泛素结合酶蛋白在脑胶质瘤细胞中的表达及与细胞周期的关系

目的探讨泛素结合酶蛋白在脑胶质瘤细胞中的表达及与细胞周期的关系。方法选取2015年1月至2016年12月间陕西省第四人民医院冻存的96例脑胶质瘤组织,采用免疫组化及蛋白印迹法检测脑胶质瘤组织和脑胶质瘤细胞株U251细胞内细胞增殖标记物表达,分析脑胶质瘤细胞患者病理特征及预后与泛素集合酶Ubc H10的关系;以血清饥饿释放试验分析U251细胞周期与Ubc H10的关系;以siRNA干扰U251细胞中Ubc H10表达情况,观察细胞周期进程、Rb磷酸化水平及细胞增殖能力变化情况。结果脑胶质瘤组织中Ubc H10表达量显著高于正常组织,差异有统计学意义(P<0.05);细胞增殖标志物Ki-67表达量与Ubc H表达量正相关(P<0.05),Ubc H表达量与组织学分级、肿瘤直径、肿瘤转移及浸润和预后相关(P<0.05)。经无血清饥饿72h后,细胞周期同步化,74.0%的细胞停止于G1期,血清释放推进细胞周期进程,6~8h后逐渐向S期和G2期转换;细胞饥饿72h后Ubc H处于低表达状态,血清释放后其表达量逐渐升高,在9h时逐渐下降;siRNA干扰后,siRNA#3的抑制效果最强(P<0.05);siRNA#3干扰后,Rb蛋白磷酸化水平降低(P<0.05)。采用siRNA干扰后,细胞阻滞在G1期,且差异存统计学意义(P<0.05);shRNA干扰后U251细胞克隆形成数低于未处理组(P<0.05)。结论在脑胶质瘤中Ubc H10处于高表达状态,可通过下调Rb蛋白水平释放转录因子释放,调节下游靶基因表达及转录,促进细胞增殖,在脑胶质瘤的发生与发展过程中十分重要。