B mRNA水平有升高趋势,p62 mRNA水平及蛋白表达均显著降低(P<0.01);与模型组比较,当归饮子各剂量组小鼠皮肤组织LC3B mRNA水平及蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01),小鼠皮肤组织的p62mRNA水平及蛋白表达明显下降(P<0.05,P<0.01),以高剂量组疗效最佳。结论:当归饮子可调节LC3B,p62 mRNA及蛋白表达,增强细胞自噬水平,进而改善CU小鼠皮肤病理状态。